用于分流混合液相色譜法的方法以及設(shè)備的制作方法
【專利摘要】一種用于色譜分離液體樣品的分析物的方法，包括：(i)在一個管道中提供樣品；(ii)對該樣品提供一種溶劑；(iii)使該溶劑同時地流入該管道以便將該樣品從該管道排出、并且流入且通過一個第二管道以便退出所述第二管道；(iv)同時將該排出的樣品和該退出的溶劑提供到一個混合T形接頭，使得該排出的樣品和該退出的溶劑在此混合；(v)將該排出的樣品和該退出的溶劑的混合物提供到一個色譜柱中，使得這些分析物被轉(zhuǎn)移到該柱內(nèi)，并且在其中在該溶劑、或一種不同的溶劑或溶劑的一種混合物的一個流動的影響下進行色譜分離。
【專利說明】用于分流混合液相色譜法的方法以及設(shè)備
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及高效液相色譜法(HPLC)，并且更具體地涉及用于捕獲注入HPLC柱的有機溶劑中的少量分析物的技術(shù)，特別是用于隨后的檢測和分析的目的。
[0002]發(fā)明背景
高效液相色譜法(HPLC)廣泛用于分離液體樣品中的分析物。典型的HPLC儀器使用高壓泵來迫使一個合適的含有樣品的流動相以一個恒定的流速通過一個或多個色譜分離柱。通過一種或多種機制在該分離柱內(nèi)分離樣品組分，這些機制包括吸附、尺寸排阻、離子交換或者與色譜填料的其他相互作用。然后通過任何常規(guī)的檢測器，例如UV-可見光檢測器、熒光檢測器、紅外檢測器、質(zhì)譜儀、拉曼檢測器，或者測量折射率或電導率的檢測器(只是幾個實例)來檢測樣品組分。
[0003]已在范圍廣泛的應(yīng)用中證明了通過HPLC分離的效用，這些應(yīng)用包括從低分子量到高分子量的范圍內(nèi)的分子的分析和純化。該分離過程依賴于這樣的事實:通過顆粒的填充床(被稱為固定相)滲濾的一種流體的流動流束中的許多組分溶質(zhì)分子可以有效地彼此分離?？傮w上，液相色譜法中的分離是在一個柱中通過樣品分子在固定相與流動相之間的選擇性分布來實現(xiàn)。單獨的樣品組分被分離出來，因為每個組分對固定相具有不同的親和力，導致每個組分有不同的遷移速率和每個組分從柱中出來的不同的退出時間。分離效率是由當溶質(zhì)帶穿過該床或柱時其擴散量來確定。
[0004]反相液相色譜法(RP-HPLC)廣泛地用作高效液相色譜法(HPLC)中的一種分離模式。在RP-HPLC技術(shù)中，在流動相中使用的一種或多種溶劑相比固定相是更具極性的，而在RP-HPLC發(fā)展之前進行的常規(guī)的(正相)色譜法中情況是相反的。在反相液相色譜系統(tǒng)中典型地采用的流動相溶劑包括水和一種或多種與水可混溶的有機改性劑，例如乙腈或甲醇。所感興趣的分析物物種典型地形成一種具有流動相的溶液。RP-HPLC固定相通常是高度疏水的或非極性的?；瘜W物種對固定相的親和力主要產(chǎn)生于該物種與存在于固定相上的化學基團的相互作用，這種親和力會影響在流動的流動相中的特定物種通過該固定相的速率。這些化學基團可以通過使表面改性劑與基質(zhì)(如硅石基質(zhì))反應(yīng)而提供在固定相上。因此可以使用表面改性劑來將特定的化學基團吸附到該固定相上。常規(guī)反相液相色譜法使用3 Mffl-10 Mffl球形硅石珠，這些硅石珠已經(jīng)通過包括4、8、或18個碳原子的烴鏈的共價附接進行了改性以提供一個非極性的表面。
[0005]在進行RP-HPLC分離時可能出現(xiàn)的一個困難是，當將有機溶劑中的大量分析物注入到色譜裝置中時，注入體積可能超過柱體積從而導致分析物不能在反相HPLC固定相中保留。由于在色譜法領(lǐng)域有朝著更小(更低的體積)的柱發(fā)展的趨勢，這一困難在最近幾年已變得更為顯著。當樣品體積到達該柱時，為了減少通過該柱看到的流動相中總的有機溶劑的量，可以在到達該柱之前將樣品體積與水性流動相溶劑混合。作為一個實例，圖1示出了一個常規(guī)的HPLC系統(tǒng)，在該系統(tǒng)中混合是在將樣品裝填入色譜裝置之前進行。圖2-3(圖1的討論之后所討論的)示出了常規(guī)的HPLC系統(tǒng)的實例，在這些系統(tǒng)中混合是在裝填之后進行的。[0006]如圖1A中所示，有機溶劑中含有分析物的樣品是從樣品源11提供的并在混合裝置19中與來自溶劑源12的水性溶劑混合。然后將該混合物在泵13a的推動下通過管件2a遞送到多端口閥15的一個端口。在裝填步驟或階段過程中，多端口閥15被配置為將含有待分析的樣品部分的混合物遞送至環(huán)狀管件2c。將任何過量的溶劑或樣品通過管件2d遞送至廢棄物容器17，該管件是流體地連接到該多端口閥的一個端口。
[0007]圖10是在根據(jù)本傳授內(nèi)容的系統(tǒng)內(nèi)可以采用的多端口閥的一個實例的示意圖。在圖10中所示的多端口閥15以已知的方式包括其中具有多個孔或通道47的定子部分46，這些孔或通道47從一端到另一端穿過該定子部分，以及其中具有多個凹槽或槽48a-48c的轉(zhuǎn)子部分45，這些凹槽或槽置于該轉(zhuǎn)子部分45的面向定子部分46的一側(cè)。如所示，該定子部分46包括六個孔或通道47，這些孔或通道相對應(yīng)于例如如圖1A中所示的閥15的端口pl-p6。該轉(zhuǎn)子部分45可以旋轉(zhuǎn)，如圖10中的雙頭箭頭所示，以保持轉(zhuǎn)子部分和定子部分的面處于相互接觸，并且使得凹槽或槽48a-48c可以被配置為使相鄰的孔或通道47的交替的組流體互連。盡管示出的是一個旋轉(zhuǎn)閥，但本發(fā)明并不旨在限制于此，因為該旋轉(zhuǎn)閥只是一種可以使用的閥的一個實例。
[0008]參照這個和其他附圖，應(yīng)當指出，以實線或短劃線示出的管段由此表示為通過其發(fā)生流體流動的那些管段，而以點線示出的管段由此表示為處于未啟用狀態(tài)。使用了短劃線(而不是實線)以便指示通過其發(fā)生混合溶劑流動的管段，該混合物包括由兩個來源14a和14b所提供的溶劑。應(yīng)該指出“未啟用的”管件的名稱僅涉及所討論的特定實施例的討論。取決于系統(tǒng)配置和操作，有可能關(guān)于所討論的特定實施例示為“未啟用”的一些管段實際上可以是結(jié)合一些其他功能或方法正在主動地輸送流體。僅作為一個實例，在一些色譜系統(tǒng)中，取決于系統(tǒng)配置和運作模式，可以給樣品環(huán)(管件2c)連續(xù)提供來自一個或多個來源的樣品物質(zhì)，即使在洗脫階段(即圖1C)在樣品環(huán)管件根據(jù)本討論被表示為處于“未啟用”的過程中的時間段。應(yīng)當進一步指出，雖然術(shù)語“管件”在本說明書中用來描述通過其來將流體從一個位置轉(zhuǎn)移到另一個位置的裝置，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地認識到這種管件長度可能會由任何形式的管道(如蝕刻或機械加工進一個或多個基板的槽)所取代。因此，可以采用任何形式的管道來代替管件本身。還應(yīng)當進一步指出，環(huán)狀管件2c經(jīng)常被稱為“進樣環(huán)”。如在此所用的和在本【技術(shù)領(lǐng)域】中的常見用法中的術(shù)語“環(huán)”并不是指必須暗示管件(或其他形式的管道)的任何特定的幾何構(gòu)型，而是指管件在其兩個端部流體式連接到多端口閥的兩個分離的端口。
[0009]收集含有待分析的樣品部分的混合物的一部分后，將該閥如圖1B所示重新配置以便將混合物的一部分遞送至色譜柱18。在圖1B所示的“進樣”配置中，使一種由溶劑源14b所提供的水性流動相溶劑在泵13b的推動下流過梯度閥16和管件2b以便進入多端口閥15的一個端口，并且由此與先前在管件2c中收集的混合物部分混合并排出該混合物部分。被排出的樣品和溶劑的混合物穿過管件2e進入色譜柱18。在這個進樣階段或步驟中，流動相溶劑被選擇為使得該分析物或這些分析物被優(yōu)先分配到固定相。用這種方法，該分析物或這些分析物優(yōu)選“集中”在該固定相-換句話說，通過吸附在固定相上使分析物駐留在柱內(nèi)的固定相的一個狹窄區(qū)域內(nèi)。
[0010]在常規(guī)的系統(tǒng)10 (圖1C)的洗脫階段或步驟過程中，梯度閥16被配置為用于提供來自兩個溶劑源14a、14b的溶劑的混合物進入管件13b。該多端口閥可以被配置為用于將溶劑的混合物直接遞送至管件2e并且然后遞送至柱18。這些溶劑選擇為使得該分析物或這些分析物對來自溶劑源14a的溶劑比來自溶劑源14b的溶劑具有更大的親和力。使用RP-HPLC技術(shù)，這種情況總體上是通過選擇來自源14a的溶劑以便比來自源14b的溶劑更具非極性或更少水性來實現(xiàn)。在洗脫過程中，該梯度閥可以被操作為使得漸進地增加來自溶劑源14a的溶劑的比例。用這種方法，可以將分析物以與它們結(jié)合到該固定相上的強度的相反順序一個接一個從該柱中移除。由此分離出的分析物離開柱并被順序遞送至檢測器9。
[0011]如上文所指出，在某些情況下，由于高的有機溶劑體積可能會出現(xiàn)其中有機物質(zhì)的進樣量超過柱體積的所不希望的情況。高有機物含量從而導致一種所不希望的情況，其中將不會有感興趣的分析物吸附到固定相，即感興趣的分析物沒有保留在柱上。上面所討論的圖1示出了這個問題的一種常規(guī)的解決方案，其中將有機溶劑的體積在被裝填入色譜系統(tǒng)之前使用一種水性流動相進行稀釋。此解決方案受到一個可能的缺點影響，即，如果感興趣的分析物最初在初始樣品中以低濃度存在，那么使用水性溶劑的隨后稀釋可能會導致在裝填步驟過程中在環(huán)形管件2C內(nèi)保留的分析物物質(zhì)不足。 [0012]圖2代表第二種常規(guī)的色譜系統(tǒng)20，其中使用一種在線混合設(shè)備27進行與水性溶劑的混合。由于該混合是在樣品裝填之后進行，系統(tǒng)20不包括外部的混合設(shè)備，如在圖1中所示的混合設(shè)備19。相反，來自樣品源11的未稀釋的樣品在裝填步驟過程中被遞送至管件2a (圖2A)。裝填步驟的其他方面與參照圖1中已討論的那些是相似的。
[0013]在隨后的進樣步驟中(圖2B)，通過使用來自溶劑源14b的溶劑沖洗將所收集的樣品從管件2c中排出并且進入管件2e如前面參照圖1B所述。然而，對比圖1B中所示的操作，管件2e不立即將樣品引導到柱18。相反，將該樣品流體穿過一個插入的在線混合設(shè)備27，在該設(shè)備內(nèi)它與將它從管件2c中沖洗出并隨它流出管件2c的水性溶劑混合并被其稀釋，。樣品與水性溶劑的混合稀釋了被遞送至柱的流動相內(nèi)有機溶劑的濃度，使得感興趣的分析物到固定相上的吸附可以發(fā)生。
[0014]不同類型的在線混合設(shè)備可用作該混合設(shè)備27。這些裝置總體上合并了某種形式的內(nèi)部流中斷機構(gòu)(如惰性顆粒、折流板或葉片、旋轉(zhuǎn)的螺旋槳、離軸流體引入端口等)以便增加在其內(nèi)分離地引入的流體能夠混合的相互作用路徑長度和相互作用體積。這類混合裝置有不同尺寸可供使用。不同的這類裝置還被稱為“混合柱”。對于將樣品與稀釋液混合，該混合設(shè)備的內(nèi)部體積通?；谝氲挠袡C溶劑的百分比需要稀釋到的程度進行選擇，以便使感興趣的分析物被柱保留。
[0015]作為一個實例，由溶劑源14b提供給混合設(shè)備27的水性溶劑的體積可被控制為大于從環(huán)狀管件2c所提供的樣品的體積的高達三倍、四倍等，從而以至少3、4等的系數(shù)稀釋最初存在于樣品源11中的所有樣品和溶劑物種的濃度。樣品和稀釋液流入混合裝置以便在被釋放到柱18之前在其內(nèi)部體積內(nèi)填充并且混合。在線混合裝置的操作的此特征增加了額外的系統(tǒng)空體積，并且可以增加額外的樣品分析延遲。因此，例如，如果100 μ L的樣品被引入到該混合裝置中并要求稀釋至原濃度的20%，則通常會采用一個具有500 μ I的內(nèi)部體積的在線混合裝置。然而，對于此進樣量，通常的流速是恰好每分鐘500 μ?。因此，使用常規(guī)的設(shè)備將給每個樣品分離增加至少一分鐘。這種增加的時間在連續(xù)運行許多樣品的自動化系統(tǒng)中(例如在臨床實驗室中)可能會變得顯者。[0016]圖3示出了第三種常規(guī)的色譜系統(tǒng)29。類似于系統(tǒng)20 (圖2)的操作，在色譜系統(tǒng)29內(nèi)，在樣品裝填之后并且在多端口閥15的下游，進行樣品與水性溶劑的混合。然而，不是采用在線混合設(shè)備，該系統(tǒng)使用了一個輔助梯度閥29結(jié)合一臺輔助泵23以及水性溶劑的輔助源21。管件2f以選定的流速遞送一種來自該輔助溶劑源21的水性溶劑流，以便連續(xù)地混合并稀釋通過管件2e提供到輔助梯度閥15的樣品。可替代地，該水性溶劑可以從溶劑源14b中提取。
[0017]而系統(tǒng)20 (圖2)的在線混合設(shè)備27進行樣品的整個體積與溶劑的整個所選體積一起的混合，系統(tǒng)29 (圖3)的輔助梯度閥進行分別由管段2e和2f提供的樣品流和溶劑流的連續(xù)混合。作為一個實例，由溶劑源21所提供的水性溶劑的流動速率可被控制為大于通過管件2e的樣品的流動的高達三倍、四倍等，從而以至少3、4等的系數(shù)稀釋最初存在于樣品源11中的所有樣品和溶劑物種的濃度。在樣品的流速與溶劑的流速之間的比率可由輔助梯度閥25控制。
[0018]盡管在系統(tǒng)20 (圖2)或系統(tǒng)29 (圖3)中對樣品進行了稀釋，將所有或大部分分析物物種保留以用于隨后的檢測，因為它們通過柱18的流動通過吸附到柱內(nèi)的固定相而被捕獲。與此相反，由于在環(huán)狀管件2c中收集的稀釋后的樣品的有限體積，圖1中所示的預(yù)稀釋技術(shù)可能會降低可用于檢測的分析物的總量。在洗脫階段(圖3C)中，輔助泵23被關(guān)閉或者輔助閥25被配置為阻止來自輔助溶劑源21的水性溶劑的流動。在系統(tǒng)20或系統(tǒng)29的操作中，洗脫階段基本上如之前參照圖1C所描述的進行，其中將來自兩種溶劑源14a、14b的溶劑的混合物供應(yīng)給柱18。也可以采用遞送到柱中的兩種溶劑的相對比例的一個程序化的時間變化，以便從柱中順序移出分析物物種，以便每一個依次被檢測器9檢測到。
[0019]雖然可以并且已經(jīng)成功地使用圖1-3中所示的和上面討論的常規(guī)的色譜技術(shù)，它們各自還有一些缺點。例如，圖1中所示的常規(guī)的預(yù)稀釋技術(shù)要求一個額外的樣品制備步驟并且，如上所述，可能減少可用于檢測的分析物的總量。圖2中所示的常規(guī)的在線混合技術(shù)將額外的“死體積”引入到如上所指出的流體路徑中。該額外的死體積可能會降低色譜分離以及由此產(chǎn)生的數(shù)據(jù)質(zhì)量，并且還引入了額外的時間延遲。圖3中所示的系統(tǒng)29要求色譜系統(tǒng)包括一個額外的泵以及一個額外的閥，從而增加了系統(tǒng)成本和尺寸。
[0020]鑒于以上考慮，在現(xiàn)有技術(shù)中對于可在過量有機溶劑的存在下成功地捕獲并檢測小水平的有機分析物物種而無需額外的泵以及混合設(shè)備并且不會對譜質(zhì)量或分析速度產(chǎn)生不良影響的色譜分析方法和設(shè)備存在需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0021 ] 根據(jù)本傳授內(nèi)容的第一方面，提供了 一種用于色譜分離液體樣品分析物的方法，其中該方法包括:(i)在一個管道中提供該樣品；(ii)對該樣品提供一種溶劑；(iii)提供一個流體泵；(iv)操作該流體泵以便同時使該溶劑流入該管道以便將該樣品從該管道中排出，并且使該溶劑流入并通過一個第二管道以便退出所述第二管道；(iv)同時將該排出的樣品和該退出的溶劑提供到一個混合T形接頭，使得該排出的樣品和該退出的溶劑在此混合；(V)將該排出的樣品和退出的溶劑的混合物提供到一個色譜柱中，使得這些分析物被轉(zhuǎn)移到該柱內(nèi)，并且在其中在該溶劑、一種不同的溶劑或多種溶劑的混合物的流的影響下進行色譜分離。在不同的實施例中，這些分析物在該色譜柱內(nèi)被吸附到固定相，并且在這樣的實施例中，該方法可以包括一個額外步驟(Vi):將一種包含第二溶劑的流體提供到該色譜柱使得這些吸附的分析物依次從該固定相解吸并從該色譜柱中排出。在等度洗脫的例子中，包含該第二溶劑的流體的組成不隨時間變化；在梯度洗脫的例子中，該流體的組成是隨時間變化的。
[0022]對該樣品提供一種溶劑的步驟(ii)可以包括以如下方式提供該溶劑使得，當在該混合T形接頭處與該樣品混合時，該溶劑造成該樣品的總有機溶劑含量的稀釋。在不同的實施例中，步驟(iii)可以包括使該溶劑的一個流通過一個分流T形接頭，以便在此被分流成流入該管道的一個第一流動部分和流入并通過該第二管道的一個第二流動部分。在不同的其他實施例中，步驟(iii)可以包括使該溶劑的一個流通過一個三端口閥，以便在此被分流成流入該管道的一個第一流動部分和流入并通過該第二管道的一個第二流動部分，所述三端口閥具有一個可操作的流動調(diào)節(jié)機構(gòu)用于控制第一流部分的流速與第二流動部分的流速之間的比率。該流動調(diào)節(jié)機構(gòu)可以手動或自動控制。此外，在不同的實施例中，步驟(iii)可以包含將該溶劑的一個流分流成通過一個多端口閥流入該管道的一個第一流動部分和繞過該多端口閥的一個第二流動部分。該第一流動部分的流速與該第二流動部分的流速之間的比率可通過選擇該第二管道的長度或內(nèi)徑來控制。
[0023]在一些實施例中，將一種包含第二溶劑的流體提供到色譜柱的步驟(Vi)可包含隨時間改變該流體的組成，其中對所述時間變化進行校準，以便補償該第一和第二流動部分的流速的差異。在不同的其他實施例中，步驟(vi)可包括配置一種流動調(diào)節(jié)機構(gòu)使得流體不流過該第二管道。
[0024]根據(jù)本傳授內(nèi)容的第二個方面，提供了一個色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括:(a) —個多端口閥，該多端口閥包括流體性地連接到樣品源的第一端口 ；以及至少一個第二端口、第三端口、第四端口和第五端口，其中該多端口閥包括一種第一配置，其中該第三和第五端口流體性地連接并且該第二和第四端口流體性地連接；(b) —個流體性地連接到該第二和第三端口的進樣環(huán)管道；(C)流體性地連接到該第四端口的樣品的至少一個溶劑源，以便將一種或多種溶劑提供到該第四端口 ；(d) —個在溶劑源與該第四端口之間流體性地連接的流體泵，該流體泵是可操作的以使一種或多種溶劑流過該系統(tǒng)；(e) —個在該流體泵與該第四端口之間流體性地連接的第一 T形接頭；(f) 一個流體性地連接到該第五端口的色譜柱，以便從其接收液體樣品；(g) —個在該色譜柱和該第五端口之間流體性地連接的第二 T形接頭；以及(h) —個在該第一與第二 T形接頭之間流體性連接的旁路管道，其中該旁路管道或該第一和第二 T形接頭之一被配置為使得，當該多端口閥是在其第一種配置時，在該泵的運行下由該至少一個溶劑源提供的該一種或多種溶劑被分流成一個提供到該進樣環(huán)管道的第一流動部分和一個提供到該旁路管道的第二、更大的流動部分。
[0025]—些實施例可進一步包含:(i) 一個第二多端口閥，該第二多端口閥包括:一個第二閥第一端口，可操作用于將該一種或多種溶劑提供到該第一 T形接頭；一個第二閥第二端口，可操作用于接收來自該流體泵的一種或多種溶劑；一個第二閥第三端口，可操作用于將該液體樣品或一種或多種溶劑提供到該色譜柱；以及一個第二閥第四端口，可操作用于接收來自該第二 T形接頭的該第一流動部分和該第二流動部分的一個組合，其中該第二多端口閥包含一種第一配置，其中該第一和第二端口是流體性地連接的并且該第三和第四端口是流體性地連接的，以及一種第二配置，其中該第二和第三端口是流體性連接的。【專利附圖】

【附圖說明】
[0026]從下面僅以舉例方式并且參照未按比例繪制的附圖所給出的說明中，本發(fā)明的以上指出的和各種其他方面將變得清楚，在附圖中:
圖1A-1C分別是根據(jù)第一種常規(guī)色譜系統(tǒng)和方法的色譜裝填、進樣和洗脫階段的示意
圖；
圖2A-2C分別是根據(jù)第二種常規(guī)色譜系統(tǒng)和方法的色譜裝填、進樣和洗脫階段的示意
圖；
圖3A-3B分別是根據(jù)第三種常規(guī)色譜系統(tǒng)和方法的色譜裝填和進樣階段的示意圖；
圖4A-4C分別是根據(jù)本傳授內(nèi)容的第一種色譜系統(tǒng)和方法的色譜裝填、進樣和洗脫階段的示意圖；
圖5是根據(jù)本傳授內(nèi)容的第二種色譜系統(tǒng)和方法的洗脫階段的示意圖；
圖6A-6C分別是根據(jù)本傳授內(nèi)容的第三種色譜系統(tǒng)和方法的色譜裝填、進樣和洗脫階段的示意圖；
圖7是根據(jù)本傳授內(nèi)容的另一個色譜系統(tǒng)和方法的色譜進樣階段的示意圖，并且代表在圖6中示出的系統(tǒng)和方法的修改后的版本；
圖8是根據(jù)本傳授內(nèi)容的另一個色譜系統(tǒng)的洗脫步驟的示意圖；
圖9是一組睪酮在甲醇中的2 μ g/mL溶液的100 μ L進樣的色譜圖，一個色譜圖是使用常規(guī)的配置獲得的而另一個色譜圖是使用根據(jù)本發(fā)明的系統(tǒng)獲得的；
圖10是可以在根據(jù)本傳授內(nèi)容的設(shè)備內(nèi)用作多端口閥的一個示例性的旋轉(zhuǎn)閥組件的示意圖；
圖11是一個示例性T形接頭的示意圖；并且 圖12是一個根據(jù)本傳授內(nèi)容的色譜方法的流程圖。
【具體實施方式】
[0027]以下說明的提出是為了使本領(lǐng)域的任何技術(shù)人員能夠進行和使用本發(fā)明，并且是在特定的應(yīng)用及其要求的背景下提供的。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，對所描述的實施例的各種修改將是顯而易見的，并且在此的一般原則可以應(yīng)用到其他實施例。因此，本發(fā)明并非旨在局限于所示出的實施例和實例，而是要根據(jù)所示出和所描述的特征和原則而給予可能的最寬范圍。參照附圖1-12結(jié)合以下說明，本發(fā)明的具體特征和優(yōu)點將變得更加清楚。
[0028]本發(fā)明可以結(jié)合采用梯度洗脫或等度洗脫之一的色譜方法和系統(tǒng)來實施。梯度洗脫是最常見的類型，在圖4-7以及在與這些圖有關(guān)的下面的討論中詳細示出。涉及等度洗脫的一些變體示于圖8以及與該圖有關(guān)的下面的討論中。
[0029]圖4A-4C分別是根據(jù)本傳授內(nèi)容的一種第一色譜系統(tǒng)的色譜裝填、進樣和洗脫階段的示意圖。在圖4中所示的系統(tǒng)30包含許多相同的部件，這些部件與色譜系統(tǒng)10 (圖1)、20 (圖2)和29 (圖3)中的部件在功能和布置上相似。這些相同或相似的部件通過它們相對于圖1-3的類似的參考號進行分辨，并且讀者可以參考上述討論的背景部分中這些部件和它們的功能的說明。為了便于參考，多端口閥15的第一、第二、第三、第四、第五和第六端口在圖4Α中分別被標記為端口 ？1、？2、？3、？4、？5和？6。這種端口標記方案應(yīng)理解為適用于整個說明書；然而，端口的編號是任意的。雖然在附圖中多端口閥15被示出為確切地包含圓形地安排的六個端口，應(yīng)當理解還可以使用具有一些其他總端口數(shù)或具有一些不同的幾何配置的端口的閥，前提是這樣的閥能夠?qū)⒃诖怂境龊兔枋龅牟煌丝诹黧w性地互連。
[0030]類似于系統(tǒng)29 (圖3)的工作方式，對系統(tǒng)30 (圖4)進行操作使稀釋液水性溶劑與樣品流體在流體地介于進樣環(huán)形管件2c和色譜柱18之間的位置混合。然而，對比系統(tǒng)20，系統(tǒng)30既不包括輔助溶劑源、輔助泵、輔助閥，也不包括在線混合設(shè)備。相反，在系統(tǒng)30中，在進樣階段(圖4B)過程中由溶劑源14a、14b所提供的該溶劑或這些溶劑的一部分通過一個分流T形接頭31a轉(zhuǎn)移入一個旁路管件2g，該分流T形接頭被流體性地布置在多端口閥15的上游。該溶劑或這些溶劑的剩余部分(也就是，未分流到旁路管件26的部分)在進樣階段過程中繼續(xù)流入管件2b，從該管件中它進行如上所述的與在進樣環(huán)形管件2c中的樣品混合并且從該管件中排出該樣品。該溶劑或這些溶劑的轉(zhuǎn)移部分與樣品流體在進樣階段過程中在混合T形接頭31b處恰好在樣品和溶劑進入柱18之前進行混合。
[0031]每個分流T形接頭31a和混合T形接頭31b可以是處于圖11中示意性地示出的一個簡單的流體管件連接裝置31的形式。為說明的清楚起見，在這里指出，“T形接頭”(或者可替代地，“T接頭”)總體上是一個裝置，該裝置可以是大致成形(或近似成形)為字母符號“T”的形式并且用于互連流體管件的三個分離的長度。例如，圖4中所示的T形接頭31包括一個整體的裝置，該裝置包括具有孔34的一個第一管狀部分32以及具有孔35的一個相交的第二管狀部分33。在操作中，三個對應(yīng)的流體管件長度流體性地連接到孔34的兩個端部和孔35的端部。總體而言，一種從孔34的第一端部進入裝置31的流體流動將分流成兩個流動部分，使得一個流動部分通過孔34的相對端部退出，并且使得另一個流動部分通過孔35退出。此外，該裝置31可用于將兩個進入的流體流動部分混合成為退出該裝置的一個單一的混合的流體流動。雖然在圖11中第二管狀部分33被示為與第一管狀部分32成直角，應(yīng)當理解，實際上，這些管狀部分可以彼此布置成任何銳角或斜角。例如，一些T形接頭可以被配置為字母“Y”的形式，或成形為類似一個箭頭，以便幫助流體會聚或發(fā)散。因此，術(shù)語“T形接頭”，如在此所用，是指包含所有這樣的變型。
[0032]圖4B與圖2B或者圖3B的對比顯示該混合T形接頭31b實現(xiàn)了使用水性溶劑稀釋該樣品流體的功能，類似于通過系統(tǒng)20的在線混合設(shè)備27或系統(tǒng)29的泵23與梯度閥25的組合進行的功能。然而，在該新型系統(tǒng)30中，去除了輔助泵，因為將稀釋液水性溶劑在泵13b的推動下從旁路管件2g提供給混合T形接頭31b。常規(guī)使用的輔助泵的去除減少了系統(tǒng)的成本、尺寸和復雜性。在分流T形接頭31a處，在旁路管件2g和管件2b之間的溶劑流動的相對比例可以由兩個流體路徑(該流動被分流在其間)之間的相對流體阻力所控制或確定。例如，如果沿著旁路管件2g在T形接頭之間的流體性路徑的長度保持為與可替代的流體性路徑的總長度相等，該總長度包括管件2b、管件2c和管件2e以及通過多端口閥15的總的流體路徑，那么相對流速可以通過各路徑最收縮的部分的內(nèi)徑比率來確定。因此，在本實例中，該相對比例可以通過選擇具有一定內(nèi)徑的旁路管件2g來設(shè)置。在圖4以及在隨后的附圖中，將旁路管件2g示意性地示出為比其他管段更厚，以便運送更大的流動比例。可替代地，旁路管件2g內(nèi)對流體流動的阻力可以通過選擇管件的長度、通過選擇管件的長度和內(nèi)徑、或通過選擇管件或其連接的某些其他特性或某些特性組合來控制。[0033]此外，在系統(tǒng)30中，常規(guī)使用的在線混合設(shè)備27被去除，替代為簡單的混合T形接頭31b，從而降低成本并且消除與在線混合裝置27相關(guān)的附加死體積和時間延遲。因為分離的流體流動的僅有一個匯合，所以基本上沒有通過使用T形接頭31b引入額外的死體積。因此，在該新系統(tǒng)中去除了這種額外的死體積的任何不利影響。
[0034]系統(tǒng)30的柱進樣階段的操作已經(jīng)參照圖4B在上述段落中進行了描述。裝填階段的操作(圖4A)類似于參照圖1-3已經(jīng)描述的操作，并且這樣的描述在這里不再重復。系統(tǒng)30的洗脫階段的操作在圖4C中示出。如前所述，在洗脫階段過程中，從溶劑源14a、14b提供的兩種溶劑的相對比例在洗脫過程(梯度洗脫)中可能會隨時間而變化，以便產(chǎn)生一系列具有不同組成的的溶劑混合物。由于該簡單的分流T形接頭31a可能不具有關(guān)閉能力，所有這樣的混合物的流動可能會在兩個路徑之間分流，如圖4C所示。
[0035]流動相在兩個路徑之間(在T形接頭31a處)的分流可能會導致流動相的組成在進行梯度洗脫的過程中隨時間的變化與在沒有旁路管件2g進行梯度洗脫的轉(zhuǎn)移過程中可能的情況不同。例如，旁路管件的流體阻力和長度可以是使得具有某種組成的、被轉(zhuǎn)移進入旁路管件2g的流動相的一部分比具有相同組成的、流經(jīng)閥15的部分稍微更早(或更晚)到達混合T形接頭31b。在這種情況下，在任何給定的時間內(nèi)退出混合T形接頭31b的流動相的組成可以是不同于使用常規(guī)的系統(tǒng)(即沒有旁路管件2g和T形接頭31a、31b)將會預(yù)測的組成。此影響可以通過校準程序進行補償，該程序確定由梯度閥16確定的流動相溶劑的比例應(yīng)如何及時進行調(diào)整，以便考慮非同步的到達時間。所得到的校準(包括梯度閥的定時調(diào)整)然后可以合并到任何現(xiàn)有的色譜法中。
[0036]可替代地，也可以采用在圖5中所示的配置以控制流動相溶劑的流動的分流。在圖5所示的替代系統(tǒng)40中，分流T形接頭由具有流動調(diào)節(jié)機構(gòu)42 (例如像一個針閥機構(gòu))的三端口閥41替換，該閥可以將轉(zhuǎn)移入管件2g的流的比例從0%改變到某個正的百分比，可能高達100%。以這種方式，可以控制洗脫溶劑的路徑。另外，在柱進樣階段過程中還可以采用流動調(diào)節(jié)機構(gòu)42，以便控制水性溶劑在管件2b與旁路管件2g之間的相對比例，從而在混合T形接頭31b處控制或選擇稀釋系數(shù)。因此可以采用調(diào)節(jié)機構(gòu)42的控制(無論是手動控制或自動控制)來可變地配置稀釋系數(shù)用于優(yōu)化使用各種不同的樣品、不同的溶劑、或不同的分析方法中的每一種。自動控制可以由電子連接到該調(diào)節(jié)機構(gòu)的計算機或其他可編程控制器裝置(未示出)提供。
[0037]圖6A-6C分別是根據(jù)本傳授內(nèi)容的依據(jù)第三色譜系統(tǒng)50的色譜裝填，進樣和洗脫階段的示意性描繪。在圖6所示的系統(tǒng)50包括許多與之前參考圖4描述的系統(tǒng)30的相同的部件。這些相同的部件包括:樣品源11 ;第一泵13a ;多端口閥15 ;廢棄物容器17 ;溶劑源14a、14b ;梯度閥16 ;第二泵13b ;管段2a、2b、2c、2d、2e和2g以及T形接頭31a和31b。這些相同部件的功能在系統(tǒng)30與系統(tǒng)50之間是相同的或基本上相似的。系統(tǒng)50進一步包括一個第二多端口閥15b，其是流體性地夾在:(a)該第二泵13b與該第一多端口閥15之間；(b)該第二泵13b與該柱18之間；(c)該第二泵13b與該分流T形接頭31a之間；(d)該柱18與該混合T形接頭31b之間；以及任選地，(e)該分流T形接頭31a與該第一多端口閥15之間。如所示，在圖6A中該第二多端口閥15b可以包含六個端口，這些被標記為第二閥端口 ql、q2、q3、q4、q5和q6。該第二多端口閥15b的提供需要包括額外的管段，如圖6中所示的管段2h、2j和2k以及2m。[0038]系統(tǒng)50 (圖6A)的裝填階段的操作類似于系統(tǒng)30 (圖4A)的裝填階段的操作。同樣地，進樣階段(圖6B)是類似于系統(tǒng)30的進樣階段的操作(圖4B)，因為來自溶劑供應(yīng)14b的水性溶劑的流動在分流T形接頭31a處分流成(a)流經(jīng)閥15b、15并且流經(jīng)樣品環(huán)管件2c以便將樣品流體沖洗出樣品環(huán)形管件2c并進入柱18的第一部分，以及(b)轉(zhuǎn)移入旁路管件2g并且用于在混合T形接頭31b處稀釋該樣品的第二、更大的部分。相對于系統(tǒng)30，在此進樣階段過程中的主要區(qū)別是流體流動通過該第二多端口閥15b。
[0039]在系統(tǒng)50的洗脫階段的操作過程中(圖6C)，該第二多端口閥15b被配置為使得從溶劑供應(yīng)14a、14b提供的溶劑混合物的流動不通過導向T形接頭31a、31b的管件的區(qū)段，而是直接從第二閥流入色譜柱18。此配置排除洗脫溶劑混合物在分流T形接頭31a處被不必要地分流成兩部分的可能性，并且最小化在第二泵13b與柱18之間的流體路徑的總長度。相對于系統(tǒng)30，此配置因此提高了系統(tǒng)50的性能效率。
[0040]圖7示出了另一種色譜系統(tǒng)55，其中僅示出了該進樣配置。在圖7中所示的系統(tǒng)55是在圖6中所示的系統(tǒng)50的修改版本，其被配置為使得從溶劑供應(yīng)14a、14b提供的一種或多種溶劑的流一次僅通過該第二多端口閥15b。在圖7中所示的配置釋放了六端口閥15b的兩個端口。釋放的端口因此可以被用于其他目的或流體連接?？商娲?，可以將在圖7中所示的六端口閥15b替換為一個更便宜的四端口閥。
[0041]圖8示出了色譜系統(tǒng)37的洗脫步驟，該系統(tǒng)是在圖4中所示的系統(tǒng)30的一種變體。系統(tǒng)37被設(shè)置為用于等度洗脫。因此，系統(tǒng)30的梯度閥16被去除并且兩種溶劑供應(yīng)14a、14b被一個單一的溶劑供應(yīng)14c所替換，該溶劑供應(yīng)可能包含多種溶劑的預(yù)混合的混合物，這些溶劑對于在洗脫步驟過程中用作流動相而進行了優(yōu)化?？梢赃x擇溶劑混合物以便在混合T形接頭31b處的混合過程中是足夠極性或水性的來充分稀釋該樣品的有機含量，又是足夠非極性的使得樣品中的分析物在流動相的流動的影響下遷移通過該柱。還進一步地，可以將分離的柱進樣和洗脫步驟替換為一個單一的“流過”步驟，類似于常規(guī)的色譜法，其中在特定選擇的溶劑組成的連續(xù)流動下分析物既被引入柱內(nèi)又在柱內(nèi)分離。
[0042]使用許多其他變體或配置也可以實現(xiàn)等度洗脫。例如，可以保留系統(tǒng)30的基本結(jié)構(gòu)，但修改成使得溶劑供應(yīng)14a包含對于在等度洗脫步驟過程中使用而優(yōu)化的溶劑的預(yù)混合的混合物。在這樣的配置中，在進樣步驟過程中,可以操作閥16以便從溶劑供應(yīng)14b中吸取溶劑，如前面所述。然而，在洗脫步驟過程中，將會操作閥16以便僅從含有溶劑混合物的溶劑供應(yīng)14a (而不是從兩個溶劑供應(yīng))中吸取溶劑。在這種情況下，梯度閥16可以由一個更簡單的的三端口切換閥替換，該切換閥僅從這些溶劑供應(yīng)的所選擇的一個中吸取溶齊U，但不從兩者中吸取溶劑。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地認識到如何修改用于等度洗脫的在附圖中示出的其他實施例。
[0043]圖9是使用常規(guī)的色譜配置與使用根據(jù)本發(fā)明的配置獲得的色譜圖之間的比較。色譜圖91以及色譜圖93分別代表通過常規(guī)的色譜系統(tǒng)和一個根據(jù)本發(fā)明的系統(tǒng)處理后的睪酮的實驗檢測。在每個例子中，樣品是睪酮在甲醇中的2 μ g/mL的溶液的100 μ L進樣。
[0044]因為高的有機溶劑(甲醇)濃度，使用常規(guī)的配置得到的色譜圖91在檢測到退出色譜柱的第一化合物時在初始溶劑前沿表現(xiàn)出一個大的偽峰92。該偽峰92由保留在色譜柱中的流動相的溶液中的睪酮的檢出造成，因為在色譜柱進樣過程中其不能完全吸附到色譜柱固定相。該色譜圖91還表現(xiàn)出了一個小峰94，該小峰可歸因于在約1.75分鐘的預(yù)計保留時間時觀察到的睪酮。雖然該峰94代表吸附到固定相的睪酮的一小部分的檢出，其強度嚴重不足以代表樣品中睪酮的濃度，因為顯著比例的睪酮在洗脫開始時退出該色譜柱，并且因為在進樣步驟過程中未知量的睪酮被沖洗通過該色譜柱。該峰94還表現(xiàn)出差的形狀，如由該峰值的前區(qū)域95所示。
[0045]相比之下，使用根據(jù)本發(fā)明的色譜系統(tǒng)獲得的色譜圖93在睪酮保留時間僅表現(xiàn)出一個單一的良好形狀的峰96。峰96的強度和在峰下的面積大于峰94的對應(yīng)的特征并且代表睪酮濃度，因為基本上所有的這種分析物在進樣過程中保留在色譜柱固定相上，如由在洗脫開始時沒有任何偽峰存在所證明。
[0046]圖12是一個根據(jù)本傳授內(nèi)容的色譜方法的流程圖。在方法100 (圖12)的第一步驟，步驟102中，在一個管道中提供包含感興趣的分析物的一個樣品。例如，進樣環(huán)(也就是說，在幾個附圖中所示的樣品環(huán)管2c)可用作一個在其中提供該樣品的合適的管道。在下一個步驟，步驟104中，提供了一種用于該樣品的溶劑?？梢钥商鎿Q地提供多種溶劑的一種混合物。
[0047]在方法100 (圖12)的下一個步驟，步驟106中，使該溶劑或這些溶劑同時流入該管道中以從該管道排出該樣品并且流入以及通過一個第二管道以從該第二管道中退出。到該第一管道的路徑可以包括通過一個閥門的一個路徑，該第一管道流體性地連接到該閥門并且該第二管道可以是一個繞過該閥門的旁路管件。同時流動通過該兩個路徑可能是由以下情況弓I起:通過一個分流接頭(如一個分流τ形接頭)或通過一個可(手動或自動)配置為在這兩個路徑之間提供可變的分流比的三端口閥，將來自一個溶劑源的該溶劑(或這些溶齊IJ)的總流動在這兩個路徑之間分流。該分流比還可以通過兩條路徑之間對流體流阻力的差異來確定。具有最小流體阻力的路徑將接收到該流動的較大部分，反之亦然。流體阻力(以及因此的流動分流比)可以由各路徑內(nèi)的內(nèi)徑或路徑的長度之間的差異來選擇或固定。
[0048]下一步，在方法100(圖12)的步驟108中，將排出的樣品與通過并且退出該第二管道的該溶劑或這些溶劑在一個混合接頭(例如一個混合T形接頭)處混合。在步驟110中，將混合物提供到一個色譜柱中。如果使用“流過”等度洗脫，使得沒有分離的色譜柱進樣和洗脫步驟，則該方法100可在步驟110之后終止。在這樣的情況下，使用一種單一組成的流體(可能包括一種溶劑混合物)不僅用來輸送樣品分析物進入該色譜柱，并且還由于在色譜柱內(nèi)分析物在移動相與固定相之間的分配而促進這些分析物通過該色譜柱的差別性遷移。分析物到固定相的分配可通過在混合T形接頭處的早先的混合而得以促進(在前面的步驟108中)，以便稀釋樣品中有機溶劑的濃度。在一些實施例中，由此分離出的分析物可能會被遞送到一個檢測器用于隨后的檢測。
[0049]在步驟110中，如果采用梯度洗脫，則將該混合物提供到該柱，使得分析物在色譜柱內(nèi)吸附到固定相。該吸附可通過在混合T形接頭處的混合來促進(在前面的步驟108中)，以便稀釋樣品中有機溶劑的濃度。在梯度洗脫的情況下，然后執(zhí)行步驟112，其中將一個包括第二溶劑并具有隨時間變化的組成的移動相流體提供到色譜柱，使得所吸附的分析物從該固定相順序地解吸并從色譜柱排出。在某些等度洗脫的情況下也可以執(zhí)行步驟112。在這種情況下，流動相組成在洗脫過程中是不隨時間變化的。在一些實施例中，從柱中退出的分離出的分析物可能會被遞送到一個用于隨后檢測的檢測器。
[0050]本申請中所包括的論述內(nèi)容旨在用作基本的說明。雖然已經(jīng)根據(jù)示出和描述的不同實施例描述了本發(fā)明，讀者應(yīng)該了解具體的討論可能沒有明確地描述所有可能的實施例。在本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員將容易認識到，許多替代選擇是隱式的并且所描述的實施例可以有許多變型。例如，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地認識到，根據(jù)通用程序，在所示的色譜系統(tǒng)的變型中可以采用一個額外的多端口閥。例如，這樣的一個額外的閥可以被流體性地置于該混合T形接頭31b與柱18之間，并且可以包含為了沖洗管線、將分析物以向前方向或相反的方向沖洗出柱等等的目的而流體性地連接到額外的廢棄物容器或溶劑源的端口和管段。此外，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地認識到，根據(jù)通用程序，可以在各個所示的色譜系統(tǒng)中采用一個額外的柱。例如，許多色譜系統(tǒng)采用兩個柱-一個包括保護柱或凈化柱的第一柱以及包括一個分析柱第二柱。
[0051]還進一步地，雖然關(guān)于本發(fā)明的上述討論中的大多數(shù)涉及反相高效液相色譜法(RP-HPLC)，應(yīng)當指出，本發(fā)明還適用于任何HPLC系統(tǒng)，其中進樣的樣品是在一種溶液中，在到達HPLC柱之前需要用流動相對該溶液進行改性。例如，如果采用一個親水相互作用的液相色譜(HILIC)柱來代替一個RP-HPLC柱，則在正常情況下，親水性分析物的柱進樣通常采用富含有機物的流動相。但是，如果樣品本身包含豐富的水(使得不是所有的分析物都被吸附到HILIC柱的固定相)，則可以采用所描述的上述傳授內(nèi)容(連同輕微的顯而易見的改變)以便使用有機流體來稀釋水的濃度。如果采用正相柱，第一有機相可以使用(例如)具有不同疏水性的不同有機相來稀釋，但本發(fā)明將仍然能夠適用。因此，在不脫離本發(fā)明的范圍和本質(zhì)的情況下，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以做出許多改變。說明書和術(shù)語都不旨在限制本發(fā)明的范圍-本發(fā)明僅由權(quán)利要求所限定。在此所提及的任何專利、專利申請、專利公開或技術(shù)公開都通過引用明確地結(jié)合在此。
【權(quán)利要求】
1.一種用于色譜分離液體樣品的分析物的方法，該方法包括: (i)在一個管道中提供該樣品； (ii)對該樣品提供一種溶劑； (iii)使該溶劑同時地流入該管道以便將該樣品從該管道排出、并且流入且通過一個第二管道以便退出所述第二管道； (iv)同時地將該排出的樣品和該退出的溶劑提供到一個混合T形接頭，使得該排出的樣品和該退出的溶劑在此混合； (v)將該排出的樣品和該退出的溶劑的混合物提供到一個色譜柱中，使得這些分析物被轉(zhuǎn)移到該柱內(nèi)，并且在其中在該溶劑、或一種不同的溶劑或多種溶劑的一種混合物的一個流動的影響下進行色譜分離。
2.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中對該樣品提供一種溶劑的步驟(ii)包括提供該溶劑使得，當在混合T形接頭處與該樣品混合時，該溶劑造成該樣品的總有機物濃度的稀釋。
3.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中對該樣品提供一種溶劑的步驟(ii)包括提供該溶劑使得，當在混合T形接頭處與該樣品混合時，該溶劑造成該樣品的總水濃度的稀釋。
4.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中步驟(iii)包括使該溶劑的一個流動通過一個分流T形接頭，以便在此被分流成一個流入該管道的第一流動部分和一個流入并通過該第二管道的第二流動部分。
5.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中步驟(iii)包括使該溶劑的一個流通過一個三端口閥，以便在此被分流成一個流入該管道的第一流動部分和一個流入并通過該第二管道的第二流動部分，所述三端口閥具有一個流動調(diào)節(jié)機構(gòu)可操作用于控制該第一與第二流動部分的流速之間的比率。
6.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中步驟(iii)包括將該溶劑的一個流動分流成一個通過一個多端口閥流入該管道的第一流動部分和一個繞過該多端口閥的第二流動部分。
7.如權(quán)利要求6所述的一種方法，其中步驟(iii)進一步包括通過選擇該第二管道的長度或內(nèi)徑來設(shè)置在該第一流動部分的流速與該第二流動部分的流速之間的比率。
8.如權(quán)利要求4所述的一種方法，其中將一種包含第二溶劑的流體提供到該色譜柱的步驟(vi)包含隨時間改變該流體的組成，其中對所述隨時間變化進行校準，以便補償該第一和第二流動部分的流速上的差異。
9.如權(quán)利要求5所述的一種方法，其中將一種包含第二溶劑的流體提供到該色譜柱的步驟(vi)包括配置該流動調(diào)節(jié)機構(gòu)使得該流體不流過該第二管道。
10.如權(quán)利要求1所述的一種方法，其中將該排出的樣品和該退出的溶劑的混合物提供到一個色譜柱的步驟(V)是使得這些分析物在該色譜柱內(nèi)被吸附到一個固定相，并且其中該方法進一步包括:(vi)將一種包含該不同溶劑或該溶劑混合物的流體提供到該色譜柱，使得這些吸附的分析物順序地從該固定相解吸并從該色譜柱排出。
11.一種用于色譜分離從樣品源提供的液體樣品的分析物的色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括: 一個多端口閥，該多端口閥包括:一個流體性地連接到該樣品源的第一端口；以及 至少一個第二端口、第三端口、第四端口和第五端口，其中該多端口閥包括一種第一配置，其中該第三和第五端口流體性地連接并且該第二和第四端口流體性地連接； 一個流體性地連接到該第二和第三端口的進樣環(huán)管道； 流體性地連接到該第四端口的、用于該樣品的至少一個溶劑源，以便將一種或多種溶劑提供到該第四端口； 一種在該溶劑源與該第四端口之間流體性地連接的流體泵，該流體泵可操作用于使該一種或多種溶劑流過該系統(tǒng)； 一個在該流體泵與該第四端口之間流體性地連接的第一 T形接頭； 一個流體性地連接到該第五端口以便從其接收該液體樣品的色譜柱； 一個在該色譜柱與該第五端口之間流體性地連接的第二 T形接頭；以及 一個在該第一和第二 T形接頭之間流體性地連接的旁路管道， 其中該旁路管道或該第一和第二 T形接頭之一被配置為使得，當該多端口閥是在它的第一配置時，在該泵的運行下由該至少一個溶劑源提供的該一種或多種溶劑被分流成一個提供到該進樣環(huán)管道的第一流動部分和一個提供到該旁路管道的第二的、更大的流動部分。
12.如權(quán)利要求11所述的一種色譜系統(tǒng)，其中第一T形接頭包含一個流動調(diào)節(jié)機構(gòu)，該流動調(diào)節(jié)機構(gòu)可操作用于控制該第一流動部分與該第二流動部分之間的比率。
13.如權(quán)利要求12所述的一種色譜系統(tǒng)，其中將該流動調(diào)節(jié)機構(gòu)電子地連接到一個控制器，該控制器可操作以便通過控制該流動調(diào)節(jié)機構(gòu)來控制該比率。
14.如權(quán)利要求11所述的一種色譜系統(tǒng)，其中該至少一個溶劑源包含一個具有第一溶劑的第一溶劑源以及一個具有第二溶劑的第二溶劑源，并且進一步包括: 一個在該流體泵與該第一和第二溶劑源之間流體性地連接的梯度閥，該梯度閥可操作使得在該流體泵的運行下該第一和第二溶劑的一種混合物從該第一和第二溶劑源被抽出。
15.如權(quán)利要求11所述的一種液相色譜系統(tǒng)，進一步包括: 一個第二多端口閥，該第二多端口閥包括: 一個第二閥第一端口，該第一端口可操作用于將該一種或多種溶劑提供到該第一 T形接頭; 一個第二閥第二端口，該第二端口可操作用于接收來自該流體泵的該一種或多種溶劑； 一個第二閥第三端口，該第三端口可操作用于將該液體樣品或該一種或多種溶劑提供到該色譜柱；以及 一個第二閥第四端口，該第四端口可操作用于接收來自該第二 T形接頭的該第一流動部分和該第二流動部分的一種組合， 其中該第二多端口閥包含一種第一配置，其中該第一和第二端口是流體性地連接的并且該第三和第四端口是流體性地連接的，以及一種第二配置，其中該第二和第三端口是流體性地連接的。
【文檔編號】G01N30/32GK103675156SQ201310387187
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月31日
【發(fā)明者】J.L.赫曼 申請人:賽默菲尼根有限責任公司