本實(shí)用新型涉及一種化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器，具體是用于酶促反應(yīng)氣體產(chǎn)生量的增減變化、間接顯示酶活性的結(jié)構(gòu)簡單的測定儀。

背景技術(shù)：

過氧化氫酶活性的測定，一直以來是按過氧化氫與過氧化氫酶在酶促反應(yīng)中過氧化氫量的減少，用紫外分光光度計(jì)240nm波長的紫外光照射，根據(jù)吸光度逐漸降低，測出吸光度的變化速度，計(jì)算出過氧化氫酶的活性。具體做法是將過氧化氫酶與過氧化氫置于比色皿中，立即將分光光度計(jì)也置于比色皿內(nèi)，開啟光度計(jì)、蓋上比色皿的蓋，進(jìn)行比色測定。這種比色儀在進(jìn)行測定時，投放過氧化氫酶與投放過氧化氫幾乎是同時進(jìn)行的，因酶促反應(yīng)中的酶具有高效性，兩者一旦混合，反應(yīng)就開始，過氧化氫的反應(yīng)損耗也已經(jīng)產(chǎn)生，即使立即投放分光光度計(jì)、開始實(shí)測，還是無法反映出這時間差中過氧化氫的損耗量，所測數(shù)據(jù)不甚準(zhǔn)確，誤差較大。本實(shí)用新型是將過氧化氫酶與過氧化氫反應(yīng)中氧氣產(chǎn)生量的增減來反映過氧化氫酶的活性，反應(yīng)與實(shí)測同步進(jìn)行，既沒有時間差，又能顯示出整個反應(yīng)的全貌，為此，設(shè)計(jì)出一種專用的測定儀和介紹其配套的使用方法。我校學(xué)生俞率成申請的CN201620610666.3“過氧化氫酶活性測定儀”介紹了相同用處、相似功能的測定儀，但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，操作稍煩些，制作成本較高，推廣和應(yīng)用前景不甚理想。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問題是提供一種在酶促反應(yīng)中將過氧化氫的減量改為氧氣的增量來反映過氧化氫酶的活性，能使反應(yīng)與實(shí)測同步進(jìn)行且誤差小的一種簡易型過氧化氫酶活性測定儀。

解決上述技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案：本簡易型過氧化氫酶活性測定儀，圓筒形的反應(yīng)筒上部有內(nèi)襯密封圈或片的蓋，蓋上有帶有啟閉閥的氣液進(jìn)管，蓋上還有氣體檢測儀插孔，反應(yīng)筒的底部有帶啟閉閥的放液管，上述兩管與孔側(cè)均安裝有密封圈。

所述的蓋上帶有啟閉閥的氣液進(jìn)管有一條或兩條。

所述的反應(yīng)筒的底為錐形底，放液管安裝在錐尖部。

所述的反應(yīng)筒底部安裝有支架。

本實(shí)用新型的有益效果是：本測定儀能使反應(yīng)與實(shí)測同步進(jìn)行，所測數(shù)據(jù)，能反映出整個反應(yīng)的全貌，精度高、誤差小，且提供了一種結(jié)構(gòu)簡單、使用方便的酶活性測定新儀器。

附圖說明

附圖為本簡易型測定儀結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

本實(shí)用新型下面結(jié)合實(shí)施例并參照附圖予以詳述：參見附圖，本簡易型過氧化氫酶活性測定儀，圓筒形的反應(yīng)筒5上部有內(nèi)襯密封圈或片的蓋1，蓋上有帶有啟閉閥4的氣液進(jìn)管3，蓋上還有氣體檢測儀插孔2，反應(yīng)筒的底部有帶啟閉閥的放液管7，上述兩管與孔側(cè)均安裝有密封圈。

所述的蓋上帶有啟閉閥的氣液進(jìn)管有一條或兩條。

所述的反應(yīng)筒的底為錐形底，放液管安裝在錐尖部。

所述的反應(yīng)筒5底部安裝有支架6。

使用時，將反應(yīng)筒底部的放液管7的啟閉閥關(guān)閉、將氣體檢測儀插孔2與氣體檢測儀連接，開啟氣液進(jìn)管3上的閥門，此時，記錄反應(yīng)筒內(nèi)原始的氧氣含量。再從氣液進(jìn)管3分別或先后向反應(yīng)筒5內(nèi)加入經(jīng)計(jì)量的過氧化氫液和經(jīng)計(jì)量的過氧化氫酶液，加入量的快慢可通過閥門開啟的大小來控制，最后關(guān)閉其閥門，兩液便在反應(yīng)筒底部進(jìn)行酶促反應(yīng)，不斷地、逐步地消耗過氧化氫的同時，產(chǎn)生著氧氣，分時間段分別讀取并記錄氧氣的增量，直至反應(yīng)結(jié)束，畫出不同時間段的氧氣含量變化曲線，根據(jù)公式計(jì)算出過氧化氫酶的活性。作為過氧化氫酶的活性測定是要求反應(yīng)一旦開始應(yīng)快速，則宜采用開大啟閉閥的閥門，快速放液的方法。在反應(yīng)開始之初，氧氣產(chǎn)生量較大，曲線斜率也大，反映酶的活性最好。

過氧化氫酶活性的計(jì)算公式為：

過氧化氫酶活性(U·μmol·min^-1·g^-1)＝(2×ΔO₂×V_T)/(W×V_S×t)；

以每分鐘內(nèi)氧氣增加的物質(zhì)的量的2倍的酶量為1個酶活單位(U)；

式中：ΔO₂為待測過氧化氫酶溶液的放氧曲線的直線部分的氧氣增加量(μmol)，V_T為提取酶液總體積(mL)，V_S為測定時取用酶液體積(mL)，W為生物材料鮮重(g)，t為待測過氧化氫酶溶液的放氧曲線的直線部分所消耗的時間(min)。

本測定儀的氣體檢測儀可選用深圳市逸云天電子有限公司生產(chǎn)和銷售的MS600型便攜式六合一氣體檢測儀。本測定儀可用玻璃、塑料和不銹鋼材料制作。其中的“氣液進(jìn)管3有一條或兩條”，當(dāng)只有一條時，過氧化氫酶液與過氧化氫液可一前一后地加，兩條時上述兩液可分管先后加入，加畢即關(guān)閥；還應(yīng)說明的是反應(yīng)筒5容積應(yīng)足夠大，應(yīng)能滿足計(jì)劃設(shè)計(jì)中產(chǎn)氣量對反應(yīng)筒的容量要求，以免內(nèi)壓過高引起漏氣或炸裂。