必士通牌香菊片有效成分的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物分析檢測領(lǐng)域，涉及香菊片有效成分的檢測方法。目前其含量測定通過薄層色譜法檢測黃芪甲苷，但其重現(xiàn)性較差，準(zhǔn)確性和靈敏度都不高。本發(fā)明的目的是：提供一種香菊片有效成分的檢測方法。采用高效液相色譜法檢測黃芪甲苷，照高效液相色譜法測定；色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相：乙腈和磷酸二氫鉀溶液混合，加三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至2.5至3.5；流速1mL/min；柱溫20℃；紫外檢測波長為208nm，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000。本發(fā)明效果達到方便的、準(zhǔn)確的對香菊片產(chǎn)品中每片制劑含黃芪以黃芪甲苷計不少于0.010mg的定量檢測的目的。
【專利說明】必士通牌香菊片有效成分的檢測方法
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于藥物分析檢測領(lǐng)域，涉及一種辛散祛風(fēng)、清熱通竅，可用于治療急、慢性鼻竇炎、鼻炎的藥物，具體涉及必士通牌香菊片有效成分的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]香菊片為已收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十冊，具有辛散祛風(fēng)，清熱通竅的功效。是一種用于治療急、慢性鼻竇炎、鼻炎的良藥。
[0003]香菊片為薄膜衣，除去薄膜衣后顯棕黑色；味苦、微甜。香菊片的1000粒處方如下:化香樹果序(除去種子)631g ;夏枯草631g ;野菊花251g ;生黃苗420g ;辛夷251g ;防風(fēng)251g ;白芷251g ;甘草251g ;川芎251g。
[0004]必士通牌香菊片的制備方法如下:以上九味，加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.12(60°C)時，加乙醇，使含醇量達60%，靜置，濾過，回收乙醇，濃縮至稠膏，減壓干燥，粉碎，加淀粉，滑石粉及硬脂酸鎂適量，制粒，壓制成1000片，包衣，即得。
[0005]目前的香菊片執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBZ12122004，該標(biāo)準(zhǔn)通過薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)定性檢測片劑除去薄膜衣中的甘草，而含量測定也是通過薄層色譜法檢測黃芪甲苷，對產(chǎn)品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)是每片含黃芪以黃芪甲苷計不少于0.0lOmg。但是薄層色譜法檢測的重現(xiàn)性較差，準(zhǔn)確性和靈敏度都不高。因此，有必要進一步提高香菊片中有效成分檢測的靈敏度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是:提供一種必士通牌香菊片有效成分的檢測方法。達到方便的、準(zhǔn)確的對香菊片產(chǎn)品中每片含黃芪以黃芪甲苷計不少于0.0lOmg的定量檢測的目的。
[0007]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的。
[0008]本發(fā)明提供一種必士通牌香菊片有效成分的檢測方法，其香菊片的1000粒處方如下:化香樹果序(除去種子)631g ;夏枯草631g ;野菊花251g ;生黃苗420g ;辛夷251g ；防風(fēng)251g ;白芷251g ;甘草251g ;川芎251g ;其特征是:其香菊片本品中的黃芪是采用高效液相色譜法檢測黃芪甲苷，照高效液相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI D)測定；具體地，所述檢測黃芪以黃芪甲苷的高效液相色譜條件如下:
[0009]色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相:乙腈和0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液混合體積比為15:85至3:97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至2.5至3.5 ;流速:0.8?1.2mL/min ;柱溫:10?30°C;紫外檢測波長為206?210nm，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000 ；
[0010]優(yōu)選地，所述方法還包括通過以下方法制備對照品溶液:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Irnl含20 μ g的溶液，即得；
[0011]優(yōu)選地，所述方法還包括通過以下方法制備供試品溶液:取本品，除去薄膜衣，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入堿性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，用功率250KW、頻率40Hz的超聲處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重復(fù)操作I?3次，合并上清液，50°C以下低溫蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調(diào)PH值至9，用乙醚提取3?5次，每次30ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得；
[0012]優(yōu)選地，所述方法還包括以下方法進行測定:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10?20 μ I，注入液相色譜儀，測定，即得；
[0013]另一方面，本發(fā)明還提供一種香菊片的質(zhì)量控制方法，所述方法采用上述方法檢測香菊片中的有效成分；優(yōu)選地，所述香菊片每個制劑單位含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于0.0lOmg。
[0014]上面所述制備對照品溶液方法:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定10mg，加甲醇制成每Iml含20 μ g的溶液，即得。
[0015]本發(fā)明的優(yōu)點和效果:
[0016]1、本發(fā)明 申請人:經(jīng)過幾年大量的實驗和摸索，提出必士通牌香菊片有效成分采用高效液相色譜法檢測黃芪甲苷的檢測方法，并且重新修訂了該品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，克服了現(xiàn)有技術(shù)中的薄層色譜法檢測的重現(xiàn)性較差，準(zhǔn)確性和靈敏度都不高的問題。證明了本發(fā)明提供的方法簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好，能有效表征香菊片的質(zhì)量，
[0017]2、通過實踐證明，達到方便的、準(zhǔn)確的對香菊片產(chǎn)品中每片制劑含黃芪以黃芪甲苷計不少于0.0lOmg的定量檢測的目的；實現(xiàn)了方便、有效地檢測黃芪以黃芪甲苷計的含量來有利于監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量的目的。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1是黃芪甲苷對照品高效液相色譜圖；圖2是香菊片供試品高效液相色譜圖；圖3黃芪甲苷紫外掃描圖譜。
[0019]以下，結(jié)合附圖來詳細說明本發(fā)明的實施方案。
【具體實施方式】
[0020]以下參照具體的實施例來說明本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明，其不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0021]以下各實施例中使用的供試樣品香菊片均來源于本發(fā)明的 申請人:。
[0022]以下各實施例中使用的對照品黃芪甲苷購自中國食品藥品鑒定研究院。
[0023]實施例1即香菊片中黃芪甲苷的檢測的實施例
[0024]本實施例通過高效液相色譜法，檢測了香菊片中黃芪以黃芪甲苷計的含量。
[0025](I)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性
[0026]色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(5 μ m，250mmX 4.6mm)，即設(shè)備的規(guī)格型號:色譜柱的填料直徑為5 μ m，柱長250mm，柱直徑4.6mm ;流動相:乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(體積比4:96)(其中含0.2%三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至2.7);流速:lml/min ;柱溫:30°C ;紫外檢測波長:207nm ;也可選流速:0.8,0.9,1.1、1.2ml/min ;對應(yīng)柱溫:15、18、20、25°C ;對應(yīng)紫外檢測波長:206、208、209、210nm ;理論板數(shù)按黃芪甲苷計算應(yīng)不低于4000。
[0027](2)對照品溶液的制備
[0028]取黃芪甲苷對照品10mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml置IOml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含黃芪甲苷20 μ g)。
[0029](3)供試品溶液的制備
[0030]取本品，除去薄膜衣，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加堿性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重復(fù)操作3次，合并上清液，低溫蒸干(50°C以下)，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調(diào)pH值至9，用乙醚提取5次，每次30ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。
[0031](4)測定方法
[0032]分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0033]本品每片含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于0.0lOmgo
[0034]附圖1為對照品溶液高效液相色譜圖，注:18.2min處為黃芪甲苷峰。
[0035]附圖2為供試品溶液高效液相色譜圖，注:18.2min處為黃芪甲苷峰。
[0036]實施例2即檢測波長的確定的實施例
[0037]取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇配制成每Iml含黃芪甲苷20 μ g的對照品溶液，在190?400nm范圍內(nèi)掃描。從紫外掃描圖譜可以看出，黃芪甲苷甲醇溶液的最大吸收波長為208nm。見圖3黃芪甲苷紫外掃描圖譜。
[0038]實施例3即含量測定的實施例
[0039](I)色譜條件
[0040]以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.02mol/l磷酸二氫鉀溶液(體積比15:85)(其中含0.5%三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至3.0，為流動相；流速選其中之一均可:0.8、
0.9,1.0,1.1、1.2ml/min ;柱溫:20°C選其中之一均可:10、16、20、23、25、27、28、30°C ;檢測波長:為選其中之一均可206、207、208、209、210nm。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000。
[0041](2)對照品溶液的制備
[0042]與實施例1相同，不再贅述。
[0043](3)供試品溶液的制備
[0044]取本品內(nèi)容物，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加堿性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重復(fù)操作I次，合并上清液，低溫蒸干(50°C以下)，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調(diào)pH值至9，用乙醚提取3次(4次也可)，每次30ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。
[0045]⑷測定法
[0046]與實施例1相同。[0047]實施例4即含量測定的實施例
[0048](I)色譜條件
[0049]以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.02mol/l磷酸二氫鉀溶液(體積比10:90)(其中含0.3%三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至2.8)為流動相；流速:1.2ml/min ;柱溫:250C ;檢測波長為209nm。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000。
[0050](2)對照品溶液的制備
[0051]與實施例1相同。
[0052](3)供試品溶液的制備
[0053]取本品內(nèi)容物，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加堿性甲醇(5ml濃氨加入100ml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重復(fù)操作2次，合并上清液，低溫蒸干(50°C以下)，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調(diào)pH值至9，用乙醚提取4次，每次30ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。
[0054]⑷測定法
[0055]與實施例1相同。
[0056]實施例5即干擾試驗的實施例
[0057]按實施例1 (3)的方法制備供試品溶液，同時制備不含黃芪的陰性供試品溶液及黃芪甲苷對照品溶液，各取10μ I進樣。結(jié)果表明，空白供試品對黃芪甲苷的測定無干擾。通過此干擾試驗證實了其他成分對黃芪甲苷的檢測無干擾。
[0058]實施例6即線件范圍的考察的實施例
[0059]取黃芪甲苷對照品溶液(0.322mg/ml)適量，分別配制成濃度為0.007728、
0.01288,0.02576,0.03864,0.05152,0.07728mg/ml 對照品溶液，各取 10 μ I 進樣，記錄色譜圖，測定峰面積，結(jié)果見表1。并以峰面積A對進樣量M進行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。
[0060]表1黃芪甲苷對照品測定結(jié)果
[0061]
【權(quán)利要求】
1.一種必士通牌香菊片有效成分的檢測方法，其香菊片的1000粒處方如下:化香樹果序(除去種子)631g ;夏枯草631g ;野菊花251g ;生黃芪420g ;辛夷251g ;防風(fēng)251g ;白芷.251g ;甘草251g ;川芎251g ;其特征是:其香菊片本品中的黃芪是采用高效液相色譜法檢測黃芪甲苷，照高效液相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI D)測定；具體地，所述檢測黃芪以黃芪甲苷的高效液相色譜條件如下: 色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相:乙腈和0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液混合體積比為15: 85至3:97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸調(diào)pH值至2.5至.3.5 ;流速:0.8?1.2mL/min ;柱溫:10?30°C ;紫外檢測波長為206?210nm，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000 ； 優(yōu)選地，所述方法還包括通過以下方法制備對照品溶液:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得； 優(yōu)選地，所述方法還包括通過以下方法制備供試品溶液:取本品內(nèi)容物，研細，取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入堿性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，用功率250KW、頻率40Hz的超聲處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重復(fù)操作I?3次，合并上清液，50°C以下低溫蒸干，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調(diào)PH值至9，用乙醚提取3?5次，每次30ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得； 優(yōu)選地，所述方法還包括以下方法進行測定:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10?20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種必士通牌香菊片有效成分的檢測方法，其特征是:采用上述方法檢測香菊片中的有效成分；優(yōu)選地，所述香菊片每個制劑單位含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于 0.0lOmgo
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種必士通牌香菊片有效成分的檢測方法，其特征是:上面所述制備對照品溶液方法:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定10mg，加甲醇制成每Iml含.20 μ g的溶液，即得。
【文檔編號】G01N30/02GK103675120SQ201310578946
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】梁剛, 任紅莉 申請人:陜西白云制藥有限公司