專利名稱:一種中藥復(fù)方制劑黃莪膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及中藥質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域,具體涉及含有黃芪和莪術(shù)藥材的復(fù)方藥物制劑中的黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量檢測(cè)方法。( 二)
背景技術(shù):
黃莪膠囊是浙江康恩貝制藥股份有限公司、浙江現(xiàn)代中藥與天然藥物研究院有限公司聯(lián)合中國中醫(yī)研究院廣安門醫(yī)院研制的現(xiàn)代中藥復(fù)方制劑,其組方由黃芪、桃仁、莪術(shù)、大黃、土茯苓、薏苡仁、益母草、夏枯草、肉桂、北豆根、桔梗、川牛膝共12味中藥組成,具有益氣活血、清熱利濕功能,主治前列腺增生氣虛血瘀、濕熱阻滯證。黃莪膠囊已于2011年獲國家新藥證書,并經(jīng)SFDA批準(zhǔn)上市。黃莪膠囊是依據(jù)中醫(yī)理論和臨床實(shí)踐配制而成的治療前列腺增生藥物,其組方多達(dá)十二味中藥材,制備工藝復(fù)雜。中國專利ZL200510060631. 3公開了黃莪膠囊治療前列腺增生癥的相關(guān)研究結(jié)果及其制備方法,其制備方法是取肉桂、大黃、薏苡仁、桃仁碎成細(xì)粉;莪術(shù)飲片提揮發(fā)油;黃芪水提醇沉;桃仁、薏苡仁、土茯苓、北豆根、夏枯草、益母草、桔梗、 川牛膝的飲片、莪術(shù)藥渣,水提濾液與黃芪乙醇液合并濃縮制干膏,粉碎,過篩,加入莪術(shù)揮發(fā)油及肉桂等藥物的細(xì)粉,配以藥用輔料制成膠囊。黃芪是黃莪膠囊組方的君藥,益氣、推動(dòng)血行,可消散血瘀,是黃莪膠囊的主要藥效成分之一,文獻(xiàn)“HPLC-ELSD測(cè)定黃莪通閉膠囊中黃芪甲苷的含量”和藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)都采用HPLC-ELSD法測(cè)定了黃莪膠囊中黃芪甲苷的含量,雖然后者還采用薄層色譜法鑒別莪術(shù)、大黃、熊果酸和桂皮醛,但這些已公開資料都僅對(duì)黃芪甲苷進(jìn)行定量分析,缺乏對(duì)其他組分的測(cè)定分析,有可能導(dǎo)致其它組分含量的不穩(wěn)定甚至缺乏,這將使黃莪膠囊的質(zhì)量難以得到全面控制。尤其是,中藥材莪術(shù)在黃莪膠囊組方中為臣藥,具有行氣活血功效,但其主要的有效成分是一種易揮發(fā)性油,其在制備和儲(chǔ)藏過程中都容易因?yàn)閾]發(fā)而含量損失;而且,莪術(shù)油的生物利用度較低。因此,如何有效減少莪術(shù)油在生產(chǎn)、儲(chǔ)存過程中的揮發(fā)、提高其生物利用度,達(dá)到安全有效、質(zhì)量可控的目標(biāo),是黃莪膠囊在技術(shù)研究中要重點(diǎn)解決的問題。研究人員在黃莪膠囊制備過程中采用¢-環(huán)糊精包結(jié)莪術(shù)油的辦法解決了這個(gè)難題。而有關(guān)研究也表明,莪術(shù)油包結(jié)率的高低影響著黃莪膠囊治療前列腺增生癥的療效。但是莪術(shù)油的成分較為復(fù)雜且含量較低,國內(nèi)外常用櫳牛兒酮、莪術(shù)醇、莪術(shù)二酮等為莪術(shù)油質(zhì)量的檢測(cè)指標(biāo);而櫳牛兒酮的含量最為豐富且最穩(wěn)定,因此,以櫳牛兒酮為莪術(shù)油的質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo)是一種較受推薦的方法。所以,為了保證黃莪膠囊組方中各味藥材的協(xié)同作用,為了保證黃莪膠囊質(zhì)量的穩(wěn)定性和療效的有效性,在黃莪膠囊的質(zhì)量控制方法中,不僅要檢測(cè)黃芪甲苷的含量,而且有必要同時(shí)測(cè)定其櫳牛兒酮的含量。黃芪甲苷通常作為評(píng)價(jià)黃芪藥材質(zhì)量優(yōu)劣的標(biāo)準(zhǔn),目前含有黃芪甲苷的中藥有黃芪藥材和含有黃芪的膠囊、顆粒、散劑等中藥復(fù)方制劑。而黃芪甲苷為環(huán)阿爾廷型三萜皂苷類化合物,易溶于甲醇、乙醇、丙酮,難溶于氯仿、乙酸乙酯等弱酸性有機(jī)溶劑。其早期的含量測(cè)定主要使用薄層掃描法,如張怡等(中國醫(yī)藥雜志2004. 1(5) :185-186)采用雙波長-薄層色譜法測(cè)定康胃泰膠囊中黃芪甲苷的含量,樣品平均回收率為98. 27% ;但該方法重復(fù)性較差。隨著應(yīng)用研究的不斷深入,逐漸發(fā)展出采用HPLC法分離測(cè)定黃芪甲苷的含量,該方法也先后經(jīng)歷HPLC-UV法和HPLC-ELSD法的演變,ELSD法具有靈敏度高、適用性廣的優(yōu)點(diǎn),尤其適用于在近紫外區(qū)無紫外吸收或紫外吸收較弱的物質(zhì),如黃芪甲苷等。李毅等(時(shí)珍國醫(yī)國藥2011. 22(3) :768-769)先采用石油醚溶解活血散結(jié)合劑(組方為當(dāng)歸、黃芪、莪術(shù)、川芎、昆布等藥材),水層多步正丁醇提取,然后用氨試液洗滌,再將正丁醇溶液于水浴中蒸干,最后加甲醇溶解得供試品溶液,用shim-pack C18-ODS(150mmX4. 6mm,5um)色譜柱,以乙腈-水(32 68)流動(dòng)相測(cè)定活血散結(jié)合劑中黃芪甲苷的含量,結(jié)果表明HPLC-ELSD法操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好,靈敏度高,專屬性強(qiáng)。《中國藥典》2010版以櫳牛兒酮為指標(biāo),采用薄層色譜法鑒別莪術(shù)藥材;且莪術(shù)藥材的含量測(cè)定規(guī)定莪術(shù)揮發(fā)油的含量不得少于I. 5% (mg/g)。櫳牛兒酮作為莪術(shù)藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)已得到普遍認(rèn)可,其為倍半萜類化合物,其能溶于甲醇、乙醇、石油醚等有機(jī)溶劑中,不溶于水。莪術(shù)等含有櫳牛兒酮的藥材和注射劑、膠囊等復(fù)方制劑中櫳牛兒酮含量測(cè)定早期曾經(jīng)采用比色法,但精密度、重復(fù)性和適用性存在局限,后來多采用HPLC法和GC法,HPLC法是櫳牛兒酮含量測(cè)定最常使用的檢測(cè)方法。梁小潔等(貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào)自然科學(xué)版2011. 29(1) :92-94)直接用甲醇溶解保婦康泡沫劑制得供試品溶液,用SpherisorbC18 (4. 6mmX250mm,5um)色譜柱,以乙腈-甲醇-0. 4%磷酸溶液(50 25 25)為流動(dòng)相測(cè)定櫳牛兒酮的含量。結(jié)果表明,HPLC法測(cè)定櫳牛兒酮含量操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好。 已有上百種同時(shí)含有黃芪和莪術(shù)的中藥復(fù)方制劑被批準(zhǔn)上市,但目前對(duì)這類復(fù)方制劑的質(zhì)量控制大部分仍采用以黃芪甲苷為單一的質(zhì)量控制指標(biāo),也尚未見一次性同時(shí)測(cè)定黃芪甲苷和櫳牛兒酮含量的報(bào)道。這是由于在提取黃芪甲苷時(shí),多采用水溶解后多步醇提堿洗,這是公認(rèn)的提取黃芪甲苷的方法,但是櫳牛兒酮不溶于水,采用該傳統(tǒng)提取方法無法同時(shí)提取黃芪甲苷和櫳牛兒酮,高效液相色譜難以測(cè)到黃莪膠囊中的櫳牛兒酮。因此,同時(shí)提取黃芪甲苷和櫳牛兒酮是采用高效液相色譜法檢測(cè)黃莪膠囊質(zhì)量的前提,也是目前研究的難點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種同時(shí)測(cè)定含有黃芪和莪術(shù)藥材的復(fù)方藥物制劑中的黃芪甲苷和櫳牛兒酮含量的高效液相色譜測(cè)定方法。該方法可同時(shí)測(cè)定此類復(fù)方藥物制劑中黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量,具有良好的精密度、重現(xiàn)性和可靠性,可用于包括已上市的黃莪膠囊在內(nèi)的含有黃芪和莪術(shù)的復(fù)方藥物制劑的質(zhì)量控制。本發(fā)明運(yùn)用循證醫(yī)學(xué)研究方法對(duì)黃莪膠囊治療前列腺增生癥的中醫(yī)理論進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),黃芪益氣、推動(dòng)血行,可消散血瘀,莪術(shù)行氣活血,兩者是黃莪膠囊的主要藥效成分;有關(guān)臨床研究證實(shí),缺乏黃芪和莪術(shù)的黃莪膠囊在治療前列腺增生癥上效果微弱,黃芪和莪術(shù)是黃莪膠囊組方中相當(dāng)重要的組分。國內(nèi)外相關(guān)研究分別將黃芪甲苷、櫳牛兒酮作為黃芪和莪術(shù)的質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo),但是黃芪甲苷傳統(tǒng)的水提醇沉法無法同時(shí)提取櫳牛兒酮,因此目前采用高效液相色譜法一次性同時(shí)檢測(cè)黃芪甲苷和櫳牛兒酮含量仍有一定的困難。本發(fā)明針對(duì)黃芪甲苷和櫳牛兒酮不同的化學(xué)性質(zhì),首先對(duì)黃莪膠囊進(jìn)行前處理,然后直接進(jìn)樣檢測(cè)黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量。為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括含有黃芪和莪術(shù)藥材的復(fù)方黃莪膠囊制劑的測(cè)定方法,(I)供試品溶液的制備取黃莪膠囊制劑,傾出內(nèi)容物,混勻,精密稱定IOg置250ml容量瓶中,精密加甲醇IOOml,搖勻稱定重量;超聲處理(功率150W,頻率50Hz)30min,放置24h,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻;
靜置12h,轉(zhuǎn)速2000r/min離心5min,吸取上清液,過45iim濾紙,收集濾液;濾液直接過中性硅膠氧化鋁柱,用甲醇洗脫,洗脫液水浴蒸干,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得供試品溶液;對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷和櫳牛兒酮對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含黃芪甲苷0. 5mg、櫳牛兒酮0. IOmg的溶液,即得對(duì)照品溶液;(2)高效液相色譜條件采用 Waters Symmetry C18 (4. 6_X 250mm, 5 ii m)色譜柱;以乙腈(A)-水(B)為流動(dòng)相,梯度洗脫0-20min,30%A — 40%A ;20-30min, 40%A — 60%A ;30-50min,60%A — 70%A,流速為 I. Oml/min,柱溫 25 40°C ;AllerchELSD2000 型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器,檢測(cè)參數(shù)漂移管溫度lOrC,氮?dú)饬魉?. 7L/min ;檢測(cè)波長為200 215nm ;(3)檢測(cè)方法,按照《中國藥典》2010年版I部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定黃莪膠囊中黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量精密吸取供試品溶液lOiil,注入高效液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算,即得。 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于(I)采用甲醇溶解黃莪膠囊粉末代替?zhèn)鹘y(tǒng)的水溶解,解決了無法采用黃芪甲苷傳統(tǒng)的提取方法同時(shí)提取黃芪甲苷和櫳牛兒酮的問題,使得采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定黃莪膠囊中黃芪甲苷和櫳牛兒酮這兩種主要成分的含量成為可能。(2)采用甲醇過濾后直接過中性硅膠氧化鋁柱代替多次醇提堿洗,不但有效去除了供試品溶液中的磷脂、色素等雜質(zhì),而且減少了提取中黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量損失,提高了含量測(cè)定的準(zhǔn)確度。(3)采用HPLC-ELSD法一次性同時(shí)測(cè)定了黃莪膠囊中黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量,并對(duì)其測(cè)定波長進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷和櫳牛兒酮在208nm處吸收良好。通過本發(fā)明黃莪膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法,可以一次性同時(shí)有效地測(cè)定黃莪復(fù)方制劑中黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量,提高了黃莪膠囊質(zhì)量測(cè)定的準(zhǔn)確性和產(chǎn)品的穩(wěn)定性,有利于提高工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制。
圖I為實(shí)施例I對(duì)照品溶液的HPLC-ELSD色譜圖;圖2為實(shí)施例I供試品溶液的HPLC-ELSD色譜圖;圖3為實(shí)施例I陰性溶液的HPLC-ELSD色譜圖;圖4為實(shí)施例6黃芪甲苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖;圖5為實(shí)施例6櫳牛兒酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說明如下。實(shí)施例II、儀器Agilent 1100高效液色譜儀;Allerch ELSD-2000蒸發(fā)光散射檢測(cè)器;中性氧化鋁柱4g/12ml ;KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器;MEITLER AE240電子天平。2、試藥
采用黃莪膠囊(浙江康恩貝制藥股份有限公司,批號(hào)091207);不含黃芪和莪術(shù)的黃莪膠囊(浙江康恩貝制藥股份有限公司,批號(hào)100824);黃芪甲苷(中國食品藥品檢定研究院,批號(hào)110781-200613,含量測(cè)定用);櫳牛兒酮(中國食品藥品檢定研究院,批號(hào)111665-200902,98. 8%,含量測(cè)定用);甲醇和乙腈(色譜純);其他試劑都為分析純。3、色譜條件Waters Symmetry C18 (4. 6mmX 250mm, 5 u m)色譜柱;以乙腈(A)-水(B)為流動(dòng)相,梯度洗脫(0-20min,30%A — 40%A ;20-30min, 40%A — 60%A ;30-50min, 60%A — 70%A),流速為I. Oml/min,柱溫30°C ;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器參數(shù)漂移管溫度101°C,氮?dú)饬魉?. 7L/min ;檢測(cè)波長為208nm。4、試驗(yàn)方法4. I對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷和櫳牛兒酮對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含黃芪甲苷0. 5mg、櫳牛兒酮0. IOmg的溶液,即得對(duì)照品溶液。4. 2供試品溶液的制備取黃莪膠囊制劑,傾出內(nèi)容物,混勻,精密稱定IOg置250ml容量瓶中,精密加甲醇100ml,搖勻稱定重量;超聲處理(功率150W,頻率50Hz) 30min,放置24h,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻;再靜置12h,轉(zhuǎn)速2000r/min離心5min,吸取上清液過45 y m濾紙,收集濾液;濾液過中性硅膠氧化鋁柱,用甲醇洗脫;將洗脫液蒸干,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得供試品溶液。4. 3不含黃芪和莪術(shù)的黃莪膠囊的陰性溶液的制備取不含黃芪和莪術(shù)的黃莪膠囊,按4. 2供試品溶液的制備方法制備陰性溶液。4. 4含量測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性溶液各10 yl,注入液相色譜儀,測(cè)定,分析,色譜圖見圖1、2、3 (其中,A為黃芪甲苷,B為櫳牛兒酮)。5、結(jié)果表明陰性溶液對(duì)測(cè)定基本無干擾,供試品溶液中黃芪甲苷、櫳牛兒酮與雜質(zhì)峰分離良好,不干擾測(cè)定。實(shí)施例2該實(shí)施例中I儀器、2試藥、4試驗(yàn)方法都與實(shí)施例I相同,僅3色譜條件中的流動(dòng)相不同。3色譜條件Waters Symmetry C18 (4. 6mmX 250mm, 5 u m)色譜柱;以乙臆-水(32 : 68)為流動(dòng)相,流速為I. Oml/min,柱溫30°C ;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器參數(shù)漂移管溫度101°C,氮?dú)饬魉?. 7L/min ;檢測(cè)波長為208nm。5、結(jié)果表明供試品溶液中櫳牛兒酮保留時(shí)間較長,且拖尾嚴(yán)重,在一定程度上影響測(cè)定。實(shí)施例3該實(shí)施例中I儀器、2試藥、3色譜條件和4試驗(yàn)方法中的4. I對(duì)照品溶液的制備、4. 4含量測(cè)定方法都與實(shí)施例I相同,僅4試驗(yàn)方法中的4. 2供試品溶液的制備和4. 3陰性溶液的制備不同。4. 2供試品溶液的制備取黃莪膠囊制劑,傾出內(nèi)容物,混勻,精密稱定IOg置250ml容量瓶中,精密加蒸餾水100ml,搖勻稱定重量,超聲處理(功率150W,頻率50Hz) 30分鐘,放置24小時(shí),再稱定重量,用蒸餾水補(bǔ)足減失的重量,搖勻。靜置12小時(shí),轉(zhuǎn)速2000r/min離心5分鐘,精密吸取上清液50ml,置分液漏斗中,用水飽和的正丁醇振搖提取4次(30ml,30ml,20ml,20ml),合并正丁醇液,用氨試液洗滌2次(40ml,20ml),充分振搖靜置使分層,合并氨試液,用水飽和的正丁醇30ml提取,棄去氨試液,合并正丁醇液,加水洗滌兩次(40ml,20ml),合并水液,用水飽和的正丁醇30ml振搖提取,棄去水液,合并正丁醇液,蒸干,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得供試品溶液。4. 3不含黃芪甲苷和櫳牛兒酮的陰性溶液的制備取不含黃芪和莪術(shù)的黃莪膠囊,按4. 2供試品溶液的制備方法制備陰性溶液。 5、結(jié)果表明陰性溶液對(duì)測(cè)定基本無干擾,供試品溶液中基本檢測(cè)不到櫳牛兒酮的含量。因此,該制備方法無法用于同時(shí)測(cè)定黃芪甲苷和櫳牛兒酮的含量。實(shí)施例4該實(shí)施例中I儀器、2試藥、4試驗(yàn)方法都與實(shí)施例I相同,僅3色譜條件中檢測(cè)波長不同。3、色譜條件Waters Symmetry C18 (4. 6mmX 250mm, 5 u m)色譜柱;以乙臆-水(32 : 68)為流動(dòng)相,流速為I. Oml/min,柱溫30°C ;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器參數(shù)漂移管溫度101°C,氮?dú)饬魉?. 7L/min ;檢測(cè)波長為200nm。5、結(jié)果表明供試品溶液中黃芪甲苷、櫳牛兒酮的吸收峰不明顯,難以準(zhǔn)確測(cè)定兩者的含量。實(shí)施例5該實(shí)施例中I儀器、2試藥、4試驗(yàn)方法都與實(shí)施例I相同,僅3色譜條件中檢測(cè)波長不同。3、色譜條件Waters Symmetry C18 (4. 6mmX 250mm, 5 u m)色譜柱;以乙臆-水(32 : 68)為流動(dòng)相,流速為I. Oml/min,柱溫30°C ;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器參數(shù)漂移管溫度101°C,氮?dú)饬魉?. 7L/min ;檢測(cè)波長為215nm。5、結(jié)果表明供試品溶液中黃芪甲苷、櫳牛兒酮的吸收峰不明顯,影響兩者的含量測(cè)定。實(shí)施例6線性關(guān)系考察精密稱取對(duì)照品黃芪甲苷25. Omg、櫳牛兒酮4. Omg,置20ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻,得含黃芪甲苷I. 25mg/ml、櫳牛兒酮0. 20mg/ml溶液。取上述對(duì)照品溶液,加甲醇分別制成黃苗甲苷和物牛兒酮濃度各為0. 25mg/ml、0. 04mg/ml ;0. 50mg/ml、0. 08mg/ml ;0. 75mg/ml、0. 12mg/ml ;1. 00mg/ml、0. 16mg/ml ; I. 25mg/ml、0. 20mg/ml 的對(duì)照品溶液。分別吸取各濃度溶液10. O iil,注入高效液相色譜儀中,按實(shí)施例I的色譜條件測(cè)定峰面積,結(jié)果見表I。表I黃芪甲苷、櫳牛兒酮對(duì)照品濃度與峰面積關(guān)系
權(quán)利要求
1.一種中藥復(fù)方制劑黃莪膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法,包括以下步驟(1)高效液相色譜條件Waters Symmetry C18,4. 6mmX 250mm, 5 ii m色譜柱;以乙腈-水為流動(dòng)相,乙腈為A,水為 B,A+B=100% ;梯度洗脫0-20min,30%A — 40%A ;20-30min, 40%A — 60%A ;30-50min,60%A — 70%A ;流速為I. Oml/min,柱溫25 40°C;Allerch ELSD2000型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè);檢測(cè)波長為208nm ;(2)供試品溶液的制備取黃莪膠囊制劑,傾出內(nèi)容物,混勻,精密稱定IOg置250ml容量瓶中,精密加甲醇100ml,搖勻稱定重量;超聲處理30min,放置,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,離心過濾;濾液過中性硅膠氧化鋁柱,用甲醇洗脫,洗脫液蒸干,殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得供試品溶液;(3)測(cè)定精密吸取供試品溶液lOyl,注入高效液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算,即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的測(cè)定方法,其特征是步驟(I)所述AllerchELSD2000型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的檢測(cè)參數(shù)漂移管溫度10rC,氮?dú)饬魉?. 7L/min。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的測(cè)定方法,其特征是步驟(2)所述的超聲處理?xiàng)l件為功率150W、頻率50Hz,處理后放置24h。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的測(cè)定方法,其特征是步驟(2)所述的離心過濾條件靜置12h,轉(zhuǎn)速 2000r/min 離心 5min。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的測(cè)定方法,其特征是步驟(2)所述的處理?xiàng)l件離心5min后,吸取上清液,過45 y m濾紙,收集濾液,再過中性硅膠氧化鋁柱。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有黃芪和莪術(shù)藥材的復(fù)方藥物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法,采用甲醇溶解處理復(fù)方藥物制劑,應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC-ELSD)一次性同時(shí)測(cè)定復(fù)方藥物制劑黃莪膠囊中黃芪甲苷和牻牛兒酮的含量,以反映黃莪膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量。該方法解決了難以同步測(cè)定黃芪甲苷和牻牛兒酮的難題,提高了黃莪膠囊質(zhì)量檢測(cè)的準(zhǔn)確性和產(chǎn)品的穩(wěn)定性,有利于提高工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制。
文檔編號(hào)G01N30/06GK102778526SQ201210140479
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月8日
發(fā)明者葉劍鋒, 吳華玲, 王如偉, 胡林水, 胡江寧, 許茵南, 陳玲芳 申請(qǐng)人:浙江康恩貝制藥股份有限公司, 浙江現(xiàn)代中藥與天然藥物研究院有限公司