1.一種基于CdS@SnS2@MWCNTs無(wú)標(biāo)記型胰島素光電免疫傳感器的制備方法,其特征在于,步驟如下:
(1)ITO 電極的預(yù)處理:將ITO導(dǎo)電玻璃切割至1.0 cm × 2.5 cm大小,依次用洗潔精、丙酮、乙醇和超純水超聲清洗30 min,用氮?dú)獯蹈桑?/p>
(2)滴加5~7 μL、2~5 mg/mL CdS@SnS2@MWCNTs溶液于電極表面,室溫條件下晾干;
(3)將電極于3 mmol/L 巰基乙酸溶液中浸潤(rùn)0.5~1.5 h,室溫條件下晾干,超純水沖洗;
(4)滴加2~4 μL、含0.01 mol/L 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽溶液EDC、0.002 mol/L N-羥基琥珀酰亞胺溶液的混合溶液于電極表面,繼續(xù)滴加5~7 μL、1~3 μg/mL的胰島素捕獲抗體,4℃冰箱中晾干,超純水沖洗;
(5)滴加5~7 μL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5~2.0 %的牛血清白蛋白溶液于電極表面,以封閉電極表面上非特異性活性位點(diǎn),4℃冰箱中晾干;
(6)用超純水清洗,晾至濕潤(rùn)狀態(tài),將5~7 μL、0.1 pg/mL ~ 5 ng/mL不同濃度的胰島素抗原溶液滴涂于電極表面,使其與胰島素捕獲抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng),4℃冰箱中孵化1 h,用超純水沖洗以除去未結(jié)合的胰島素抗原,室溫下晾干,制得一種基于CdS@SnS2@MWCNTs無(wú)標(biāo)記型胰島素光電免疫傳感器。
2.如權(quán)利要求1所述的一種基于CdS@SnS2@MWCNTs無(wú)標(biāo)記型胰島素光電免疫傳感器的制備方法,其特征在于,所述CdS@SnS2@MWCNTs的制備,步驟如下:
(1)SnS2@MWCNTs的制備
將30~50 mg MWCNTs 溶解于30 mL超純水中,超聲4 h,3~6 mmol SnCl4·5H2O加入到上述溶液中,攪拌4 h后,10~15 mmol 硫代乙酰胺加入到上述溶液中,攪拌30 min,將此混合溶液轉(zhuǎn)移至50 mL的聚四氟乙烯反應(yīng)釜中,160℃條件下保持8~12 h,冷卻至室溫,離心分離,用超純水和無(wú)水乙醇洗滌3次,于真空干燥箱中50℃干燥12 h,制得SnS2@MWCNTs復(fù)合材料;
(2)CdS@SnS2@MWCNTs的制備
向30~70 mL 1.0 ×10-2 mol/L CdCl2溶液中通氮?dú)?0 min,去除溶液中的氧氣,隨后,60 mg SnS2@MWCNTs粉末加入到上述溶液中,氮?dú)夥諊拢?00℃回流30 min,冷卻至室溫,離心分離,用超純水洗滌3次,于真空干燥箱中50℃干燥12 h,制得CdS@SnS2@MWCNTs復(fù)合材料。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法制備的一種基于CdS@SnS2@MWCNTs無(wú)標(biāo)記型胰島素光電免疫傳感器,用于胰島素抗原的檢測(cè),檢測(cè)步驟如下:
(1)采用三電極體系進(jìn)行測(cè)定,所制備的光電免疫傳感器為工作電極,飽和甘汞電極為參比電極,鉑絲電極為對(duì)電極,利用光電化學(xué)工作站進(jìn)行檢測(cè),光電檢測(cè)采用i-t測(cè)試手段,偏壓設(shè)置為0 V,光源為430 nm,每隔20 s進(jìn)行開關(guān)燈;
(2)在15 mL、pH 7.0的含0.2 mol/L抗壞血酸的磷酸鹽緩沖溶液中,通過(guò)光電化學(xué)工作站檢測(cè)0.1 pg/mL ~ 5 ng/mL一系列不同濃度的胰島素抗原標(biāo)準(zhǔn)溶液,通過(guò)記錄開關(guān)燈前后產(chǎn)生的不同光電流信號(hào),繪制工作曲線;
(3)將待測(cè)樣品溶液代替胰島素抗原標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)的結(jié)果可通過(guò)工作曲線的查得。