本發(fā)明涉及醫(yī)療檢測領(lǐng)域，特別涉及一種尿酸生化分析干片及其制備方法和試劑盤。
背景技術(shù)：
：對人的體液或血液的醫(yī)療檢測手段，能夠為臨床上對疾病的診斷、治療以及是否健康狀態(tài)提供非常有利的信息依據(jù)?，F(xiàn)有醫(yī)療場所例如醫(yī)院、診所等，對現(xiàn)有人體生化項目例如尿酸等項目的測定，通常采用例如比色法或間接法。比色法因其測量精度，準(zhǔn)確度等與所要求的相差太大，此法在醫(yī)學(xué)的早期實驗室檢查中使用，已經(jīng)是屬于淘汰的用法。而間接法中，為防檢測儀器內(nèi)部被堵塞，對樣品的要求極為嚴(yán)格，需經(jīng)常規(guī)分離再經(jīng)稀釋后方可測量，而一般稀釋倍數(shù)大都在30倍左右，在如此大的稀釋倍數(shù)下，對管路確是有益，但從數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理角度來看，這樣的測量，將會把誤差同比例放大，那么這樣測到的結(jié)果，準(zhǔn)確度和精確度不能達到要求。另外，采用這種方式檢測的儀器，由于對樣品進行常規(guī)分離再經(jīng)稀釋后方可測量，需要包含純水稀釋部件，因而儀器體積較大，無法移動，只能由專業(yè)檢測師在專業(yè)的實驗室中完成，從取樣、送樣和檢測過程來看，耗時較長，對于一些對檢測時效性要求較高的場合，例如急救、家庭全科醫(yī)生去患者家中問診等場合等無法適用。技術(shù)實現(xiàn)要素：鑒于上述問題，提出了本發(fā)明以便提供一種克服上述問題或者至少部分地解決上述問題的一種尿酸生化分析干片及其制備方法和試劑盤。第一方面，本發(fā)明實施例提供一種尿酸生化分析干片，從上到下依次包括：分散層、反射層、銜接層、試劑層和支持層；其中：所述支持層為光學(xué)透明基材；所述試劑層主要由尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑構(gòu)成；所述銜接層主要由聚n-異丙基稀酰胺構(gòu)成；所述反射層主要由白色反光材料構(gòu)成；所述分散層主要由粘合的多孔微粒以及表面活性劑構(gòu)成。在一個實施例中，所述試劑層包括：尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑；所述銜接層為聚n-異丙基稀酰胺；所述反射層為白色反光材料；所述分散層為粘合的多孔微粒以及表面活性劑。在一個實施例中，所述試劑層中各組分的含量為：尿酸酶不小于0.018u/cm2、過氧化物酶不小于0.4u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑不小于1×10-2mg/cm2、表面活性劑3.2～4.2×10-2mg/cm2和固定劑1.9～2.4mg/cm2。在一個實施例中，所述固定劑包括：明膠、親水纖維素衍生物、葡聚糖、瓊脂糖、聚乙烯醇和聚丙烯酰胺中的任一種或者上述任意多種組合。在一個實施例中，所述銜接層中聚n-異丙基稀酰胺的含量為2×10-2～5×10-2mg/cm2。在一個實施例中，所述反射層中白色反光材料包括：二氧化鈦、硫酸鋇或者二者混和物，所述反射層的厚度為10～500μm。在一個實施例中，所述分散層中的多孔微粒為二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅、氧化鉛、硅藻土、微晶纖維素或其中任意幾種混合物的微粒。在一個實施例中，所述微粒之間通過醋酸纖維粘合。在一個實施例中，所述微粒的直徑為1-7μm，所述分散層的層厚30～500μm，孔隙率25％～95％。在一個實施例中，所述多孔微粒為二氧化鈦時，所述二氧化鈦和表面活性 劑的質(zhì)量比為：200:1～30:1。在一個實施例中，所述光學(xué)透明基材為玻璃、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯或者聚酯。在一個實施例中，所述尿酸生化分析干片還包括：上外框和下外框，所述上外框位于所述分散層之上，所述下外框位于所述支持層之下，且所述上外框和下外框之間粘接。第二方面，本發(fā)明實施例提供一種試劑盤，該試劑盤上有至少一個前述尿酸生化分析干片。第三方面，本發(fā)明實施例提供一種尿酸生化分析干片的制備方法，包括：將尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑溶解于緩沖液之中，將生成的混合物涂覆于光學(xué)透明基材上，冷凍干燥后生成試劑層；將聚n-異丙基稀酰胺水溶液涂覆于所述試劑層上形成銜接層；在所述銜接層上涂覆白色反光材料形成反射層；將粘合劑和表面活性劑與二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅、氧化鉛、硅藻土、微晶纖維素或其中任意幾種混合物的微粒進行混合，并將混合后的微粒置于有機溶劑中，涂覆于反射層上，待有機溶劑揮發(fā)后形成分散層。在一個實施例中，上述尿酸生化分析干片的制備方法還包括：待所述試劑層、銜接層、反射層和分散層干燥后，將各層固定于上下外框之中；粘接上下外框。本發(fā)明實施例提供的上述技術(shù)方案的有益效果至少包括：本發(fā)明實施例提供的尿酸生化分析干片及其制備方法和試劑盤的技術(shù)方案中，尿酸生化分析干片為多層涂膜的干化學(xué)試劑，不含液體，全部試驗所需的物品都包含在一片干性試劑中，環(huán)保且易于保存和攜帶，并且穩(wěn)定時間較長，所需的標(biāo)本量較少，同時，又保留了傳統(tǒng)的生化反應(yīng)方法，檢測的化學(xué)反應(yīng)與 傳統(tǒng)的生化的模式或原理相同，提高了系統(tǒng)的溯源性，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時，由于尿酸生化分析干片的上述特點，使得使用尿酸生化分析干片和安裝有該尿酸生化分析干片的試劑盤的檢測儀可以不用使用生物化學(xué)需要使用的純水，簡化了傳統(tǒng)檢測儀的檢測過程，使得檢測儀在保證檢測結(jié)果精確性的同時可以小型化，便于攜帶，從而縮短從采樣、送樣和檢測整個過程耗費的時間，可以實現(xiàn)在臨床科室的病床旁檢測、家庭全科醫(yī)生在患者家中檢測，急救等時間緊急度要求較高的場合。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將在隨后的說明書中闡述，并且，部分地從說明書中變得顯而易見，或者通過實施本發(fā)明而了解。本發(fā)明的目的和其他優(yōu)點可通過在所寫的說明書、權(quán)利要求書、以及附圖中所特別指出的結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)和獲得。下面通過附圖和實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的詳細描述。附圖說明附圖用來提供對本發(fā)明的進一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與本發(fā)明的實施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。在附圖中：圖1為本發(fā)明實施例中提供的標(biāo)本濃度與檢測儀檢測到的反射響應(yīng)電壓值的回歸線性圖。圖2為本發(fā)明實施例提供的光學(xué)檢測機構(gòu)與尿酸生化分析干片的結(jié)構(gòu)示意圖。具體實施方式下面將參照附圖更詳細地描述本公開的示例性實施例。雖然附圖中顯示了本公開的示例性實施例，然而應(yīng)當(dāng)理解，可以以各種形式實現(xiàn)本公開而不應(yīng)被這里闡述的實施例所限制。相反，提供這些實施例是為了能夠更透徹地理解本公開，并且能夠?qū)⒈竟_的范圍完整的傳達給本領(lǐng)域的技術(shù)人員。本發(fā)明實施例提供了一種尿酸生化分析干片，從上到下依次包括：分散層、反射層、銜接層、試劑層和支持層；其中：所述支持層為光學(xué)透明基材；所述試劑層主要由尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑構(gòu)成；所述銜接層主要由聚n-異丙基稀酰胺構(gòu)成；所述反射層主要由白色反光材料構(gòu)成；所述分散層主要由粘合的多孔微粒以及表面活性劑構(gòu)成。進一步地，上述試劑層包括：尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑；上述銜接層為聚n-異丙基稀酰胺；上述反射層為白色反光材料；上述分散層為粘合的多孔微粒以及表面活性劑。尿酸生化分析干片的檢測原理為：當(dāng)待檢測的樣本滴于尿酸生化分析干片上時，通過分散層均勻地分布到下一層，樣本中的尿酸遷移到試劑層，在尿酸酶的作用下，被氧化形成尿囊素和過氧化氫，然后，過氧化氫在過氧化酶作用下氧化無色染劑，生成有色染料，通過對有色染料的反射光強進行檢測，最終可以分析出尿酸生化濃度。試劑層反應(yīng)原理如下：上述分散層主要作用是形成分子篩，讓樣品在重力的作用下均勻分布并下滲，對試驗無關(guān)的干擾物也在本層被過濾掉。上述試劑層含有多種干性粉末試劑，由于樣品是受到重力向下運動的，試劑層的結(jié)構(gòu)可以有效地控制反應(yīng)過程。試劑層含有干性染料，檢測在這里最終發(fā)生顏色變化，并被固定在這一層，以便檢測光路檢測。上述銜接層是一層凝膠類的物質(zhì)，其作用是阻止反應(yīng)后的顯色層試劑向其 他層擴散。上述支持層是一層光學(xué)透明基材，允許檢測的光線通過，并起到支撐上述各層的作用。光學(xué)透明基材例如可以為玻璃、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯或者聚酯。在一個實施例中，試劑層中各組分的含量可以有多種，例如下述幾種：尿酸酶0.022u/cm2、過氧化物酶0.4u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑2×10-2mg/cm2、表面活性劑3.2×10-2×10-2mg/cm2和固定劑2.4mg/cm2。尿酸酶0.018u/cm2、過氧化物酶0.8u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑1×10-2mg/cm2、表面活性劑4.2×10-2mg/cm2和固定劑1.9mg/cm2。尿酸酶0.022u/cm2、過氧化物酶0.8u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑2×10-2mg/cm2、表面活性劑4.2×10-2mg/cm2和固定劑2.4mg/cm2。尿酸酶0.018u/cm2、過氧化物酶0.4u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑1×10-2mg/cm2、表面活性劑3.2×10-2mg/cm2和固定劑1.9mg/cm2。尿酸酶0.02u/cm2、過氧化物酶0.6u/cm2、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑1.4×10-2mg/cm2、表面活性劑3.9×10-2mg/cm2和固定劑2.17mg/cm2。上述試劑層中各組分的含量并不限于上述例子，以上只是示例而已。在一個實施例中，上述固定劑包括：明膠、親水纖維素衍生物、葡聚糖、瓊脂糖、聚乙烯醇和聚丙烯酰胺中的任一種或者上述任意多種組合。表面活性劑在試劑層中可以起到潤濕、乳化、分散等作用，促進樣本充分、快速與反應(yīng)物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。上述2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑為無 色染劑。樣品進入試劑層后，發(fā)生顯色反應(yīng)，其顏色變化與樣品中尿酸濃度成比例，從而通過顯色反應(yīng)能夠最終檢測到樣品中的尿酸濃度。在一個實施例中，銜接層中聚n-異丙基稀酰胺的含量為2×10-2～5×10-2mg/cm2。較佳地，上述聚n-異丙基稀酰胺的含量為3×10-2mg/cm2。在一個實施例中，反射層上可以是任何具有高反射系數(shù)(例如反射系數(shù)在95％以上)的白色物質(zhì)，上述白色反光材料包括：二氧化鈦、硫酸鋇或者二者混和物，反射層的厚度為10～500μm。較佳地，上述反射層的厚度為50～300μm。在一個實施例中，分散層中的多孔微粒為二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅、氧化鉛、硅藻土、微晶纖維素或其中任意幾種混合物的微粒。這些微粒形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可以幫助樣本液體快速、均勻地分散到下層。分散層中的二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅等物質(zhì)，一方面可以起到掩蓋樣品中有色物質(zhì)的作用，使反射光的測定不受影響，另一方面，這些反光物質(zhì)，也可以為反射層提供反射背景。分散層的各種微?？梢蕴砑颖砻婊钚詣┎⑼ㄟ^適當(dāng)量的粘和劑粘合，例如采用醋酸纖維粘合。分散層的微粒的直徑為1-7μm，所述分散層的層厚30～500μm，孔隙率25％～95％。多孔微粒為二氧化鈦時，二氧化鈦和表面活性劑的質(zhì)量比為：200:1～30:1。為了方便保存、運輸，上述尿酸生化分析干片還可以包括：上外框和下外框，上外框位于分散層之上，下外框位于支持層之下，且上外框和下外框之間粘接。本發(fā)明實施例提供的尿酸生化分析干片在使用時可以固定安裝于試劑盤上，該試劑盤可用于一種小型化的多功能的檢測儀中，試劑盤安裝于檢測儀中之后，對尿酸生化分析干片進行加樣，然后37℃下孵育時間大約5分鐘，然后 在試劑盤的下方的光學(xué)檢測機構(gòu)會在試驗要求的時間用相應(yīng)波長濾鏡(例如尿酸項目為波長670nm的濾鏡)對試劑盤內(nèi)尿酸生化分析干片顯色層的顏色進行判讀(讀取反射光強度)，判讀時進行一次或者多次讀取，尿酸項目為終點法，最終得到反射光強度轉(zhuǎn)換的反射響應(yīng)電壓值，根據(jù)該反射響應(yīng)電壓值經(jīng)過檢測儀的最終計算得到尿酸檢測結(jié)果值。圖2是尿酸生化分析干片與檢測儀中光學(xué)檢測機構(gòu)的結(jié)構(gòu)示意圖，在光學(xué)檢測開始時，發(fā)光部的燈泡201發(fā)出全波段的光透過第一匯聚透鏡202，經(jīng)過反射透鏡203濾掉無用的紅外波長光，反射后透過第二匯聚透鏡204，匯聚在特定試劑盤的尿酸生化分析干片3上，尿酸生化分析干片3反射出的光線經(jīng)過物鏡205、濾光輪206得到特定波長的反射光，該反射光透過第三匯聚透鏡207后投射到采光部(光電池等)208，采光部將光強信號轉(zhuǎn)化為反射響應(yīng)電壓信號，通過一系列分析后，得出尿酸的濃度。之前需要對尿酸項目檢測項目進行定標(biāo)。定標(biāo)過程如下：用已知濃度的定標(biāo)液在檢測儀上完成定標(biāo)。定標(biāo)液包含待測物質(zhì)的3-5個水平的濃度，在設(shè)備上分別讀出相應(yīng)的反射光強度，每個水平讀取3-5次取平均值。以尿酸項目為例如下：ln(檢測儀電壓值)＝k*ln(標(biāo)本濃度)+b(檢測儀電壓值即反射響應(yīng)電壓值)標(biāo)本濃度檢測儀電壓值ln(標(biāo)本濃度)ln(檢測儀電壓值)29.72.20563.3911470460.7909995812232.10495.4071717710.74426796338.92.07565.8257050790.7302502695952.04596.3885614060.71583779959.92.02346.8668291120.704779265參照圖1所示，定標(biāo)后得到標(biāo)本濃度與檢測儀檢測到的反射響應(yīng)電壓值的回歸線性圖。根據(jù)上述定標(biāo)數(shù)據(jù)進行如下計算：0.79＝3.68k+b0.73＝5.83k+b0.70＝6.86k+b得到k＝-0.0279b＝0.8927該項目本批次的定標(biāo)曲線為ln(反射響應(yīng)電壓值)＝-0.0279*ln(標(biāo)本濃度)+0.8927定標(biāo)成功后，檢測儀根據(jù)具體試驗標(biāo)本得到的反射響應(yīng)電壓值，帶入上述的定標(biāo)曲線中運算，變可得到標(biāo)本中的尿酸濃度值：例如：測量電壓值r＝2.0628lnr＝0.7241ln(標(biāo)本濃度)＝(0.7241-0.8927)/(-0.0279)標(biāo)本濃度＝e^ln(標(biāo)本濃度)＝422mmol/l。本發(fā)明實施例提供的尿酸生化分析干片，為多層涂膜的干化學(xué)試劑，不含液體，全部試驗所需的物品都包含在一片干性試劑中，環(huán)保且易于保存和攜帶，并且穩(wěn)定時間較長，所需的標(biāo)本量較少，同時，又保留了傳統(tǒng)的生化反應(yīng)方法，檢測的化學(xué)反應(yīng)與傳統(tǒng)的生化的模式或原理相同，提高了系統(tǒng)的溯源性，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。本發(fā)明實施例還提供了一種試劑盤，該試劑盤上有至少一個上述尿酸生化分析干片。上述尿酸生化分析干片和安裝有該尿酸生化分析干片的試劑盤，由于尿酸生化分析干片的上述特點，使得使用尿酸生化分析干片和安裝有該尿酸生化分析干片的試劑盤的檢測儀可以不用使用生物化學(xué)需要使用的純水，簡化了傳統(tǒng)檢測儀的檢測過程，使得檢測儀在保證檢測結(jié)果精確性的同時可以小型化，便于攜帶，從而縮短從采樣、送樣和檢測整個過程耗費的時間，可以實現(xiàn)在臨床科室的病床旁檢測、家庭全科醫(yī)生在患者家中檢測，急救等時間緊急度要求較高的場合。本發(fā)明實施例還提供了一種尿酸生化分析干片制備方法，包括下述步驟：s1、將尿酸酶、過氧化物酶、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二 甲基胺基苯基)咪唑、表面活性劑和固定劑溶解于緩沖液之中，將生成的混合物涂覆于光學(xué)透明基材上，冷凍干燥后生成試劑層；s2、將聚n-異丙基稀酰胺水溶液涂覆于試劑層上形成銜接層；s3、在銜接層上涂覆白色反光材料形成反射層；s4、將粘合劑和表面活性劑與二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅、氧化鉛、硅藻土、微晶纖維素或其中任意幾種混合物的微粒進行混合，并將混合后的微粒置于有機溶劑中，涂覆于反射層上，待有機溶劑揮發(fā)后形成分散層。上述尿酸生化分析干片的制備方法，在步驟s4之后，還可以執(zhí)行下述步驟：s5、待所述試劑層、銜接層、反射層和分散層干燥后，將各層固定于上下外框之中；s6、粘接上下外框。以一個具體的例子說明上述尿酸生化分析干片的制備方法，該例子以100cm2尿酸生化分析干片為例，該制備方法包括下述各步驟：s1′、準(zhǔn)備基材，基材可采用任何光學(xué)透明材料，比如玻璃、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚酯。s2′、制備混合物溶液：尿酸酶(candidautilis,e.c.1.7.3.3)2u、過氧化物酶(horseradishroot,e.c.1.11.1.7)60u、2-(3,5-二甲氧基-4-羥苯基)-4,5-對(4-二甲基胺基苯基)咪唑1.4mg、表面活性劑3.9mg、明膠217mg(或可在水中溶脹形成水凝膠的任何物質(zhì)，如親水纖維素衍生物、葡聚糖、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺)。以上混合物溶解于10～300ml的ph8.7的硼酸-硼酸鈉緩沖液中。緩沖液采用其他類型的緩沖液也可。s3′、將上述混合物溶液涂覆(如直接涂布法、噴涂、刮涂)于基材上，冷凍干燥后形成試劑層。s4′、將3mg聚n-異丙基丙烯酰胺溶解于一定量的水中，形成0.1～0.8g/ml 的聚n-異丙基丙烯酰胺水溶液，涂敷于試劑層上升溫至32℃以上形成銜接層。s5′、在銜接層上直接涂敷任何具有高反射系數(shù)(95％及以上)的白色物質(zhì)(如二氧化鈦、硫酸鋇及二者混和物)形成反射層，厚度10～500μm。s6′、以二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鋅、氧化鉛、硅藻土、微晶纖維素或其任意幾種混合物制備直徑1～7μm的微粒，層厚30～500μm，孔隙率25％～95％。加入醋酸纖維素(二氧化鈦/醋酸纖維素比例為10:1～3:1，質(zhì)量比m/m)、表面活性劑(二氧化鈦/表面活性劑為200:1～30:1，質(zhì)量比m/m)，與微?；旌虾笾糜诒?、二甲苯、二氯乙烷或四氫呋喃的混合溶劑中，涂敷于反射層上，溶劑揮發(fā)后即形成分散層。s7′、待上述各層干燥后，將其固定于上下外框中，并粘接，干燥后得到尿酸生化分析干片。外框可采用高分子材料，例如聚丙烯、聚氯乙烯、聚乙烯或聚酯等。顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對本發(fā)明進行各種改動和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本發(fā)明也意圖包含這些改動和變型在內(nèi)。當(dāng)前第1頁12