專利名稱：血栓心脈寧片有效成分的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域，具體涉及一種血栓心脈寧片的檢測方法。
背景技術(shù)：
中藥成分復雜，特別是中藥復方往往含多類、多種成分，構(gòu)成了一個非常復雜的系統(tǒng)。目前，新的有效部位中藥制劑和現(xiàn)代復方中藥制劑的研發(fā)不斷增多，新的工藝及多種不同提取方式并用于藥品的研究及生產(chǎn)。隨著現(xiàn)代分析測試技術(shù)、設(shè)備儀器的迅猛發(fā)展，中藥的含量測定、色譜鑒別成為檢測的重要手段。但目前一般只建立某一指標化學成分的含量測定或鑒別，針對上述多種新工藝同時應用的情況，僅建立某單一成分的含量測定或鑒別在很大程度上帶有較大的片面性。血栓心脈寧片具有益氣活血，開竅止痛功能，用于氣虛血瘀所致的中風、胸痹，癥見頭暈目眩、半身不遂、胸悶心痛、心悸氣短；缺血性中風恢復期、冠心病心絞痛見上述癥候
者ο血栓心脈寧片為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯棕色；氣微香，味微苦。其處方是川芎500g，丹參500g，槐花250g，水蛭125g，毛冬青250g，人工麝香 1. 25g，人工牛黃12. 5g，人參莖葉皂苷25g，冰片2. 5g，蟾酥1. 25g ；制法以上十味，取人工麝香、冰片、人工牛黃、人參莖葉總皂苷、蟾酥粉碎成細粉； 丹參、毛冬青用80%乙醇回流提取2次，每次1. 5小時，濾過，合并鋁濾液，回收乙醇，濃縮至相對密度為1. 28 1. 30 (600C )的稠膏，藥渣備用。川芎提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油備用，蒸餾后水溶液另器收集，藥渣備用。水蛭與丹參、毛冬青醇提后的藥渣合并，加水煎煮2小時，濾過，濾液放置，藥渣與上述川芎藥渣合并，加水煎煮2小時，濾過，濾液與上述各煎液合并， 濃縮至相對密度為1. 28 1. 30 (600C )的稠膏，與丹參、毛冬青醇提取膏混合，于60 70°C 干燥，粉碎成細粉；取槐花加適量水，用飽和氫氧化鈣水溶液調(diào)節(jié)PH值至8 9，加熱至微沸，保溫30分鐘，趁熱濾過，藥渣如上法再提取2次，合并濾液，60 70°C攪拌加入鹽酸，調(diào)節(jié)PH值至4 5，靜置1 2小時，抽濾上清液，沉淀用適量水洗3 4次，60°C減壓干燥， 粉碎成細粉，與上述各細粉混勻，制粒，干燥，加入適量滑石粉，硬脂酸鎂，羧甲淀粉鈉，噴加川彎揮發(fā)油，混勻，壓制成1000片，包薄膜衣，即得。每片重0.40g; 口服。一次2片，一日3 次。方中以辛溫、入肝膽經(jīng)，行氣開郁，祛風燥濕，活血止痛的川芎及苦微溫，入心肝經(jīng)，活血祛瘀，安神寧心之痛，養(yǎng)血的丹參共為君藥。臣以毛冬青、水蛭、槐花、人工麝香，活血化瘀，開竅醒神、通絡止痛。佐以冰片、人工牛黃、人參莖葉皂苷三藥佐君臣活血化瘀，開竅醒神，通絡止痛，清心肝堅腎水，治標為主，兼顧本虛及郁化熱之勢。使以蟾酥，引藥直達病所，強身止痛，通行經(jīng)絡。血栓心脈寧片原來檢測方法中對臣藥的鑒別及含量測定方面僅有對槐花的鑒別及含量測定，但同為方中臣藥的人工麝香并沒有鑒別方法，而臣藥是輔助君藥加強治療主病和主證的藥物，且因人工麝香價格昂貴，如沒有相應的檢測手段容易造成不法企業(yè)不填或少填人工麝香，使得僅對槐花的鑒別及含量測定在很大程度上帶有較大的片面性，不能全面的反映血栓心脈寧片重要成份的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種血栓心脈寧片有效成分的檢測方法，以解決目前檢測方法中存在的對臣藥檢測方法不全面的問題。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是，包括如下鑒別方法和含量測定方法(一)鑒別方法槐花的薄層色譜鑒別取本品6片，研細，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，取Iml，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取蘆丁對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法)試驗，吸取上述三種溶液各4μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 1 1為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細，加乙醚40ml冷浸1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對照品適量，加無水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液；照氣相色譜法試驗，DB-FFAP毛細管柱柱長為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定；記錄供試品色譜中與對照品色譜峰保留時間相同的色譜峰；(二)含量測定方法槐花色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1%乙酸溶液7 14 79為流動相；檢測波長為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計算應不低于 2000 ；對照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細，取約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明優(yōu)點是規(guī)范了血栓心脈寧片的檢測方法，通過建立對人工麝香的鑒別，并配合原有的槐花的鑒別及含量測定，能更全面的檢測臣藥的成分和其配伍，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
具體實施例方式血栓心脈寧片由吉林華康藥業(yè)股份有限公司按背景技術(shù)中處方和工藝生產(chǎn)提供。包括如下鑒別方法和含量測定方法(一 )鑒別方法取本品6片，研細，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml 溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液， 取1ml，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取蘆丁對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，中國藥典2010年版一部附錄VI B,吸取上述三種溶液各4 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 1 1為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細，加乙醚40ml冷浸1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加無水乙醇^iil
使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對照品適量，加無水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液； 照氣相色譜法試驗、中國藥典2010年版一部附錄VI E，DB-FFAP毛細管柱柱長為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各 Iy 1，注入氣相色譜儀，測定；記錄供試品色譜中與對照品色譜峰保留時間相同的色譜峰。( 二)含量測定方法槐花照高效液相色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI D測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1%乙酸溶液7 14 79為流動相；檢測波長為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計算應不低于 2000 ；對照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細，取約0. 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含槐花以無水蘆丁(C27H3tlO16)計，不少于12. Omgo試驗例采用氣相色譜法鑒別人工麝香中的麝香酮。Agilent 7890A氣相色譜儀，DB-FFAP毛細管柱柱長為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘，F(xiàn)ID檢測器；按本發(fā)明方法制備供試品溶液和麝香酮對照品溶液，同法制備不含人工麝香的陰性對照溶液，5批次樣品供試品色譜中，均呈現(xiàn)與對照品色譜峰保留時間相同的色譜峰，陰性無干擾。
權(quán)利要求
1. 一種血栓心脈寧片有效成分的檢測方法，包括如下槐花鑒別方法和含量測定方法 槐花鑒別方法取本品6片，研細，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml溶解， 用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，取lml，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取蘆丁對照品，加甲醇制成每 Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法)試驗，吸取上述三種溶液各4μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 :1 :1為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；槐花含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1% 乙酸溶液7 14 79為流動相；檢測波長為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計算應不低于2000 ；對照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細，取約0. 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，即得；其特征在于還包括人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細，加乙醚40ml冷浸1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對照品適量，加無水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液；照氣相色譜法試驗，DB-FFAP毛細管柱柱長為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5Mm，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至 250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各 μ ，注入氣相色譜儀， 測定；記錄供試品色譜中與對照品色譜峰保留時間相同的色譜峰。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種血栓心脈寧片有效成分的檢測方法，屬于中藥的檢測領(lǐng)域。通過建立對人工麝香的鑒別，并配合原有的槐花的鑒別及含量測定，規(guī)范了血栓心脈寧片的檢測方法，能更全面的檢測臣藥的成分和其配伍，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
文檔編號G01N30/90GK102507843SQ20111035741
公開日2012年6月20日 申請日期2011年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月13日
發(fā)明者劉傳貴, 劉艷秋, 洪梅, 金立群, 閆智力 申請人:吉林華康藥業(yè)股份有限公司