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一種過濾檢測技術裝置的制作方法

文檔序號:6003587閱讀:161來源:國知局
專利名稱:一種過濾檢測技術裝置的制作方法
技術領域
本發(fā)明涉及一種檢測技術裝置。
背景技術
免疫學檢測技術是應用免疫學原理設計的測定抗原、抗體、免疫細胞及化學成分等的實驗手段,廣泛用于來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。常用的有免疫濁度技術、固相酶免疫測定技術、化學發(fā)光檢測技術、免疫熒光標記技術、流式細胞術、膠體金技術等。免疫濁度技術,也稱免疫濁度法是可溶性抗原、抗體在液相中特異結合,產生一定大小的復合物,形成光的折射或吸收,測定這種折射或吸收后的透射光或散射光作為計算單位,用于定量檢測,但檢測靈敏度低,不適合于微量檢測。固相酶免疫測定技術基于抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學活性,抗原或抗體的酶結合物既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應,具有靈敏度高、線性響應范圍寬和易于實現(xiàn)自動化等顯著優(yōu)點。但檢測反應時間長限制了其使用。免疫化學發(fā)光檢測技術是一種高靈敏的微量及痕量分析技術,具有操作方便、靈敏度高、線性響應范圍寬和易于實現(xiàn)自動化等顯著優(yōu)點,廣泛地應用于環(huán)境、臨床、藥物分析、食品和工業(yè)分析中,也是基于抗原或抗體的固相分離手段及抗原或抗體的發(fā)光試劑標記技術。但檢測反應時間長及對檢測設備的要求高也影響其使用。免疫熒光標記技術、流式細胞術、膠體金技術也是常用的檢測技術被廣泛使用,但均有其相應的不足。高靈敏度、快速、小型化、全定量、自動化是目前臨床免疫檢測技術產品的發(fā)展趨勢,但現(xiàn)有的都無法同時實現(xiàn)上述功能。因此,開發(fā)一種能夠實現(xiàn)既具有高靈敏度、全定量、自動化特點,同時又具有檢測快速、設備可做到小型便攜特點的新的檢測技術,不僅使用方便、減少浪費,同時也可顯著提高工作效率,在檢測和分析、分離的諸多領域具有重要的實用意義。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種具有靈敏度高、全定量、檢測速度快的免疫檢測技術裝置,特別是以過濾器作為反應載體的免疫檢測技術裝置。為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用了如下技術方案?!N免疫過濾檢測技術裝置,所述的檢測技術裝置是以過濾器作為檢測反應的載體,由過濾器、待檢樣本、檢測相和檢測器組成,其中過濾器內的過濾芯是由能夠與待檢物形成特異性結合的固相材料組成。具有如下特征:1)用待檢物特異性結合物如抗原或抗體,偶聯(lián)標記捕獲載體過濾芯,制成標記過濾芯,該步反應所述的待檢物特異性結合物如抗原或抗體也稱為能與待檢物特異性結合的第一物質;2)標記過濾芯裝載于過濾器內使用;3)檢測相為能夠與待檢物特異性結合并能夠直接或間接產生顏色或光量變化的檢測物質的溶液,是由直接或間接產生顏色或光量變化的指示劑標記待檢物特異性結合物如抗原或抗體而制成,該步反應所述的待檢物特異性結合物也稱為能與待檢物特異性結合的第二物質,與第一物質具有相互配對待檢物特異性反應的特性;4)用檢測器檢測過濾芯上特異性結合的被捕獲的指示劑的顏色或光量變化進而計算待檢物的含量和/或用檢測器檢測未被捕獲而流出的指示劑的顏色或光量變化進而計算待檢物的含量。待檢物特異性結合物常用的有酶和抑制劑、抗原和抗體、配體和受體等。常用的過濾芯載體有凝膠顆粒、乳膠顆粒和磁微粒等,凝膠顆粒有葡聚糖凝膠系列的凝膠過濾填料和瓊脂糖凝膠系列的凝膠過濾填料。所述的過濾器內裝有過濾芯的過濾結構為長大于寬的形狀,其中長寬比值為2-100,優(yōu)選2-50,更優(yōu)選2-30,可以是圓柱狀、圓錐狀、方形、長方形及其組合形狀等。所述的過濾器內裝有過濾芯的過濾結構為寬大于長的形狀,其中寬長比值為
1.1-10,優(yōu)選1.1-5,更優(yōu)選1.1-3,可以是圓柱狀、圓錐狀、方形、長方形及其組合形狀等。所述的過濾器內裝有的過濾芯為抗體或抗原偶聯(lián)的固相顆粒狀或篩孔狀物質,其體積為2立方毫米至I立方厘米,優(yōu)選3立方毫米至0.3立方厘米,更優(yōu)選5立方毫米至
0.1立方厘米或者表述為2微升至I毫升,優(yōu)選3微升至0.3毫升,更優(yōu)選5微升至0.1毫升。所述的抗原或抗體為能夠與待檢物發(fā)生特異性結合反應的抗原或抗體。所述的固相顆粒狀或篩孔狀物質為多種能夠與抗原或抗體偶聯(lián)結合并且對其抗原或抗體的免疫學結合特性不產生明顯改變的固態(tài)物質,如常用的凝膠顆粒、乳膠顆粒、磁微粒等,凝膠顆粒有葡聚糖凝膠系列的凝膠過濾填料和瓊脂糖凝膠系列的凝膠過濾填料,常用的有溴化氰活化瓊脂糖凝膠介質、NHS活化瓊脂糖凝膠介質等。所述的待檢樣本包括來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。來源于人體的樣本檢測為臨床檢測的主要內容,用于各種疾病的診斷、輔助診斷、預測、病情監(jiān)測等。來源于動物體的樣本檢測也為臨床檢測的主要內容,用 于動物相關各種疾病的診斷、輔助診斷、預測、病情監(jiān)測以及食品安全檢測等。所述的檢測相為能夠與待檢物特異性結合并能夠直接或間接產生顏色或光量變化的檢測物質的溶液。所述的檢測物質為待檢物特異性的抗原或抗體與能夠直接或間接產生顏色或光量變化的指示劑形成的結合物。檢測相是含有檢測物質的溶液。檢測物質是能夠與待檢物直接或間接形成特異性結合并能夠對待檢物進行量化分析的物質。一般檢測物質為抗原或抗體與酶類物質、可直接或間接發(fā)出光的物質、可產生熒光的物質、自身帶有顏色的物質的結合物。酶類物質常用的有辣根過氧化酶(HRP)、堿性磷酸酶(ALP)、葡萄糖氧化酶,β-半乳糖苷酶、溶菌酶和蘋果酸脫氫酶等。可直接或間接發(fā)光的物質常用的有魯米諾及其衍生物、光澤精、洛粉堿、過氧化草酸酯類、吖啶酯類等??僧a生熒光的物質有異硫氰酸熒光素(FITC)或羅達明(RB200)等、自身帶有顏色的物質如膠體金類等。所述的檢測器為能夠定量檢測并記錄由所述的檢測物產生的顏色或光量變化的機械結構。常用的有酶聯(lián)免疫檢測器、化學發(fā)光檢測器、熒光檢測器、分光光度計等。所述的檢測技術包括以下步驟:I)用能夠與待檢物形成特異性結合的抗原或抗體標記過濾芯;2)用標記過濾芯制備過濾器的過濾結構;[0017]3)待檢樣本經過濾器過濾,則待檢物被標記過濾芯特異性捕獲;4)用清洗液清洗去除未被捕獲而殘留在過濾芯中的樣品殘留物;5)檢測相經過濾器過濾,則檢測物質與被捕獲的待檢物特異性結合,形成過濾芯-待檢物-檢測物質復合物;6)用清洗液清洗去除未被捕獲而殘留在過濾芯中的檢測相殘留物;7)用檢測器采用下列方法之一進行檢測:(I)直接采用過濾芯檢測所述的指示劑的量,進而計算待檢物的含量;(2)用洗脫液洗脫并收集含有檢測物質的洗脫液,用檢測器檢測所述的指示劑的量,進而計算待檢物的含量;(3)直接檢測未被結合而流出的指示劑的量,進而計算待檢物的含量。常用的檢測步驟可以是采用含有過濾芯的過濾器,用含有待檢物的樣品過濾,清洗,然后用待檢物特異性抗原或抗體的檢測物質直接過濾檢測的兩步法,也可以是采用含有過濾芯的過濾器,用含有待檢物的樣品過濾,清洗,再用含有非標記的待檢物特異性抗原或抗體過濾,與待檢物結合,然后用待檢物特異性抗原或抗體的檢測物質過濾檢測的三步法或更多。所述的檢測技術在多種檢測技術產品開發(fā)中的應用,包括來源于人體的樣本檢測為臨床檢測的主要內容,用于各種疾病的診斷、輔助診斷、預測、病情監(jiān)測等。來源于動物體的樣本檢測也為臨床檢測的主要內容,用于動物相關的各種疾病的診斷、輔助診斷、預測、病情監(jiān)測以及食品安全檢測等以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。有益效果]I)本發(fā)明創(chuàng)造性地設計了一種以過濾器為反應載體的檢測技術裝置,提高了檢測個性化的可控程度,提高了檢測效率。2)本發(fā)明過濾的反應時間較現(xiàn)行的檢測結合反應時間明顯縮短,提高了檢測速度。3)本發(fā)明在室溫下就可以完成全部反應,免除了現(xiàn)行檢測設備中需要設置的溫控反應結構,簡化了儀器設計,可實現(xiàn)小型化、便攜的目的。因此,本發(fā)明技術對改善現(xiàn)有免疫檢測技術具有重要的意義和良好的應用前景。
圖1是本申請為長柱狀過濾器的過濾檢測技術裝置的基本結構示意圖。圖2是本申請為扁柱狀過濾器的過濾檢測技術裝置的基本結構示意圖
具體實施方式
以下結合附圖和實施例對本發(fā)明進行詳細的描述。如圖1、圖2所示,本發(fā)明包括待檢樣本2、檢測相3和檢測器4、長柱狀過濾器I或扁柱狀過濾器10。長柱狀過濾器I或扁柱狀過濾器10為檢測反應的反應器,檢測反應的主要反應過程在過濾器I或過濾器10上進行,由入口 5、過濾層6和出口 7組成,其中過濾層內的過濾芯是由能夠與待檢物形成特異性結合的用抗原或抗體偶聯(lián)的標記固相材料組成。固相材料可以是堆積的固相顆粒狀物質,形成了顆粒與顆粒之間的腔隙性過濾孔徑,也可以是篩孔狀的固相物質。待檢樣本2為一裝有樣本的容器結構,裝載包括來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。通過管道8與過濾器相連接。檢測相3也為一裝有檢測溶液的容器結構,裝在有能夠與待檢物特異性結合并能夠直接或間接產生顏色或光量變化的檢測物質的溶液。通過管道9與過濾器相連接。檢測器4為一顏色或光量檢測分析裝置。實施例1、本發(fā)明過濾器的制備:實驗材料:市售微型過濾器、NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒、抗人纖維蛋白原多克隆抗體、碳酸氫鈉、鹽酸、乙醇胺。實驗方法:取市售微型過濾器,取出濾芯。取5mg抗人纖維蛋白原多克隆抗體加
0.2M碳酸氫鈉溶液,pH8.3,2ml溶解。取Iml NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒,用ImM鹽酸20ml,分三次抽濾清洗。將抗人纖維蛋白原多克隆抗體溶液與處理后的NHS活化瓊脂糖凝膠顆?;旌希?°C,震蕩反應4小時。清洗反應后的NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒,然后加入IOmM乙醇胺,0.2M碳酸鈉溶液,pH8.0,室溫震蕩4小時封閉未偶聯(lián)的基團,洗干凈,用制備后的NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒制作過濾芯,裝入市售微型過濾器內,封閉,備用。實施例2、本發(fā)明與現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術的檢測性能的比較:實驗材料:抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器、辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體、磁微粒、魯米諾、對碘苯酚、過氧化脲、化學發(fā)光檢測儀、人纖維蛋白原溶液。實驗方法:取已知濃度的人纖維蛋白原溶液,用PBS溶液稀釋配置lug/ml人纖維蛋白原溶液。實驗將采用本發(fā)明與現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術觀測不同結合反應時間對發(fā)光量的影響。觀察結合反應時間點1、2、4、10、20、30、45、60分鐘?,F(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術組,每管加入抗人纖維蛋白原多克隆抗體標記的磁微粒lOOul,再分別加入人纖維蛋白原溶液各lOOul,結合反應在37°C震搖溫育,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入PBS 200ul清洗三次,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體200ul,結合反應在37°C震搖以對應的反應時間進行溫育,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入PBS 200ul清洗三次,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,轉移磁微粒至發(fā)光杯,置化學發(fā)光檢測儀,加入IOOul魯米諾、對碘苯酚和過氧化脲等配置的發(fā)光底物工作液,反應進行2分鐘時,記錄發(fā)光量6秒鐘。本發(fā)明組,取實施例1制作的抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器,用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至Iml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,取IOOul至發(fā)光杯,置化學發(fā)光檢測儀,加入IOOul魯米諾、對碘苯酚和過氧化脲等配置的發(fā)光底物工作液,反應進行2分鐘時,記錄發(fā)光量6秒鐘,乘以10作為與上述現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術組可比較的總計數(shù)結果。實驗結果:現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術在1、2、4、10、20、30、45、60分鐘時的發(fā)光量(HiV)分別為 3222、5672、7968、9810、14281、20339、19827、20513,結合反應 30 分鐘基本達到平衡,結合反應為30分鐘時的全過程操作時間為89分鐘。本發(fā)明的檢測結果為21320,全過程操作時間僅為13分鐘。實施例3、本發(fā)明與現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術檢測結果的比較:實驗材料:抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器、辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體、磁微粒、魯米諾、對碘苯酚、過氧化脲、化學發(fā)光檢測儀、人纖維蛋白原溶液、健康人血漿。實驗方法:取已知濃度的人纖維蛋白原標準溶液,用PBS溶液稀釋配置10、30、70、100、300、700ng/ml人纖維蛋白原溶液。另取健康人血漿,用PBS進行10000倍稀釋。實驗采用本發(fā)明與現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術檢測人纖維蛋白原溶液并繪制標準曲線,然后測定健康人纖維蛋白原,并用標準曲線計算纖維蛋白原濃度。取42個試管,分為本發(fā)明組和現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術組。每個樣品做3個平行管?,F(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術組,每管加入抗人纖維蛋白原多克隆抗體標記的磁微粒lOOul,再分別加入人纖維蛋白原溶液或健康人血漿各lOOul,結合反應在37°C震搖溫育30分鐘,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入PBS 200ul清洗三次,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體200ul,結合反應在37°C震搖溫育30分鐘,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,加入PBS 200ul清洗三次,用磁塊吸附分離磁微粒,棄上清,轉移磁微粒至發(fā)光杯,置化學發(fā)光檢測儀,加入IOOul魯米諾、對碘苯酚和過氧化脲等配置的發(fā)光底物工作液,反應進行2分鐘時,記錄發(fā)光量6秒鐘。繪制標準曲線,計算血漿纖維蛋白原含量。本發(fā)明組,取實施例1制作的抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器,用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液或健康人血漿各至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,取IOOul至發(fā)光杯,置化學發(fā)光檢測儀,加入IOOul魯米諾、對碘苯酚和過氧化脲等配置的發(fā)光底物工作液,反應進行2分鐘時,記錄發(fā)光量6秒鐘。繪制標準曲線,計算血漿纖維蛋白原含量。實驗結果:現(xiàn)行化學發(fā)光檢測技術測定結果2.51g/L,本發(fā)明測定結果2.58g/L,兩種實驗方法所得結果基本一致,但本發(fā)明的完成實驗時間明顯短于現(xiàn)行技術。實施例4、本發(fā)明過濾芯體積對檢測結果的影響:實驗材料:市售微型過濾器、NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒、抗人纖維蛋白原多克隆抗體、碳酸氫鈉、鹽酸、乙醇胺、人纖維蛋白原。實驗方法:采用實施例1方法制備體積為1、2、3、5、10、50、100、300、500、700、1000
立方毫米的抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器。用PBS溶液稀釋配置lug/ml人纖維蛋白原溶液。用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,取IOOul至發(fā)光杯,置化學發(fā)光檢測儀,加入IOOul魯米諾、對碘苯酚和過氧化脲等配置的發(fā)光底物工作液,反應進行2分鐘時,記錄發(fā)光量6秒鐘。實驗結果:所記錄的體積為1、2、3、5、10、50、100、300、500、700、1000立方毫米過濾器的發(fā)光量(mV)分別為 843、1597、1871、1925、1967、1983、2042、1956、1995、2035、2068,
體積為3立方毫米時基本達到平衡。實施例5、本發(fā)明與現(xiàn)行酶聯(lián)免疫檢測技術檢測結果的比較:實驗材料:抗人纖維蛋白原多克隆抗體、抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器、辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體、鄰苯二胺、酶聯(lián)免疫檢測儀、人纖維蛋白原溶液、健康人血漿。實驗方法:取已知濃度的人纖維蛋白原標準溶液,用PBS溶液稀釋配置30、70、100、300、700、1000 ng/ml人纖維蛋白原溶液。另取健康人血漿,用PBS進行10000倍稀釋。實驗將采用本發(fā)明與現(xiàn)行酶聯(lián)免疫檢測技術檢測人纖維蛋白原溶液并繪制標準曲線,然后測定健康人纖維蛋白原,并用標準曲線計算纖維蛋白原濃度。取42個試管,分為本發(fā)明組和現(xiàn)行酶聯(lián)免疫檢測技術組。每個樣品做3個平行管?,F(xiàn)行酶聯(lián)免疫檢測技術組,采用96孔酶聯(lián)板,每管加入抗人纖維蛋白原多克隆抗體IOOul,4°C過夜包被,清洗三次,再分別加入人纖維蛋白原溶液或健康人血漿各lOOul,結合反應在37°C溫育120分鐘,清洗三次,加入辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體lOOul,結合反應在37°C溫育60分鐘,清洗三次,棄上清,加入IOOul顯色液(0.1M檸檬酸2.43ml, 0.2M磷酸氫二鈉2.57ml,鄰苯二胺5mg,過氧化氫5ul ),避光5分鐘,加入2M硫酸終止反應。置酶聯(lián)免疫檢測儀上讀取吸光值,繪制標準曲線,計算血漿纖維蛋白原含量。本發(fā)明組,取實施例1制作的抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器,用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液或健康人血漿各至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,各取IOOul至96孔酶聯(lián)板,加入IOOul顯色液,避光5分鐘,加入2M硫酸終止反應。置酶聯(lián)免疫檢測儀上讀取吸光值,繪制標準曲線,計算血漿纖維蛋白原含量。實驗結果:現(xiàn)行技術測定結果2.56g/L,本發(fā)明技術測定結果2.50g/L,兩種實驗方法所得結果基本一致,但本發(fā)明的完成實驗時間明顯短于現(xiàn)行技術。實施例6、本發(fā)明技術以膠體金為指示劑的檢測技術檢測結果的比較:實驗材料:抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器、膠體金標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體、分光光度計、人纖維蛋白原溶液。實驗方法:取已知濃度的人纖維蛋白原標準溶液,用PBS溶液稀釋配置100、300、700、1000、3000ng/ml人纖維蛋白原溶液。另取健康人血漿,用PBS進行5000倍稀釋。實驗將采用本發(fā)明技術檢測100ng、300ng、700ng、1000ng、3000ng人纖維蛋白原溶液并繪制標準曲線,然后測定健康人纖維蛋白原,并用標準曲線計算纖維蛋白原濃度。取18個試管,每個樣品做3個平行管。取實施例1制作的抗人纖維蛋白原多克隆抗體過濾器,用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液或健康人血漿各至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul膠體金標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至Iml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,混勻,取800ul置分光光度計讀取520nm波長的吸光值,繪制標準曲線,計算血漿纖維蛋白原含量。[0070]實驗結果:本發(fā)明技術測定結果2.81g/L,與其它方法檢測的結果基本一致。實施例7、本發(fā)明過濾器形狀對檢測結果的影響:實驗材料:NHS活化瓊脂糖凝膠顆粒、抗人纖維蛋白原多克隆抗體、碳酸氫鈉、鹽酸、乙醇胺、人纖維蛋白原。實驗方法:采用實施例1方法制備體積為100立方毫米的抗人纖維蛋白原多克隆抗體微型柱狀過濾器和微型扁平過濾器。用PBS溶液稀釋配置lug/ml人纖維蛋白原溶液。用堿性PBS稀釋IOOul人纖維蛋白原溶液至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用堿性PBS稀釋IOOul辣根過氧化物酶標記抗人纖維蛋白原單克隆抗體至1ml,過濾,用堿性PBS緩沖液Iml過濾洗三次,再用pH4.5 Tris-鹽酸緩沖液Iml過濾,收集濾出液,各取IOOul至96孔酶聯(lián)板,加入IOOul酶聯(lián)反應顯色液,避光3分鐘,加入2M硫酸終止反應。置酶聯(lián)免疫檢測儀上讀取吸光值。實驗結果:柱狀過濾器測定結果為1.78,扁平過濾器測定結果為1.62,兩種過濾
器所得結果基本一致。
權利要求1.一種過濾檢測技術裝置,其特征在于:所述的檢測技術裝置是以過濾器作為檢測反應的載體,由過濾器、待檢樣本、檢測相和檢測器組成,其中過濾器是由入口、過濾層和出口組成,過濾層內的過濾芯是由能夠與待檢物形成特異性結合的固相材料組成。
2.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的過濾器內裝有過濾芯的過濾結構為長大于寬的形狀,其中長寬比值為2-100。
3.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的過濾器內裝有過濾芯的過濾結構為寬大于長的形狀,其中寬長比值為1.1-10。
4.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的過濾器內裝有的過濾芯為用抗體或抗原偶聯(lián)的固相顆粒狀或篩孔狀物質,其體積為2立方毫米至I立方厘米。
5.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的待檢樣本包括來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。
6.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的檢測相為能夠與待檢物特異性結合并能夠直接或間接產生顏色或光量變化的檢測物質的溶液。
7.根據權利要求6所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的檢測物質為待檢物特異性的抗原或抗體與能夠直接或間接產生顏色或光量變化的指示劑形成的結合物。
8.根據權利要求1所述的檢測技術裝置,其特征在于:所述的檢測器為能夠定量檢測并記錄由所述的檢測物產生的顏色或光量變化的機械結構。
專利摘要本實用新型公開了一種過濾檢測技術裝置及其用途,所述的過濾檢測技術裝置是由過濾器、待檢樣本、檢測相和檢測器組成,其中過濾器是由入口、過濾層和出口組成,過濾層內的過濾芯是由能夠與待檢物形成特異性結合的固相材料組成,可用于多種分析檢測技術產品的開發(fā),具有良好的適用價值和市場前景。
文檔編號G01N33/53GK203083994SQ20122062686
公開日2013年7月24日 申請日期2012年11月25日 優(yōu)先權日2012年11月25日
發(fā)明者劉鳳鳴 申請人:北京康華源科技發(fā)展有限公司
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