專利名稱：一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及煙用香精香料的檢驗技術(shù)領(lǐng)域，尤其是指一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法。
背景技術(shù)：
芝麻酚，又名3，4-亞甲二氧基苯酚，是芝麻香精/香料重要的香氣成分之一，也是芝麻香精/香料重要的品質(zhì)穩(wěn)定劑。芝麻酚具有非常強的抗氧化能力，常用于食品、醫(yī)藥的抗氧化劑，此外.該物質(zhì)還具有促進乙醇代謝、調(diào)節(jié)血脂代謝、抗癌、保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)及調(diào)節(jié)免疫等功能。目前，對芝麻酚的檢測方法主要有顯色法、紫外分光光度法、薄層色譜法(TLC)、氣質(zhì)聯(lián)用法(GC — MS)及高效液相色譜法(HPLC)等。其中。HPLC法具有分析時間短、重現(xiàn)性好、準確可靠等優(yōu)點，是目前的常用分析方法。然而，以往HCLC法的研究主要集中在對芝麻及芝麻油中芝麻酚的分析檢測。芝麻香精香料是煙用香精香料的重要原料，目前未見煙用香精香料中芝麻酚的HPLC檢測方法報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，以實現(xiàn)對煙用香精香料中芝麻酚含量的快速、準確測定。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:—種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:包括以下步驟:(I)標準溶液的配制；稱取芝麻酚標準品，用甲醇配制成具有濃度梯度的芝麻酚標準工作溶液；(2)樣品溶液的制備:使用甲醇卒取樣品，然后過濾后制備樣品溶液；(3)液相色譜分析:利用液相色譜儀分別對標準溶液和樣品溶液進行檢測分析；(4)煙用香精香料中芝麻酚含量的計算。所述標準溶液的配制是稱取0.1 g芝麻酚，精確至0.0001 g，用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，并定容，定為標準儲備液；分別移取0.01 mL，0.1 mL，0.5 mL, 1.0mL，2.5 mL，5.0 mL的標準儲備液到10 mL容量瓶中，用萃取劑定容，則芝麻酚的濃度為
0.1 u g/mL, I u g/mL, 5 u g/mL, 10 u g/mL, 25 u g/mL, 50 u g/mL。所述樣品溶液的制備方法具體包括稱取0.4 — 0.8 g香精香料樣品于50 mL具塞三角瓶中，加入10—20 mL甲醇，用密封膠密封振蕩萃取20— 40 min ;靜置后，移取2.0—
5.0 mL上層清液用0.45 Um有機濾膜過濾，得到樣品溶液。所述的色譜分析條件為色譜柱采用菲羅門C18液相色譜柱，色譜柱溫度為30 V’進樣量為15 u L，流速為0.4 ml/min ;檢測波長:297.7 nm，流動相:A為水，B為甲醇，采用梯度洗脫程序，即初始時，A:75%，B:25% ；15 min, A:20%, B:80% ；20 min, A:0%, B:100% ；26 min, A:0%, B:100% ；30 min, A:75%, B:25%0 洗脫時間總共 30 min。所述的色譜柱的規(guī)格為3.9 X 150 mm, 5 粒徑。芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。本發(fā)明的檢測方法對樣品的處理方法和色譜條件進行了優(yōu)化，達到了以下效果:(I)檢測時間短:采用本發(fā)明測定煙用香精香料中芝麻酚含量周期僅需要30分鐘左右;(2)本發(fā)明具有操作簡便、靈敏度高、回收率高及重復性好的優(yōu)點:本發(fā)明方法的色譜條件使芝麻酚的色譜峰與雜質(zhì)色譜峰分離較好，并且具有較好的線性相關(guān)性，檢測限為0.11 u g/g，平均回收率為96.4% 105.3%，平均相對標準偏差RSD〈3%(n=5)。


圖1為本發(fā)明的測定方法的流程圖；圖2為芝麻酚標準曲線線性方程及線性回歸系數(shù)坐標圖；圖3為標準溶液的色譜圖；圖4為樣品溶液的色譜圖。
具體實施例方式本發(fā)明以下結(jié)合實施例和附圖做進一步描述:實施例1本實施例對煙用香精香料中芝麻酚含量的檢測方法如下(所述檢測方法的流程圖如圖1所示)(I)稱取0.1 g芝麻酚，精確至0.0001 g，用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，并定容，定為標準儲備液；分別移取0.01 mL,0.1 mL,0.5 mL, 1.0 mL, 2.5 mL, 5.0 mL的標準儲備液到10 mL容量瓶中，用甲醇定容,配制成濃度為0.1 u g/mL, I u g/mL, 5 U g/mL，10 u g/mL, 25 U g/mL, 50 U g/mL的芝麻酚標準溶液。標液避光4°C保存，取用時放置于常溫下，達到常溫后方可使用。每周做一次標線；(2)樣品溶液的制備:稱取0.6 g香精香料樣品于50 mL具塞三角瓶中，加入10mL甲醇，用密封膠密封振蕩萃取20 min ;靜置后，移取2.0 mL上層清液用0.45 y m有機濾膜過濾，得到樣品溶液，得到樣品溶液，于4°C保存待分析；(3)色譜分析:色譜分析條件為采用菲羅門C18液相色譜柱，所述的色譜柱的規(guī)格為3.9 X 150mm, 5 Um0色譜柱溫度為30 °C，進樣量為15 y L，流速為0.4 ml/min ;檢測波長:297.7 nm，流動相:A為水，B為甲醇，采用梯度洗脫程序，即初始時，A:75%，B:25%;15 min, A:20%, B:80% ；20 min, A:0%, B:100% ；26 min, A:0%, B:100% ；30 min, A:75^3:25 ^洗脫時間總共30 min。標準溶液的色譜分析結(jié)果如圖3所示；樣品溶液的色譜分析結(jié)果如圖4所示； (4)煙用香精香料中芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線(如圖2所示)；與標準曲線相對應的回歸方程、相關(guān)系數(shù)等數(shù)據(jù)如表I所示。表I芝麻酚的標準曲線和檢測限
權(quán)利要求
1.一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)標準溶液的配制；稱取芝麻酚標準品，用甲醇配制成具有濃度梯度的芝麻酚標準工作溶液； (2)樣品溶液的制備:使用甲醇卒取樣品，然后過濾后制備樣品溶液； (3)液相色譜分析:利用液相色譜儀分別對標準溶液和樣品溶液進行檢測分析； (4)煙用香精香料中芝麻酚含量的計算。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:所述標準溶液的配制是稱取0.1芝麻酚，精確至0.0001 g，用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中并定容，定為標準儲備液；分別移取0.01 mL,0.1 mL,0.5 mL, 1.0 mL，2.5 mL,5.0 mL的標準儲備液到IOmL容量瓶中，用甲醇定容，配制成芝麻酚的濃度為0.1 u g/mL, I u g/mL,5 u g/mL,10 u g/mL,25 u g/mL,50 u g/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:所述樣品溶液的制備方法具體包括稱取0.4—0.8 g香精香料樣品于50 mL具塞二角瓶中，加入10—20 mL甲醇，用密封膠密封振蕩萃取20—40 min ;靜置后，移取2.0—5.0 mL上層清液用0.45 Pm有機濾膜過濾，得到樣品溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:所述的色譜分析條件為色譜柱采用菲羅門C18液相色譜柱，色譜柱溫度為30 °C，進樣量為15 yL，流速為0.4 ml/min ;檢測波長:297.7 nm，流動相:A為水，B為甲醇，采用梯度洗脫程序，即初始時，A:75%, B:25% ；15 min, A:20%, B:80% ；20 min, A:0%, B:100% ；26min, A:0%, B:100% ；30 min, A:75%, B:25%0 洗脫時間總共 30 min。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:所述的色譜分析條件為色譜柱采用菲羅門C18液相色譜柱，色譜柱溫度為30 °C，進樣量為15UL，流速為0.4 ml/min ;檢測波長:297.7 nm，流動相:A為水，B為甲醇，采用梯度洗脫程序，即初始時，A:75%，B:25% ;15 min, A:20%,B:80% ；20 min,A:0%,B:100% ；26 min,A:0%, B:100% ；30 min, A:75%, B:25%0 洗脫時間總共 30 min。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:所述的色譜柱的規(guī)格為3.9 X 150mm, 5um粒徑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。
11.根據(jù)權(quán)利要求6所述的煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，其特征在于:芝麻酚含量的計算:首先以標準溶液所檢測出的目標物的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準曲線；然后將樣品溶液檢出的目標物的色譜峰面積，代入標準曲線，即得到樣品中的芝麻酚濃度，由 此即可計算出煙用香精香料中芝麻酚的含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，包括萃取試劑和樣品溶液的制備，液相色譜分析及測定結(jié)果的計算等步驟。經(jīng)優(yōu)化之后的檢測方法具有檢測時間短、操作簡便、靈敏度高、回收率高及重復性好等優(yōu)點，本發(fā)明方法的色譜條件使芝麻酚的色譜峰與雜質(zhì)色譜峰分離較好，并且具有較好的線性范圍，檢測限為0.11 μg/g，回收率在96.4％~105.3％之間，相對標準偏差RSD<3%(n=5)。
文檔編號G01N30/88GK103149311SQ201310035519
公開日2013年6月12日 申請日期2013年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月30日
發(fā)明者吳清輝, 黃朝章, 謝衛(wèi), 張建平, 鄧其馨, 蘇明亮, 張穎璞 申請人:福建中煙工業(yè)有限責任公司