專利名稱:一種抗原檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其是涉及一種抗原檢測方法,該方法可以應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、發(fā)酵工業(yè)、食品工業(yè)等眾多領(lǐng)域。
背景技術(shù):
1979年,JohnUgelstad等人利用免疫磁標(biāo)記(dynabeads)很好地分離了細(xì)胞,弓丨 發(fā)了生物分離技術(shù)史上的一次革命,從此,免疫磁標(biāo)記得到廣泛應(yīng)用。免疫磁標(biāo)記是表面結(jié) 合有單克隆抗體的磁性微球,近年來免疫磁標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)成為國內(nèi)外研究比較熱門的一種 新的免疫學(xué)技術(shù),可應(yīng)用于快速診斷、高通量藥物篩選、單分子抗原檢測等。近幾年來,多鐵性材料受到了人們的廣泛關(guān)注,美國《科學(xué)》雜志在2007年底預(yù)測 多鐵性材料將是2008年值得關(guān)注的7大研究熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。多鐵性材料是指在同一種材 料中同時存在兩種或者兩種以上“鐵性”(鐵磁性、鐵電性和鐵彈性),而且其中的兩種“鐵 性”之間存在耦合作用。例如,在同時具有鐵電性和鐵磁性的磁電多鐵性材料中,由于鐵電 與鐵磁之間的耦合作用,當(dāng)施加外磁場H時,會引起電極化強(qiáng)度Ρ(Ρ= α H)的改變,而當(dāng)施 加外電場E時,會引起磁化強(qiáng)度Μ(Μ= β Ε)的改變。這種耦合效應(yīng)使得多鐵性材料非常適 合用在磁傳感器的轉(zhuǎn)換元件上構(gòu)成多鐵性材料磁傳感器,從而實(shí)現(xiàn)多功能傳感的目的。多 鐵性材料磁傳感器具有結(jié)構(gòu)簡單、磁場探測精度高等特點(diǎn),磁場探測精度可以達(dá)到10_8奧 斯特(Oe)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種抗原檢測方法。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案為一種抗原檢測方法,通過抗原與抗體 之間的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原進(jìn)行磁標(biāo)記,利用傳感元件檢測該磁標(biāo)記從而識別抗原;所述 的傳感元件是多鐵性材料磁傳感元件;所述的抗體通過化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)吸附在所述的多鐵性 材料磁傳感元件的表面。為優(yōu)化上述技術(shù)方案,采取的措施還包括上述磁標(biāo)記通過直接標(biāo)記法或者間接標(biāo)記法實(shí)現(xiàn);所述的直接標(biāo)記法中,抗體通 過物理或者化學(xué)吸附與磁性顆粒結(jié)合,抗體通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原進(jìn)行磁標(biāo)記;所述的 間接標(biāo)記法中,抗體包括第一抗體與第二抗體,第一抗體通過化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)吸附在所述的 多鐵性材料磁傳感元件的表面,第二抗體通過物理或者化學(xué)吸附與磁性顆粒結(jié)合,抗原與 第一抗體通過免疫應(yīng)答反應(yīng)進(jìn)行結(jié)合,第二抗體通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原進(jìn)行磁標(biāo)記。上述磁性顆粒是鐵、鈷、鎳、Y相三氧化二鐵、四氧化三鐵、釤鈷合金、鐵碳合金、 鐵_碳化鐵合金、鈷鉻合金、鈷鉬合金或者鈷鈀合金。上述多鐵性材料磁傳感元件依次由保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層和下電極層 構(gòu)成,或者由保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層、鐵磁層和下電極層構(gòu)成。上述化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)具體包括如下步驟
步驟1 對所述的保護(hù)層進(jìn)行清洗、表面氨基化處理和醛基化處理;步驟2 將所述的抗體與經(jīng)步驟1處理后的保護(hù)層表面的醛基進(jìn)行反應(yīng)。上述鐵磁層是采用磁控濺射或者電子束蒸發(fā)的方法在所述的鐵磁層表面制備得 至IJ,或者是采用環(huán)氧膠粘結(jié)的方法粘結(jié)在所述的鐵電層表面。
上述保護(hù)層由10 500nm厚的SiO2或者類金剛石薄膜構(gòu)成。上述上電極層和下電極層分別由鉬、金、鈦、鎢、鉭、鋁、銅和銀中的一種材料構(gòu)成。上述鐵電層由鈦酸鋇、鈦酸鋇摻雜材料、鉛基鐵電材料或者單相多鐵材料構(gòu)成;所 述的鉛基鐵電材料是鈦酸鉛、鋯鈦酸鉛、鈦酸鉛鑭、鋯鈦酸鉛鑭、鈮鎂酸鉛、鈮鋅酸鉛、鈮鈧 酸鉛、鈮鎂酸鉛摻雜的鈦酸鉛、鈮鋅酸鉛摻雜的鈦酸鉛或者鈮鈧酸鉛摻雜的鈦酸鉛;所述的 單相多鐵材料是鐵酸鉍。上述鐵磁層由鈷基材料、鐵氧體材料、鐵磁性金屬、鐵磁性合金或者鈣鈦礦結(jié)構(gòu)氧 化物構(gòu)成;所述的鈷基材料包括鈷鉻合金、鈷鈀多層膜、鈷鉬多層膜、釤鈷合金、釤鈷鉻合 金、鈷摻雜的Y相三氧化二鐵或者鈷摻雜的四氧化三鐵;所述的鐵氧體材料包括Y相三氧 化二鐵、四氧化三鐵、鋇鐵氧體、鍶鐵氧體、鎳鐵氧體或者鈷鐵氧體;所述的鐵磁性金屬包括 鐵、鈷或者鎳;鐵磁性合金包括鐵鈷合金、鐵鈷鎳合金或者鋱鏑鐵磁致伸縮合金;所述的鈣 鈦礦結(jié)構(gòu)氧化物包括錳酸鍶鑭、錳酸鈣鑭、錳酸鋇鑭、錳酸鉛鑭或者錳酸銀鑭。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明一種抗原檢測方法將多鐵性材料磁傳感技術(shù)與免疫磁標(biāo) 記技術(shù)巧妙地結(jié)合在一起,通過抗原與抗體之間的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原進(jìn)行磁標(biāo)記,對磁 標(biāo)記進(jìn)行磁化處理產(chǎn)生磁信號,利用多鐵性材料磁傳感元件將磁信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺ㄟ^ 對電信號的檢測實(shí)現(xiàn)對抗原的識別分析;本發(fā)明的抗原檢測方法簡單易于實(shí)現(xiàn)、檢測成本 低廉、具有高檢測精度,可應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、發(fā)酵工業(yè)、食品工業(yè)等眾多領(lǐng)域。
圖1是多鐵性材料磁傳感器的工作原理圖;圖2是本發(fā)明一種抗原檢測方法的示意圖;圖3是本發(fā)明一種抗原檢測方法中多鐵性材料磁傳感元件的結(jié)構(gòu)示意圖;圖4是本發(fā)明一種抗原檢測方法中多鐵性材料磁傳感元件的另一種結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。其中的附圖標(biāo)記為抗原1、第一抗體2、第二抗體3、多鐵性材料磁傳感元件4。圖1所示為多鐵性材料磁傳感器的工作原理圖。多鐵性材料磁傳感器依次由上 電極層、鐵磁層、鐵電層和下電極層構(gòu)成。H為直流偏置場,通過信號發(fā)生器提供交流磁信 號ΔΗ(相當(dāng)于生物傳感器中的磁標(biāo)記顆粒),多鐵性材料磁傳感器中的鐵磁層對該交流磁 信號發(fā)生響應(yīng),產(chǎn)生磁致伸縮,通過磁電耦合作用傳遞給鐵電層,引起鐵電層的電極化強(qiáng)度 P= α ΔΗ的變化,通過電荷放大器對電荷進(jìn)行放大,通過示波器可以得到電極化強(qiáng)度的變 化,從而可以反應(yīng)出交流磁信號的大小。本發(fā)明一種抗原的檢測方法主要用于對抗原1的檢測,進(jìn)而可以得到在一定的被 測區(qū)域內(nèi)抗原1的濃度,含量等參數(shù)。本發(fā)明一種抗原的檢測方法是通過抗原1與抗體之間的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原1進(jìn)行磁標(biāo)記,利用傳感元件檢測該磁標(biāo)記,從而可以識別抗原1。本發(fā)明中,傳感元件是多鐵性材料磁傳感元件4,抗體通過化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)固定連接在所述的 多鐵性材料磁傳感元件4的表面。其中,多鐵性材料磁傳感元件4的結(jié)構(gòu)由保護(hù)層、上電極 層、鐵磁層、鐵電層和下電極層構(gòu)成(如圖3所示),或者由保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電 層、鐵磁層和下電極層構(gòu)成(如圖4所示)。本發(fā)明一種抗原檢測方法中,磁標(biāo)記有兩種實(shí)現(xiàn)方式直接標(biāo)記法與間接標(biāo)記法。 直接標(biāo)記法中,抗體通過物理或者化學(xué)吸附與磁性微球連接,抗原1與抗體通過免疫應(yīng)答 反應(yīng)進(jìn)行結(jié)合,即抗體對抗原1進(jìn)行了磁標(biāo)記,通過外加磁場可以分離被磁標(biāo)記的抗原1。 間接標(biāo)記法中,抗體包括第一抗體2與第二抗體3,第一抗體2與多鐵性材料磁傳感元件4 的表面相連接,第二抗體3通過物理或者化學(xué)吸附與磁性顆粒結(jié)合,抗原1與第一抗體2通 過免疫應(yīng)答反應(yīng)進(jìn)行結(jié)合,第二抗體3通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原1進(jìn)行磁標(biāo)記。直接標(biāo)記是最快速磁性標(biāo)記方法。目前有多種人、小鼠、大鼠以及非人類靈長類 細(xì)胞的商業(yè)化的直接標(biāo)記磁珠可供選用。當(dāng)沒有直接標(biāo)記磁珠時,幾乎針對任何種系任 何細(xì)胞的任何一種單抗或多抗,均可用于間接標(biāo)記法,間接標(biāo)記法與直接標(biāo)記法相比,除適 應(yīng)范圍廣外,還可以使用一組單克隆抗體,會獲得更好的抗原識別效果。例如選用牛蛋 白IgG(B0Vine IgG)作為目標(biāo)識別的抗原1,由于吸附有磁性微球的Protein G與抗原牛 蛋白IgG有很強(qiáng)的免疫應(yīng)答反應(yīng),選用Protein G作為第二抗體3 ;選用羊抗牛IgG(Goat anti-Bovine IgG)作為第一抗體2 ;采用化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)(即吸附法)將第一抗體2,即羊抗 牛IgG吸附到多鐵性材料磁傳感元件4的保護(hù)層表面;通過抗原1與第一抗體2的免疫應(yīng) 答反應(yīng)掛接抗原1,即牛蛋白IgG與羊抗牛IgG的免疫應(yīng)答反應(yīng)掛接牛蛋白IgG ;通過第二 抗體3與抗原1的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原1進(jìn)行磁標(biāo)記,即通過Protein G與牛蛋白IgG的 免疫應(yīng)答反應(yīng)對牛蛋白IgG進(jìn)行磁標(biāo)記。圖2是本發(fā)明一種抗原檢測方法的示意圖。圖2中選用間接標(biāo)記法對抗原1進(jìn)行 磁標(biāo)記,第一抗體2與多鐵性材料磁傳感元件4的表面相連接,通過抗原1與第一抗體2的 免疫應(yīng)答反應(yīng)捕獲抗原1。第二抗體3吸附了納米磁性顆粒,通過第二抗體3與抗原1的 免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原1進(jìn)行磁標(biāo)記。對磁標(biāo)記進(jìn)行磁化處理時,磁標(biāo)記產(chǎn)生的磁場作用于 多鐵性材料磁傳感元件4的鐵磁層,根據(jù)磁電耦合效應(yīng),多鐵性材料磁傳感元件4中鐵電層 的電極化強(qiáng)度(P = α H)將發(fā)生變化,通過外加電路中補(bǔ)償電荷電量的測量即可探知抗原 1的濃度。保護(hù)層,也可稱生物固定層,由10 500nm厚的SiO2或者類金剛石薄膜構(gòu)成,而 且保護(hù)層經(jīng)過氨基化、醛基化處理。上電極層與下電極層的材料選自鉬、金、鈦、鎢、鉭、鋁、銅或者銀中的一種或者多 種,可以采用磁控濺射或者電子束蒸發(fā)的方法來制備上電極層與下電極層。鐵電層的材料選取范圍很廣,可以是鈦酸鋇(BaTiO3)、鈦酸鋇的摻雜材料、鉛基鐵 電材料或者單相多鐵材料構(gòu)成;鉛基鐵電材料可以是鈦酸鉛(PbTiO3)、鋯鈦酸鉛(Pb(&, Ti)O3)、鈦酸鉛鑭((La, Pb)TiO3)、鋯鈦酸鉛鑭((La, Pb) (Zr, Ti)O3)、鈮鎂酸鉛(Pb (Mg,Nb) O3)、鈮鋅酸鉛(Pb (Zn, Nb) O3)、鈮鈧酸鉛(Pb (Sc, Nb) O3)、鈮鎂酸鉛-鈦酸鉛(Pb (Mg,Nb) O3-PbTiO3)、鈮鋅酸鉛_鈦酸鉛(Pb (Zn, Nb) O3-PbTiO3)或者鈮鈧酸鉛_鈦酸鉛(Pb (Sc, Nb) O3-PbTiO3)、鈦酸鋇(BaTiO3)、鈦酸鍶鋇((Ba,Sr)TiO3)、鐵酸鉍(BiFeO3)等;單相多鐵材料可以是鐵酸鉍(BiFeO3)??梢圆捎妹}沖激光沉積(PLD)、磁控濺射或者電子束蒸發(fā)的方法來制備上述鐵電層。鐵磁層的材料可以是鈷鉻合金(Co-Cr)、鈷鈀多層膜(Co/Pd)、鈷鉬多層膜(Co/Pt)、釤鈷合金(Sm-Co)、釤鈷鉻合金(Sm-C0-Cr)、鈷摻雜的Y相三氧化二鐵(Co- y -Fe2O3)、 鈷摻雜的四氧化三鐵(Co-Fe3O4)、Y相三氧化二鐵(Y -Fe2O3)、四氧化三鐵(Fe3O4)、 鋇鐵氧體(BaFe2O4)、鍶鐵氧體(SrFe2O4)、鎳鐵氧體(Ni Fe2O4)、鈷鐵氧體(CoFe2O4)、鐵 (Fe)、鈷(Co)、鎳(Ni)、鐵鈷合金(Fe-Co)、鐵鈷鎳合金(Fe-Ni)、鋱鏑鐵磁致伸縮合金 (Terfenol-D)、錳酸鍶鑭(La,Sr) MnO3、錳酸鈣鑭(La,Ca) MnO3、錳酸鋇鑭(La,Ba) MnO3、錳酸 鉛鑭(La,Pb) MnO3或者錳酸銀鑭(La,Ag)Mn03??梢圆捎么趴貫R射或者電子束蒸發(fā)的方法來制備上述鐵磁層,此外,也可采用環(huán) 氧膠粘結(jié)的方法粘結(jié)鐵電層與鐵磁層。實(shí)施例1 采用PMN-PT (鈮鎂酸鉛-鈦酸鉛)作為鐵電層,尺寸為6mmX 3mmX 0. 5mm, Laa7Sra3MnO3作為鐵磁層,上電極與下電極均采用Au電極,保護(hù)層為Si02。多鐵性材料磁 傳感元件的結(jié)構(gòu)依次為保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層和下電極層。多鐵性材料磁傳感元件的制備方法如下(1)用脈沖激光沉積(PLD)的方法在PMN-PT基底上生長IOOnm厚的Latl.7Sr0.3Μη03。 激光脈沖頻率為2Hz,激光的能量為300mJ,沉積氣氛為O2,沉積壓強(qiáng)為50Pa,沉積溫度為 800度,沉積時間為lOmin。(2)用電子束蒸發(fā)的方法在Laa7Sra3MnO3和PMN-PT背面上生長50nm厚的Au電 極。背底真空為2X 10_4Pa,沉積速率為1 A/s。(3)用磁控濺射的方法在Au電極表面生長50nm厚的SiO2保護(hù)層。背底真空為 7 X10_5Pa,濺射氣氛為OjPAr的混合氣體,其中,P (O2) P(Ar) =2 1,濺射壓強(qiáng)為lPa, 濺射功率為60W,射頻濺射。磁標(biāo)記的方法如下(1)保護(hù)層的清洗用體積比為H202 (濃度為30%) H2S04(濃度為98%)= 1 3的混和溶液浸泡保護(hù)層,然后用丙酮沖洗,風(fēng)干,去除表面的有機(jī)物和雜質(zhì);(2)保護(hù)層表面氨基化處理用濃度為3%,5%,12%的氨基硅烷的乙醇溶液依次 對保護(hù)層表面進(jìn)行處理,溫度為室溫,然后水洗、晾干;(3)保護(hù)層表面醛基化處理將上述氨基化處理的保護(hù)層浸入3%的戊二醛 PBS (鹽酸緩沖液)溶液中,作用40-50分鐘,用PBS溶液清洗晾干;(4)掛接第一抗體設(shè)定不同濃度的羊抗??贵w(0. lmg/mL 0. 5mg/mL),利用經(jīng) 氨基、醛基化處理的保護(hù)層表面的醛基與羊抗??贵w之間的化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)來掛接羊抗牛抗 體;(5)掛接抗原利用羊抗牛IgG與牛蛋白IgG抗原免疫應(yīng)答反應(yīng),掛接牛蛋白IgG 抗原;(6)進(jìn)行磁標(biāo)記=Protein G第二抗體(帶有磁性微球)與抗原牛蛋白IgG發(fā)生免 疫應(yīng)答反應(yīng),進(jìn)行磁標(biāo)記;
信號發(fā)生器采用上海君達(dá)儀器廠的GSF_3015(頻率范圍0.01Hz 15MHz);電 荷放大器采用北京京儀北方儀器廠的DHF-2(電荷靈敏度1 10.99PC/ms2);示波器 TDS2004B (4 通道,帶寬 60MHz);測量本發(fā)明的抗原檢測方法的響應(yīng)時,首先通過外加500V的直流電壓來極化PMN-PT鐵電層,然后通過外加的交流磁場對磁標(biāo)記進(jìn)行磁化,通過示波器記錄輸出信號的 變化,反應(yīng)出所探測抗原的濃度。本實(shí)施例的方法同樣可以應(yīng)用于鐵磁層與鐵電層由其他材料構(gòu)成的多鐵性材料 磁傳感元件中。實(shí)施例2 采用MN-PT作為鐵電層,尺寸為6_X3_X0. 5mm,Terfenol-D作為鐵磁層,電極 采用Au電極,保護(hù)層Si02。多鐵性材料磁傳感元件4的結(jié)構(gòu)為保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、 鐵電層、鐵磁層和下電極層。多鐵性材料磁傳感元件4的制備方法如下(1)用磁控濺射的方法在雙拋的PMN-PT基底的正反面上各生長IOOnm厚的 Terfenol-D。背底真空為7X 10_5Pa,濺射氣氛為Ar,濺射壓強(qiáng)為lPa,直流濺射。(2)用電子束蒸發(fā)的方法在Terfenol-D上生長50nm厚的Au上電極和Au下電極。 背底真空為2 X10_4Pa,沉積速率為1 A/s。(3)用磁控濺射的方法在Au上電極表面生長50nm厚的SiO2保護(hù)層。背底真空為 7X10_5Pa,濺射氣氛為OjPAr的混合氣體,其中,P(O2) P(Ar) =2 1,濺射壓強(qiáng)外為 lPa,濺射功率為60W,射頻濺射。磁標(biāo)記的過程、所用的測量儀器和方法與實(shí)施例1相同。本實(shí)施例的方法同樣可以應(yīng)用于鐵磁層與鐵電層由其他材料構(gòu)成的多鐵性材料 磁傳感元件中。實(shí)施例3 采用PMN-PT作為鐵電層,尺寸為6謹(jǐn)X 3謹(jǐn)X 0. 5謹(jǐn),Terfenol-D作為鐵磁層,尺寸 為6mmX3mmX0. 5mm,上電極與下電極均采用Au電極,保護(hù)層為SiO2,多鐵性材料磁傳感元 件4的結(jié)構(gòu)為保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層和下電極層。(1)用環(huán)氧導(dǎo)電膠(E-Solder No. 302LACME Division of Allied Products Co., CONN, USA)將PMN-PT與Terfenol-D粘結(jié)好,在60°C的環(huán)境中,加IOMPa的壓力固化6h。(2)用電子束蒸發(fā)的方法在Terfenol-D的上表面生長50nm厚的Au下電極, PMN-PT的背面生長50nm厚的Au下電極。背底真空2 X 10_4Pa,沉積速率1 A/s。(3)用磁控濺射的方法生長50nm厚的SiO2保護(hù)層。背底真空為7X10_5Pa,濺射 氣氛02、Ar,P(O2) P(Ar) =2 1,濺射壓強(qiáng)為lPa,濺射功率為60W,射頻濺射。磁標(biāo)記的過程、所用的測量儀器和方法與實(shí)施例1相同。本實(shí)施例的方法同樣可以應(yīng)用于鐵磁層與鐵電層由其他材料構(gòu)成的磁傳感元件 中。
權(quán)利要求
一種抗原檢測方法,其特征是通過抗原(1)與抗體之間的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原(1)進(jìn)行磁標(biāo)記,利用傳感元件檢測磁標(biāo)記從而識別抗原(1);所述的傳感元件是多鐵性材料磁傳感元件(4);所述的抗體通過化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)吸附在所述的多鐵性材料磁傳感元件(4)的表面。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的磁標(biāo)記通過直接標(biāo)記 法或者間接標(biāo)記法實(shí)現(xiàn);所述的直接標(biāo)記法中,抗體通過物理或者化學(xué)吸附與磁性顆粒結(jié) 合,抗體通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原(1)進(jìn)行磁標(biāo)記;所述的間接標(biāo)記法中,抗體包括第一抗 體(2)與第二抗體(3),第一抗體(2)通過化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)吸附在所述的多鐵性材料磁傳感元 件(4)的表面,第二抗體(3)通過物理或者化學(xué)吸附與磁性顆粒結(jié)合,抗原(1)與第一抗體 (2)通過免疫應(yīng)答反應(yīng)進(jìn)行結(jié)合,第二抗體(3)通過免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原(1)進(jìn)行磁標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的磁性顆粒是鐵、鈷、鎳、 Y相三氧化二鐵、四氧化三鐵、釤鈷合金、鐵碳合金、鐵_碳化鐵合金、鈷鉻合金、鈷鉬合金 或者鈷鈀合金。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一權(quán)利要求所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的 多鐵性材料磁傳感元件(4)依次由保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層和下電極層構(gòu)成,或 者由保護(hù)層、上電極層、鐵磁層、鐵電層、鐵磁層和下電極層構(gòu)成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)具體包 括如下步驟步驟1 對所述的保護(hù)層進(jìn)行清洗、表面氨基化處理和醛基化處理;步驟2 將所述的抗體與經(jīng)步驟1處理后的保護(hù)層表面的醛基進(jìn)行反應(yīng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的鐵磁層是采用磁控濺 射或者電子束蒸發(fā)的方法在所述的鐵磁層表面制備得到,或者是采用環(huán)氧膠粘結(jié)的方法粘 結(jié)在所述的鐵電層表面。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的保護(hù)層由10 500nm 厚的SiO2或者類金剛石薄膜構(gòu)成。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的上電極層和下電極層 分別由鉬、金、鈦、鎢、鉭、鋁、銅和銀中的一種材料構(gòu)成。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的鐵電層由鈦酸鋇、鈦酸 鋇摻雜材料、鉛基鐵電材料或者單相多鐵材料構(gòu)成;所述的鉛基鐵電材料是鈦酸鉛、鋯鈦酸 鉛、鈦酸鉛鑭、鋯鈦酸鉛鑭、鈮鎂酸鉛、鈮鋅酸鉛、鈮鈧酸鉛、鈮鎂酸鉛摻雜的鈦酸鉛、鈮鋅酸 鉛摻雜的鈦酸鉛或者鈮鈧酸鉛摻雜的鈦酸鉛;所述的單相多鐵材料是鐵酸鉍。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗原檢測方法,其特征是所述的鐵磁層由鈷基材料、 鐵氧體材料、鐵磁性金屬、鐵磁性合金或者鈣鈦礦結(jié)構(gòu)氧化物構(gòu)成;所述的鈷基材料包括鈷 鉻合金、鈷鈀多層膜、鈷鉬多層膜、釤鈷合金、釤鈷鉻合金、鈷摻雜的Y相三氧化二鐵或者 鈷摻雜的四氧化三鐵;所述的鐵氧體材料包括Y相三氧化二鐵、四氧化三鐵、鋇鐵氧體、鍶 鐵氧體、鎳鐵氧體或者鈷鐵氧體;所述的鐵磁性金屬包括鐵、鈷或者鎳;鐵磁性合金包括鐵 鈷合金、鐵鈷鎳合金或者鋱鏑鐵磁致伸縮合金;所述的鈣鈦礦結(jié)構(gòu)氧化物包括錳酸鍶鑭、錳 酸鈣鑭、錳酸鋇鑭、錳酸鉛鑭或者錳酸銀鑭。
全文摘要
本發(fā)明一種抗原檢測方法將多鐵性材料磁傳感技術(shù)與免疫磁標(biāo)記技術(shù)巧妙地結(jié)合在一起,通過抗原與抗體之間的免疫應(yīng)答反應(yīng)對抗原進(jìn)行磁標(biāo)記,對磁標(biāo)記進(jìn)行磁化處理產(chǎn)生磁信號,利用多鐵性材料磁傳感元件將磁信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺ㄟ^對電信號的檢測實(shí)現(xiàn)對抗原的識別分析;本發(fā)明的抗原檢測方法簡單易于實(shí)現(xiàn)、檢測成本低廉、具有高檢測精度,可應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、發(fā)酵工業(yè)、食品工業(yè)等眾多領(lǐng)域。
文檔編號G01N33/532GK101846673SQ20101017688
公開日2010年9月29日 申請日期2010年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月17日
發(fā)明者劉宜偉, 李潤偉, 陳斌 申請人:中國科學(xué)院寧波材料技術(shù)與工程研究所