專利名稱：血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及熒光測試物的使用，具體是一種血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GP0-PAP法)一 步終點法測定方法檢測范圍窄、靈敏度低、誤差大、操作繁瑣。目前，臨床實驗室測定甘油常用GPO-PAP比色法，由于人體內(nèi)的游離甘油含量低， 0.06-0. 22mmol/L，血清中甘油和三磷酸腺苷(ATP)在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶 (GPO)的催化下生成H2O2，在過氧化物酶(POD)的催化下，H2O2和色原物(PAP)顯色，吸光度 與標本中甘油含量成正相關(guān)，可進行比色測定，但是，國外資料顯示，正常人體游離甘油含 量為0. 06-0. 22mmol/L,約占總總甘油的6-14%，國內(nèi)結(jié)果與此相近，我國正常人游離甘油 水平為0. 08mmol/L(0. 02-0. 33mmol/L)，約占總總甘油的7. 9 %，雖然臨床標本中游離甘油 顯著升高者很少見，但在異常情況下如應(yīng)急反應(yīng)，劇烈運動，服用含硝酸甘油藥物，靜脈滴 注含甘油的營養(yǎng)液，肝素治療，嚴重肝病、腎病、糖尿病時，血清游離甘油顯著升高，給臨床 決策帶來誤導(dǎo)。而采用血清中甘油化學(xué)發(fā)光測定方法，血清中甘油和試劑中的三磷酸腺苷(ATP) 在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶(GPO)的催化下生成H2O2，在過氧化物酶(POD)的催化 下，H2O2和異魯米諾生成氧化異魯米諾和水，同時放出光子而發(fā)光，血清中甘油濃度越高，發(fā) 出的光信號就越強，用已知濃度的甘油與測出的光信號作劑量-反應(yīng)曲線；未知樣品的甘 油含量可從該曲線推算出來。應(yīng)用魯米諾-過氧化物酶的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)進行血清甘油分析，靈敏度高達 10_18mol，可在20分鐘內(nèi)快速檢測出結(jié)果，便于完全實現(xiàn)自動化，有效期高達一年以上，無放 射性和致畸物質(zhì)，便于環(huán)保而受到普遍歡迎，是目前發(fā)展最迅速的檢測技術(shù)。例如，血清中甘油和三磷酸腺苷(ATP)在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶(GPO) 的催化下生成H2O2，在過氧化物酶(POD)的催化下，H2O2和異魯米諾生成氧化異魯米諾和水， 同時放出光子而發(fā)光，血清中甘油濃度越高，發(fā)出的光信號就越強，用已知濃度的甘油與測 出的光信號作劑量-反應(yīng)曲線；未知樣品的甘油含量可從該曲線推算出來。未知濃度的甘 油可從該曲線推算出來；所述的化學(xué)發(fā)光物為異魯米諾，這便是本發(fā)明的化學(xué)發(fā)光測定方 法，該方法可用于測定血清中甘油含量。1.試劑組成混合酶液每升Tris-HCl 緩沖液內(nèi)含 Tris 150mmol (ρΗ7· 6)、MgSO412mmol, 膽酸鈉 4. 2mmol、Triton X-1000· 12g、ATP 1. 2mmol、GK 600U、GPO 3600U、POD 1200U、 Proclin-300 防腐劑 200 μ 1。發(fā)光液:100mlTris buffer 含魯米諾:0. Olmol/L(0. 178g)，Trisbuffer 配方 0. lmol/L 6. 07gTris 溶于 500ml 水，用鹽酸調(diào) pH = 8. 8。[oo10] 儀器MPC—l單光子化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。[oo11] 2．測定方法樣品混合酶液發(fā)光液一l55。溫度37℃溫浴5min，，測定[LU值，以甘油定標液定標，測定標本時和高1低質(zhì)控液同時測定，當高1低質(zhì)控液測定值均在此范圍時，其測定數(shù)據(jù)可靠。[oo12] 作出劑量一反應(yīng)曲線，根據(jù)樣品的發(fā)光強度[LU值從該曲線求出血清甘油三酯的濃度。或直接由公式求出[oo13] 甘油三酯的濃度一(樣品[LU值／標準[LU值)×標準濃度。[oo14] 上述方法靈敏度更高1線性范圍寬，監(jiān)測范圍為2．o×lo”一6．o×lo，成本低1準確度高，測定的光信號，可一個一個光子計數(shù)，因此精密度和準確度高于比色法；在反應(yīng)中，不需要離心或分離步驟，直接進行發(fā)光強度測定。發(fā)明內(nèi)容[oo15] 本實用新型就是為了解決廣泛應(yīng)用血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法的問題，而提供一種便于各類醫(yī)療機構(gòu)能夠普遍應(yīng)用的血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒。[oo16] 本實用新型是按以下技術(shù)方案設(shè)計的。[oo17] 一種血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，包括方形盒體及與其一側(cè)邊彎折連體的盒蓋，而在盒體一側(cè)長邊內(nèi)形成有插孔的試劑架上分別容納甘油定標液瓶，高值甘油質(zhì)控血清瓶和低值甘油質(zhì)控血清瓶，試劑架旁側(cè)形成有臥置酶混合液瓶和發(fā)光應(yīng)用液瓶的空間。[oo18] 本實用新型不僅保持了靈敏度更高1線性范圍寬1成本低1準確度高，在反應(yīng)中，不需要離心或分離步驟，直接進行發(fā)光強度測定的優(yōu)點，而且，便于普及，可用于全自動測定，也可用于手工測定或半自動測定，適用于大中小各層次的醫(yī)療和研究機構(gòu)使用。


[oo19] 附圖是本實用新型結(jié)構(gòu)示意圖。[0020] 圖中1．盒體2．盒蓋[0021] 3．插孔4．試劑架[0022] 5．甘油定標液瓶6．高值甘油質(zhì)控血清瓶[0023] 7．低值甘油質(zhì)控血清瓶 8．酶混合液瓶[0024] 9．發(fā)光應(yīng)用液lo．支撐架。
具體實施方式
[0025] 一種血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，包括方形盒體l及與其一側(cè)邊彎折連體的盒蓋2，而在盒體l一側(cè)長邊內(nèi)形成有插孔3的試劑架4上分別容納加蓋密封的甘油定標液瓶5，高值甘油質(zhì)控血清瓶6和低值甘油質(zhì)控血清瓶7，試劑架4旁側(cè)形成有臥置加蓋密封的酶混合液瓶8和發(fā)光應(yīng)用液瓶8的空間。[0026] 所述血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，其盒體l的側(cè)壁上沿向盒體內(nèi)直角彎折形成撐頂酶混合液瓶8和發(fā)光應(yīng)用液瓶9底部的空心支撐架lo，使在盒體l內(nèi)的酶混合液瓶8和發(fā)光應(yīng)用液瓶9臥置穩(wěn)定。[0027]所述的酶混合液瓶8預(yù)裝有IOOml的甘油檢測試劑酶混合液；所述發(fā)光應(yīng)用液9 預(yù)裝有IOOml的異魯米諾發(fā)光應(yīng)用液；甘油定標液瓶5，高值甘油質(zhì)控血清瓶6和低值甘油質(zhì)控血清瓶7分別預(yù)裝2ml試 劑，備用。盒體1內(nèi)附加實驗操作說明書(未圖示)。
權(quán)利要求1.一種血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，包括方形盒體(1)及與其一側(cè)邊彎折連 體的盒蓋O)，其特征在于盒體⑴一側(cè)長邊內(nèi)形成有插孔⑶的試劑架⑷上分別容納 甘油定標液瓶(5)，高值甘油質(zhì)控血清瓶(6)和低值甘油質(zhì)控血清瓶(7)，試劑架(4)旁側(cè) 形成有臥置酶混合液瓶(8)和發(fā)光應(yīng)用液瓶(9)的空間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，其特征在于盒體(1) 的側(cè)壁上沿向盒體內(nèi)直角彎折形成撐頂酶混合液瓶(8)和發(fā)光應(yīng)用液瓶(9)底部的空心支 撐架(10)。
專利摘要本實用新型涉及一種血清中甘油的均相化學(xué)發(fā)光法試劑盒，屬于熒光測試物的使用。本實用新型包括方形盒體及與其一側(cè)邊彎折連體的盒蓋，而在盒體一側(cè)長邊內(nèi)形成有插孔的試劑架上分別容納甘油定標液瓶，高值甘油質(zhì)控血清瓶和低值甘油質(zhì)控血清瓶，試劑架旁側(cè)形成有臥置酶混合液瓶和發(fā)光應(yīng)用液瓶的空間。本實用新型依據(jù)應(yīng)用異魯米諾-過氧化物酶的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)進行血清甘油分析，不僅保持了靈敏度更高、線性范圍寬、成本低、準確度高的優(yōu)點，而且，便于普及，可用于全自動測定，也可用于手工測定或半自動測定，適用于大中小各層次的醫(yī)療和研究機構(gòu)使用。
文檔編號G01N21/76GK201852789SQ201020540030
公開日2011年6月1日 申請日期2010年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月25日
發(fā)明者李立和, 王高生 申請人:天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院