一種蚌毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蚌毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，具體步驟如下：建立標準指紋圖譜：制備參照物溶液：取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，得參照物溶液；制備供試品溶液：取本品干燥細粉或者口服液，(供試品為液態(tài)制劑時，先干燥，然后再研成細粉)，精密加入40％～90％甲醇，稱定重量，回流提取，放至室溫，再稱量，用40％～90％甲醇補足減失的重量，濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5～10μl，分別注入液相色譜儀，測定，得蚌毒靈口服制劑的標準高效液相指紋圖譜；計算，得出結論。本發(fā)明可以進一步全面控制蚌毒靈相關口服制劑和中間體質量。
【專利說明】一種蚌毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明具體涉及一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法。
【背景技術】
[0002]蛘毒靈散中藥組方收載于《中國獸藥典》2010版:
[0003]【處方】黃芩、黃柏、大青葉、大黃；
[0004]【性狀】本品為灰黃色的粉末；氣微，味苦。
[0005]現有的鑒定方法為:(1)取本品，置顯微鏡下觀察:纖維淡黃色、梭形，孔溝細。纖維束鮮黃色，周圍細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細胞的壁木化增厚。靛藍結晶藍色，存在于葉肉組織和表皮細胞中，呈細小顆粒狀或片狀，常聚集成堆。草酸鈣簇晶大，直徑60-140 μ mo (2)取本品3g，加乙醇20ml，加熱回流15分鐘，濾過。取濾液lml，加醋酸鉛試液2滴，可生成橘黃色沉淀；另取濾液1ml，加鎂粉少量與鹽酸3-4滴，顯紅色。
[0006]現有的記載未設定其相關質量標準，且顯微技術、化學方法的鑒定存在明顯不足，本發(fā)明擬開發(fā)該復方的口服液制劑，并用中藥指紋圖譜的方法作為該制劑的質量控制。

【發(fā)明內容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種可以進一步全面控制蛘毒靈相關口服制劑和中間體質量的一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法。
[0008]本發(fā)明的一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，具體步驟如下:
[0009]步驟1:建立標準指紋圖譜:
[0010](I)以ODS十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
[0011](2)流動相:A為甲醇，B為酸性溶液；
[0012](3)洗脫程序為:甲醇-0.1 %磷酸水梯度洗脫:0-10min40:60 ；10-30min45:55 ；30-40min60:40 ；40-50min80:20 ；50-60min60:40 ；60-62min40:60 為流動相梯度洗脫；
[0013]步驟2:制備參照物溶液:取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，得參照物溶液；
[0014]步驟3:制備供試品溶液:取本品干燥細粉或者口服液，(供試品為液態(tài)制劑時，先干燥，然后再研成細粉)，精密加入40%~90%甲醇，稱定重量，回流提取，放至室溫，再稱量，用40%~90%甲醇補足減失的重量，濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；
[0015]步驟4:精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5~10μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，得蛘毒靈口服制劑的標準高效液相指紋圖譜；
[0016]步驟5:計算,得出結論。
[0017]作為優(yōu)選，所述步驟I中的檢測波長為254nm。
[0018]作為優(yōu)選，所述步驟I中理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低于1000。
[0019]作為優(yōu)選，所述標準高效液相指紋圖譜的制定方法為:
[0020](I)取多批蛘毒靈口服制劑的同一劑型，分別按所述供試品溶液的制備方法制得供試溶液；
[0021](2)根據檢測所得的多批檢測數據，建立蛘毒靈口服制劑的高效液相譜圖，確立高效液相色譜峰保留時間和峰面積值；
[0022](3)收集所有檢測數據，計算各對應峰相對保留時間的平均值和相對峰面積的平均值以及標準差等，分別與參照峰的平均保留時間和平均峰面積相除，作為標準指紋圖譜的相對保留時間和相對峰面積值，導出計算結果；
[0023](4)制定標準指紋圖譜數據，繪制標準指紋圖譜。
[0024]本發(fā)明適用于檢查蛘毒靈相關口服制劑和中間體，能夠克服現有微技術、化學方法鑒定的不足，可以進一步全面控制蛘毒靈相關口服制劑和中間體質量。
【具體實施方式】
[0025]為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加清楚明白，以下結合實施例對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0026]實施例1
[0027]—種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，具體步驟如下:
[0028]步驟1:建立標準指紋圖譜:以ODS十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相:A為甲醇，B為酸性溶液；洗脫程序為:甲醇-0.1 %磷酸水梯度洗脫:10min40:60 ；20min45:55 ；30min60:40 ；40min80:20 ；50min60:40 ；60min40:60 為流動相梯度洗脫；
[0029]步驟2:制備參照物溶液:取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解得參照物溶液；
[0030]步驟3:制備供試品溶液:取本品干燥細粉或者口服液，(供試品為態(tài)制劑時，先干燥，然后再研成細粉)，精密加入50%甲醇，稱定重量，回流提取，放至室溫，再稱量，用50%甲醇補足減失的重量，濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；
[0031]步驟4:精密吸取參照物溶液與供試品溶液各7 yl，分別注入液相色譜儀，測定，得蛘毒靈口服制劑的標準高效液相指紋圖譜；
[0032]步驟5:計算,得出結論。
[0033]其中，所述步驟I中的檢測波長為254nm。
[0034]其中，所述步驟I中理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低于1000。
[0035]其中，所述標準高效液相指紋圖譜的制定方法為:取多批蛘毒靈口服制劑的同一劑型，分別按所述供試品溶液的制備方法制得供試溶液；根據檢測所得的多批檢測數據，建立蛘毒靈口服制劑的高效液相譜圖，確立高效液相色譜峰保留時間和峰面積值；收集所有檢測數據，計算各對應峰相對保留時間的平均值和相對峰面積的平均值以及標準差等，分別與參照峰的平均保留時間和平均峰面積相除，作為標準指紋圖譜的相對保留時間和相對峰面積值，導出計算結果；制定標準指紋圖譜數據，繪制標準指紋圖譜。
[0036]經測定，所得樣品指紋圖譜與標準指紋圖譜比較，經計算，相似度不低于0.09。
[0037]實施例2
[0038]一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，具體步驟如下:
[0039]步驟1:建立標準指紋圖譜:以ODS十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相:A為甲醇，B為酸性溶液；洗脫程序為:甲醇-0.1 %磷酸水梯度洗脫:5min40:60 ；15min45:55 ；35min60:40 ；45min80:20 ；55min60:40 ；62min40:60 為流動相梯度洗脫；
[0040]步驟2:制備參照物溶液:取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，得參照物溶液；
[0041]步驟3:制備供試品溶液:取本品干燥細粉或者口服液，(供試品為態(tài)制劑時，先干燥，然后再研成細粉)，精密加入90%甲醇，稱定重量，回流提取，放至室溫，再稱量，用90%甲醇補足減失的重量，濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；
[0042]步驟4:精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，得蛘毒靈口服制劑的標準高效液相指紋圖譜。
[0043]步驟5:計算,得出結論。
[0044]其中，所述步驟I中的檢測波長為254nm。
[0045]其中，所述步驟I中理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低于1000。
[0046]其中，所述標準高效液相指紋圖譜的制定方法為:取多批蛘毒靈口服制劑的同一劑型，分別按所述供試品溶液的制備方法制得供試溶液；根據檢測所得的多批檢測數據，建立蛘毒靈口服制劑的高效液相譜圖，確立高效液相色譜峰保留時間和峰面積值；收集所有檢測數據，計算各對應峰相對保留時間的平均值和相對峰面積的平均值以及標準差等，分別與參照峰的平均保留時間和平均峰面積相除，作為標準指紋圖譜的相對保留時間和相對峰面積值，導出計算結果；制定標準指紋圖譜數據，繪制標準指紋圖譜。
[0047]經測定，所得樣品指紋圖譜與標準指紋圖譜比較，經計算，相似度不低于0.09
[0048]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，其特征在于，具體步驟如下: 步驟1:建立標準指紋圖譜: (1)以ODS十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； (2)流動相:A為甲醇，B為酸性溶液； (3)洗脫程序為:甲醇-0.1 %磷酸水梯度洗脫:0-10min40:60 ； 10_30min45:55 ；30-40min60:40 ；40-50min80:20 ；50-60min60:40 ；60-62min40:60 為流動相梯度洗脫； 步驟2:制備參照物溶液:取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，得參照物溶液； 步驟3:制備供試品溶液:取本品干燥細粉或者口服液，(供試品為液態(tài)制劑時，先干燥，然后再研成細粉)，精密加入40%?90%甲醇，稱定重量，回流提取，放至室溫，再稱量，用40%?90%甲醇補足減失的重量，濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液； 步驟4:精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5?10 iil，分別注入液相色譜儀，測定，得蛘毒靈口服制劑的標準高效液相指紋圖譜； 步驟5:計算，得出結論。
2.根據權利要求1所述的一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，其特征在于，所述步驟I中的檢測波長為254nm。
3.根據權利要求1所述的一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，其特征在于，所述步驟I中理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低于1000。
4.根據權利要求1所述的一種蛘毒靈口服制劑的中藥指紋圖譜檢查方法，其特征在于，所述標準高效液相指紋圖譜的制定方法為: (1)取多批蛘毒靈口服制劑的同一劑型，分別按所述供試品溶液的制備方法制得供試溶液； (2)根據檢測所得的多批檢測數據，建立蛘毒靈口服制劑的高效液相譜圖，確立高效液相色譜峰保留時間和峰面積值； (3)收集所有檢測數據，計算各對應峰相對保留時間的平均值和相對峰面積的平均值以及標準差等，分別與參照峰的平均保留時間和平均峰面積相除，作為標準指紋圖譜的相對保留時間和相對峰面積值，導出計算結果； (4)制定標準指紋圖譜數據，繪制標準指紋圖譜。
【文檔編號】G01N30/02GK103529142SQ201310502729
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月15日 優(yōu)先權日:2013年10月15日
【發(fā)明者】王宏軍, 蔣紅, 周鐵忠, 劉秀萍, 王鐵良, 蘇玉虹, 遲進坤, 張華 , 劉英姿, 張玲, 李麗, 張安國 申請人:遼寧醫(yī)學院