專利名稱：：上濃縮有機微對象以便進行顯微成像的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：在第一方面中，本發(fā)明涉及一種分析包含有機微對象的樣本流體的方法。在第二方面中，本發(fā)明涉及一種用于分析包含有機微對象的樣本流體的裝置或系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
：本發(fā)明涉及微生物學(xué)領(lǐng)域，尤其是涉及流體樣本的微生物分析。通常，這樣的分析旨在確定樣本中特定有機微對象的存在/不存在、量化它們的數(shù)量或濃度，并且在一些情況下在不同的細節(jié)水平識別未知的微生物。術(shù)語“有機微對象”可以指生物起源的各種各樣的微觀對象中的任何對象，尤其是微生物和細胞。微生物包括細菌，真菌，古細菌，原生生物，綠藻，諸如浮游生物、渦蟲和阿米巴之類的動物。除了細菌之外，細胞包括植物細胞和哺乳動物細胞，例如血細胞和組織細胞。除了諸如唾液或其他體液的測試之類的臨床診斷之外，微生物分析例如在食品和飲料、制藥、個人護理產(chǎn)品和環(huán)保部門中具有重要的工業(yè)應(yīng)用。當(dāng)前的標(biāo)準(zhǔn)測試方法基于細胞培養(yǎng)并且得到結(jié)果需要數(shù)天至數(shù)周的時間，這取決于樣本和微生物的類型。需要具有增加的通量(throughput)的微生物分析。這種快速方法的一個實例是AESChemunex(www.aeschemunex.com)提出的方法。它們的FDA批準(zhǔn)的kanRDI系統(tǒng)提供了從樣本到結(jié)果的90分鐘的通量，并且通過過濾產(chǎn)品的激光掃描血細胞計數(shù)執(zhí)行分析。該方法的步驟是過濾流體樣本，利用熒光染料對可能存在的微生物污染物染色，利用大的激光斑(5-10Mffl)光學(xué)掃描過濾器的表面以便檢測可能存在的微生物污染物，以及利用具有自動化鏡臺的高分辨率(0.5Mffl)顯微鏡對污^iIUMIlWISJllcj^ftOJ.-L.Drocourt,P.Desfetes,J.Sanghera,Apparatusandprocessforrapidandultrasensitivedetectionandcountingofmicroorganismsbyfluorescence,EP0713087Bl(1994)中描述了該技術(shù)。fluXXion(www.fluxxion.com)提供了一種改進的過濾技術(shù)。該技術(shù)基于光刻上定義的微篩，這些微篩具有單一良好定義的孔隙尺寸(低至0.2Mffl),是光學(xué)平坦的(這從后續(xù)光學(xué)掃描步驟的觀點來看是有利的并且也導(dǎo)致降低的后向散射)且薄的，以便提供低流阻以及因而與從諸如纖維素、尼龍、聚氯乙烯、聚砜、聚碳酸酯和聚酯之類的多孔材料制成的常規(guī)膜過濾器相比提供更高的過濾通量。低分辨率成像(經(jīng)由激光斑掃描)和高分辨率成像(利用顯微鏡)的兩個步驟的可替換方案是以高分辨率對整個過濾區(qū)域成像。為了具有合理的過濾通量，事實證明，過濾區(qū)域比具有所需的分辨率的標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡物鏡的視場大得多。例如，0.5Mffl的分辨率典型地需要具有直徑為0.5mm的視場的40X/NA0.65物鏡。典型的過濾器具有數(shù)mm的直徑，因此大約比顯微鏡物鏡大一個數(shù)量級。顯然，這要求掃描過濾區(qū)域，這是耗時的且需要具有高精度的復(fù)雜機械部分。在相關(guān)的上下文中，快速地檢測病原體和測試抗生素耐藥性/敏感性可能對于具有傳染性疾病的患者的正確治療是至關(guān)重要的?；颊邩颖镜慕?jīng)典培養(yǎng)技術(shù)典型地從采樣到最終結(jié)果花費數(shù)天，并且必須在大型中心微生物實驗室中進行。在該時間期間，患者通常不可能保持不被治療而不遭受嚴(yán)重后果，這將執(zhí)業(yè)醫(yī)生限制到使用廣泛的抗菌譜的猜謎游戲。這不僅在經(jīng)濟上是昂貴的，而且也增加醫(yī)院環(huán)境中的抗抗生素細菌菌株問題。通過使用微流體設(shè)備上的自動化和集成的測試可以增進速度并且可以降低成本。通過減小微流體設(shè)備的尺寸以便實現(xiàn)小的試劑體積并且允許使用一次性使用的塑料盒可以進一步增進速度并且可以進一步降低成本。微流體系統(tǒng)通常包括可以將樣本注入其中的流體系統(tǒng)。它可以進一步包含用于使細菌豐富并且用于將細菌與人類細胞分離的構(gòu)件。人類細胞可以以這樣的方式分開地檢查，所述方式在不同情況下將干擾細菌分析。一些微流體設(shè)備適于針對病毒基因篩選哺乳動物細胞。這樣的設(shè)備可能能夠檢測所有已知類型的微觀病原體。微流體技術(shù)例如通過利用例如實時PCR考察基因表達譜或者通過在微流體設(shè)備中培養(yǎng)并且分析單細菌分裂而對于快速地診斷傳染性疾病具有巨大的潛力。存在用于將細菌與人類細胞分離的各種不同的微流體技術(shù)。實例包括電泳(參見A.K.BalasubramanianjK.A.Sonijetal.,Amicrofluidicdeviceforcontinuouscaptureandconcentrationofmicroorganismsfrompotablewater,LabonaChip,vol.7，pp.1315-1321，2007)、介電泳(參見LJ.Yang,P.P.Banadajetal.，Amultifunctionalmicro-fluidicsystemfordielectrophoreticconcentrationcoupledwithimmuno-captureoflownumbersoflisteriamonocytogenes,LabonaChip,vol.6，pp.896-905，2006)和磁珠分離(參見Y.K.ChojJ.G.Leejetal.，One-steppathogenspecificDNAextractionfromwholebloodonacentrifugalmicrofluidicdevice,LabonaChip,vol.7，pp.565-573，2007)。然而，微流體設(shè)備通常具有非常有限的樣本通量，典型地大約為數(shù)μ/min。出于這個原因，存在與例如來自口腔或鼻腔拭子的通常在例如Iml的液體中只包含100個或更少的相關(guān)細菌的真實患者樣本，或者包含數(shù)ml液體(典型地為5-10ml)和僅僅一些自由浮動細菌的血液樣本的嚴(yán)重失配。典型地，真實患者樣本在l_5ml的樣本液體中只包含總共10-100個相關(guān)細菌。因此，使用樣本的僅僅一定份額不是一個選項。然而，ml體積通常不適合微流體設(shè)備。因此，需要宏觀流體樣本體積與微流體系統(tǒng)之間的連接。除了上述用于在μι體積內(nèi)分離細菌和人類細胞的微流體技術(shù)之外，也存在在實驗臺上這樣做的許多方式。一種簡單的方法是使用來自例如SartoriusStedim(www.sartorius-stedim.com)、Whatman(www.whatman.com)或者Millipore(www.millipore.com)的注射器過濾器或離心過濾器。大孔隙尺寸捕獲人類細胞，而更小的孔隙捕捉病原體。Wiegum禾口同事們(S.J.WuandC.I.Kado,PreparationofmilksamplesforPCRanalysisusingarapidfiltrationtechnique,JournalofAppliedMicrobiology,vol.96，pp.1342-1346,2004)將過濾器集成到PMMA盒中并且過濾出細胞，然后在膜上分析這些細胞。在這里，流速相當(dāng)高，為250μ1/πη-750μ1/πη，但是在過濾膜上捕獲的細胞未轉(zhuǎn)移到另一個液體體積以供進一步分析。mi和Kado使用過濾器以使樣本中的細菌DNA豐富(S.J.WuandC.I.Kado,PreparationofmilksamplesforPCRanalysisusingarapidfiltrationtechnique,JournalofAppliedMicrobiology,vol.96，pp.1342-1346，2004)。這些作者使用具有0.4Mffl孔隙尺寸的過濾器捕獲來自牛奶樣本的細菌。然后，利用裂解緩沖液處理具有細菌的膜，并且DNA隨后用于PCR。該非常簡單的技術(shù)具有大約每ml牛奶10菌落形成單位(CFU)的靈敏度。為了進行DNA分析，也存在來自SIRS-Lab(www.sirs-lab.com)的將細菌與人類DNA分離的特殊離心過濾器。然而，盡管在實驗臺上是高效的，但是上面的技術(shù)中沒有一種直接連接到微流體芯片。其他的分析方法包括熒光激活細胞分類(FACS)或者磁激活細胞分類(MACS)，其中利用用于特定菌株的抗體對細菌加標(biāo)簽并且將其選出。FACS機器可以具有相當(dāng)高的通量，但是是大而復(fù)雜的儀器并且需要利用抗體加特定標(biāo)簽。結(jié)合到例如硅膠磁珠的DNA或者加標(biāo)簽的細胞的磁性分離可以用來將病原體或病原體DNA轉(zhuǎn)移到漏斗結(jié)構(gòu)中的小得多的體積。然而，珠和樣本的孵化仍然必須發(fā)生在大的體積內(nèi)，這是耗時的。此外，結(jié)合到細胞或DNA的磁珠本身的轉(zhuǎn)移在微流體系統(tǒng)中也可能是成問題的。本發(fā)明的目的是減少對最初包含在樣本流體中的有機微對象成像所需的總時間。
發(fā)明內(nèi)容依照本發(fā)明的第一方面，分析樣本流體的方法包括步驟-通過在總時間T1內(nèi)從微對象移除體積為V1的樣本流體而上濃縮(up-concentrate)微對象；-將微對象浸沒到轉(zhuǎn)移流體中；或者讓微對象留在樣本流體的剩余部分中，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；-在總時間T3內(nèi)通過過濾器過濾體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象；以及-產(chǎn)生在過濾器上積聚的微對象的圖像；其中上濃縮步驟的通量V1Zt1大于過濾步驟的通量ν3/τ3。因此，上濃縮步驟與過濾步驟相比是快速的。本發(fā)明因而提出了一種雙步驟方法，其中在過濾器上收集微對象之前使用快速技術(shù)從微對象移除樣本流體的部分。當(dāng)然，可以擴展該雙步驟方法以包含附加的步驟。體積V1可以是樣本流體的總體積或者其一定份額。類似地，體積V3可以是轉(zhuǎn)移流體的總體積或者其一定份額。通量V1Zt1和通量ν3/τ3是平均通量，因為它們可以通過分別在時間T1和T3上對瞬時變化率進行平均而分別從與樣本流體關(guān)聯(lián)和與轉(zhuǎn)移流體關(guān)聯(lián)的瞬時通量(即從瞬時體積變化率)計算。對應(yīng)的瞬時通量分別在上濃縮步驟和過濾步驟期間可以是但不一定必須是基本上恒定的。通量V1Zt1可以例如是通量V3/T3的超過3、10、30、100、300、1000或3000倍。浸沒步驟花費的時間T2與上濃縮步驟相比可以忽略。例如，浸沒步驟花費的時間T2可以小于上濃縮步驟花費的時間T3的10%、3%或者1%。因此，與其中通過經(jīng)由過濾器過濾整個樣本流體而從微對象移除基本上所有樣本流體的常規(guī)方法相比，該過程的總時間可以減少。等價地說，所述過濾器與常規(guī)方法中使用的過濾器相比可以具有更低的通量，該更低的通量由需要流經(jīng)過濾器的更小的樣本流體量補償。給定相同的時間量，所述過濾器因而可以例如更小，以便適合光學(xué)顯微鏡的視場，避免掃描過濾器的需要并且因而進一步減少總的時間量。轉(zhuǎn)移流體可以具有樣本流體初始體積的小于20%、小于10%、小于5%或者小于1%的體積。在移除步驟中，可以從微對象移除大于70%、大于90%、大于95%或者大于99%的樣本流體。因此，在過濾步驟之前，相當(dāng)程度地增大了微對象的濃度。上濃縮、浸沒、過濾和產(chǎn)生圖像的步驟花費的時間！^+!^+!^+!^可以短于由過濾器過濾整個樣本流體并且對該過濾器上的微對象成像花費的時間。在這里，應(yīng)當(dāng)理解的是，使用了相同的成像方法。由過濾器過濾的轉(zhuǎn)移流體的體積V3可以遠小于從微對象移除的體積％。例如，V3可以小于以下之一0.3*V1,0.1*VijO.03*VijO.01*VijO.003*V1和0.001*V10因此，可以相當(dāng)?shù)販p少所述方法的總時間I\+T2+T3+T4。事實上，快速的上濃縮步驟中移除的樣本流體的份額越大，則可以預(yù)期所述過程的總時間越短。所述方法可以包括步驟-通過預(yù)過濾器預(yù)過濾樣本流體，該預(yù)過濾器至多滯留(retain)微對象的不顯著的份額；該預(yù)過濾步驟在過濾步驟之前執(zhí)行。因此，可以事先過濾掉大于感興趣微對象(例如細菌)的對象(例如哺乳動物細胞)，從而有利于后續(xù)的分析。所述過濾器可以是第二過濾器，并且上濃縮步驟可以涉及-通過第一過濾器過濾樣本流體，從而在第一過濾器上積聚微對象。依照該實施例，上濃縮步驟也通過過濾執(zhí)行。盡管第二過濾器可以特別地適于過濾小的體積，但是第一過濾器可以特別地適于過濾大的體積。例如，第一過濾器可以大于第■~過濾器ο所述方法可以進一步包括-溶解第一過濾器。一旦第一過濾器被溶解，微對象可以更容易地轉(zhuǎn)移到第二過濾器。第一過濾器可以由例如轉(zhuǎn)移流體溶解。浸沒步驟可以涉及-轉(zhuǎn)移流體沿著第一過濾器流動；或者-樣本流體的部分回流通過第一過濾器。在后一種情況下，即在樣本流體的部分回流通過第一過濾器的情況下，轉(zhuǎn)移流體由樣本流體提供。在這兩種情況下，轉(zhuǎn)移流體本身將攜帶微對象。然后，可以將轉(zhuǎn)移流體引導(dǎo)到第二過濾器。上濃縮步驟可以涉及-蒸發(fā)體積為V1的樣本流體；和/或-將微對象吸引到收集區(qū)；和/或-離心分離(centrifugalize)樣本流體。因此，提供了濃縮微對象的可替換方式。產(chǎn)生圖像可以涉及-產(chǎn)生微對象的光學(xué)圖像；或者-掃描微對象。這可以通過本領(lǐng)域中已知的任何方法完成，使用例如上面描述的AESChemimex的方法。所述方法可以進一步包括-將染料釋放到樣本流體或者釋放到轉(zhuǎn)移流體。因此，可以在上濃縮過程之前、期間或者之后對微對象染色。特別是在要溶解第一過濾器的情況下，可以將染料嵌入到第一過濾器中?？商鎿Q地，染料可以包含于第一過濾器的涂層中?？商鎿Q地，它可以包含于預(yù)過濾器(如果存在的話)中或者包含于第二過濾器中，或者它可以以其他方式釋放。所述方法可以進一步包括-將用于使染料失活的失活劑釋放到樣本流體或者釋放到轉(zhuǎn)移流體。失活劑可以嵌入到第一過濾器中或嵌入到第二過濾器中，或者可以以其他方式釋放。依照本發(fā)明第二方面的裝置或系統(tǒng)包括-用于通過在總時間T1內(nèi)從微對象移除體積為V1的樣本流體而上濃縮微對象的構(gòu)件；-用于將微對象浸沒到轉(zhuǎn)移流體中，或者用于讓微對象留在樣本流體的剩余部分中的構(gòu)件，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；-用于在總時間T3內(nèi)通過過濾器過濾體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象的構(gòu)件；以及-用于產(chǎn)生在過濾器上積聚的微對象的圖像的構(gòu)件；其中用于上濃縮的構(gòu)件的通量V1Zt1大于過濾器的通量ν3/τ3。因此，可以減少總的測定(assay)時間。所述系統(tǒng)或裝置可以包括用于產(chǎn)生過濾器上積聚的微對象的光學(xué)圖像的光學(xué)顯微鏡。所述過濾器可以是第二過濾器，并且用于上濃縮的構(gòu)件可以包括用于滯留微對象的第一過濾器，第一過濾器具有比第二過濾器更大的面積。在本文中，術(shù)語“面積”具有本領(lǐng)域中賦予它的通常含義，即它指的是過濾器表面的暴露于進入該過濾器的流體的部分。過濾器表面的預(yù)期不暴露于流入流體的部分不對過濾器的面積產(chǎn)生貢獻。例如，第一過濾器的面積可以是第二過濾器的面積的超過3、10、30、100、300、1000、3000或10000倍。因此，第一過濾器可以具有比第二過濾器大得多的最大可能通量。第一過濾器和第二過濾器可以具有相同的孔隙尺寸和/或相同的孔隙結(jié)構(gòu)，例如相同的孔隙幾何結(jié)構(gòu)。例如，第一過濾器和第二過濾器可以由相同種類的材料制成。第一過濾器和第二過濾器可以是基本上僅在其面積方面不同的膜過濾器，第一過濾器具有比第二過濾器更大的面積。第一過濾器和第二過濾器可以是僅在其直徑方面不同的圓形膜過濾器，第一過濾器具有比第二過濾器更大的直徑。所述過濾器可以是第二過濾器，并且用于上濃縮的構(gòu)件可以包括用于滯留微對象的第一過濾器，第一過濾器具有比第二過濾器更高的最大通量。例如，第一過濾器可以具有比第二過濾器更大的有效過濾面積?？商鎿Q地或者此外，用于上濃縮的構(gòu)件可以例如包括用于離心分離樣本流體的離心分離機，或者用于至少蒸發(fā)樣本流體的相當(dāng)部分的蒸發(fā)器，或者用于將微對象吸引到收集區(qū)的吸引器。第一過濾器可以包括用于對微對象染色的染料。該染料可以包含于過濾器的涂層中。當(dāng)將該過濾器暴露于要分析的液體時，染料將被釋放到該液體中。在可溶解過濾器的情況下，染料可以嵌入到該過濾器中。它將在過濾器溶解時釋放。此外，染料可以包含于可溶解過濾器的涂層中，并且該過濾器可以包含用于使嵌入到過濾器中的染料失活的物質(zhì)。第一過濾器可以包括可在有機溶劑中溶解的有機聚合物或者穿孔鋁箔。因此，可以在微對象在第一過濾器上積聚之后溶解第一過濾器。所述系統(tǒng)或裝置可以包括包含所述過濾器的微流體芯片。該微流體芯片可以具有可以通過其對微對象成像的光學(xué)窗口。它可以進一步適于對微對象執(zhí)行其他測定，例如化學(xué)測定。圖1示意性地示出了使用第一過濾器和注射器積聚微對象。圖2示意性地示出了使用蒸發(fā)積聚微對象。圖3示意性地示出了通過朝表面吸引微對象而積聚微對象。圖4示意性地示出了用于對第二過濾器上的微對象成像的設(shè)置。圖5為分析包含有機微對象的樣本流體的方法的流程圖。圖6示意性地示出了一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的直ο圖7示意性地示出了另一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的裝置。圖8示意性地示出了另一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的裝置。圖9示意性地示出了另一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的裝置。圖10示意性地示出了另一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的裝置。圖11示意性地示出了另一個用于濃縮微對象并且用于將它們轉(zhuǎn)移到另一個設(shè)備的裝置。圖12示出了細菌的實驗確定的數(shù)量和濃度。圖13示出了利用不同的過濾器收集的DNA的量。圖14示意性地示出了用于分離細菌和人類細胞的方法。圖15示出了過濾過程期間不同階段的金黃色葡萄球菌細菌的菌落(colony)形成單位(CFU)的數(shù)量。圖16示出了過濾過程期間不同階段的金黃色葡萄球菌細菌的菌落形成單位(CFU)的數(shù)量。具體實施例方式除非另有規(guī)定，不同附圖中出現(xiàn)的相同或相似的附圖標(biāo)記指的是相同或相似的部件。依照本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施例，一種用于快速的微生物分析的方法包括用于制備樣本、用于上濃縮、用于利用(熒光)染料對微生物染色、用于顯微成像以及用于圖像分析的步驟，其中用于上濃縮的步驟包括第一步驟，其用于利用大面積過濾器進行過濾；以及第二步驟，其用于將濾渣(包括可能存在的微生物)收集到小面積上，使得該小面積匹配具有所需的分辨率的用于顯微成像的顯微鏡物鏡的視場，所述物鏡例如具有0.5mm的視場并且允許以0.5Mm分辨率成像的40X/NA0.65物鏡。該方法允許利用單次捕獲(曝光)進行顯微成像并且因而避免了掃描，同時由于利用大面積過濾器(過濾時間與過濾面積成反比)的第一過濾步驟的原因，總體通量為高。換言之，大體積的樣本流體由于第一過濾器的大表面面積的原因而被快速過濾，并且其后第二過濾也是快速的，而不管第二過濾器的面積為小，因為樣本的體積在第一過濾步驟中減小了(上濃縮)。在第一實施例中，大面積過濾器由可溶解材料制成，并且在第二步驟中，溶劑用于溶解不影響細菌的過濾器。更精確地說，大面積過濾器由不可在要檢查的流體(通常為基于水的)中溶解、但是可在其他溶劑中溶解的材料制成。優(yōu)選地，該材料不影響(染色的)細菌。一個實例可以是穿孔鋁箔。該箔不在水中溶解，但是會在醋(稀釋的醋酸)中溶解。醋不溶解細菌。其他實例可以是由受有機溶劑影響的有機聚合物制成的過濾器，所述有機聚合物例如當(dāng)接觸到有機溶劑時分解的有機聚合物。在第一步驟中，流體樣本在大面積過濾器上過濾，并且在第二步驟中，包括細菌的過濾器在第二流體中溶解。得到的液體樣本體積比原始樣本小并且因而可以在相對較短的時間跨度內(nèi)利用不可溶解在第二流體中的小面積過濾器(例如陶瓷過濾器)過濾。在第二實施例中，在第一過濾步驟之后反轉(zhuǎn)泵浦方向，并且將流體的小部分和所有滯留的微生物定向到小面積過濾器。在第三實施例中，在第一過濾步驟之后引發(fā)側(cè)流，從而將濾渣收集到過濾器的子區(qū)域上。在所有這些實施例中，可以在過濾期間將染料(尤其是熒光染料)添加到流體，使得微生物在過濾步驟期間被染色。這樣做的一個優(yōu)選的實施例是將染料包含于所述過濾器中的至少一個中。這樣做存在若干方法(a)將染料作為涂層添加到過濾器。當(dāng)把過濾器暴露于要分析的液體時，該染料被釋放到液體中。(b)在可溶解過濾器(實施例1)的情況下，可以將染料嵌入到該過濾器中。因此，它在該過濾器溶解時釋放。(C)像在(a)中一樣將染料作為涂層而添加，并且像在(b)中一樣添加使嵌入到可溶解過濾器中的染料失活的物質(zhì)。一個優(yōu)點是，當(dāng)過濾器溶解時，染料(除了細菌吸收的染料之外)變得失活，從而沒有在第一過濾步驟之后到達的細菌污染物將被染色。這允許非無菌第二過濾通過。圖1中所示的是一種用于濃縮包含在樣本流體10中的有機微對象12的設(shè)備20。宏觀體積的樣本流體10包含在設(shè)備20的腔室中，如圖Ia中所示。通過朝第一過濾器16推進注射器活塞14，樣本流體10或者至少其相當(dāng)部分(例如至少50%或至少80%或至少90%)被強迫通過過濾器16。微對象12由第一過濾器16滯留并且在第一過濾器16的表面18上積聚(參見圖lb)。因此，從微對象12移除了至少50%或至少80%或至少90%或至少99%的樣本流體10。應(yīng)當(dāng)指出的是，樣本流體10可以包含圖中未示出的可以穿過過濾器16的更小的微對象。在后續(xù)的步驟(未示出)中，將微對象12浸沒到具有比樣本流體10更小的體積的轉(zhuǎn)移流體中。然后，通過第二過濾器32(圖4中表示)過濾轉(zhuǎn)移流體以便在第二過濾器32的表面34上積聚微對象12。轉(zhuǎn)移流體可以由流經(jīng)第一過濾器16的樣本流體10部分或者由另一流體或者由樣本流體10和另一流體的混合物提供。在第二過濾器32上積聚微對象12(參見圖4)之后，它們可以通過任何適當(dāng)?shù)姆椒?例如通過掃描顯微技術(shù))檢測或成像。第一過濾器16可以被設(shè)計成使得從微對象上濃縮超過一半的樣本流體10的步驟比第二過濾器32過濾轉(zhuǎn)移流體的步驟花費更少的時間。這可以例如通過將第一過濾器16選擇得足夠大來實現(xiàn)?，F(xiàn)在參照圖2，示出了在其中樣本流體10為液體的情況下從微對象12移除樣本流體10的全部或相當(dāng)部分的可替換方法。設(shè)備20包括具有側(cè)壁22和底板M的盆狀物。包含微對象12的樣本液體10被引入到該盆狀物20中，如圖加中所示。樣本液體10具有形成樣本液體10與空氣或真空或另一氣體之間的界面的表面沈。在表面沈(蒸發(fā)表面)處，樣本液體10蒸發(fā)。可以加熱樣本液體沈以便加速蒸發(fā)過程?？商鎿Q地或者此外，可以加熱在蒸發(fā)表面沈處接觸樣本液體10的空氣/氣體，或者可以產(chǎn)生沿著蒸發(fā)表面沈的熱空氣/氣體流。隨著樣本液體26的蒸發(fā)，微對象12在盆狀物20的底板M上積聚，如圖2b中所示。在已經(jīng)在上面參照圖1描述的后續(xù)步驟中，將微對象12轉(zhuǎn)移到圖4中所示的第二過濾器32并且對其成像。同樣地，與由第二過濾器32過濾整個樣本液體10相比，所提出的方法可以需要更小的時間總量。圖3示出了在其中樣本流體10為液體的情況下從微對象12移除樣本流體10的全部或相當(dāng)部分的另一種方法。樣本液體10包含在具有透明底板M的盆狀物中。光源觀設(shè)置在底板M之下以便經(jīng)由底板M將光發(fā)射到盆狀物中，如圖3a中所示。光將光敏微生物12吸引到底板M，如圖北中所示，這些微生物在那里積聚?？商鎿Q地，代替使用光源的是，可以跨樣本液體10施加電場以便將帶電微對象(例如帶負電的細菌)吸引到底板24。在圖3c中所示的后續(xù)步驟中，樣本流體10通過宏觀流體出口30釋放，微對象在后面留在底板M上。在已經(jīng)在上面參照圖1描述的后續(xù)步驟中，將微對象12轉(zhuǎn)移到圖4中所示的第二過濾器32并且對其成像。同樣地，與由第二過濾器32過濾整個樣本液體10相比，所提出的方法可以需要更小的時間總量。圖4中所示的是一種用于對在第二過濾器32的表面34上積聚的微對象12成像的示例性成像系統(tǒng)的簡化表示。整個第二過濾器32適合顯微鏡物鏡36的視場，該顯微鏡物鏡在圖中示為單個透鏡，但是通常包括透鏡系統(tǒng)。顯微鏡物鏡36在圖像傳感器38上產(chǎn)生微對象12的光學(xué)圖像。圖像傳感器38可以例如包括電荷耦合器件(CXD)。圖像傳感器38耦合到信息處理設(shè)備(未示出)，該信息處理設(shè)備例如個人計算機，用于處理由圖像傳感器38輸送的輸出信號。圖5為分析包含有機微對象的樣本流體的方法的流程圖。該方法包括連續(xù)的步驟-通過在總時間T1內(nèi)從微對象12移除體積為V1的樣本流體10而上濃縮(Si)微對象；-將微對象浸沒(S2)到轉(zhuǎn)移流體中；或者讓微對象留在樣本流體的剩余部分中，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；-在總時間T3內(nèi)通過過濾器32過濾(S3)體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象；以及-產(chǎn)生(S4)在第二過濾器上積聚的微對象的圖像。在該方法中，上濃縮步驟Sl的通量V1Zt1大于過濾步驟S3的通量V3/T3。上濃縮Si、浸沒S2、過濾S3和產(chǎn)生圖像S4的步驟花費的時間分別為1\、T2,T3和T4。應(yīng)當(dāng)指出的是，上濃縮Si、浸沒S2、過濾S3和產(chǎn)生圖像S4的步驟花費的總時間Ι\+Τ2+Τ3+Τ4可以遠遠短于通過過濾器32過濾整個樣本流體10并且對該過濾器32上的微對象12成像花費的總時間T3，+T4'。現(xiàn)在參照圖6-11，這些圖示出了用于將宏觀(ml)樣本體積減小至可以進一步轉(zhuǎn)移到微流體系統(tǒng)中，同時仍然包含病原體的初始量的微觀體積(μι)的設(shè)備的不同設(shè)計。隨著樣本體積的減小，病原體的濃度大大增加。預(yù)過濾器可以被設(shè)置用于在樣本進入微流體芯片之前分離出人類細胞，以便有利于下游的分析過程并且從細菌和哺乳動物分析獲得最大數(shù)量的相關(guān)數(shù)據(jù)。特別地，預(yù)過濾器可以增大后續(xù)片上(on-chip)分析的靈敏度。此外，提出了將宏觀物理過濾器或者不同孔隙尺寸的膜與微流體系統(tǒng)組合。特別地，提出了將一個或多個宏觀流體過濾器與微流體系統(tǒng)組合，以便從大體積收獲細菌、真菌或酵母并且在微流體體積內(nèi)洗提(elute)，從而使上述病原體的濃度豐富并且減小樣本體積以便進一步處理。優(yōu)選地，本發(fā)明包括至少兩個過濾器，其中第一過濾器具有更大的孔隙尺寸以便過濾出例如下游分析不需要的人類細胞，同時讓感興趣細菌通過，并且第二過濾器具有比感興趣細菌的尺寸更小的孔隙尺寸?，F(xiàn)在參照圖6，示出了一種用于通過從有機微對象移除最大部分的包含有機微對象的樣本流體而減小該流體的體積的宏觀到微流體過濾設(shè)備20。設(shè)備20包括注射器鎖或蓋板46、注射器活塞14、入口58、預(yù)過濾器40(上面的過濾器)、第一環(huán)48、第一過濾器16(下面的過濾器)、第二環(huán)50、出口30、底板或插塞52、微流體入口42和微流體出口44。微流體出口44連接到預(yù)過濾器40下游和下面的過濾器16上游的空間。微流體入口42連接到下面的過濾器16下游的空間。設(shè)備20如下操作。具有0.Iml-IOml量級的體積的樣本流體經(jīng)由入口58引入到預(yù)過濾器40上游的空間。然后，將活塞14向下推進，迫使樣本流體流經(jīng)預(yù)過濾器40并且然后通過下面的過濾器16。預(yù)過濾器40分離出例如大的哺乳動物細胞。下面的過濾器16捕獲例如細菌。下面的過濾器16具有一直延伸通過它的孔隙。因此，例如細菌不會像例如膜基質(zhì)的情況可能的那樣被卡住。下面的過濾器16可以例如為例如fIuXXion制造的硅膜過濾器或者聚碳酸酯(“核孔”)過濾器。在后續(xù)的第二步驟中，將插塞52插入到第二環(huán)50中以關(guān)閉宏觀流體出口30。同時，通過微流體入口42、沿著下面的過濾器16并且通過微流體出口44的微流體通道打開。然后，在例如由活塞(未示出)強迫通過微流體通道的轉(zhuǎn)移液體的微流體體積(例如ΙΟΟμΙ)內(nèi)洗提下面的過濾器16上的細菌。可以洗提全部細菌以供進一步處理，或者僅僅DNA可以利用轉(zhuǎn)移液體轉(zhuǎn)移。在后一種情況下，轉(zhuǎn)移液體(洗提緩沖液)也可以是裂解緩沖液，或者裂解可以通過某種其他的機制發(fā)生，例如在Whatman洗提裂解紙上使用加熱或超聲而發(fā)生。微流體和宏觀流體通道可以經(jīng)由例如(機械地、用熱方法地或者以其他方式激活的)閥門，或者如圖中所示通過移除或插入插塞52打開和關(guān)閉。圖7a為與上面參照圖6所述類似的設(shè)備20的示意性表示。具有大約l_5ml的體積的液體樣本10借助于注射器(未示出)推送通過設(shè)備20并且流經(jīng)包括預(yù)過濾器40(上面的過濾器)和第一過濾器16(下面的過濾器)的宏觀通路58、40、16、30。在關(guān)閉宏觀通路之后，將卡在下面的過濾器16上的病原體浸沒到轉(zhuǎn)移液體(洗提緩沖液)中，該轉(zhuǎn)移液體經(jīng)由微流體入口42流入設(shè)備20，沿著下面的過濾器16流動，并且經(jīng)由微流體出口44流出設(shè)備20。在所示的實例中，蓋板46(在圖7b中鮮明地示出)、上面的環(huán)48(在圖7c中鮮明地示出)和下面的環(huán)50(在圖7d中鮮明地示出)借助于雙面膠帶實現(xiàn)。在這種情況下，宏觀流體通路的末端可以在宏觀流體液體(即流體樣本)被泵浦通過之后通過將帶粘附到固體襯底而關(guān)閉。此外，可以每帶集成超過一個流體連接?？商鎿Q地，包含預(yù)過濾器40和第一過濾器16并且提供外殼的設(shè)備20部分可以由例如塑料制成。依照圖8中表示的另一個實施例，轉(zhuǎn)移流體由穿過第一過濾器16的樣本液體10部分提供。在第一過濾器16上積聚微對象之后，強迫所述樣本液體10部分(即轉(zhuǎn)移流體)回流通過第一過濾器16(在圖中向上的方向上)。這通過壓縮包含例如水、空氣或油的腔室54(參見圖8b)實現(xiàn)。從而，將先前在第一過濾器16上積聚的微對象浸沒到轉(zhuǎn)移流體中。轉(zhuǎn)移流體的體積比最初引入到設(shè)備20中的樣本液體10的體積小大約一個數(shù)量級。因此，經(jīng)由微流體出口44離開設(shè)備20的轉(zhuǎn)移流體具有更高濃度的微對象?？梢栽谙掠危缭谶B接到微流體出口44的微流體芯片中進一步處理轉(zhuǎn)移流體。可以在可壓縮腔室M與第一過濾器16上積聚微對象的空間之間設(shè)置閥門(圖中未示出)。閥門和可壓縮腔室二者可以利用例如溫度進行控制。在圖9中以簡化的方式示出的該方案的一個不同版本中，經(jīng)由DC或AC(介電泳)電場將在第一過濾器16上面或之中捕獲的諸如細菌或DNA之類的帶電或偶極微對象從第一過濾器16轉(zhuǎn)移到小腔室56。應(yīng)當(dāng)指出的是，細菌通常攜帶負電荷。電場可以通過在第一過濾器16與腔室56之間施加電壓而產(chǎn)生。在所示的實例中，將第一過濾器16設(shè)置為零電位(GND)，而將腔室設(shè)置為正電位(V)。腔室56可以連接到微流體芯片。第一過濾器16可以包括凝膠材料，例如多孔凝膠。從而，可以有利于微對象(例如細菌或DNA)在沿著或通過第一過濾器16的橫向(圖中的水平)方向上的運動。圖10中示意性表示的是依照另一個實施例的設(shè)備20。設(shè)備20的工作原理與上面參照圖9所述的類似之處在于，微對象12在穿過預(yù)過濾器40(上面的過濾器)之后轉(zhuǎn)移到小腔室56。然而，依照當(dāng)前實施例，第一過濾器16不存在。電場將微對象(例如細菌)與樣本流體10的主流(在圖中向下的方向上)分離并且將它們轉(zhuǎn)移到腔室56中?？梢蕴峁┬∧z插塞以便防止宏觀流(即樣本流體10流)擴散進入腔室56中。圖11示出了又一個實施例。第一過濾器16(例如膜)由在酸性(高pH)或熱(高溫)環(huán)境值中分解的凝膠或過濾材料制成。在高PH下溶解的凝膠的實例是聚陰離子，例如(聚)丙煉酸禾口(聚)甲基丙煉酸(Y.QiuandK.Park,Environment-sensitivehydrogelsfordrugdelivery,AdvancedDrugDeliveryReviews,vol.53,pp.321-339，2001)。溫度敏感凝膠包括(聚)環(huán)氧乙烷和(聚)環(huán)氧丙烷的共聚物(參見引用的Qiu和Park的論文)。在圖Ila所示的第一步驟中，沿著包括入口58、預(yù)過濾器40、第一過濾器16和宏觀流體出口30的宏觀通道58、40、16、30推進或抽吸宏觀體積的樣本流體10通過設(shè)備20。同時，微流體出口44例如借助于閥門(未示出)而保持關(guān)閉。在第二步驟中，經(jīng)由入口58將小體積的NaOH引入設(shè)備中。NaOH本身或者與熱組合增大pH并且從而分解第一過濾器16。此外，NaOH可以裂解例如在第一過濾器16上積聚的微對象(例如細菌)以便釋放DNA。在圖lib所示的第三步驟中，微流體出口44借助于提到的閥門或者借助于另一個閥門(未示出)打開。通過暫時阻擋宏觀流體出口30和微流體出口44，可以提供一定的孵化時間。在下文中，描述其中從宏觀流體樣本制備微流體樣本的實驗。使用預(yù)過濾器和第一過濾器分離人類細胞和細菌在夜間在腦心浸液中培養(yǎng)大腸桿菌(埃布氏菌)并且利用BacLight活/死染劑對其染色。利用熒光標(biāo)記對THP-I細胞染色。在這種情況下，在離心分離步驟中將細胞生長培養(yǎng)基(medium)換成PBS。在PBS中將500μ1的細菌懸液與500μ1的人類THP-I細胞混合。該Iml的細胞+細菌液體首先通過Whatman5Mm孔隙尺寸聚碳酸酯過濾器過濾。使用2ml的空氣以便從過濾器移除該液體。使用熒光顯微鏡分析濾出的懸浮液和過濾器。然后，通過0.22微孔過濾器第二次過濾500μ1的濾液懸浮液。利用切物鏡，只檢測到單核細胞，而埃布氏菌利用20χ清晰可見。如預(yù)期的那樣，在這些樣本中細菌的濃度遠高于THP-I細胞的濃度(近似109對106細胞/ml)。埃布氏菌太多而無法計數(shù)，但是單核細胞在切放大率下平均為沈士4細胞/幀(3幀)。來自5x物鏡和20x物鏡的幀示出通過5Mm聚碳酸酯過濾器(預(yù)過濾器)過濾之后的懸浮液。預(yù)過濾器移除了大多數(shù)或者全部單核細胞并且允許細菌通過。然而，Whatman過濾器固定器(holder)中的死體積相當(dāng)大，并且因而大約一半的樣本在那里損失掉。利用切物鏡，單核細胞的數(shù)量在所有幀(4幀)中為0。根據(jù)電鍍實驗，可見當(dāng)通過5Mm過濾器過濾低濃度的細菌(<500CFU/ml)時，大致100%的細菌通過，這表明很少的(如果有的話)細菌附著到聚碳酸酯過濾器。在最終通過0.22Mm過濾器過濾之后，樣本液體中不再發(fā)現(xiàn)細胞。通過在實驗臺上洗提0.22Mffl過濾器上濃縮細菌在下一個步驟中，我們也做了這樣的實驗，其中在0.22ΜΠ1過濾器上捕獲的細菌隨后在更小的體積內(nèi)洗提以便增大濃度。進行了三個這樣的實驗，它們具有非常相似的結(jié)果。在埃布氏菌的情況下，通過0.22Mm過濾器過濾500μ1的細菌懸浮液。然后，將該過濾器置于50μ1的PBS緩沖液中并且渦旋(vortex)。在5分鐘之后，移除過濾器并且培養(yǎng)懸浮液。開始的懸浮液包含200CFU/ml(500μ1中100CFU)，并且來自過濾器的洗提包含1000CFU/ml(50μ1中50CFU)，意味著切的上濃縮。此外，以相同的方式過濾和洗提金黃色葡萄球菌(金黃色葡萄球菌)(在更小的體積內(nèi)渦旋+等待5分鐘)。在這些實驗中，通過0.22Mm過濾器過濾分別具有160和98CFU/ml的Iml懸浮液。細菌然后在100μ1的TBS生長培養(yǎng)基中洗提和培養(yǎng)。100μ1培養(yǎng)基中的金黃色葡萄球菌的數(shù)量在這種情況下分別為84(“840CFU/ml”)和78(“780CFU/ml”)。這些實驗之后的最終濃度是起始濃度的525%和795%。在所有上面的實驗中，濾液(通過過濾器的溶液)也培養(yǎng)作為對照(control)，并且得到0個菌落。圖12中概括了這些結(jié)果。實驗臺上的NaOH裂解和洗提在與上面所述類似的實驗中，具有來自包含98CFU/ml的Iml細菌懸浮液的捕獲的金黃色葡萄球菌的過濾器置于100μ1的NaOH中，渦旋并且孵化5分鐘。其后，移除過濾器并且利用乙醇沉淀提取NaOH中的DNA。圖13概括了相應(yīng)的qPCR結(jié)果。0.22Mm過濾器上捕獲的細菌同時利用NaOH裂解和洗提。由SA過濾器-樣本可見，相當(dāng)數(shù)量的金黃色葡萄球菌的DNA被洗提。當(dāng)以僅僅每ml98個細菌開始時，相當(dāng)數(shù)量(接近0.Olng參考)的金黃色葡萄球菌的DNA從應(yīng)當(dāng)捕獲細菌的兩個過濾器(“SA過濾器NaOH25C”和“SA過濾器NaOH95C”)恢復(fù)。除了一個過濾器與僅僅TSB培養(yǎng)基(“TSB過濾器25C”)一起使用外，所有的陰性對照和濾液表現(xiàn)出很少或者沒有DNA含量。上濃縮細菌和與人類細胞分離圖14示出了用于分離細菌和人類細胞，之后跟隨第二過濾器上的富集的實驗方案。在兩個過濾器(5Mm和0.22Mm)的相應(yīng)過濾實驗中，輸入液體為10000U937人類細胞/ml和22金黃色葡萄球菌/ml的混合溶液。2ml的混合樣本溶液通過5Mm過濾器過濾。Iml的該濾液隨后通過0.22Mffl過濾器過濾。細菌在100μ1培養(yǎng)基中從這兩個過濾器洗提5分鐘。來自過濾序列的所有階段的樣本通過培養(yǎng)進行分析。實驗結(jié)果示于圖15和圖16中。由于使用的過濾器固定器的“死體積”的原因，不是所有的通過第一過濾器的液體可以經(jīng)過第二過濾器。然而，幾乎沒有細菌在第一過濾器上損失掉，并且來自第二過濾器的洗提與輸入樣本相比具有濃度高得多的金黃色葡萄球菌?？傊?，上面的實驗證明，過濾器的組合可以用來將細菌與人類細胞分離并且通過減小樣本體積而增大細菌的濃度。圖15示出了過濾過程的每個階段的金黃色葡萄球菌的絕對數(shù)量。應(yīng)當(dāng)指出的是，只有一半來自過濾器ι的濾液用作過濾器2的輸入液體。οομ的該濾液為了分析而被培養(yǎng)，但是Iml通過過濾器2而被過濾。在過濾器2的濾液中不能檢測到細菌。圖16示出了過濾過程的每個階段的金黃色葡萄球菌的濃度。“通過過濾器1”中的濃度應(yīng)當(dāng)?shù)扔诨蛐∮谳斎霛舛?。略有高估的值歸因于根據(jù)僅僅ΙΟΟμΙ(在該情況下平均包含3個細菌)的分析計算濃度。在過濾器2的濾液中不能檢測到細菌。總而言之，提出了用于從ml到μ減小初始樣本體積而不顯著損失用于進一步分析的細菌數(shù)量的特定技術(shù)。尤其是在低濃度的細菌使得以“大”體積的樣本液體開始成為必要的時候，這樣獲得的ml體積可以使用微流體片上實驗室系統(tǒng)進一步加以分析，或者可以由光學(xué)顯微鏡在單次捕獲中成像。本發(fā)明可以在用于工業(yè)應(yīng)用(食品加工、制藥、個人護理產(chǎn)品、飲料、環(huán)境和工業(yè)加工部門)以及用于臨床應(yīng)用的快速微生物分析中得到應(yīng)用。所提出的方法可以特別地非常適合檢測和列舉微生物。此外，特定染劑的使用(例如免疫標(biāo)記)可以提供選擇性檢測和識別的路線。本發(fā)明的一個特定應(yīng)用可以是造成傳染性疾病的細菌的片上檢測以及篩選抗生素敏感性。其他的應(yīng)用是例如食品和水質(zhì)測試以及哺乳動物細胞中的病毒檢測。本發(fā)明是在研究項目“Xyall:Digitalcellimagingforlifesciencesandpathology”的框架內(nèi)提出的，并且涉及保健孵化器中的快速微生物投資(venture)。盡管在所述附圖和前面的描述中已經(jīng)詳細地圖示和描述了本發(fā)明，但是所述附圖和描述應(yīng)當(dāng)被認為是示例性的而不是限制性的。本發(fā)明并不限于所公開的實施例。在不脫離本發(fā)明范圍的情況下也可以實現(xiàn)上面未描述的等效物、組合和修改。動詞“包括”及其派生詞并沒有排除在“包括”所指的內(nèi)容中存在其他的步驟或元件。不定冠詞“一”并沒有排除多個該冠詞所指的對象。特別地，術(shù)語“微對象”并沒有排除存在其他的微對象。例如，除了權(quán)利要求1中涉及的微對象之外，樣本流體10也可以包括未轉(zhuǎn)移到第二過濾器32或者在所述過程中損失的微對象。也應(yīng)當(dāng)指出的是，單個單元可以提供權(quán)利要求中提到的若干構(gòu)件的功能。在相互不同的從屬權(quán)利要求中陳述特定特征這一事實并不意味著這些特征的組合不可以加以利用。權(quán)利要求書中的任何附圖標(biāo)記都不應(yīng)當(dāng)被視為對范圍的限制。權(quán)利要求1.一種分析包含有機微對象(12)的樣本流體(10)的方法，該方法包括步驟-通過在總時間T1內(nèi)從微對象移除體積為V1的樣本流體(10)而上濃縮(Si)微對象；-將微對象浸沒(S2)到轉(zhuǎn)移流體中；或者讓微對象留在樣本流體的剩余部分中，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；-在總時間T3內(nèi)通過過濾器(32)過濾(S3)體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象；以及-產(chǎn)生(S4)在過濾器上積聚的微對象的圖像；其中上濃縮步驟(Si)的通量VZT1大于過濾步驟(S3)的通量V3/T3。2.依照權(quán)利要求1的方法，其中上濃縮步驟使用第一過濾器(16)執(zhí)行，并且過濾步驟使用第二過濾器(32)執(zhí)行，第一過濾器具有比第二過濾器更大的面積。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中上濃縮(Si)、浸沒(S2)、過濾(S3)和產(chǎn)生圖像(S4)的步驟花費的時間短于通過過濾器(32)過濾整個樣本流體(10)并且對該過濾器(32)上的微對象(12)成像花費的時間。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中V3小于0.2*V105.如權(quán)利要求1所述的方法，包括步驟-通過預(yù)過濾器(40)預(yù)過濾樣本流體(10)，該預(yù)過濾器至多滯留微對象(12)的不顯著的份額；該預(yù)過濾步驟在過濾步驟(S3)之前執(zhí)行。6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中過濾器(32)是第二過濾器，并且上濃縮步驟(Si)涉及-通過第一過濾器(16)過濾樣本流體(10)，從而在第一過濾器(16)上積聚微對象；-溶解第一過濾器(16)。7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中浸沒步驟(S2)涉及-轉(zhuǎn)移流體沿著第一過濾器(16)流動；或者-樣本流體的部分回流通過第一過濾器。8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中上濃縮步驟(Si)涉及-蒸發(fā)體積為V1的樣本流體(10)；和/或-將微對象(12)吸引到收集區(qū)；和/或-離心分離樣本流體(10)。9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中產(chǎn)生圖像涉及-產(chǎn)生微對象(12)的光學(xué)圖像；或者-掃描微對象(12)。10.如權(quán)利要求1所述的方法，包括-將染料釋放到樣本流體(10)或者釋放到轉(zhuǎn)移流體中。11.一種用于分析包含有機微對象(12)的樣本流體(10)的裝置或系統(tǒng)，該裝置或系統(tǒng)包括-用于通過在總時間T1內(nèi)從微對象移除體積為V1的樣本流體(10)而上濃縮微對象的構(gòu)件(20)；-用于將微對象浸沒到轉(zhuǎn)移流體中，或者用于讓微對象留在樣本流體的剩余部分中的構(gòu)件(22J4；42，44)，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；-過濾器(32)，其用于在總時間T3內(nèi)過濾體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象；-用于產(chǎn)生在過濾器上積聚的微對象的圖像的構(gòu)件(36)；其中用于上濃縮的構(gòu)件的通量V1Zt1大于過濾器的通量V3/T3。12.如權(quán)利要求11所述的系統(tǒng)或裝置，其中過濾器(32)是第二過濾器，并且用于上濃縮的構(gòu)件(20)包括用于滯留微對象的第一過濾器(16)，第一過濾器(16)具有比第二過濾器(32)更大的面積。13.如權(quán)利要求11所述的系統(tǒng)或裝置，其中過濾器(32)是第二過濾器，并且用于上濃縮的構(gòu)件(20)包括用于滯留微對象的第一過濾器(16)，第一過濾器(16)具有比第二過濾器(32)更高的最大通量。14.如權(quán)利要求12或13所述的系統(tǒng)或裝置，其中第一過濾器(16)包括用于對微對象(12)染色的染料。15.如權(quán)利要求12或13所述的系統(tǒng)或裝置，其中第一過濾器(16)包括可在有機溶劑中溶解的有機聚合物或者穿孔鋁箔。16.如權(quán)利要求11所述的系統(tǒng)或裝置，包括包含過濾器(32)的微流體芯片。全文摘要提出了一種分析包含有機微對象的樣本流體的方法。該方法包括步驟通過在總時間T1內(nèi)從微對象移除體積為V1的樣本流體而上濃縮(S1)微對象；將微對象浸沒(S2)到轉(zhuǎn)移流體中，或者讓微對象留在樣本流體的剩余部分中，樣本流體的剩余部分于是提供轉(zhuǎn)移流體；在總時間T3內(nèi)通過過濾器過濾(S3)體積為V3的轉(zhuǎn)移流體，從而在該過濾器上積聚微對象；以及產(chǎn)生(S4)在過濾器上積聚的微對象的圖像；其中上濃縮步驟(S1)的通量V1/T1大于過濾步驟(S3)的通量V3/T3。過濾器可以是第二過濾器，并且上濃縮步驟(S1)可以涉及通過第一過濾器過濾樣本流體，從而在第一過濾器上積聚微對象。也公開了一種用于分析包含有機微對象的樣本流體的裝置或系統(tǒng)。文檔編號G01N15/06GK102395870SQ201080016767公開日2012年3月28日申請日期2010年4月14日優(yōu)先權(quán)日2009年4月14日發(fā)明者E.G.范米爾伯根B.,J.伊薩克森B.,胡爾斯肯B.,W.G.龐杰M.,凱珀S.,斯塔林加S.,S.尤納伊Z.申請人:皇家飛利浦電子股份有限公司