專利名稱：：氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)和高效液相色譜測定中藥里安定成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于一種測定中藥里安定成分的方法，具體涉及一種氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)和高效液相色譜測定中藥里安定成分的方法。
背景技術(shù)：
：目前世界上，有不少神經(jīng)疾病患者。其表現(xiàn)是較嚴(yán)重的焦慮、失眠、驚厥、癲癎等。他們常常需要使用一些安定情緒的藥品。治療神經(jīng)疾病的藥物有幾十種。其中，西藥是化學(xué)合成的，有一定組成結(jié)構(gòu)和較固定的分析方法。我國是中藥發(fā)源地，中藥來源豐富，常常也有較好的療效。但目前許多中藥的成分不為人知，嚴(yán)重影響它的利用。為保護(hù)和開發(fā)我國的中藥資源，建立一些現(xiàn)代化的分析方法，搞清楚中藥的成分是有必要的，經(jīng)檢索，未發(fā)現(xiàn)對中藥里安定成分的測定方法的文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種采用溶劑抽提，氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)合高液相色譜的對中藥里安定成分的測定分析法。本發(fā)明所指中藥里安定成分是指具有一定結(jié)構(gòu)的，與西藥對應(yīng)的對神經(jīng)有穩(wěn)定作用的成分。本發(fā)明具體的測定分析法包括如下步驟一、測定儀器和實(shí)施條件①.WatersBreeze1525高效液體色譜儀，美國制造，儀器配有Watersl525Binary高效液體色譜泵，Dualλ2487紫外檢測器，色譜柱型號為VP-ODSSHIMADZU,4.6x150mm，3個(gè)色譜柱，日本制造，分析中以3個(gè)色譜柱串聯(lián)使用，色譜流動相為乙醇，流速0.6毫升/分，色譜柱壓為2400PSI，柱溫14°C，紫外波長選在254nm；②菲尼根跟蹤氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)分析儀由美國菲尼根公司提供，氣相色譜/質(zhì)譜分析的條件色譜柱是一個(gè)DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑，薄膜厚度為0.25毫。載氣為氦氣1.Oml/min,初始溫度為70°C，保持4分鐘，然后以10°C/分鐘上升率，最后加熱至250°C，停留3分鐘，電子轟擊為70電子伏，原子質(zhì)量范圍為30-350；③試劑和樣品試劑乙醇為分析純試劑，由天津市博迪化工有限公司生產(chǎn)；中藥路路通，云南制藥廠生產(chǎn)；棗仁安神顆粒，黑龍江濟(jì)仁藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；外標(biāo)物為西藥(說明書中具有安定作用)純舒樂安定，其來自艾司唑侖片(EstazolamTablets)，化學(xué)名為6_苯基_8_氯_4H_〔1，2，4〕-三氮唑〔4，3_α(1，4)苯并二氮雜卓定，天津太平洋制藥有限公司生產(chǎn)；純氯硝安定，來自氯硝西泮片(Clonaz印amTablets)，化學(xué)名為1，3-二氫_7_硝基_5_(2-氯苯基)-2H-1，4-苯并二氮雜卓_2_酮，由江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；二、中藥中安定成分的分析方法(1)中藥成分的抽提和制備將中藥研磨成粉末，稱取0.1-0.5克，將其置于50毫升三角瓶中，加入50毫升乙醇，將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理，再放置24小時(shí)，過濾，以清液進(jìn)行儀器分析；(2)中藥中安定成分的定性分析(一)、色譜/質(zhì)譜(GC/MS)定性①色譜保留值定性法在相同的色譜條件下，中藥分離譜圖中的組分，若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間是一致的，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間不同，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；②質(zhì)譜比較定性法中藥分離譜圖中的組分，若其質(zhì)譜特征圖和所對應(yīng)的純試劑的質(zhì)譜特征圖是基本一致，即其質(zhì)譜圖的質(zhì)荷比(m/z)相同，并具有較高的匹配度，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分。若其質(zhì)譜特征圖和對應(yīng)的純試劑的質(zhì)譜特征圖不同，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；關(guān)于GC/MS定性的補(bǔ)充說明通常，對一個(gè)未知物的分離譜圖的每個(gè)色譜峰，GC/MS儀器都可以給出可能的化合物，和相應(yīng)的匹配度。有時(shí)候，這種定性是亦是準(zhǔn)確的，甚至不需要純試劑再核實(shí)。但本工作對所確定的組分還以純化合物進(jìn)行了再核實(shí)。因?yàn)檫@種多種定性總是更為準(zhǔn)確，周全。(二)、高效液相色譜(HPLC)定性以HPLC分離中藥時(shí)，對所確定的成分，若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間是一致，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分。若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間不一致的，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；(3)中藥成分的定量測定在前述定性的基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜外標(biāo)法定量，以所確定中藥成分的對應(yīng)試劑為外標(biāo)物，其制備如下將外標(biāo)物研磨成粉末，稱取0.01-0.05克，置其于50毫升三角瓶中，加入50毫升乙醇。將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)的處理，放置24小時(shí)。過濾，取清液進(jìn)行儀器分析，過程中濾紙和三角瓶都需要稱重以計(jì)算真正的溶解濃度。外標(biāo)法定量時(shí)，其計(jì)算公式如下W%=R樣/R外標(biāo)XC外標(biāo)/C樣XV外標(biāo)/V樣X100%-----------------------(1)式中代表中藥成分中所含安定成分的重量百分含量，R#代表中藥中所含安定成分的HPLC響應(yīng)值，Rms代表外標(biāo)安定的HPLC響應(yīng)值，和C#分別代表外標(biāo)和中藥所配制的濃度(克/毫升)，V—和V-分別代表外標(biāo)和中藥在色譜分析中的進(jìn)樣量(微升)本發(fā)明的特點(diǎn)1.建立了一個(gè)分析方法，此法可以鑒別中藥中的安定成分。2.所用氣相色譜采用DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑的色譜柱，液相色譜分析采用了3個(gè)色譜柱串聯(lián)。這使色譜分析呈現(xiàn)了高分辨特性，確保了準(zhǔn)確定性。樣品制備采用乙醇試劑，對人無毒，有利環(huán)保。液相色譜流動相也采用乙醇，避免了分析中制備樣品的沉淀也有利環(huán)境保護(hù)。3.中藥成分極其復(fù)雜，分離和鑒定都較困難，本方法開拓了中藥中安定成分的檢測方法。圖1純氯硝安定的分子結(jié)構(gòu)2氣質(zhì)分析中棗仁安神顆粒的分離3氣質(zhì)分析中純氯硝安定的分離4氣質(zhì)分析中棗仁安神補(bǔ)腦劑所確定氯硝安定的質(zhì)譜5氣質(zhì)分析中純氯硝安定的質(zhì)譜6中藥棗仁安神顆粒的高效液相色譜分離譜7純氯硝安定的高效液相色譜分離譜8純舒樂安定的分子結(jié)構(gòu)9氣質(zhì)分析中路路通中藥的分離10氣質(zhì)分析中純舒樂安定的分離11氣質(zhì)分析中路路通中舒樂安定成分的質(zhì)譜12氣質(zhì)分析中純舒樂安定的質(zhì)譜13中藥路路通的高效液相色譜分離譜14純舒樂安定的高效液相色譜分離譜圖具體實(shí)施例方式實(shí)施例1棗仁安神顆粒的測定一.測定儀器和實(shí)施條件①.WatersBreeze1525高效液體色譜儀，美國制造，儀器配有Watersl525Binary高效液體色譜泵，Dualλ2487紫外檢測器，色譜柱型號為VP-ODSSHIMADZU,4.6x150mm，日本制造，分析中以3個(gè)色譜柱串聯(lián)使用，色譜流動相為乙醇，流速0.6毫升/分，色譜柱壓為2400PSI，柱溫14°C，紫外波長選在254nm；②菲尼根跟蹤氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)分析儀由美國菲尼根公司提供，氣相色譜/質(zhì)譜分析的條件色譜柱是一個(gè)DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑，薄膜厚度為0.25毫。載氣為氦氣1.Oml/min,初始溫度為70°C，保持4分鐘，然后以10°C/分鐘上升率，最后加熱至250°C，停留3分鐘，電子轟擊為70電子伏，原子質(zhì)量范圍為30-350；③試劑和樣品試劑乙醇為分析純試劑，由天津市博迪化工有限公司生產(chǎn)；中藥棗仁安神顆粒由黑龍江濟(jì)仁藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；西藥(說明書中具有安定作用)純氯硝安定，來自氯硝西泮片(Clonaz印amTablets)，化學(xué)名為1，3-二氫_7_硝基_5_(2-氯苯基)-2H-1，4-苯并二氮雜卓_2_酮，由江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；二、中藥安神顆粒中安定成分的分析方法1.中藥棗仁安神顆粒抽提和制備將中藥棗仁安神顆粒研磨成粉末，稱取一份0.4821克，將其置于三角瓶中，加入50毫升乙醇將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理。放置24小時(shí)，過濾，取清液進(jìn)行儀器分析。樣品進(jìn)行氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)和高效液相色譜(HPLC)分析。2.中藥棗仁安神顆安定成分的定性方法2.1.GC-MS定性①色譜的保留值定性法在相同的色譜條件下，中藥分離譜圖中所確定組分的色譜保留時(shí)間應(yīng)該和所對應(yīng)的純試劑有一致的色譜保留時(shí)間；②質(zhì)譜比較定性法中藥分離譜圖中所確定組分的質(zhì)譜圖應(yīng)該和所對應(yīng)的純試劑質(zhì)譜圖基本一致，即質(zhì)譜圖的質(zhì)荷比(m/z)相同；2.2.HPLC定性以HPLC分離中藥時(shí)，所確定中藥成分的色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的準(zhǔn)純樣的色譜保留時(shí)間應(yīng)該一致；3.中藥棗仁安神顆安定成分的定性結(jié)果，最終，分析結(jié)果確定，棗仁安神顆粒中含有氯硝安定成分，定性依據(jù)匯總于表1。其中，在GC/MS分析中，氯硝安定的色譜保留時(shí)間為28.02分；“棗仁安神”所確定組分的色譜保留時(shí)間為28.02分。氯硝安定MS的質(zhì)荷比為39,51,63,75,89,102.125，133，151，164，177，193，205，213，234，252，268，280，286，314；所確定組分的質(zhì)荷比為39，51，63，75，89，102.125，133，151，164，177，193，205，213，234，252，268，280，286，314。以MS分析“棗仁安神”，其匹配度達(dá)95%。HPLC分析中，純氯硝安定的色譜保留時(shí)間為8.36分，“棗仁安神”所確定組分的色譜保留時(shí)間為8.36分?？梢钥吹剑皸椚拾采瘛彼幹写_切地存在氯硝安定成分。4.棗仁安神顆中安定成分的定量方法和結(jié)果在前述定性的基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜外標(biāo)法定量。以確定中藥成分的對應(yīng)試劑為外標(biāo)物，其制備如下將氯硝安定研磨成粉末，稱取0.01克，置其于50毫升三角瓶中，加入50毫升乙醇。將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理，放置24小時(shí)。過濾，取清液進(jìn)行儀器分析，過程中濾紙和三角瓶均需稱重以計(jì)算真正的溶解濃度。此配制液一方面是HPLC分析的外標(biāo)，也是GC/MS分析時(shí)的核實(shí)標(biāo)準(zhǔn)(定性部分已述)外標(biāo)法定量時(shí)，其計(jì)算公式如下R樣/R外標(biāo)XC外標(biāo)/C樣XV外標(biāo)/V樣X100%-----------------(1)式中代表中藥成分中所含安定成分的重量百分含量，R#代表中藥中所含安定成分的HPLC響應(yīng)值，Rms代表外標(biāo)安定的HPLC響應(yīng)值，和C#分別代表外標(biāo)和中藥所配制的濃度(克/毫升)，V—和V-分別代表外標(biāo)和中藥在色譜分析中的進(jìn)樣量(微升)定量結(jié)果示于表3，中藥棗仁安神顆中氯硝安定含量為0.0118%(平均值)。實(shí)施例2中藥路路通的測定—.測定儀器和實(shí)施條件①.WatersBreeze1525高效液體色譜儀，美國制造，儀器配有Watersl525Binary高效液體色譜泵，Dualλ2487紫外檢測器，色譜柱型號為VP-ODSSHIMADZU,4.6x150mm，日本制造，分析中以3個(gè)色譜柱串聯(lián)使用，色譜流動相為乙醇，流速0.6毫升/分，色譜柱壓為2400PSI，柱溫14°C，紫外波長選在254nm；②菲尼根跟蹤氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)分析儀由美國菲尼根公司提供，氣相色譜/質(zhì)譜分析的條件色譜柱是一個(gè)DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑，薄膜厚度為0.25毫。載氣為氦氣1.Oml/min,初始溫度為70°C，保持4分鐘，然后以10°C/分鐘上升率，最后加熱至250°C，停留3分鐘，電子轟擊為70電子伏，原子質(zhì)量范圍為30-350；③試劑和樣品試劑乙醇為分析純試劑，由天津市博迪化工有限公司生產(chǎn)；中藥路路通，云南制藥廠生產(chǎn)；西藥(說明書中具有安定作用)純舒樂安定，來自艾司唑侖片(EstazolamTablets)，化學(xué)名為6-苯基-8-氯-4H-〔1，2，4〕-三氮唑〔4，3_α(1,4)苯并二氮雜卓定，天津太平洋制藥有限公司生產(chǎn)；二、中藥路路通中安定成分的分析方法1.中藥路路通的抽提和制備將中藥路路通研磨成粉末，稱取一份0.5103克，將其置于三角瓶中，加入50毫升乙醇將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理。放置24小時(shí)。過濾，取清液進(jìn)行儀器分析。樣品進(jìn)行氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)和高效液相色譜(HPLC)分析。2.中藥路路通中安定成分的定性方法1.GC-MS定性①色譜保留值定性法在相同的色譜條件下，中藥分離譜圖中所確定組分的色譜保留時(shí)間應(yīng)該和所對應(yīng)的純試劑有一致的色譜保留時(shí)間。②質(zhì)譜比較定性法中藥分離譜圖中所確定組分的質(zhì)譜圖應(yīng)該和所對應(yīng)的純試劑質(zhì)譜圖基本一致，即質(zhì)譜圖的質(zhì)荷比(m/z)相同。2.HPLC定性中藥成分分離中，所確定中藥成分的色譜保留時(shí)間和對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)物(純樣)的色譜保留時(shí)間應(yīng)該一致。3.中藥路路通安定成分的定性結(jié)果最終，分析結(jié)果確定，路路通中含有舒樂安定成分，定性依據(jù)匯總于表1。其中，在GC/MS分析中，舒樂安定的色譜保留時(shí)間為28.70分；“路路通”所確定組分的色譜保留時(shí)間為28.70分。MS分析時(shí)，舒樂安定的質(zhì)荷比為44，51，63，77，89，102，129，137，190，205，213，231，239。269，270，294；路路通中所確定組分的質(zhì)荷比為44，51，63，77，89，102，129，137，190，205，213，231，239。269，270，294。MS分析時(shí)，“路路通”的匹配度達(dá)95%。HPLC分析中，舒樂安定的色譜保留時(shí)間為8.66分，“路路通”所確定組分的色譜保留時(shí)間為8.66分。可以看到，“路路通”藥中確切地存在舒樂安定成分。4.路路通中安定成分的定量方法和結(jié)果在前述定性的基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜外標(biāo)法定量。以確定中藥成分的對應(yīng)試劑為外標(biāo)物，其制備如下將中藥路路通確定的安定成分(舒樂安定)研磨成粉末，稱取0.0112克，置其于50毫升三角瓶中，加入50毫升乙醇。將三角瓶置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理，放置24小時(shí)。過濾，取清液進(jìn)行儀器分析，過程中濾紙和三角瓶均需稱重以計(jì)算真正的溶解濃度。此配制液一方面是HPLC分析的外標(biāo)，也是GC/MS分析時(shí)的核實(shí)標(biāo)準(zhǔn)(定性部分已述)外標(biāo)法定量時(shí)，其計(jì)算公式如下R樣/R外標(biāo)XC外標(biāo)/C樣XV外標(biāo)/V樣X100%----------------(1)式中代表中藥成分中所含安定成分的重量百分含量，R#代表中藥成分中所含安定成分的HPLC響應(yīng)值，Rms代表外標(biāo)安定HPLC響應(yīng)值，C,和(#分別代表外標(biāo)和中藥所配制的濃度(克/毫升)，V—和V-分別代表外標(biāo)和中藥在色譜分析中的進(jìn)樣量(微升)定量結(jié)果示于表3，中藥路路通中的舒樂安定含量為0.0270%(平均值)。表1中藥棗仁安神顆粒中氯硝安定成分的確定.<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2中藥路路通中舒樂安定成分的確定<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表3中藥中安定成分的定量結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權(quán)利要求一種氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)和高效液相色譜測定中藥里安定成分的方法，其特征在于包括如下步驟本發(fā)明具體的測定分析法包括如下步驟一、測定儀器和實(shí)施條件①.WatersBreeze1525高效液體色譜儀，美國制造，儀器配有Waters1525Binary高效液體色譜泵，Dualλ2487紫外檢測器，色譜柱型號為VP-ODSSHIMADZU，4.6x150mm，3個(gè)色譜柱，日本制造，分析中以3個(gè)色譜柱串聯(lián)使用，色譜流動相為乙醇，流速0.6毫升/分，色譜柱壓為2400PSI，柱溫14℃，紫外波長選在254nm；②菲尼根跟蹤氣相色譜/質(zhì)譜分析儀由美國菲尼根公司提供，氣相色譜/質(zhì)譜分析的條件色譜柱是一個(gè)DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑，薄膜厚度為0.25毫，載氣為氦氣1.0ml/min，初始溫度為70℃，保持4分鐘，然后以10℃/分鐘上升率，最后加熱至250℃，停留3分鐘，電子轟擊為70電子伏，原子質(zhì)量范圍為30-350；③試劑和樣品試劑乙醇為分析純試劑；外標(biāo)物為西藥純舒樂安定，其來自艾司唑侖片，化學(xué)名為6-苯基-8-氯-4H-〔1，2，4〕-三氮唑〔4，3-α(1，4)苯并二氮雜卓定；純氯硝安定，來自氯硝西泮片，化學(xué)名為1，3-二氫-7-硝基-5-(2-氯苯基)-2H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮；(1)中藥成分的抽提和制備將中藥研磨成粉末，稱取0.1-0.5克，加入50毫升乙醇，置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)處理，再放置24小時(shí)，過濾，以清液進(jìn)行儀器分析；(2)中藥中安定成分的定性分析(一)、色譜/質(zhì)譜定性①色譜保留值定性法在相同的色譜條件下，中藥分離譜圖中的組分，若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間是一致的，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間不同，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；②質(zhì)譜比較定性法中藥分離譜圖中的組分，若其質(zhì)譜特征圖和所對應(yīng)的純試劑的質(zhì)譜特征圖是基本一致，即其質(zhì)譜圖的質(zhì)荷比為m/z相同，并具有較高的匹配度，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分，若其質(zhì)譜特征圖和對應(yīng)的純試劑的質(zhì)譜特征圖不同，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；(二)、高效液相色譜定性以HPLC分離中藥時(shí)，對所確定的成分，若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間是一致，說明中藥具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分，若其色譜保留時(shí)間和對應(yīng)的純試劑的色譜保留時(shí)間不一致的，說明中藥不具有對應(yīng)外標(biāo)物的安定成分；(3)中藥成分的定量測定在前述定性的基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜外標(biāo)法定量，以所確定中藥成分的對應(yīng)試劑為外標(biāo)物，其制備如下將外標(biāo)物研磨成粉末，稱取0.01-0.05克，加入50毫升乙醇，置于超聲波設(shè)備中，進(jìn)行1小時(shí)的處理，放置24小時(shí)，過濾，取清液進(jìn)行儀器分析，過程中濾紙和三角瓶都需要稱重以計(jì)算真正的溶解濃度；外標(biāo)法定量時(shí)，其計(jì)算公式如下W％＝R樣/R外標(biāo)×C外標(biāo)/C樣×V外標(biāo)/V樣×100％--------------------(1)式中W％代表中藥成分中所含安定成分的重量百分含量，R樣代表中藥中所含安定成分的HPLC響應(yīng)值，R外標(biāo)代表外標(biāo)安定的HPLC響應(yīng)值，C外和C樣分別代表外標(biāo)和中藥所配制的濃度，濃度單位為克/毫升，V外標(biāo)和V樣分別代表外標(biāo)和中藥在色譜分析中的進(jìn)樣量，進(jìn)樣量單位為微升。全文摘要一種氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)和高效液相色譜測定中藥里安定成分的方法是采用溶劑抽提，氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)合高液相色譜的對中藥里安定成分的測定分析法。所用氣相色譜采用DB-5MS柱，30米長，0.25毫米內(nèi)徑的色譜柱，液相色譜分析采用了3個(gè)色譜柱串聯(lián)。這使色譜分析呈現(xiàn)了高分辨特性，確保了準(zhǔn)確定性。樣品制備采用乙醇試劑，對人無毒，有利環(huán)保。液相色譜流動相也采用乙醇，避免了分析中制備樣品的沉淀也有利環(huán)境保護(hù)。中藥成分極其復(fù)雜，分離和鑒定都較困難，本方法開拓了中藥中安定成分的檢測方法。文檔編號G01N30/06GK101825617SQ201010139010公開日2010年9月8日申請日期2010年4月1日優(yōu)先權(quán)日2010年4月1日發(fā)明者張昌鳴,程秋霞,黃冬梅,黃張根申請人:中國科學(xué)院山西煤炭化學(xué)研究所