專利名稱：組織陣列的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于形成組織片的形成方法及用于形成該組織片的裝置，該組織片用于制造組織陣列，該組織陣列通過在基板上以陣列狀排列組織片而成。
背景技術(shù)：
在對(duì)生物體組織進(jìn)行檢查、分析時(shí)，使用通過在基板上排列多個(gè)組織片而構(gòu)成的組織陣列。組織陣列(tissue array)用于通過對(duì)被檢物質(zhì)涂布用于特異性地染色的染色液的方法等，檢查是否存在病變組織，對(duì)基因、蛋白質(zhì)進(jìn)行分析、篩選等。形成用于構(gòu)成組織陣列的組織片通常這樣地進(jìn)行對(duì)由石蠟等包埋劑包埋起來的組織塊進(jìn)行穿孔，將組織塊挖成圓形，并將芯提取出來。但是，采用這樣的組織片的形成方法，存在這樣的問題在提取芯之后進(jìn)行切片時(shí)，組織塊中的病變組織中應(yīng)特別留意的關(guān)心部位可能會(huì)缺損。而且，在對(duì)生物體組織進(jìn)行研究的研究者中，也存在這樣考慮的人，他們認(rèn)為，由于在組織塊上開孔時(shí)，該芯部分完全從組織塊中消失，因此，這種做法對(duì)后續(xù)的研究來說并不是優(yōu)選的。因此，對(duì)采用其他方法而不采用從組織塊中挖出圓形的芯的方法來形成用于構(gòu)成組織陣列的組織片進(jìn)行了研究。專利文獻(xiàn)I及專利文獻(xiàn)2公開了為了解決像上述那樣的問題而提出來的方法。在專利文獻(xiàn)I及專利文獻(xiàn)2所公開的組織片的形成方法中，首先，利用切片機(jī)等對(duì)組織塊進(jìn)行切片，獲得片狀的組織片。然后，將該片狀的組織片卷繞成卷(口一 >)狀。將卷繞起來的卷狀的組織片插入到石蠟等包埋劑形成為塊狀而成的基體塊的空孔內(nèi)。當(dāng)在基體塊中排列了規(guī)定數(shù)量的卷狀的組織片時(shí)，對(duì)該基體塊進(jìn)行切片，以使該卷狀的組織片成為圓片狀，并將切片設(shè)置于載玻片等基板，從而，形成組織陣列。另外，優(yōu)選在將卷狀的組織片插入到石蠟等包埋劑形成為塊狀而成的基體塊的空孔內(nèi)時(shí)，使卷狀的組織片的直徑與空孔的直徑一致。其原因在于，通過使卷狀的組織片的直徑與空孔的直徑一致，能夠可靠地進(jìn)行定位。 這樣，在專利文獻(xiàn)I及專利文獻(xiàn)2所述的形成方法中，通過將片狀的組織片卷繞成卷狀，能夠?qū)挿秶慕M織的各個(gè)部位放入到一個(gè)組織片中，因此，能夠解決病變組織中應(yīng)特別留意的關(guān)心部位缺損這樣的問題。而且，無需在組織塊開孔，僅通過將表面切得較薄就能夠留存，也能夠有助于于后續(xù)的研究?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1:國(guó)際公開第2010 / 027012號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2 :國(guó)際公開第2008 / 108410號(hào)公報(bào)發(fā)明要解決的問題
如上所述，在專利文獻(xiàn)I及專利文獻(xiàn)2所述的方法中，將形成的卷狀的組織片插入到由石蠟等包埋劑形成為塊狀而成的基體塊的空孔內(nèi)。但是，在卷狀的組織片中，根據(jù)組織片的大小、厚度的不同，其直徑也有所不同。因而，存在這樣的問題即使在基體塊形成了預(yù)先決定的直徑的空孔，在卷狀的組織片的直徑比該空孔的直徑大的情況下，也無法將卷狀的組織片插入到空孔內(nèi)，而且，在卷狀的組織片的直徑比該空孔的直徑小的情況下，卷狀的組織片在空孔內(nèi)移動(dòng)，而無法可靠地使其位置固定。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明是為了解決上述課題而做成的，其目的在于，提供一種能夠使各種直徑的卷狀的組織片可靠地固定于基體塊的組織陣列的制作方法。用于解決問題的方案根據(jù)本發(fā)明的組織陣列的制作方法，該制作方法用于制作組織陣列，該組織陣列是通過將片狀的組織片卷繞成卷狀而形成的卷狀組織片以陣列狀排列在基板上而成的，其特征在于，該方法通過如下步驟制作組織陣列在用于供熔融的包埋劑注入并使其積存起來的容器內(nèi)配置用于以多個(gè)卷狀組織片的軸線方向朝向鉛垂方向的方式保持該多個(gè)卷狀組織片的保持構(gòu)件，并使各卷狀組織片保持于保持構(gòu)件，將包埋劑注入到容器內(nèi)，從而形成將多個(gè)卷狀組織片以陣列狀排列而成的基體塊，對(duì)基體塊進(jìn)行切片，以使卷狀組織片成為圓片狀，將該切片設(shè)置在基板上。采用該方法，能夠在保持有多個(gè)卷狀組織片，并利用熔融的包埋劑將多個(gè)卷狀組織片周圍包埋起來的狀態(tài)下制作基體塊， 因此，能夠制作可靠地排列有多個(gè)卷狀組織片的組織陣列。根據(jù)本發(fā)明的組織陣列的制作方法，其特征還在于，將形成有多個(gè)直徑至少與卷狀組織片的最小直徑相同的插入孔的彈性構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的外周面。采用該方法，即使各卷狀組織片的直徑各不相同，彈性構(gòu)件的插入孔也能夠保持各卷狀組織片。另外，根據(jù)本發(fā)明的組織陣列的制作方法，其特征還在干，上述插入孔是多邊形形狀。S卩，由于卷狀組織片的截面為大致圓形，因此，當(dāng)插入孔截面為圓形時(shí)，有時(shí)也難以以彈性構(gòu)件的保持力來保持卷狀組織片，但是，通過將插入孔截面做成多邊形形狀，能夠可靠地保持截面為圓形的卷狀組織片。而且，通過將插入孔的截面做成多邊形形狀，能夠減小卷狀組織片與弾性構(gòu)件間的接觸面積，從而能夠通過減小彈性力，更容易使插入孔的直徑擴(kuò)大，増大對(duì)卷狀組織片的直徑的偏差的容許量。而且，根據(jù)本發(fā)明的組織陣列的制作方法，其特征還在于，將形成有多個(gè)邊長(zhǎng)至少與卷狀組織片的最小直徑相同的格子方框(grid square)的格子狀構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的外周面。采用該方法，即使各卷狀組織片的直徑各不相同，也能夠通過使格子狀構(gòu)件的各個(gè)邊彈性變形來保持各卷狀組織片。而且，根據(jù)本發(fā)明的組織陣列的制作方法，其特征在干，將插入于多個(gè)卷狀組織片的軸心部分的棒狀保持構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的軸心部分。采用該方法，即使各卷狀組織片的直徑各不相同，也能夠保持各卷狀組織片。發(fā)明的效果采用本發(fā)明的組織陣列的制作方法，能夠使各種直徑的卷狀的組織片可靠地固定于基體塊，從而能夠可靠地制作組織陣列。


圖1是用于說明切出片狀的組織片的說明圖。圖2是表示將片狀的組織片卷繞于芯棒的過程中的狀態(tài)的說明圖。圖3是第I實(shí)施方式中的用于排列卷狀組織片的結(jié)構(gòu)的組裝分解圖。圖4是表示第I實(shí)施方式中的用于排列卷狀組織片的結(jié)構(gòu)的說明圖。圖5是表示利用圖5的結(jié)構(gòu)制作而成的基體塊的說明圖。圖6是組織陣列片的立體圖。圖7是表示第I實(shí)施方式中的保持構(gòu)件的另一例的說明圖。圖8是第2實(shí)施方式中的用于排列`卷狀組織片的結(jié)構(gòu)的組裝分解圖。圖9是表示第2實(shí)施方式中的用于排列卷狀組織片的結(jié)構(gòu)的說明圖。
具體實(shí)施例方式以下，根據(jù)附圖對(duì)本實(shí)施方式的組織陣列的制作方法進(jìn)行說明。首先，根據(jù)圖1 圖2對(duì)組織陣列所使用的卷狀組織片進(jìn)行說明。卷狀組織片6是通過將片狀的組織片卷繞成卷狀而構(gòu)成的。簡(jiǎn)單地對(duì)卷狀組織片6的制造方法進(jìn)行說明，利用切片機(jī)4將由石蠟等包埋劑包埋起來的組織塊5切成100 μ m左右厚度的片狀，形成片狀組織片8。然后，將片狀的組織片8卷繞于芯棒11形成卷狀組織片6。在卷繞時(shí)，一邊對(duì)其加熱一邊進(jìn)行卷繞則較佳，以能夠可靠地將片狀的組織片8卷繞成卷狀。而且，在將組織片卷繞成卷狀之后，也可以將圖2所示的芯棒11拔出。第I實(shí)施方式接著，根據(jù)圖3 圖6，對(duì)使用上述卷狀組織片制作組織陣列的方法的第I實(shí)施方式進(jìn)行說明。將多個(gè)卷狀組織片6排列在形成為能夠積存熔融的包埋劑(在本實(shí)施方式中為石蠟)的形狀的容器內(nèi)。能夠?qū)窠M織片以制作病理樣本的包埋皿10和包埋框14用作容器。以下，對(duì)使用了包埋皿10和包埋框14的實(shí)施方式進(jìn)行說明。包埋皿10形成有中央凹入、能夠積存熔融石蠟的積存部20。在積存部20的周圍形成有包埋框載置部22，該包埋框載置部22是自積存部20的上端朝向外方而形成的臺(tái)階部，且上表面形成為平面狀。包埋框載置部22的周圍形成有壁部24，該壁部24的外側(cè)與外壁面形成在同一平面中，且該壁部24向上方突出以覆蓋載置于包埋框載置部22的包埋框14的側(cè)面。包埋框14載置于包埋皿10的包埋框載置部22上，與包埋皿10 —體地被使用。
包埋框14的中央形成有形成得與包埋皿10的積存部20俯視時(shí)的形狀相同或者比包埋皿10的積存部20俯視時(shí)的形狀小的連通孔28。當(dāng)將包埋框14載置于包埋皿10時(shí)，包埋皿10的積存部20與包埋框14的連通孔28相連通，成為較深的積存部。在本實(shí)施方式中，多個(gè)卷狀組織片6由由彈性體形成的保持構(gòu)件16保持。能夠?qū)⒑＞d、橡膠等材料用作彈性體。保持構(gòu)件16的大小為能夠正好嵌入到包埋框14的連通孔28的大小，保持構(gòu)件16的厚度形成為與包埋框14的連通孔28的上下方向上的長(zhǎng)度大致相同。而且，保持構(gòu)件16的俯視形狀與包埋框14的連通孔28的俯視形狀大致相同，且在保持構(gòu)件16的局部形成有切口部29。能夠?qū)⑷廴谑瀼脑撉锌诓?9注入。在保持構(gòu)件16上形成有多個(gè)插入孔30，該插入孔30沿著保持構(gòu)件16的厚度方向(上下方向)貫穿并用于保持卷狀組織片6。將插入孔30的直徑做成得比卷狀組織片6的預(yù)想的最小直徑稍小。這樣，即使是對(duì)最細(xì)的卷狀組織片6而言，插入到插入孔30的卷狀組織片6也會(huì)擴(kuò)寬插入孔30，從而使保持構(gòu)件16彈性變形。利用該彈性變形的回復(fù)力，卷狀組織片6的外周面能夠被插入孔30的內(nèi)壁面可靠地保持，從而夠固定于包埋皿10的積存部20。而且，也可以不將保持構(gòu)件16的插入孔30的截面形成為圓形，而形成為截面是多邊形形狀。即，與插入孔30的截面為圓形的情況相比，在插入孔30的內(nèi)壁面具有角時(shí)，該角能夠可靠地推壓卷狀組織片6的外周面從而提高固定功能。而且，通過將插入孔30的截面做成多邊形形狀，能夠減小卷狀組織片6與彈性構(gòu)件間相接觸的接觸面積，從而能夠通過減小彈性力而容易使插入孔30的直徑擴(kuò)大，增大對(duì)卷狀組織片6的直徑的偏差的容許量。若事先在包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面配置雙面膠帶12則較佳。使雙面膠帶12的一側(cè)的面(下表面)貼附并固定于積存部20的內(nèi)底面，使其另一側(cè)的面(上表面)貼附于保持于保持構(gòu)件16的多個(gè)卷狀組織片6的下端面。通過這樣地使多個(gè)卷狀組織片6的下端面貼附并固定于雙面膠帶12，能夠?qū)⒍鄠€(gè)卷狀組織片6的下端面對(duì)齊而形成在同一平面中。因此，能夠使卷狀組織片6穩(wěn)定地排列。另外，即使不使用雙面膠帶12，也能夠通過推壓保持于保持構(gòu)件16的卷狀組織片6的上端面，使卷狀組織片6的下端面抵接于包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面，從而使卷狀組織片6穩(wěn)定地排列。接著，對(duì)使用上述器具制作組織陣列的步驟進(jìn)行說明。首先，將雙面膠帶12配置在包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面。將卷狀組織片6插入保持構(gòu)件16的各插入孔30。并且，預(yù)先將各卷狀組織片6切齊，以使插入的卷狀組織片6的長(zhǎng)度為從包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面至安裝于包埋框14的連通孔28的保持構(gòu)件16的上表面的長(zhǎng)度。此外，也可以在形成基體塊40之后，將各卷狀組織片6的長(zhǎng)度切齊。然后，將保持有多個(gè)卷狀組織片6的保持構(gòu)件16安裝于包埋框14的連通孔28。此時(shí)，優(yōu)選使用粘接劑等將包埋框14與保持構(gòu)件16間固定。將安裝有保持構(gòu)件16的包埋框14載置于包埋皿10的包埋框載置部22。圖4表示此時(shí)的狀態(tài)。在由保持構(gòu)件16保持有多個(gè)卷狀組織片6的狀態(tài)下，將熔融石蠟注入包埋皿10的積存部20內(nèi)。作為注入ロ，從保持構(gòu)件16的切ロ部29進(jìn)行注入較佳。之后，進(jìn)行冷卻，直至熔融石蠟固化。當(dāng)熔融石蠟固化時(shí)，完成在石蠟內(nèi)排列有多個(gè)卷狀組織片6并將該多個(gè)卷狀組織片6包埋起來而成的基體塊40。圖5表示將基體塊40連同包埋框14 一起從包埋皿10中拔出的過程。優(yōu)選將基體塊40與包埋框14 一體地進(jìn)行處理。S卩，將包埋框14從包埋皿10中拆除，將包埋框14也一同作為基體塊40進(jìn)行處理。由于在包埋框14也存在用于寫入記錄等的區(qū)域，因此，事先寫入基體塊40的信息的話，將有助于后續(xù)的研究等，而且，也能防止拿錯(cuò)等。而且，在利用切片機(jī)等將基體塊40切得較薄(切片)時(shí)，為了固定組織塊，只要利用任意固定部件將包埋框14固定即可，因此，容易自基體塊40制作切片。如圖6所示·，通過對(duì)基體塊40進(jìn)行切片而獲得的片狀物體是組織陣列片19。然后，通過將組織陣列片19配置在基板(未圖示)上，來做成組織陣列。另外，能夠?qū)⑤d玻片、尼龍膜基板、或者硅基板等各種基板用作基板。另外，根據(jù)圖7對(duì)本實(shí)施方式中的保持構(gòu)件的另一例進(jìn)行說明。該保持構(gòu)件33采用形成有多個(gè)格子方框34的格子狀構(gòu)件，其中，該格子方框34邊長(zhǎng)比卷狀組織片6的預(yù)想的最小直徑稍小。保持構(gòu)件33的大小為能夠正好嵌入于包埋框14的連通孔28的大小，保持構(gòu)件33的厚度形成為與包埋框14的連通孔28的上下方向上的長(zhǎng)度大致相同。能夠通過將多個(gè)能夠彈性變形的板狀構(gòu)件組合成格子狀來形成格子狀構(gòu)件。采用該保持構(gòu)件33，能夠?qū)⒕頎罱M織片6保持于各格子方框34。而且，也將該保持構(gòu)件33安裝于包埋框14的連通孔28來使用。此時(shí)，優(yōu)選利用粘接劑等將包埋框14與保持構(gòu)件33間固定。第2實(shí)施方式接著，根據(jù)圖8 圖9對(duì)使用卷狀組織片制作組織陣列的方法的第2實(shí)施方式進(jìn)行說明。另外，有時(shí)對(duì)與在上述實(shí)施方式中說明的結(jié)構(gòu)相同的結(jié)構(gòu)部件標(biāo)注相同的附圖標(biāo)記，省略其說明。本實(shí)施方式中的保持構(gòu)件41設(shè)有多個(gè)棒狀構(gòu)件42而構(gòu)成，該棒狀構(gòu)件42用于插入于卷狀組織片6的軸心部分并保持卷狀組織片6的軸心部分。若在形成卷狀組織片6時(shí)將芯棒11拔出，則能夠在卷狀組織片6的軸心部分形成空洞，將棒狀構(gòu)件42插入其中。而且，即使在不抜出芯棒11的情況下，若芯棒11形成為筒狀，也能夠使棒狀構(gòu)件42插入該筒狀的內(nèi)部。這些多個(gè)棒狀構(gòu)件42以向上方突出的方式配置在基座44的上表面，基座44形成為能夠配置在包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面的大小。另外，也可以將保持構(gòu)件41的棒狀構(gòu)件42的頂端部分形成得較尖鋭。接著，對(duì)第2實(shí)施方式中的制作組織陣列的步驟進(jìn)行說明。首先，將保持構(gòu)件41配置在包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面。使保持構(gòu)件41的棒狀構(gòu)件42插入到卷狀組織片6的軸心部分，將多個(gè)卷狀組織片6排列在包埋皿10內(nèi)并固定。而且，事先將各卷狀組織片6切齊，以使插入的卷狀組織片6的長(zhǎng)度為從包埋皿10的積存部20的內(nèi)底面至包埋框14的上表面的長(zhǎng)度，。此外，也可以在形成基體塊40之后將各卷狀組織片6的長(zhǎng)度切齊。然后，將包埋框14載置于包埋皿10的包埋框載置部22。圖8表示此時(shí)的狀態(tài)。在由保持構(gòu)件41保持有多個(gè)卷狀組織片6的狀態(tài)下，將熔融石蠟注入包埋皿10的積存部20內(nèi)。將熔融石蠟從包埋框14的連通孔28中的各卷狀組織片6彼此的間隙注入。之后，進(jìn)行冷卻，直至熔融石蠟固化。另外，當(dāng)熔融石蠟固化時(shí)，完成在石蠟內(nèi)排列有多個(gè)卷狀組織片6并將該多個(gè)卷狀組織片6包埋起來而成的基體塊40，由于對(duì)基體塊40進(jìn)行切片來制作組織陣列的過程與第I實(shí)施方式同樣，因此，在此省略說明。另外，作為在本實(shí)施方式中使用的包埋劑，列舉了石蠟為例，但是，除此之外，能夠列舉出火棉、聚酯樹脂、聚酰胺樹脂、(甲基)丙烯酸樹脂等非親水性包埋劑、聚乙二醇、明膠等親水性包埋劑、及將上述各材料的多種混合起來而成的包埋劑。作為優(yōu)選的包埋劑，能夠列舉出石蠟及含有聚乙烯等合成聚合物的添加劑的石蠟等石蠟類。采用本發(fā)明，無論是像上述第I實(shí)施方式那樣的、保持卷狀組織片6的外周面的方法，還是像第2實(shí)施方式那樣的、保持卷狀組織片6的軸心部分的方法，均能夠使用卷狀組織片將其可靠地固定于基體塊，能夠可靠地制作組織陣列。
權(quán)利要求
1.一種組織陣列的制作方法，其用于制作組織陣列，該組織陣列是通過將片狀的組織片卷繞成卷狀而形成的卷狀組織片以陣列狀排列在基板上而成的，其特征在于， 該方法通過如下步驟制作組織陣列 在用于供熔融的包埋劑注入并使其積存起來的容器內(nèi)配置用于以多個(gè)卷狀組織片的軸線方向朝向鉛垂方向的方式保持該多個(gè)卷狀組織片的保持構(gòu)件，并使各卷狀組織片保持于保持構(gòu)件； 將包埋劑注入到容器內(nèi)，從而形成將多個(gè)卷狀組織片以陣列狀排列而成的基體塊； 對(duì)基體塊進(jìn)行切片，以使卷狀組織片成為圓片狀，將該切片設(shè)置在基板上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織陣列的制作方法，其特征在于， 包埋劑為石蠟類。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組織陣列的制作方法，其特征在于， 將形成有多個(gè)直徑至少與卷狀組織片的最小直徑相同的插入孔的彈性構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的外周面。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組織陣列的制作方法，其特征在于， 上述插入孔為多邊形形狀。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組織陣列的制作方法，其特征在于， 將形成有多個(gè)邊長(zhǎng)至少與卷狀組織片的最小直徑相同的格子方框的格子狀構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的外周面。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組織陣列的制作方法，其特征在于， 將插入到多個(gè)卷狀組織片的軸心部分的棒狀保持構(gòu)件用作上述保持構(gòu)件，來保持卷狀組織片的軸心部分。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能夠?qū)⒏鞣N直徑的卷狀的組織片可靠地固定于基體塊的組織陣列的制作方法。一種制作組織陣列的制作方法，該組織陣列是通過將片狀組織片(8)卷繞成卷狀而形成的卷狀組織片(6)以陣列狀排列在基板上而成的，其中，該方法通過如下步驟制作組織陣列在供熔融的包埋劑注入并使其積存起來的容器(10)內(nèi)配置用于以多個(gè)卷狀組織片(6)的軸線方向朝向鉛垂方向的方式保持該多個(gè)卷狀組織片(6)的保持構(gòu)件(16)，并使各卷狀組織片(6)保持于保持構(gòu)件(16)，將包埋劑注入到容器(10)內(nèi)，形成將多個(gè)卷狀組織片(6)以陣列狀排列而成的基體塊(40)，對(duì)基體塊(40)進(jìn)行切片，以使卷狀組織片(6)成為圓片狀，將該切片設(shè)置在基板上。
文檔編號(hào)G01N1/28GK103038622SQ20118003734
公開日2013年4月10日 申請(qǐng)日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月29日
發(fā)明者中澤良昭, 高野正喜, 荒川雅彥, 成竹浩二 申請(qǐng)人:櫻花精機(jī)株式會(huì)社, 日本櫻花檢驗(yàn)儀器株式會(huì)社