專利名稱：毒品四合一聯(lián)合檢測試卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，同時(shí)可用于公安系統(tǒng)、軍隊(duì)征兵、戒毒所、勞教所、家庭監(jiān)測、社區(qū)戒毒、等行政部門。
背景技術(shù)：
全球性的毒品泛濫已成為危害人民健康和影響社會(huì)穩(wěn)定的重要因素之一。國內(nèi)外都在尋找一種簡易、快速、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方法，以便在特定場合(如征兵、娛樂場所等)進(jìn)行普查，達(dá)到防止毒品進(jìn)一步蔓延的目的。目前毒品檢測主要是以金標(biāo)法進(jìn)行尿液檢測為主，主要特點(diǎn)是快速、方便、便于攜帶、準(zhǔn)確率高等特點(diǎn)。尿液中單一毒品的測定較普遍采用的方法有單克隆抗體單片定性法、薄層層析色譜法、氣相色譜法、氣-質(zhì)聯(lián)用法。這些方法均在不同程度上存在交叉反應(yīng)、干擾因素多和前處理過程復(fù)雜等不足之處。免疫膠體 金標(biāo)記技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物或顯色劑，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。由于它不存在內(nèi)源酶干擾及放射性同位素污染等問題，且利用不同顆粒大小的膠體金還可以作雙重甚至多重標(biāo)記，使定位更加精確。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能同時(shí)檢測尿樣中是否含有嗎啡、冰毒、搖頭丸、K粉這四種成分，且能準(zhǔn)確、快速、簡單、易攜帶的產(chǎn)品。本發(fā)明的整體技術(shù)構(gòu)思是膠體金檢測試卡是一種簡便、快速、價(jià)格低廉易于操作的檢測方法，膠體金的顏色可用肉眼辨別，無需二級(jí)放大即可直接觀察結(jié)果，抗原抗體具有高特異性。將高度特異性的抗體抗原反應(yīng)與免疫膠體金層析技術(shù)相結(jié)合，制備四種毒品的聯(lián)合檢測試卡，彌補(bǔ)了單一測試卡操作繁瑣、費(fèi)用昂貴等缺點(diǎn)。此聯(lián)合試卡具有快速、靈敏、操作簡便、成本低、無需專業(yè)人員檢測的特點(diǎn)。毒品四合一聯(lián)合檢測試卡實(shí)施方式(I)將嗎啡等四種毒品的抗原免疫BALB/C鼠，制備單克隆抗體，并純化抗體。(2)制備金顆粒，膠體金標(biāo)記抗體，包被抗原、抗體，制備聯(lián)合試卡。膠體金試卡制備方法為取氯金酸制成大小合適的金顆粒，并將嗎啡等四種抗原分別用金顆粒進(jìn)行標(biāo)記；抗原包被將標(biāo)記膠體金抗原包被在玻璃纖維素膜上，真空干燥；抗體包被用自動(dòng)噴膜機(jī)將抗嗎啡等四種的McAb和羊抗鼠IgG抗體包被在醋酸纖維素膜上，真空干燥；將兩種膜以一定順序貼于磁白板上。試卡包含塑料板和毒品檢測試紙；塑料板包括板身及板蓋，板身內(nèi)部設(shè)有4個(gè)與毒品檢測試紙對(duì)應(yīng)的凹槽，板身正面有結(jié)果判別說明、檢測對(duì)象說明和結(jié)果顯示欄，毒品檢測試紙4條固定于板身內(nèi)部。試紙條包含檢測樣本區(qū)域，檢測結(jié)果顯示區(qū)域和吸水區(qū)域。本試卡能同時(shí)檢測尿樣中是否含有嗎啡、冰毒、搖頭丸、K粉的成分，準(zhǔn)確性和可靠性極高，而且檢測過程簡單，速度快，方便攜帶。一種毒品四合一聯(lián)合檢測板，其特征在于包括塑料板、毒品檢測試紙；塑料板包括板身和板蓋兩部分，板身和板蓋連接方式為插接；板身內(nèi)部設(shè)有與毒品檢測試紙對(duì)應(yīng)的凹槽，板身正面有結(jié)果判別說明、檢測對(duì)象說明和結(jié)果顯示欄；毒品檢測試紙固定于板身內(nèi)部，是由底板、吸水板、硝酸纖維素膜、單克隆抗體金標(biāo)墊、樣品吸液層、MAX線組成，底板中部為硝酸纖維素膜，底板一端端頭為吸水板，另一端端頭為樣品吸液層，硝酸纖維素膜兩端分別與吸水板和單克隆抗體金標(biāo)墊相互交疊連接，在單克隆抗體金標(biāo)墊上壓有樣品吸液 層。
權(quán)利要求
1.毒品四合一聯(lián)合檢測試卡的制備方法，其特征在于它包括如下工藝步驟 (1)用重氮化法將半抗原嗎啡、冰毒、搖頭丸、K粉分別偶聯(lián)到載體蛋白上，形成偶聯(lián)抗原。
(2)將(I)中的嗎啡等四種毒品的偶聯(lián)抗原免疫BALB/C鼠，用ELISA法測定血清抗體效價(jià)，效價(jià)達(dá)到要求后即可用于細(xì)胞融合。
(3)制備雜交瘤細(xì)胞。
(4)嗎啡等四種毒品單克隆抗體的制備、純化。
(5)嗎啡等毒品四合一聯(lián)合檢測試卡的制備取氯金酸制成大小合適的金顆粒，并將(I)中偶聯(lián)的嗎啡等四種抗原分別用金顆粒進(jìn)行標(biāo)記；抗原包被將標(biāo)記的膠體金抗原包被在NC膜上，真空干燥；用自動(dòng)噴膜機(jī)將⑷中的抗嗎啡等四種的McAb和羊抗鼠IgG抗體包被在玻璃纖維素膜上，真空干燥；將兩種膜以一定順序貼于磁白板上。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的毒品四合一聯(lián)合檢測試卡的制備方法，其特征在于(I)嗎啡等四種毒品半抗原的偶聯(lián)；(4)嗎啡等四種毒品單克隆抗體的制備、純化；(5)嗎啡等四種毒品四合一聯(lián)合檢測試卡的制備。試卡包含塑料板和毒品檢測試紙；塑料板包括板身及板蓋，板身內(nèi)部設(shè)有4個(gè)與毒品檢測試紙對(duì)應(yīng)的凹槽，板身正面有結(jié)果判別說明、檢測對(duì)象說明和結(jié)果顯示欄，毒品檢測試紙4條固定于板身內(nèi)部。試紙條包含檢測樣本區(qū)域，檢測結(jié)果顯示區(qū)域和吸水區(qū)域。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物與新醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明的整體技術(shù)構(gòu)思是膠體金檢測試卡是一種簡便、快速、價(jià)格低廉易于操作的檢測方法，膠體金的顏色可用肉眼辨別，無需二級(jí)放大即可直接觀察結(jié)果，抗原抗體具有高特異性。將高度特異性的抗體抗原反應(yīng)與免疫膠體金層析技術(shù)相結(jié)合，制備四種毒品的聯(lián)合檢測試卡，彌補(bǔ)了單一測試卡操作繁瑣、費(fèi)用昂貴等缺點(diǎn)。此聯(lián)合試卡具有快速、靈敏、操作簡便、成本低、無需專業(yè)人員檢測的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/558GK102879568SQ20111020039
公開日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2011年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月12日
發(fā)明者李彬 申請(qǐng)人:李彬