專利名稱：一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種試劑盒，尤其是涉及一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒。
背景技術(shù)：
人口老齡化是當(dāng)今世界各國面臨的重大社會(huì)問題，已經(jīng)引起國際社會(huì)的廣泛關(guān)注。據(jù)有關(guān)方面統(tǒng)計(jì)，我國北京、上海等大城市已邁入了老齡城市，下個(gè)世紀(jì)前半期我國就將進(jìn)入老齡社會(huì)，老年人的心理及身體健康問題已提上了議事日程。人口老齡化一方面是我國經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展、人民生活水平提高、醫(yī)療衛(wèi)生條件改善的結(jié)果，是社會(huì)文明進(jìn)步的重要標(biāo)志；另一方面，老年群體的增加關(guān)系國計(jì)民生，關(guān)系改革、發(fā)展、穩(wěn)定大局，關(guān)系我國和諧建設(shè)。如今，“銀色浪潮”正悄悄襲來，關(guān)注、關(guān)愛老人就更有具廣泛而深遠(yuǎn)的意義。老年癡呆癥是老年人腦部功能失調(diào)的一種表現(xiàn)，是以智力衰退、行為及人格變化為特征。典型臨床癥狀包括有記憶力、抽象思考、定向力障礙，同時(shí)伴有社會(huì)活動(dòng)能力減退。 主要表現(xiàn)為健忘、目光呆滯、口齒遲鈍，繼而影響知覺神經(jīng)，失去自理能力。它已成為老年人健康的一大克星。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，世界范圍內(nèi)65歲以上的老年人中，老年癡呆癥患者已占到5%。國外的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)老年癡呆是僅次于心血管病、腦血管病和惡性腫瘤，居第四位的老年人死因。有人預(yù)測，老年癡呆癥將是下世紀(jì)最可怕的老年病。目前，老年癡呆癥已引起許多老年病科學(xué)家、醫(yī)學(xué)家們的關(guān)注，對其病因、誘發(fā)因素開展了廣泛的實(shí)驗(yàn)研究。阿爾茨海默病(Alzheimer’ s Disease AD)就是老年癡呆癥中的一種。是我國各地區(qū)老年病研究中心重點(diǎn)關(guān)注的疾病之一。阿爾茨海默病的特點(diǎn)是在腦細(xì)胞外有斑塊存在與胞內(nèi)有神經(jīng)纖維原纏結(jié)存在。組成這些斑塊的蛋白質(zhì)是β-淀粉樣蛋白(Αβ)，它是淀粉樣前體蛋白經(jīng)β-分泌酶和Y-分泌酶酶切后形成的40到43個(gè)氨基酸的多肽。在某些個(gè)體上，由于某些基因突變，或ApoE等位基因的表達(dá)，或其他尚未發(fā)現(xiàn)的因子的作用，導(dǎo)致了多肽的表達(dá)增加，而這些多肽Αβ 42 與A β 43比A β 40有更強(qiáng)聚集能力。所以，很多研究者推測A β 42與A β 43的增強(qiáng)釋放導(dǎo)致了 A β的異常沉積，并毒害受損個(gè)體的腦神經(jīng)。在AD患者，腦脊液中A β 42水平減少被認(rèn)為是AD的前兆。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種操作方便、檢測范圍廣、靈敏度高的人體β淀粉樣蛋白試劑盒。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)—種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括抗體包被板條、標(biāo)準(zhǔn)品、濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物、試劑稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑及終止液。所述的抗體包被板條的制備包括以下步驟用包被液將包被抗體稀釋至1 2ug/ ml，加在包被板上，用封板紙封板，在4-8°C放置12-24h后，將包被板置于洗板機(jī)上，用洗液洗板一次，然后加入封閉液并在室溫下放置池，甩凈封閉液，風(fēng)干，風(fēng)干的包被板裝入鋁箔袋中，加入干燥劑，密封即得抗體包被板條。所述的包被液為pH值為7. 2-7. 4磷酸鹽緩沖液，所述的包被抗體為鼠抗人β淀粉單抗，所述的洗液為吐溫20含量為0. 1% (V/V)的磷酸鹽緩沖液，所述的封閉液為含有血清白蛋白為2% (W/V)，蔗糖為3wt%的磷酸鹽緩沖液。所述的標(biāo)準(zhǔn)品的制備包括以下步驟以PH值為7. 2-7. 4，含血清白蛋白為5wt% 的磷酸鹽緩沖液為溶劑，將人β淀粉重組蛋白配制成2000pg/50ul/支的溶液，將該溶液置于-70°C低溫環(huán)境中凍干2h，然后將其置于冷凍干燥機(jī)中凍干8 12h，密封即得標(biāo)準(zhǔn)品。所述的濃縮生物素化抗體為維生素H標(biāo)記的抗人β淀粉抗體。所述的濃縮酶結(jié)合物為辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素。所述的試劑稀釋液為pH值為7. 2-7. 4，牛血清白蛋白含量為(W/V)的磷酸鹽緩沖液。所述的濃縮洗滌液為pH值為7. 2-7. 4，吐溫20含量為0. Iwt % (V/V)的磷酸鹽緩沖液。所述的顯色劑為四甲基聯(lián)苯二胺。所述的終止液為IN HCL(1N鹽酸)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明的抗體包被板條制備方法采用兩步法、室溫振蕩的反應(yīng)模式，此方法具有操作簡便，反應(yīng)快捷，對實(shí)驗(yàn)室條件及設(shè)備要求不高，易于掌握和推廣；(2)本發(fā)明的檢測范圍較廣，其檢測范圍為0 1000pg/ml ；(3)本發(fā)明的靈敏度較高，其檢測靈敏度最高可達(dá)7pg/ml ；(4)本發(fā)明的工藝、技術(shù)、質(zhì)量及使用效果都達(dá)到了國內(nèi)外領(lǐng)先的水平。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。實(shí)施例1一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，該試劑盒包括抗體包被板條、標(biāo)準(zhǔn)品、濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物、試劑稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑及終止液。另外還包括封板膠紙及使用說明書。具體組成如表1所示。表 1
名稱96 Tests48 Tests保存條件抗體包被板條8X128X64 "C標(biāo)準(zhǔn)品2支(凍干)1支(凍干)4 "C濃縮生物素化抗體2支1支4 "C濃縮酶結(jié)合物2支1支4°C (避光)
權(quán)利要求
1.一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括抗體包被板條、標(biāo)準(zhǔn)品、 濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物、試劑稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑及終止液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的抗體包被板條的制備包括以下步驟用包被液將包被抗體稀釋至1 2ug/ml，加在包被板上，用封板紙封板，在4-8°C放置12-24h后，將包被板置于洗板機(jī)上，用洗液洗板一次，然后加入封閉液并在室溫下放置池，甩凈封閉液，風(fēng)干，風(fēng)干的包被板裝入鋁箔袋中，加入干燥劑，密封即得抗體包被板條。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的包被液為ρΗ值為7. 2-7. 4磷酸鹽緩沖液，所述的包被抗體為鼠抗人β淀粉單抗，所述的洗液為吐溫20含量為0.1% (V/V)的磷酸鹽緩沖液，所述的封閉液為含有血清白蛋白為2% (ff/V), 蔗糖為3wt%的磷酸鹽緩沖液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的標(biāo)準(zhǔn)品的制備包括以下步驟以PH值為7. 2-7. 4，含血清白蛋白為5wt%的磷酸鹽緩沖液為溶劑， 將人β淀粉重組蛋白配制成2000pg/50ul/支的溶液，將該溶液置于-70°C低溫環(huán)境中凍干池，然后將其置于冷凍干燥機(jī)中凍干8 12h，密封即得標(biāo)準(zhǔn)品。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的濃縮生物素化抗體為維生素H標(biāo)記的抗人β淀粉抗體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的濃縮酶結(jié)合物為辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的試劑稀釋液為PH值為7. 2-7. 4，牛血清白蛋白含量為(W/V)的磷酸鹽緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的濃縮洗滌液為PH值為7. 2-7. 4，吐溫20含量為0. Iwt % (V/V)的磷酸鹽緩沖液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的顯色劑為四甲基聯(lián)苯二胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，其特征在于，所述的終止液為鹽酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種人體β淀粉樣蛋白試劑盒，該試劑盒包括抗體包被板條、標(biāo)準(zhǔn)品、濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物、試劑稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑及終止液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的抗體包被板條制備方法采用兩步法、室溫振蕩的反應(yīng)模式，此方法具有操作簡便，反應(yīng)快捷，對實(shí)驗(yàn)室條件及設(shè)備要求不高，易于掌握和推廣，檢測范圍較廣，靈敏度較高，本發(fā)明的工藝、技術(shù)、質(zhì)量及使用效果都達(dá)到了國內(nèi)外領(lǐng)先的水平。
文檔編號G01N33/543GK102192985SQ20101012757
公開日2011年9月21日 申請日期2010年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月18日
發(fā)明者秦儉 申請人:上海依科賽生物制品有限公司