專利名稱：Hplc-icp-ms聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種用高效液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜儀(HPLC-ICP-MS)聯(lián)用技術(shù)測(cè)定水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法。
背景技術(shù)：
鎘不是人體所必需的微量元素。新生嬰兒體內(nèi)幾乎無(wú)鎘，人體中鎘全部是出生后通過(guò)外界環(huán)境(例如飲水、食物、香煙)進(jìn)入人體的。研究顯示，鎘中毒會(huì)造成腎小管再吸收障礙，低分子量蛋白質(zhì)和鈣質(zhì)等由尿中流失，長(zhǎng)期下去容易形成骨質(zhì)軟化，關(guān)節(jié)疼痛、骨折及腎骼變形等。長(zhǎng)期攝入過(guò)量的鎘，會(huì)影響體內(nèi)其他有益元素的效能，造成肝腎損害、肺氣腫、支氣管炎、內(nèi)分必失調(diào)、食欲不振、失眠等問(wèn)題。鎘轉(zhuǎn)移至動(dòng)脈，使血壓上升，引致血管脂肪化。另外，鎘也是一種致癌物質(zhì)，可能誘發(fā)前列腺癌癥。鎘在正常環(huán)境中含量很低，但海藻、貝類等水生生物對(duì)鎘的富集能力極強(qiáng)，因此鎘是影響水產(chǎn)品食用安全的主要因素。鎘在生物體內(nèi)可以與蛋白質(zhì)、有機(jī)酸等結(jié)合成有機(jī)鎘形態(tài)存在，也可以無(wú)機(jī)態(tài)存在。環(huán)境學(xué)和毒理學(xué)研究結(jié)果證明，鎘的毒性與其存在形態(tài)有關(guān)，離子態(tài)鎘的毒性較高，結(jié)合態(tài)和有機(jī)態(tài)鎘無(wú)毒或毒性非常微弱。若簡(jiǎn)單地僅采用鎘的總含量、并以其離子態(tài)的毒性效應(yīng)作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)往往會(huì)高估其毒害效應(yīng)，因此鎘的形態(tài)差異成為影響海藻、貝類等水產(chǎn)品食用安全性評(píng)價(jià)的關(guān)鍵因素，但國(guó)內(nèi)外有關(guān)水產(chǎn)品中鎘形態(tài)的研究較少?，F(xiàn)行鎘的檢測(cè)方法是根據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T5009. 15-2003中規(guī)定的食品中鎘的測(cè)定方法，將水產(chǎn)品中各種形態(tài)鎘通過(guò)高溫、強(qiáng)氧化劑(硝酸和高氯酸)消解成離子態(tài)鎘，因此該方法檢測(cè)到的是水產(chǎn)品中鎘的總量。對(duì)水產(chǎn)品中鎘的食用安全評(píng)價(jià)尤其是對(duì)于具有高鎘積累特性的海藻和貝類，不能僅以鎘總量來(lái)評(píng)價(jià)，研究水產(chǎn)品中鎘的化學(xué)形態(tài)，并建立離子態(tài)鎘的分析技術(shù)已迫在眉睫。目前國(guó)際ISO和CAC標(biāo)準(zhǔn)中尚無(wú)測(cè)定水產(chǎn)中二價(jià)鎘離子的方法標(biāo)準(zhǔn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法，使用高效液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜儀聯(lián)用(HPLC-ICP-MS)形態(tài)分析技術(shù)，對(duì)水產(chǎn)品中的鎘元素進(jìn)行定性和定量分析，準(zhǔn)確測(cè)定水產(chǎn)品中的二價(jià)鎘離子含量。本發(fā)明是按照以下操作方法完成的一種HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法，包括以下步驟1)、 選用的儀器及設(shè)備，HPLC-ICP-MS聯(lián)用系統(tǒng)，2)、配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液，3)、樣品處理的步驟， 4)、實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件，5)、樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算；具體步驟如下I)選用的儀器及設(shè)備(I)、液相色譜儀HPLC :使用SERIES200高壓液相泵，配有自動(dòng)進(jìn)樣器，配有保護(hù)柱 CG5A4X50mm和相同材質(zhì)填料的CS5A 4X 250mm陽(yáng)離子交換色譜柱；
(2)、電感耦合等離子體質(zhì)譜儀ICP-MS :配有動(dòng)態(tài)反應(yīng)池，進(jìn)樣系統(tǒng)，射頻發(fā)生器， 等離子體系統(tǒng)，Chromera形態(tài)分析全自動(dòng)處理接口，離子透鏡系統(tǒng)，四極桿，真空系統(tǒng)，檢測(cè)器，氣路控制系統(tǒng)；(3)、冷卻循環(huán)水；
(4)、渦旋混合器；
(5)、純水系統(tǒng)；
(6)、循環(huán)式真空砂芯抽濾器；
(7)、高速冷凍離心機(jī),轉(zhuǎn)速不小于8000r/min ；
(8)、數(shù)控超聲波清洗器；
(9) >0. 22 μ m的水相微孔濾膜；
(10)、純度彡99. 99%的氬氣；
2)配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液
(I)、浸提液超純水；
(2)、流動(dòng)相50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，使用前經(jīng)過(guò)O. 22 μ m濾膜過(guò)濾并超聲脫氣;
所有的試劑均是優(yōu)級(jí)純，整個(gè)實(shí)驗(yàn)用水均為超純水；玻璃儀器使用前經(jīng)15%硝酸浸泡24h
(3)、二價(jià)鎘離子的標(biāo)準(zhǔn)使用液
將100 μ g/mL 二價(jià)鎘離子標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至I. 00 μ g/mL的儲(chǔ)備液，置4°C冰箱存放
備用，由I. 00 μ g/mL的二價(jià)鎘離子儲(chǔ)備液用水稀釋成10. 0ng/mL、50. 0ng/mL、100. Ong/mL、 200. 0ng/mL>500. Ong/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液,現(xiàn)用現(xiàn)配；3)樣品處理的步驟稱取經(jīng)粉碎過(guò)40目篩的干樣O. 500g I. OOOg或鮮樣勻漿稱取2. OOOg 4. OOOg 置于50mL塑料具塞刻度離心管中，加水40mL渦旋混勻后，超聲浸提40min，8000r/min 4°C 離心lOmin，取出上清液用O. 22微米的水系微孔濾膜過(guò)濾后為待測(cè)樣液，移入進(jìn)樣瓶中，上機(jī)測(cè)定待測(cè)樣液中鎘離子的值；4)實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件(I)、高效液相色譜條件流動(dòng)相為50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，流速I. OmL/ min ;進(jìn)樣體積50 μ L,自動(dòng)進(jìn)樣；(2)、電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件射頻功率1150W，等離子體氣流速15L/min，霧化氣流速O. 94L/min,透鏡電壓7. 00V,輔助氣流速I. 2L/min,檢測(cè)器模擬級(jí)電壓-1800V，檢測(cè)器脈沖級(jí)電壓900V，質(zhì)量通帶帶寬O. 25，采樣時(shí)間IOmin ；5)樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算開(kāi)機(jī)后按上述儀器條件進(jìn)行設(shè)置，待穩(wěn)定后，先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后測(cè)定處理好的待測(cè)樣液；在上述高效液相色譜和電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件下采用全自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣 50 μ L進(jìn)行測(cè)定，高效液相色譜儀進(jìn)行分離，電感耦合等離子質(zhì)譜儀對(duì)二價(jià)鎘離子進(jìn)行檢測(cè)；在上述儀器條件下二價(jià)鎘離子保留時(shí)間約為3. 2min ；(2)、定量待測(cè)樣液中二價(jià)鎘離子的色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)使用液相比變化范圍在±10%之內(nèi)即認(rèn)為是該待測(cè)定物質(zhì)；
結(jié)果計(jì)算與表述用數(shù)據(jù)處理軟件中的外標(biāo)法，確定二價(jià)鎘離子保留時(shí)間及分離度脈沖強(qiáng)度，以濃度為橫坐標(biāo)，脈沖強(qiáng)度積分為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，然后將待測(cè)樣液幸分析處理，即可得到待測(cè)樣液中的二價(jià)鎘離子的濃度，按下面式(I)計(jì)算，可得樣品中二價(jià)鎘離子的含X = CXV/mX1000..............................(I)式中X-樣品中二價(jià)鎘離子的含量，mg/kg ；C-待測(cè)樣液中二價(jià)鎘離子的濃度，ng/ml ；m-稱樣量，g;V-測(cè)定液體總體積，mL。 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果是I、本發(fā)明采用高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析水產(chǎn)品中的二價(jià)鎘離子，提取液首先由高效液相色譜，采用陽(yáng)離子交換色譜技術(shù)洗脫分離提取液中的二價(jià)鎘離子，再由電感耦合等離子體質(zhì)譜儀做為檢測(cè)器進(jìn)行分析。陽(yáng)離子交換色譜柱能吸附提取液中的二價(jià)鎘離子，通過(guò)流動(dòng)相中草酸對(duì)鎘離子的絡(luò)合作用，將二價(jià)鎘離子洗脫，通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜儀對(duì)二價(jià)鎘離子進(jìn)行分析，得到二價(jià)鎘離子的保留時(shí)間及其分離度的脈沖強(qiáng)度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的強(qiáng)度和脈沖強(qiáng)度積分，由儀器計(jì)算機(jī)擬合得到線性回歸方程。該實(shí)驗(yàn)條件選擇合理，檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。2、本發(fā)明對(duì)水產(chǎn)品中的鎘采用中性水超聲提取，鎘的形態(tài)不會(huì)被改變，因此提取液中存在自由的離子態(tài)鎘以及跟蛋白質(zhì)等有機(jī)物絡(luò)合的有機(jī)態(tài)鎘。采用的流動(dòng)相中草酸對(duì)鎘離子具有很強(qiáng)的絡(luò)合作用，而對(duì)于提取液中穩(wěn)定的鎘絡(luò)合物沒(méi)有吸附洗脫作用，保證了對(duì)樣品中鎘離子和鎘絡(luò)合物很好的分離。3、本發(fā)明填補(bǔ)了目前國(guó)標(biāo)中僅有總鎘測(cè)定方法而未有鎘元素形態(tài)檢測(cè)方法的空白，可以準(zhǔn)確科學(xué)的評(píng)價(jià)水產(chǎn)品及其制品的質(zhì)量安全，同時(shí)對(duì)制定水產(chǎn)品中有害元素限量的新標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。


圖I : 二價(jià)鎘離子標(biāo)準(zhǔn)使用液色譜圖；圖2 :扇貝中二價(jià)鎘離子分析色譜圖
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例詳細(xì)敘述本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容本發(fā)明為利用高效液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜儀(HPLC-ICP-MS)聯(lián)用技術(shù)分析水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法，步驟包括1、選用的儀器及設(shè)備，2、配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液，
3、樣品提取的步驟，4、實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件，5、樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算。水產(chǎn)品品種繁多，如貝類、魚(yú)類、甲殼類、頭足類以及各種藻類等；在其生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)鎘的富集作用和機(jī)理各不相同，其體內(nèi)鎘的含量和存在形式也相差很大，其中海藻和貝類對(duì)鋪具有較強(qiáng)的富集能力，如紫菜、扇貝、牡販等。鋪在具有聞富集能力水廣品中的存在形態(tài)是影響其食用安全性評(píng)價(jià)的關(guān)鍵因素。因此，我們選擇水產(chǎn)品中最有代表性且爭(zhēng)議最大的紫菜、扇貝、牡蠣作為驗(yàn)證的實(shí)施例。實(shí)施例I :扇貝中二價(jià)鎘離子即Cd(II)的測(cè)定I、本實(shí)施例選用的儀器及設(shè)備HPLC-ICP-MS聯(lián)用系統(tǒng)(I)、HPLC(美國(guó) Perkin-Elmer 公司，型號(hào) Series 200)部分使用 SERIES200 高壓液相泵，配有自動(dòng)進(jìn)樣器，配有保護(hù)柱CG5A 4 X 50mm和相同材質(zhì)填料的CS5A 4 X 250mm 陽(yáng)離子交換色譜柱；(2)、ICP-MS(美國(guó)Perkin-Elmer公司，型號(hào)ELAN DRC II)部分配有動(dòng)態(tài)反應(yīng)池， 自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，射頻發(fā)生器，等離子體系統(tǒng)，Chromera形態(tài)分析全自動(dòng)處理接口，離子透鏡系統(tǒng)，四極桿，真空系統(tǒng)，檢測(cè)器，氣路控制系統(tǒng)；(3)、冷卻循環(huán)水(美國(guó)P0LYSCIENCE公司，型號(hào)SHA-C)；(4)、鏇潤(rùn)混合器(IKA MS 3 basic)；(5)、純水系統(tǒng)(美國(guó) Millipore, Milli-Q Gradient A10)；(6)、循環(huán)式真空砂芯過(guò)濾器泵(真空泵，上海亞榮生化儀器廠、型號(hào)SHZ-III ;砂芯過(guò)濾裝置、型號(hào)SH/T0093)；(7)、高速冷凍離心機(jī)(Thermo，型號(hào)D-37520)；(8)、數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，型號(hào)KQ-600DE)；(9)、水系微孔濾膜(O. 22 μ m)；(10)、氬氣(純度彡 99.99% )。2、配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液；(I)、浸提液超純水。(2)、流動(dòng)相50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，使用前經(jīng)過(guò)O. 22 μ m濾膜過(guò)濾并超
聲脫氣。所有的試劑均是優(yōu)級(jí)純，整個(gè)實(shí)驗(yàn)都使用超純水；玻璃儀器使用前經(jīng)15%硝酸浸泡 24h ；(3)、二價(jià)鎘離子Cd(II)的標(biāo)準(zhǔn)使用液從國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心購(gòu)得100 μ g/mL Cd(II)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋至I. 00 μ g/mL作為Cd(II)的儲(chǔ)備液(置4°C冰箱存放備用)；1. 00 μ g/mL的Cd(II)儲(chǔ)備液用水稀釋成 10. 0ng/mL、50. Ong/mL、100. 0ng/mL、200. 0ng/mL、500. Ong/mL 的 Cd(II)標(biāo)準(zhǔn)使用液，現(xiàn)用現(xiàn)配。3、樣品處理的步驟稱取均勻勻漿扇貝約3. OOOg置于50mL具塞刻度離心管中，加水40mL混勻，超聲浸提40min。8000r/min 4°C離心lOmin，取出上清液用O. 22微米的水系微孔濾膜過(guò)濾，移入進(jìn)樣瓶中，上機(jī)測(cè)定待測(cè)樣液中二價(jià)鎘離子的值。4、實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件(I)、高效液相色譜條件(HPLC):流動(dòng)相50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，流速 lmL/min ;進(jìn)樣體積50 μ L,自動(dòng)進(jìn)樣。(2)、電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件(ICP-MS):射頻功率1150W，等離子體氣流速 15L/min,霧化氣流速O. 94L/min,透鏡電壓7. 00V,輔助氣流速I. 2L/min,檢測(cè)器模擬級(jí)電壓-1800V，，檢測(cè)器脈沖級(jí)電壓900V，質(zhì)量通帶帶寬O. 25，采樣時(shí)間lOmin。5、樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算(I)、定性開(kāi)機(jī)后按上述條件進(jìn)行設(shè)置，待穩(wěn)定后，取標(biāo)準(zhǔn)使用溶液ImL移入進(jìn)樣瓶中，自動(dòng)進(jìn)樣注入高效液相色譜儀(HPLC)，進(jìn)行洗粉離成分，然后應(yīng)用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP/MS)作為檢測(cè)器對(duì)Cd(II)進(jìn)行分析，確定Cd(II)的保留時(shí)間及其分離度的脈沖強(qiáng)度，以濃度為橫坐標(biāo)，脈沖強(qiáng)度的積分為縱坐標(biāo)，由儀器的計(jì)算機(jī)作線性擬合，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。在上述高效液相色譜和電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件下采用全自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣 50 μ L樣品提取液進(jìn)行測(cè)定，高效液相色譜儀進(jìn)行分離，電感耦合等離子質(zhì)譜儀對(duì)Cd(II) 進(jìn)行檢測(cè)；在上述儀器條件下Cd(II)保留時(shí)間約為3. 2min ;詳見(jiàn)圖I ;(2)、定量待測(cè)樣品中Cd(II)的色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)使用液相比變化范圍在 ±10%之內(nèi)即認(rèn)為是該待測(cè)定物質(zhì)；結(jié)果計(jì)算與表述用數(shù)據(jù)處理軟件(chromera)中的外標(biāo)法，確定Cd(II)保留時(shí)間及分離度脈沖強(qiáng)度，以濃度為橫坐標(biāo)，脈沖強(qiáng)度積分為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，將標(biāo)準(zhǔn)工作曲線保存，然后將樣品峰分析處理，即可得到待測(cè)樣液中的Cd(II)的濃度，按下面式(I)計(jì)算，可得試樣中Cd(II)的含量X = CXV/mXIOOO..............................(I)式中X-樣品中 Cd(II)的含量，mg/kg ；C-待測(cè)樣液中Cd(II)的濃度，ng/ml ；m-稱樣量，g;V-測(cè)定液體總體積，mL ；6、結(jié)果本方法0(1(11)檢出限量為0.0311^/1^。通過(guò)對(duì)扇貝樣品的加標(biāo)回收率試驗(yàn)，回收率為> 85%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< 5%，證明上述檢測(cè)方法的可行。對(duì)牡蠣中的二價(jià)鎘離子的測(cè)定方法與扇貝相同，扇貝和牡蠣加標(biāo)回收率的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表I。表I、扇貝、牡蠣加標(biāo)回收率的測(cè)定結(jié)果
測(cè)定元素產(chǎn)品種類本底測(cè)定值 ng/niL力口# ng/mL測(cè)定值 ng/mL回收率％含量mg/KgCd (II)扇貝58.6100147.889.2O. 754蝴19.55062.485.8O. 26實(shí)施例2 :對(duì)紫菜中Cd(II)的測(cè)定稱取紫菜粉碎干制樣品I. OOOg置于50mL具塞塑料刻度離心管中，加水40mL混勻。超聲提取40min，8000r/min 4°C離心lOmin，取出上清液用O. 22微米的水系微孔濾膜過(guò)濾，上機(jī)測(cè)定浸提液中Cd(II)的值。其它條件均與扇貝、牡蠣的相同。紫菜中樣品的加標(biāo)回收率試驗(yàn)，加標(biāo)回收率為91. 2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< 5%，滿足
8分析要求，紫菜中二價(jià)鎘離子的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。表2、紫菜加標(biāo)回收率的測(cè)定結(jié)果(以干基計(jì))
測(cè)定元素產(chǎn)品種類核測(cè)定值 ng/mL力口 ng/mL測(cè)定值 ng/mL回收率％含量mg/KgCd (II)紫菜10.52028.791.2O. 42為確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠我們采取的描施有①干制樣品需粉碎過(guò)40目篩，鮮樣需勻漿可使樣品均勻，浸提完全；②采用中性冰提取液提取，可以保證冰產(chǎn)品中鎘形態(tài)不發(fā)生變化；③、選用的保護(hù)柱CG5A 4父50111111，分析柱0354 4X250mm陽(yáng)離子交換柱能吸附離子態(tài)Cd(II)，再通過(guò)草酸的絡(luò)合作用洗脫，使離子態(tài)鎘與絡(luò)合態(tài)有機(jī)鎘很好的分離，見(jiàn)圖 2。因此高效液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜儀聯(lián)用(HPLC-ICP-MS)技術(shù)是分析水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的首選方法。這種方法可以將二價(jià)鎘離子與有機(jī)鎘很好的分離并對(duì)無(wú)二價(jià)鎘離子進(jìn)行定性定量，該方法回收率高，穩(wěn)定性好，靈敏度高，前處理簡(jiǎn)便，解決了水產(chǎn)品中的毒性較高的二價(jià)鎘離子的分析問(wèn)題，特別是對(duì)于具有高富集特性的紫菜、扇貝、牡蠣等水產(chǎn)生物，該方法可以更為清晰、準(zhǔn)確的反應(yīng)其中二價(jià)鎘離子的含量，為科學(xué)準(zhǔn)確的進(jìn)行質(zhì)量安全性評(píng)價(jià)提供重要技術(shù)支持。
權(quán)利要求
1.一種HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法，包括以下步驟1)、 選用的儀器及設(shè)備，HPLC-ICP-MS聯(lián)用系統(tǒng)，2)、配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液，3)、樣品處理的步驟，4)、實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件，5)、樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算；其特征在于具體步驟如下1)選用的儀器及設(shè)備(1)、液相色譜儀HPLC:使用SERIES200高壓液相泵，配有自動(dòng)進(jìn)樣器，配有保護(hù)柱 CG5A4X50mm和相同材質(zhì)填料的CS5A 4X 250mm陽(yáng)離子交換色譜柱；(2)、電感耦合等離子體質(zhì)譜儀ICP-MS:配有動(dòng)態(tài)反應(yīng)池，進(jìn)樣系統(tǒng)，射頻發(fā)生器，等離子體系統(tǒng)，Chromera形態(tài)分析全自動(dòng)處理接口，離子透鏡系統(tǒng)，四極桿，真空系統(tǒng)，檢測(cè)器， 氣路控制系統(tǒng)；(3)、冷卻循環(huán)水；(4)、渦旋混合器；(5)、純水系統(tǒng)；(6)、循環(huán)式真空砂芯抽濾器；(7)、高速冷凍離心機(jī),轉(zhuǎn)速不小于8000r/min；(8)、數(shù)超聲波清洗器；(9)>0. 22 μ m的水相微孔濾膜；(10)、純度彡99.99%的氬氣；2)配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液(1)、浸提液超純水；(2)、流動(dòng)相50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，使用前經(jīng)過(guò)O.22 μ m濾膜過(guò)濾并超聲脫氣;所有的試劑均是優(yōu)級(jí)純，整個(gè)實(shí)驗(yàn)用水均為超純水；玻璃儀器使用前經(jīng)15%硝酸浸泡24h ；(3)、二價(jià)鎘離子的標(biāo)準(zhǔn)使用液將100 μ g/mL 二價(jià)鎘離子標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至I. 00 μ g/mL的儲(chǔ)備液，置4°C冰箱存放備用，由I. 00 μ g/mL的二價(jià)鎘離子儲(chǔ)備液用水稀釋成10. 0ng/mL、50. 0ng/mL、100. Ong/mL、 200. 0ng/mL>500. Ong/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液,現(xiàn)用現(xiàn)配；3)樣品處理的步驟稱取經(jīng)粉碎過(guò)40目篩的干樣O. 500g I. OOOg或鮮樣勻漿稱取2. OOOg 4. OOOg置于50mL塑料具塞刻度離心管中，加水40mL渦旋混勻后，超聲浸提40min，8000r/min 4°C離心lOmin，取出上清液用O. 22微米的水系微孔濾膜過(guò)濾后為待測(cè)樣液，移入選樣瓶中，上機(jī)測(cè)定待測(cè)樣液中鎘離子的值；4)實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件(1)、高效液相色譜條件流動(dòng)相為50mM草酸+95mM氫氧化鋰溶液，流速I.OmL/min ;進(jìn)樣體積50 μ L，自動(dòng)進(jìn)樣；(2)、電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件射頻功率1150W，等離子體氣流速15L/min，霧化氣流速O. 94L/min,透鏡電壓7. 00V,輔助氣流速I. 2L/min,檢測(cè)器模擬級(jí)電壓-1800V，檢測(cè)器脈沖級(jí)電壓900V，質(zhì)量通帶帶寬O. 25，采樣時(shí)間IOmin ；5)樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算開(kāi)機(jī)后按上述儀器條件進(jìn)行設(shè)置，待穩(wěn)定后，先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后測(cè)定處理好的待測(cè)樣液；在上述高效液相色譜和電感耦合等離子質(zhì)譜儀條件下采用全自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣50 μ L進(jìn)行測(cè)定，高效液相色譜儀進(jìn)行分離，電感耦合等離子質(zhì)譜儀對(duì)二價(jià)鎘離子進(jìn)行檢測(cè)；在上述儀器條件下二價(jià)鎘離子保留時(shí)間約為3. 2min ；(2)、定量待測(cè)樣液中二價(jià)鎘離子的色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)使用液相比變化范圍在 ±10%之內(nèi)即認(rèn)為是該待測(cè)定物質(zhì)；結(jié)果計(jì)算與表述用數(shù)據(jù)處理軟件中的外標(biāo)法，確定二價(jià)鎘離子保留時(shí)間及分離度脈沖強(qiáng)度，以濃度為橫坐標(biāo)，脈沖強(qiáng)度積分為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，然后將待測(cè)樣液幸分析處理，即可得到待測(cè)樣液中的二價(jià)鎘離子的濃度，按下面式(I)計(jì)算，可得樣品中二價(jià)鎘離子的含量X = CXV/mX1000..............................(I)式中X-樣品中二價(jià)鎘離子的含量，mg/kg ；C-待測(cè)樣液中二價(jià)鎘離子的濃度，ng/ml ； m-稱樣量，g ；V-測(cè)定液體總體積，mL。
全文摘要
一種HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)水產(chǎn)品中二價(jià)鎘離子的方法，屬于水產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，包括以下步驟1)、選用的儀器及設(shè)備，HPLC-ICP-MS聯(lián)用系統(tǒng)2)、配置試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液3)、樣品處理的步驟4)、實(shí)驗(yàn)所用的儀器條件5)、樣品檢測(cè)與結(jié)果計(jì)算；本發(fā)明對(duì)水產(chǎn)品中的鎘采用中性水超聲提取，鎘的形態(tài)不會(huì)被改變，因此提取液中存在自由的離子態(tài)鎘以及跟蛋白質(zhì)等有機(jī)物絡(luò)合的有機(jī)態(tài)鎘。采用的流動(dòng)相中草酸對(duì)鎘離子具有很強(qiáng)的絡(luò)合作用，而對(duì)于提取液中穩(wěn)定的鎘絡(luò)合物沒(méi)有吸附洗脫作用，保證了對(duì)樣品中鎘離子和鎘絡(luò)合物很好的分離；本發(fā)明填補(bǔ)了目前國(guó)標(biāo)中僅有總鎘測(cè)定方法而未有鎘元素形態(tài)檢測(cè)方法的空白，可以準(zhǔn)確科學(xué)的評(píng)價(jià)水產(chǎn)品及其制品的質(zhì)量安全，同時(shí)對(duì)制定水產(chǎn)品中有害元素限量的新標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。
文檔編號(hào)G01N30/88GK102590411SQ20121001271
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月16日
發(fā)明者寧勁松, 尚德榮, 翟毓秀, 譚志軍, 趙艷芳 申請(qǐng)人:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所