本發(fā)明涉及一種中藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法，特別涉及滑葉跌打的質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：滑葉跌打是桑科假鵲腎樹(shù)Streblusindicus(Bur.)Corner的干燥莖皮，70年代初期，云南省藥物所曾從假鵲腎樹(shù)樹(shù)皮中提取出混合香豆素制成片劑，經(jīng)昆明軍區(qū)總醫(yī)院、昆明醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院試用于胃及十二指腸潰瘍出血、肝硬化、尿毒癥、肺心病引起的上消化道出血，效果較好。本品質(zhì)量檢測(cè)方法收錄于《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》(2003年版第七冊(cè))，臨床用于止血，散瘀，止痛?，F(xiàn)有質(zhì)量檢測(cè)方法中沒(méi)有含量測(cè)定項(xiàng)，因此對(duì)滑葉跌打的質(zhì)量不能有效的進(jìn)行控制，進(jìn)而不能有效的控制后續(xù)藥品的質(zhì)量。為能制備效果、質(zhì)量穩(wěn)定的藥品，本發(fā)明在滑葉跌打現(xiàn)有質(zhì)量檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上增加含量測(cè)定項(xiàng)，以實(shí)現(xiàn)滑葉跌打的質(zhì)量可控。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種滑葉跌打的質(zhì)量檢測(cè)方法，目的是解決現(xiàn)有技術(shù)問(wèn)題，提供一種能有效控制滑葉跌打的質(zhì)量。本發(fā)明解決問(wèn)題采用的技術(shù)方案是：一種滑葉跌打的質(zhì)量檢測(cè)方法，在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加含量測(cè)定項(xiàng)，其含量測(cè)定采用高效液相方法測(cè)定滑葉跌打中的東莨菪素含量。所述含量測(cè)定方法如下所示；儀器及條件：儀器及條件：十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動(dòng)相為乙腈-水＝90∶10；檢測(cè)波長(zhǎng)為216nm；對(duì)照品溶液的制備：精密稱取東莨菪素對(duì)照品適量，加甲醇溶解，并制成每1mL含1mg的對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備：取本品粉末約0.5g，精密稱取，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，超聲30分鐘，放冷，精密稱定，用甲醇補(bǔ)足重量，過(guò)濾，取濾液過(guò)微孔濾膜，即得；測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10uL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品按照干燥品計(jì)算，含東莨菪素(C10H8O4)不得少于0.20％。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明在原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高，增加了含量測(cè)定項(xiàng)，可有效對(duì)滑葉跌打藥材的質(zhì)量進(jìn)行控制，提高了藥品質(zhì)量的穩(wěn)定性，增加了用藥安全性。附圖說(shuō)明圖1是標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。具體實(shí)施方式【含量測(cè)定】照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》一部附錄VID)測(cè)定東莨菪素。1材料1.1儀器高效液相色譜儀(安捷倫HPLC-1260)；BSA224S電子天平(賽多利斯)；HS10260D型超聲波清洗器；色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料(安捷倫250mm×4.6mm0.5μm)。1.2試劑試藥甲醇為色譜純；其余試劑均為分析純；水為超純水；東莨菪素對(duì)照品由云南植物藥業(yè)有限公司研究院從滑葉跌打中分離純化得到，純度達(dá)到98%以上；滑葉跌打藥材(由云南植物藥業(yè)質(zhì)量部提供)。2實(shí)驗(yàn)方法2.1色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；流動(dòng)相∶乙腈-水(90∶10)；檢測(cè)波長(zhǎng)：216nm；流速：1.0mL·min-1，理論板數(shù)按東莨菪素(C10H8O4)峰計(jì)算，不低于3000。2.1.2對(duì)照品溶液制備取東莨菪素對(duì)照品適量(mg)，精密稱定，加甲醇制成每1mL含1mg的對(duì)照品溶液(濃度：0.9962mg/ml)。2.1.3供試品溶液制備精密稱取本品0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50mL，稱定重量，超聲30min，放置至室溫，過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。2.1.4測(cè)定法按照上述色譜條件，取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。根據(jù)上述測(cè)定法對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行選擇，其選擇方案如下列表1中所示；表1流動(dòng)相優(yōu)選方案項(xiàng)目甲醇-水（90：10）乙腈-水（90：10）出峰時(shí)間11.5616.812分離效果分離效果不好。與對(duì)照品相應(yīng)的位置有相應(yīng)的峰，分離效果好。結(jié)論：所以流動(dòng)相選擇乙腈-水(90：10)。2.1.5空白實(shí)驗(yàn)精確吸取色譜甲醇(溶解對(duì)照品的溶劑)，進(jìn)樣體積10μL，按上述色譜條件測(cè)定。結(jié)論，在與對(duì)照品、供試品色譜峰相應(yīng)的位置無(wú)干擾峰。2.2供試品處理方案優(yōu)選2.2.1取供試品粉末(過(guò)三號(hào)篩)0.5g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，按下表2進(jìn)行方法優(yōu)化處理，放置至室溫，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足重量，過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得表2供試品處理優(yōu)選方案結(jié)論：超聲和回流無(wú)明顯著差異，因回流處理時(shí)間較長(zhǎng)，效率低，故選擇超聲處理；超聲10分鐘提取收率較低、30分鐘與60分鐘及索氏提取3h無(wú)顯著差異，故選擇超聲30分鐘。供試品處理方法為：取供試品粉末(過(guò)三號(hào)篩)0.5g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲30min，放置至室溫，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足重量，過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。2.3方法學(xué)考察2.3.1線性關(guān)系考察分別精確移取對(duì)照品溶液，1μl、5μl、10μl、15μl、20μl，按上述色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰面積，以進(jìn)樣濃度X為橫坐標(biāo)，峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見(jiàn)表3，同時(shí)根據(jù)表3中結(jié)果繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖1。表3線性關(guān)系考察序號(hào)12345進(jìn)樣量（μg）0.99624.98109.962014.943019.9240峰面積2411.5412865.0624120.1036172.2348251.50結(jié)論：線性回歸方程：y＝11498x-9727，相關(guān)系數(shù)r＝0.9991，東莨菪素在線性范圍：0.9962μg-19.924μg線性良好。2.3.2精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取東莨菪素對(duì)照品溶液(0.99620mg/ml)10μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積，求RSD值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4：表4精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號(hào)12345峰面積24120.124111.524213.424116.824283.5結(jié)論：峰面積平均值為24169.06，RSD值0.32％，表明高效液相色譜儀的精密度良好。2.3.3重復(fù)性實(shí)驗(yàn)分別稱取同一批號(hào)(批號(hào)：20150521)藥材5份，每份各0.5g，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，按上述色譜條件測(cè)定樣品中東莨菪素的含量，求RSD值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。表5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)論：供試品中東莨菪素的平均含量為0.3281％，RSD值為1.13％，表明此東莨菪素的測(cè)定方法具有良好的重復(fù)性。2.3.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)按供試品溶液的制備方法，制備供試品溶液1份，分別在0小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)、24小時(shí)進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算樣品中東莨菪素的含量，求RSD值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。表6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)論東莨菪素含量穩(wěn)定，平均含量為0.3234％，峰面積穩(wěn)定，表明供試品在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.3.5加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量(0.3219％)樣品9份，每份各0.25g，分別加入適量對(duì)照品溶液(0.9962mg/mL-1)1.0mL，按供試品溶液制備方法，制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液各10μL，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算東莨菪素的含量和平均回收率，求RSD值，結(jié)果件表7.表7加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)論：平均回收率為98.64％，RSD值為1.19％，表明該提取方法具有良好的回收率。2.3.65批次樣品測(cè)定，結(jié)果件表8.表8五批樣品檢驗(yàn)表結(jié)論：根據(jù)測(cè)定結(jié)果，5樣品平均含量0.320％，本品按干燥品計(jì)算，含東莨菪素(C10H8O4)不得少于0.20％。修訂后的滑葉跌打質(zhì)量檢測(cè)方法如下所示：滑葉跌打huayedieda本品為?？浦参锛蠃o腎樹(shù)Streblusindicus（Bur.）Corner的干燥莖皮。春末、夏初剝皮，干燥。【性狀】本品呈板片狀或卷筒狀。外表面灰白色至灰綠色，易成鱗片狀脫落，脫落處呈棕褐色。內(nèi)表面光滑，黃棕色至褐色。質(zhì)韌，不易折斷，斷面不平整，纖維性。氣香，味微苦、麻?！捐b別】取本品粉末0.1g，加乙醇10mL，加熱回流30分鐘，放冷，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取滑葉跌打?qū)φ账幉?.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》一部附錄）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（2.5：0.1：1.0）為展開(kāi)劑，甲酸蒸氣飽和，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)?！緳z查】水分照水分測(cè)定法（《中國(guó)藥典》一部附錄）測(cè)定，不得過(guò)11.0%?？偦曳植坏眠^(guò)9.0%（《中國(guó)藥典》一部附錄）。酸不溶性灰分不得過(guò)5.0%（《中國(guó)藥典》一部附錄）?！窘鑫铩空沾既苄越鑫餃y(cè)定項(xiàng)下的冷浸法（《中國(guó)藥典》一部附錄）測(cè)定，用稀乙醇作溶劑，不得少于13%?！竞繙y(cè)定】照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(90∶10)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為216nm；理論塔板數(shù)按東莨菪素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取東莨菪素對(duì)照品適量，加甲醇溶解，并制成每1mL含1mg的對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5g，精密稱取，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，超聲30分鐘，放冷，精密稱定，用甲醇補(bǔ)足重量，過(guò)濾，取濾液過(guò)微孔濾膜(0.45μm)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10uL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品按照干燥品計(jì)算，含東莨菪素(C10H8O4)不得少于0.20％。【性味與歸經(jīng)】苦，辛，溫。歸胃經(jīng)?！竟δ芘c主治】止血，散瘀，止痛。用于嘔血，便血，胃脘痛，外傷出血。【用法與用量】9~15g。【貯藏】置干燥處。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3