啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法，采用頂空衍生固相微萃取-GCMS/MS的方法進行檢測，采用了PFBBr作為衍生試劑，并在萃取過程中加入NaCl、EDTA，將吸附了含硫物質(zhì)的萃取頭通過GC-MS/M解析、分離、檢測。本發(fā)明改變纖維萃取頭吸附特性，使不能有效萃取MBT等微量硫醇的纖維萃取頭實現(xiàn)了對啤酒及麥汁揮發(fā)物中的揮發(fā)性非硫醇含硫化合物及硫醇衍生物的同時衍生和萃取，以達到同時檢測非硫醇含硫化合物及硫醇物質(zhì)的目的。本發(fā)明可在同一過程依次完成衍生劑吸附、衍生、萃取、進樣、分離和檢測五個步驟，實現(xiàn)了自動化連續(xù)操作，提高了檢測效率和準確性，實現(xiàn)了10種啤酒及麥汁中的非硫醇含硫化合物及硫醇物質(zhì)的準確高效定量分析。
【專利說明】啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明創(chuàng)造涉及一種啤酒的分析檢測方法，具體涉及一種啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法。
【背景技術】
[0002]啤酒中的含硫化合物對啤酒風味是一把雙刃劍。低于閾值時它們是構成啤酒風味不可少的物質(zhì)，高于閾值時則會對啤酒風味帶來不利的影響。隨著消費者口味的改變，淡爽型啤酒的日益盛行，人們對啤酒中的不良風味物質(zhì)的感覺越來越靈敏。因此了解啤酒中的含硫化合物，采取有效的措施減少啤酒中的含硫化合物，是釀造風味優(yōu)良的啤酒的關鍵之一。啤酒中的含硫揮發(fā)性化合物有幾十種，對啤酒風味影響較大的也有十幾種，而且不排除它們之間能發(fā)生的相互轉化。
[0003]含硫化合物因其低含量、且揮發(fā)性等理化特性相差很大不宜檢測，需要用合適的富集裝置和高敏感、高選擇的檢測器才能對這些物質(zhì)實現(xiàn)有效檢測。雖然已有像SPME、吹掃捕集前處理技術和GCMS、PFPD等高靈敏度的檢測器應用到啤酒中揮發(fā)性含硫化合物的檢測，但至今還沒有一個完備的方法同時檢測啤酒中的多種主要含硫化合物。
[0004]揮發(fā)性硫類物質(zhì)對啤酒的風味影響很大，會賦予類似甜玉米、洋蔥、硫臭以及白菜等味道。硫類物質(zhì)在啤酒中含量較低，一般為0.l-20ppb。BRI (BrewingReasechInternationl國際釀造研究中心)對將硫味的描述分為總硫味、DMS味、洋蔥味、硫化物味、爛白菜味、熟的蔬菜味，并認為硫代乙酸甲酯(S-MAC)、硫代乙酸乙酯(S-EAC),3-甲硫基丙酸乙酯(3-MePrAc)、3-甲硫基丙醇(3-MeProl) 二甲基二硫(DMDS)、二甲基三硫(DMTS)為啤酒中主要非硫醇含硫風味物質(zhì)，而主要硫醇如甲硫醇(MT)、乙硫醇(ET)和3-甲基-2- 丁烯-1-硫醇(MBT)、芐硫醇(BMT)等對啤酒風味影響也很大。我們對目前國外主要關注的硫類化合物于整理，如表I。由于硫醇物質(zhì)具有風味活性高、閾值低的特點，雖在啤酒中的含量極低，控制不當也會對啤酒風味造成極大的影響，例如甲硫醇、3-甲基-2-丁烯-1-硫醇、芐硫醇。甲硫醇是硫醇的代表性物質(zhì)，據(jù)報道其風味閾值僅為
0.15 μ g/L，通常情況下其含量不高，一旦控制不當將會導致惡心的腐敗味，對啤酒風味造成嚴重的不良影響。同時，甲硫醇是許多硫化合物的前驅(qū)體，因而其含量多少對啤酒品質(zhì)的影響很大。同時，啤酒的風味物質(zhì)多達千種，背景的復雜性使得微量硫醇的檢測更為困難，一直是釀造研究者未順利攻克的難題。3-甲基-2-丁烯-1-硫醇(MBT)是通常所說的啤酒被太陽光暴曬后產(chǎn)生的“臭fi自味或日光臭”的物質(zhì)基礎，其風味閾值為2ng/L, —般認為其含量的多少與異α-酸(來自酒花)的側鏈降解有關。芐硫醇的
[0005]風味閾值為1.7ng/L，通常是使用質(zhì)量不好的酒花造成的。
[0006]表I啤酒中主要含硫化合物閾值及其風味特征
[0007]
【權利要求】
1.一種啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法，其特征在于，所述方法利用五氟苯甲基溴(PFBBr )改性PDMS/DVB纖維萃取頭，使其能夠同時吸附啤酒及麥汁中的揮發(fā)性硫醇的PFBBr衍生物及非硫醇含硫化合物，然后進行GC-MS/MS進行檢測，具體步驟如下: (1)將檢測樣品排氣，取5mL放入20mL頂空瓶中； (2)在頂空瓶中再加入2gNaCl ； (3)再向頂空瓶中加入0.0l?0.05g銅離子螯合劑； (4)將65μ m PDMS/DVB纖維萃取頭插入裝有五氟苯甲基溴(PFBBr)衍生液的頂空瓶內(nèi)10分鐘，使衍生液吸附在纖維萃取頭上；將吸附了 PFBBr的纖維萃取頭插入裝有待檢測樣品的頂空瓶內(nèi)進行衍生萃取，萃取溫度為55°C,萃取時間為10分鐘； (5)萃取完畢，將纖維萃取頭插入氣相色譜(GC)進樣口，解吸2分鐘進入GC-MS/MS檢測。
2.根據(jù)權利要求1所述的啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法，其特征在于所述步驟(3)向檢測樣品中加入0.025g EDTA，使其在檢測樣品中的濃度達到5000mg/L。
3.根據(jù)權利要求1或2任一項所述的啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法，其特征在于所述步驟(5)中的GC-MS/MS的檢測條件如下: (1)色譜條件為:氣相色譜柱為DB-5MS，0.25 mm內(nèi)徑，15 m長，膜厚0.25 μ m ;載氣為氦氣，流速1.5mL/min，進樣口溫度250°C，無分流進樣；程序升溫:60°C保持2分鐘，10°C /分鐘升溫至130°C，5°C /分鐘升溫至180°C，3(TC /分鐘升溫至300°C，保持2分鐘； (2)質(zhì)譜條件為:電子轟擊(EI)離子源，電子能量70eV;氣相色譜-二級質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS/MS)接口溫度:250°C ;離子源溫度:230°C ;四極桿溫度:180°C ;全掃描范圍:40?400amu ;采用標準物質(zhì)定性，采用子離子模式定量。
4.根據(jù)權利要求3所述的啤酒和麥汁中硫醇與非硫醇含硫類物質(zhì)同時檢測的方法，其特征在于所述非硫醇含硫化合物和硫醇物質(zhì)為硫代乙酸甲酯、硫代乙酸乙酯、3-甲硫基丙酸乙酯、3-甲硫基丙醇、二甲基二硫、二甲基三硫、甲硫醇、乙硫醇、3-甲基-2- 丁烯-1-硫醇、芐硫醇的一種或幾種的組合。
【文檔編號】G01N30/88GK103512995SQ201310494646
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2013年10月18日 優(yōu)先權日:2013年10月18日
【發(fā)明者】尹花, 董建軍, 陳華磊, 郝俊光, 閆鵬, 田玉紅, 李華, 李梅, 楊朝霞, 張宇昕 申請人:青島啤酒股份有限公司