本發(fā)明涉及一種對香料分析領(lǐng)域,具體地說是一種煙用香料揮發(fā)性成分分析的前處理方法。
背景技術(shù):
煙用香料作為添加劑,對補(bǔ)償?shù)徒褂途頍熛銡狻⑻岣呔頍煶槲焚|(zhì)起著非常重要的作用,其配方更是卷煙行業(yè)的核心技術(shù)。煙用香料中有些揮發(fā)性成分含量少,達(dá)不到儀器的檢測限,需要進(jìn)行前處理富集。
目前對煙用香料樣品的前處理方法有同時(shí)蒸餾萃取法、水蒸汽蒸餾法、超臨界流體萃取法等,存在處理時(shí)間長、操作復(fù)雜、成本高、有機(jī)溶劑用量大等問題;而固相微萃取分離法是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的試樣預(yù)分離富集方法,它集試樣預(yù)處理和進(jìn)樣于一體,將試樣純化、富集后可與各種分析方法相結(jié)合而特別適用于有機(jī)物的分析測定。但SPME也存在一定不足,熔融石英纖維非常脆弱,易于折斷,操作要十分小心。纖維固定相體積小,被吸附相香氣絕對質(zhì)量十分有限,香氣的檢出限低,同時(shí)要求很高的生產(chǎn)精度,任何不規(guī)范和不均一性都會(huì)影響到涂層的表面性質(zhì)和萃取操作的重復(fù)性,而且萃取頭價(jià)格昂貴、易斷且壽命有限。固相萃取是一種吸附劑萃取,樣品通過填充吸附劑的一次性萃取柱,分析物和雜質(zhì)被保留在柱上,然后分別用選擇性溶劑去除雜質(zhì),洗脫出分析物,從而達(dá)到分離的目的;缺點(diǎn)為 成本較高,且填料和洗脫液選擇存在一定難度,比較適用于特定物質(zhì)的前處理實(shí)驗(yàn)。
液相微萃取技術(shù)是近年來在液-液萃取基礎(chǔ)上發(fā)展起來的分析技術(shù),具備有機(jī)溶劑消耗量和樣品使用量少,而萃取富集效率高等優(yōu)點(diǎn)。文獻(xiàn)報(bào)道中,液相微萃取技術(shù)多用于水樣等簡單基質(zhì)樣品,對于復(fù)雜樣品中低含量成分的分析鮮有報(bào)道。
傳統(tǒng)的液相微萃取中,常用甲醇、乙腈、丙酮等有機(jī)分散劑,存在以下缺點(diǎn):1、揮發(fā)性大、毒性高;2、用量相對較大,容易造成目標(biāo)物在萃取劑與樣本溶液中分配系數(shù)改變導(dǎo)致的萃取效率降低等問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供了一種低毒性、易操作、成本低、富集效率高的煙用香料揮發(fā)性成分分析的前處理方法,避免了相對大體積的有機(jī)分散劑的使用,能夠有效富集煙用香料中某些含量少、檢測靈敏度低的揮發(fā)性成分,處理后用于GC/MS可檢測出更多組分。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案:一種煙用香料揮發(fā)性成分分析的前處理方法,包括如下步驟:
(1)量取煙用香料樣品于三角瓶中,加入4~6倍體積無水乙醇,在150Hz條件下超聲10min后,得到樣品提取液;
(2)量取2~5mL樣品提取液,加入尖底具塞離心管中,調(diào)節(jié)pH范圍至6-7之間,再加入30~50μL二氯甲烷(萃取劑),渦旋2min, 得樣品萃取液;
(3)使用10mL或20mL注射器將樣品萃取液快速吸入針筒中,然后快速注入上述離心管中,重復(fù)10~15次;
(4)將上述離心管以3000r/min離心5min,用微量進(jìn)樣器吸取沉積相,過0.22μm濾膜,備用。
進(jìn)一步的,所述步驟(2)中調(diào)節(jié)pH值可使用氫氧化鈉和磷酸。
GC-MS工作條件:色譜柱:DB-5MS彈性石英毛細(xì)管柱(30m×0.25mm i.d.×0.25μm d.f.),進(jìn)樣口溫度:280℃,升溫程序:50℃保持1min,以5℃/min升至280℃,保持10min,載氣流速1.0ml/min,分流比100:1;MS工作條件:傳輸線溫度:280℃,電離方式:EI,離子源溫度:230℃,電離能量:70eV,掃描范圍:40~400amu,溶劑延遲4min。
本發(fā)明具有低毒性、易操作、成本低、富集效率高等優(yōu)點(diǎn),萃取時(shí),將pH調(diào)至6~7,使目標(biāo)物以中性分子形式存在,有利于有機(jī)溶劑對目標(biāo)物的萃取,本發(fā)明用空氣注射的方式取代有機(jī)分散相的方式除了避免使用大量有機(jī)相,另外空氣輔助的方式,操作簡單,對操作人員技術(shù)要求低,重復(fù)性好,能夠有效富集煙用香料中某些含量少、檢測靈敏度低的揮發(fā)性成分,處理后用于GC/MS可檢測出更多組分;本發(fā)明采用的樣品前處理方式易于操作,時(shí)間短,可明顯提高試驗(yàn)效率,且重現(xiàn)性好。
附圖說明
圖1為經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料A的GC-MS成分分析色譜 圖;
圖2為使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料A的GC-MS成分分析色譜圖;處理方法:取5mL煙用香料A于50mL離心管中,加10mL二氯甲烷,以3000r/min離心5min,取清液過0.22μm濾膜進(jìn)行GC-MS分析。
圖3為經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料B的GC-MS成分分析色譜圖;
圖4為只使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料B的GC-MS成分分析色譜圖。處理方法:取2mL煙用香料B于50mL離心管中,加10mL二氯甲烷,以3000r/min離心5min,取清液過0.22μm濾膜進(jìn)行GC-MS分析。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明,但不限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例一
量取煙用香料樣品A 5mL于50ml三角瓶中,加入30mL無水乙醇,在150Hz條件下超聲10min后,待用。量取樣品提取液3mL加入10mL尖底具塞離心管中,調(diào)節(jié)pH范圍至6-7之間,再加入40μL二氯甲烷,渦旋2min。使用10mL注射器將樣品萃取液快速吸入針筒中,然后快速注入上述離心管中,重復(fù)11次。以3000r/min離心5min,用微量進(jìn)樣器吸取沉積相過0.22μm濾膜進(jìn)行GC-MS分析。
實(shí)施例二
量取煙用香料樣品B 5mL于50ml三角瓶中,加入20mL無水乙醇,在150Hz條件下超聲10min后,待用。量取5mL樣品提取液,加入尖底具塞離心管中,調(diào)節(jié)pH范圍至6-7之間,再加入50μL二氯甲烷,渦旋2min。使用20mL注射器將樣品萃取液快速吸入針筒中,然后快速注入上述離心管中,重復(fù)15次。以3000r/min離心5min,用微量進(jìn)樣器吸取沉積相過0.22μm濾膜進(jìn)行GC-MS分析。
實(shí)施例三
(1)量取煙用香料樣品5mL于50ml三角瓶中,加入25mL無水乙醇,在150Hz條件下超聲10min后,得到樣品提取液;
(2)量取2mL樣品提取液,加入尖底具塞離心管中,調(diào)節(jié)pH范圍至6-7之間,再加入30μL二氯甲烷(萃取劑),渦旋2min,得樣品萃取液;
(3)使用10mL注射器將樣品萃取液快速吸入針筒中,然后快速注入上述離心管中,重復(fù)10次;
(4)將上述離心管以3000r/min離心5min,用微量進(jìn)樣器吸取沉積相,過0.22μm濾膜,備用。
圖1為經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料A的GC-MS成分分析色譜圖,圖2為使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料A的GC-MS成分分析色譜圖。圖1和圖2經(jīng)對比可以看出:使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料A僅鑒定出2種化合物,而經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料A共鑒定出22種化合物,且相對含量顯著增加,說明本發(fā)明萃取富集 效果良好,處理后用于GC/MS可檢測出更多組分。
圖3為經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料B的GC-MS成分分析色譜圖,圖4為使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料B的GC-MS成分分析色譜圖。圖3和圖4經(jīng)對比可以看出:使用二氯甲烷進(jìn)行前處理的煙用香料B僅鑒定出11種化合物,而經(jīng)本發(fā)明前處理后的煙用香料B共鑒定出34種化合物,且相對含量顯著增加,說明本發(fā)明萃取富集效果良好,處理后用于GC/MS可檢測出更多組分。
以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方案的詳細(xì)描述,并不以此限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的設(shè)計(jì)思路上所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。