專利名稱：復方氨林巴比妥注射液的檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及復方氨林巴比妥注射液的檢測方法。
背景技術：
復方氨林巴比妥注射液，系由氨基比林lOOmg、安替比林40mg、巴比妥18mg組成的復方制劑，是臨床常用的急性高熱時緊急退熱的解熱鎮(zhèn)痛藥。氨基比林和安替比林同屬于吡唑酮類解熱鎮(zhèn)痛藥，能抑制下視丘前列腺素的合成和釋放，恢復體溫調節(jié)中樞感受神經元的正常反應性而起退熱作用；同時還通過抑制前列腺素等的合成而起鎮(zhèn)痛作用。氨基比林能抑制炎癥局部組織中前列腺素的合成和釋放，穩(wěn)定溶酶體膜，影響吞噬細胞的吞噬作用而起到抗炎作用。合用巴比妥，可加強鎮(zhèn)痛作用。
2003年，復方氨林巴比妥注射液在國內上市，目前執(zhí)行標準多為國家藥品監(jiān)督管理局WS-10001-(HD-1327)-2003的國家藥品標準。國家藥品標準的含量測定方法為中和法測定氨基比林含量、比色法測定安替比林含量，硝酸銀滴定法測定巴比妥含量。目前也有文獻報道了同時對三組分含量進行測定的方法，但需要使用離子對試劑且PH值偏高，容易導致色譜柱耗損快。因此，建立一種能同時測定復方注射液中三種組分含量、成本更低廉的檢測方法，顯得尤為重要。發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡便、成本低廉的復方氨林巴比妥注射液的檢測方法。
本發(fā)明提供了復方氨林巴比妥注射液的檢測方法，它是以高效液相色譜法進行測定的，其操作步驟如下:
(I)取復方氨林巴比妥注射液，稀釋后，即得供試品溶液；
(2)取氨基比林、安替比林或/和巴比妥，制備對照品溶液；
(3)將供試品溶液、對照品溶液分別注入高效液相色譜儀中，采用如下色譜條件檢測即可:
檢測波長:220±2nm;
固定相:以十八烷基鍵合硅膠為填料的色譜柱；
流動相:緩沖液:乙腈=(90:10廣(80:20) v/v或緩沖液:甲醇=(70:30Γ(80:20)v/v ;所述緩沖液的pH值 為5.5-6.0。
發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，僅有在磷酸鹽緩沖液的pH5.5飛.0時，雜質與主峰的分離完全，峰形良好。
進一步地,步驟(I)中，以乙腈水溶液或緩沖液:乙腈=(90:10廣(80:20)v/v作為溶劑進行稀釋；步驟(2)中，以乙腈水溶液或緩沖液:乙腈=(90:10廣(80:20) v/v作為溶劑制備對照品溶液。
更進一步地,步驟(I)中，所述乙腈水溶液的濃度為5_15%v/v。
進一步地，檢測波長為220nm。
進一步地，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液。
更進一步地，所述磷酸鹽緩沖液為磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀或磷酸二氫銨緩沖液；所述醋酸鹽緩沖液為醋酸銨、醋酸鈉或醋酸鉀緩沖液。
更進一步地，所述緩沖液的濃度為0.01mol/L-0.05mol/L。
進一步地，步驟(3)中，色譜柱溫度為30±5°C。
本發(fā)明的檢測方法，能同時將復方氨林巴比妥注射液各有效成分與雜質峰完全分離，能夠準確測定注射液中各組分的含量，其操作更為簡便，無需特殊流動相和色譜柱，設備損耗小，成本低廉，為該注射液的藥品安全提供了保障。


圖1對照品HPLC圖譜
圖2實施例1的HPLC圖譜，緩沖液pH=5.5 ;其中，A為溶劑空白對照，B為供試品圖譜
圖3使用醋酸鹽緩沖液時的HPLC圖譜
圖4使用磷酸二氫銨緩沖液時的HPLC圖譜
圖5使用磷酸二氫鈉緩沖液時的HPLC圖譜
圖6不同流動相下的HPLC圖譜
圖7不同流動相下的HPLC圖譜
圖8緩沖鹽濃度為0.01mol/L的HPLC圖譜
圖9緩沖鹽濃度為0.05mol/L的HPLC圖譜
圖1OK2PO4:乙腈=80:20等度洗脫的HPLC圖譜
圖1lK2PO4:乙腈=83:17等度洗脫的HPLC圖譜
圖12K2P04:乙腈=85:15等度洗脫的HPLC圖譜
圖13K2P04:乙腈=90:10等度洗脫的HPLC圖譜
圖HK2PO4:甲醇=70:30等度洗脫的HPLC圖譜
圖15K2P04:甲醇=72:28等度洗脫的HPLC圖譜
圖16K2P04:甲醇=75:25等度洗脫的HPLC圖譜
圖17K2P04:甲醇=80:20等度洗脫的HPLC圖譜
圖18復方氨林巴比妥注射液峰36個月樣品HPLC圖譜
圖19氨基比林溶液光照2個月的HPLC圖譜
圖20安替比林溶液光照2個月的HPLC圖譜
圖21巴比妥溶液光照2個月的HPLC圖譜
圖22氨林巴比妥注射液酸降解HPLC圖譜
圖23氨基比林酸降解HPLC圖譜
圖24安替比林酸降解HPLC圖譜
圖25巴比妥酸降解HPLC圖譜
圖26氨林巴比妥注射液高溫降解HPLC圖譜
圖27氨基比林高溫降解HPLC圖譜
圖28安替比林高溫降解HPLC圖譜
圖29巴比妥高溫降解HPLC圖譜
圖30氨林巴比妥注射液氧化降解HPLC圖譜(室溫2小時)
圖31氨林巴比妥注射液氧化降解HPLC圖譜(水浴2.5小時)
圖32氨基比林氧化降解HPLC圖譜
圖33安替比林氧化降解HPLC圖譜
圖34巴比妥氧化降解HPLC圖譜
圖35氨林巴比妥注射液堿降解(60攝氏度I小時)HPLC圖譜
圖36氨林巴比妥注射液堿降解(水浴2.5小時)HPLC圖譜
圖37氨基比林堿降解HPLC圖譜
圖38安替比林堿降解HPLC圖譜
圖39巴比妥堿降解HPLC圖譜
具體實施方式
實施例1本發(fā)明檢測方法
儀器與條件:Agilentl200液相色譜儀，DAD檢測器，色譜柱:AgilentTC-C18(250mm*4.6mm, 5um);檢測波長:220nm ;柱溫:30°C ;以 0.02mol/L 磷酸二氫鉀緩沖液(pH調至5.5)-乙腈=85:15為流動相。
混合對照品溶液的測定:
分別取氨基比林、安替比林和巴比妥的對照品適量，加流動相配制成濃度0.05mg/ml,0.02mg/ml、0.009mg/ml的溶液。另取復方氨林巴比妥注射液Iml置于IOOml量瓶中，力口流動相定容，依法測定，HPLC圖譜見圖1。
由圖1可見:巴比妥、安替比林、氨基比林峰保留時間依次為7.801分鐘、11.143分鐘、22.53分鐘。各主峰之間分離良好。
線性關系:
另取氨基比林、安替比林、巴比妥對照品，配制不同濃度的對照品溶液，測定其峰面積，結果見下表:
表I
權利要求
1.復方氨林巴比妥注射液的檢測方法，其特征在于:它是以高效液相色譜法進行測定的，其操作步驟如下: (I)取復方氨林巴比妥注射液，稀釋后，即得供試品溶液； (2 )取氨基比林、安替比林或/和巴比妥，制備對照品溶液； (3)將供試品溶液、對照品溶液分別注入高效液相色譜儀中，采用如下色譜條件檢測即可: 檢測波長:220±2nm; 固定相:以十八烷基鍵合硅膠為填料的色譜柱； 流動相:緩沖液:乙腈=(90:10) (80:20) v/v 或緩沖液:甲醇=(70:30)^(80:20) v/v ； 所述緩沖液的PH值為5.5-6.0。
2.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法，其特征在于:步驟(I)中，以乙腈水溶液或緩沖液:乙腈=(90:10廣(80:20) v/v作為溶劑進行稀釋；步驟(2)中，以乙腈水溶液或緩沖液:乙腈=(90:10) (80:20) v/v作為溶劑制備對照品溶液。
3.根據(jù)權利要求2所述的檢測方法，其特征在于:步驟(I)中，所述乙腈水溶液的濃度為 5-15%v/v。
4.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法，其特征在于:檢測波長為220nm。
5.根據(jù)權利要求1-4任意一項所述的檢測方法，其特征在于:所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液。
6.根據(jù)權利要求5所述的檢測方法，其特征在于:所述磷酸鹽緩沖液為磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀或磷酸二氫銨緩沖液；所述醋酸鹽緩沖液為醋酸銨、醋酸鈉或醋酸鉀緩沖液。
7.根據(jù)權利要求1、5或6所述的檢測方法，其特征在于:所述緩沖液的濃度為·0.01mol/L-0.05mol/Lo
8.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法，其特征在于:步驟(3)中，色譜柱溫度為30±5°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了復方氨林巴比妥注射液的檢測方法，它是以高效液相色譜法進行測定的。本發(fā)明的檢測方法，能同時將復方氨林巴比妥注射液各有效成分與雜質峰完全分離，能夠準確測定注射液中各組分的含量，其操作更為簡便，無需特殊流動相和色譜柱，設備損耗小，成本低廉，為該注射液的藥品安全提供了保障。
文檔編號G01N30/02GK103149298SQ20131006673
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月1日 優(yōu)先權日2013年3月1日
發(fā)明者高國玉, 趙瀚晶, 王靜, 周莉婭, 梁隆, 王利春, 沈鑫, 程志鵬 申請人:四川科倫藥物研究有限公司