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一種鐵皮石斛的人工光栽培方法

文檔序號(hào):6082689閱讀:305來源:國(guó)知局

專利名稱::一種鐵皮石斛的人工光栽培方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明屬于藥用植物栽培
技術(shù)領(lǐng)域
,具體涉及一種鐵皮石斛的人工光栽培方法。
背景技術(shù)
:鐵皮石斛(DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)是傳統(tǒng)名貴中藥材,位于中華九大仙草之首。具有滋陰清熱,生津益胃,潤(rùn)肺止咳,補(bǔ)五臟虛勞等功效,并且在提高人體免疫能力、抗衰老、抑制腫瘤、改善糖尿病癥狀和萎縮性胃炎等方面有明顯效果。根據(jù)藥理研究,鐵皮石斛的藥用有效成分主要為可溶性多糖。由于生態(tài)環(huán)境的日益惡化和藥農(nóng)的掠奪性采挖,鐵皮石斛的野生資源已瀕臨枯竭,1987年被國(guó)家列為重點(diǎn)保護(hù)的野生珍稀藥材品種。目前,國(guó)內(nèi)外鐵皮石斛的市場(chǎng)需求量最少有近百萬噸,但是市場(chǎng)供應(yīng)量還不足1%,其加工品楓斗在國(guó)際市場(chǎng)的價(jià)格已達(dá)3000-5000美元/kg以上,且有價(jià)無貨,成為名副其實(shí)的"植物黃金"。鐵皮石斛是多年生蘭科草本,長(zhǎng)期生長(zhǎng)于溫暖濕潤(rùn)的陰涼環(huán)境,屬于弱光性陰生植物。近十多年來,國(guó)內(nèi)學(xué)者通過研究,基本上確立了組培繁育種苗與相結(jié)合的人工栽培模式,即自然光栽培方法。有學(xué)者(顧慧芬等,1999,中成藥,21(12):658-659;葉紀(jì)溝,2001,中藥天地,10(1):53;朱艷等,2003,中國(guó)野生植物資源,4(22):56-57;朱艷等,2004,中國(guó)野生植物資源,6(4):62-6;廖俊杰等,2006,中藥材,29(6):533-535;鄭勇平等,2006,林業(yè)科技開發(fā),20(6):56-58)分別就鐵皮石斛如何進(jìn)行組培、組培苗如何馴化栽培、組培產(chǎn)業(yè)化的技術(shù)探討等各方面進(jìn)行闡述,也有人就鐵皮石斛如何進(jìn)行繁殖、栽培、集約化生產(chǎn)等相關(guān)技術(shù)進(jìn)行了詳細(xì)的描述(袁正仿等,2002,中國(guó)醫(yī)學(xué)生物技術(shù)應(yīng)用雜志,4(3):54-56;李鳳華等,2002,貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào),8(3):5-8;付開聰?shù)龋?003,中草藥,(2):177;袁正仿等,2004,園藝學(xué)報(bào),2:49;張泉鋒等,2004,中草藥,4(6):438-440)。專利號(hào)為ZL200410084496.1和ZL200410017380.6的發(fā)明專利、專利申請(qǐng)?zhí)枮?00710066268.5的發(fā)明專利也是利用自然光進(jìn)行鐵皮石斛的人工栽培。近年來,不少企業(yè)利用上述的鐵皮石斛的自然光栽培方法進(jìn)行人工栽培并相繼取得了成功。但是,這種栽培模式進(jìn)入采收期需要3-4年,且由于各地進(jìn)行鐵皮石斛栽培的溫室/大棚等設(shè)施對(duì)植物生長(zhǎng)環(huán)境的調(diào)控比較粗放,故藥草品質(zhì)較難控制,因此,較長(zhǎng)的生產(chǎn)周期和不穩(wěn)定的藥草品質(zhì)嚴(yán)重制約了鐵皮石斛的生產(chǎn)規(guī)模和市場(chǎng)供應(yīng)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種鐵皮石斛的人工光栽培方法。本發(fā)明的栽培方法是對(duì)現(xiàn)有技術(shù)自然光栽培方法中后期栽培條件的改進(jìn),從而縮短生產(chǎn)周期,使產(chǎn)品品質(zhì)均勻一致。本發(fā)明的鐵皮石斛的人工光栽培方法是利用與植物光合吸收光譜接近的特定高照度熒光燈作為光照源進(jìn)行鐵皮石斛的多層立體栽培。由于人工光照能夠被植物直接吸收利用的光能較少,大部分的光源能耗被轉(zhuǎn)化成熱能,故在該鐵皮石斛的人工光栽培空間內(nèi),還需有效地調(diào)控空氣流從而為鐵皮石斛生長(zhǎng)發(fā)育提供適宜的溫度、濕度、光照、C02濃度、氣流速度等物理環(huán)境。—種鐵皮石斛的人工光栽培方法,包括如下操作步驟(1)將馴化后的種苗移栽至含有基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽或穴盤內(nèi),置于人工光型密閉式植物工廠的立體栽培架上,其中,栽培條件是光照強(qiáng)度為60-150yrnolm—2s—、光照時(shí)間為9-12h(!—、溫度為24-27。C,相對(duì)濕度為65-80%,C02濃度為400-800ymol.mol—、氣流速度為0.3-0.6ms—1;(2)移栽后前2周用噴霧保持葉面濕潤(rùn)狀態(tài),移栽2周后澆水,按照保持基質(zhì)濕潤(rùn)的原則,每7-15天施1次大量元素營(yíng)養(yǎng)液,每25-35天施1次微量元素營(yíng)養(yǎng)液,每3-5天底面灌水一次;(3)按照步驟(2)的方法培養(yǎng)1.5-2.0年內(nèi)進(jìn)行采收,然后以0.5-1.0年作為一個(gè)采收期。所述栽培條件優(yōu)選光照強(qiáng)度為120molm—2s—、光照時(shí)間為12hd一1。在自然光栽培方法中使用的種苗可用于本發(fā)明的人工光栽培方法中。所屬種苗優(yōu)選人工光照培育的無糖組培生根苗,常規(guī)方法培育的有糖組培生根苗,或香蕉添加物的培養(yǎng)基中培育的組培生根苗。無論哪種組培生根苗,都需在移栽前進(jìn)行適當(dāng)馴化。對(duì)于人工光照培育的無糖組培生根苗,馴化時(shí)只需將帶透氣孔的組培容器放置在栽培室(光照強(qiáng)度約60-70ymo1*m—2s—0內(nèi)7_15天后即可進(jìn)行移栽。移栽時(shí),如果是以瓊脂為支持材的培養(yǎng)基培育的組培生根苗,需要清洗根部培養(yǎng)基,并用800倍甲基托布津或百菌清蘸根部進(jìn)行消毒后,晾干根部并移栽到栽培用基質(zhì)容器中;如果是以蛭石為支持材的培養(yǎng)基培育的組培生根苗,即可以直接移栽到栽培用基質(zhì)容器中(穴盤或營(yíng)養(yǎng)缽或營(yíng)養(yǎng)槽)。對(duì)于常規(guī)方法培育的有糖組培生根苗或香蕉添加物的培養(yǎng)基中培育的組培生根苗,一般要將帶透氣孔的組培容器放置在栽培室(光照強(qiáng)度約50-70iimol'm—2*s—0內(nèi)15-30天后再進(jìn)行移栽;如果是不帶透氣孔的組培容器,要將其放置在栽培室內(nèi)(光照強(qiáng)度約30-50mol*m—2*s—0內(nèi)15-30天后,再打開組培容器的蓋子(留部分透氣空隙就可)在光照強(qiáng)度約30-50molm—2s—1的弱光條件下培育30-60天后進(jìn)行移栽。上述常規(guī)方法培育的組培生根苗在移栽時(shí),一般也需要清洗根部培養(yǎng)基,并用800倍甲基托布津或百菌清蘸根部進(jìn)行消毒后,晾干根部再移栽到栽培用基質(zhì)容器中。注意,在組培生根苗的馴化期間可以不進(jìn)行水分管理,但是一定要保持栽培室內(nèi)組培容器周圍空氣的相對(duì)濕度在60-80%。對(duì)于生長(zhǎng)發(fā)育較柔弱的組培生根苗,也可以先使用透氣性較好的水苔作為基質(zhì)進(jìn)行移栽,待發(fā)育強(qiáng)壯后再移栽到栽培容器中。本發(fā)明所述人工光照培育的無糖組培生根苗的培養(yǎng)過程中使用的生根培養(yǎng)基為添加NAA的MS培養(yǎng)基,其中,NAA濃度為0.5mg/L,且在無糖添加活性炭的條件下培育2個(gè)月。其他方法培育的組培生根苗可參見以下文獻(xiàn)LinLY.,Y.C.Hew,S.C.Wongetal.Effectsoflightintensity,sugarandC02concentrationsongrowthandmineraluptakeofDendrobiumplantlets.J.ofHort.Sci.1992,67(5):601-611;LeeY.H.,J.D.Park,N.I.Baek,etal.InvitroandinvivoantitumoralphenanthrenesfromtheaerialpartsofDendrobiumnobile.PlantaMed,1995,61(2):178-182;曾宋君,程式君.石斛的試管苗快速繁殖.中藥材,1996,19(10):490-491;劉驊,張治國(guó).鐵皮石斛試管苗壯苗培養(yǎng)基的研究.中國(guó)中藥雜志,1998,(11);劉端駒,蒙愛冬,鄧錫清等.鐵皮石斛試管苗快速繁殖的研究.藥學(xué)學(xué)報(bào),1998,23(8):636-640;劉驊,張治國(guó).鐵皮石斛試管苗壯苗培養(yǎng)基的研究.中國(guó)中藥雜志,1998,23(11):654-656;Lau,-D.T.W.;Shaw,_P.C.;Wang,_J.;But,_P.P.H.AuthenticationofmedicinalDendrobiumspeciesbytheinternaltranscribedspacerofribosomalDNA.Planta-med.Stuttgart:GeorgThiemeVerlag,2001.67(5):456-460;ShiauY.J.,S.M.NalawadeSM,C.N.Hsia,V.MulabagalandH.S.Tsay.InvitropropagationoftheChinesemedicinalplant,DendrobiumcandidumWall.ExLindl.,fromaxenicnodalsegments.InVitroCellular&DevelopmentalBiology-Plant.2005.41(5):666-670;蘇有勇,孔祥瑩,昊楨芬,王督,一種鐵皮石斛莖尖組培繁殖方法,發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)?00710066480.1。蒙平,張向軍,何新民,鐵皮石斛組培苗移栽新技術(shù),中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè),2007(4):52-53;所述基質(zhì)為以下組分按體積比混合后加水發(fā)酵而成粒徑5-10mm的松磷粒徑3-8mm的松磷蛭石鋸末為i:i:i:o.5。所述大量元素營(yíng)養(yǎng)液中氮、磷、鉀、鈣、鎂離子的當(dāng)量濃度比為(3.5-4):i:i:2.5:i。所述微量元素營(yíng)養(yǎng)液中錳、硼、鐵、銅、鋅、鉬離子的當(dāng)量濃度比為(0.1-0.2):(0.1-0.2):(l-2):(o.oi-o.02):(o.oi-o.02):(o.003-0.006),所述微量元素營(yíng)養(yǎng)液作為大量元素營(yíng)養(yǎng)液的補(bǔ)充。所述人工光型密閉式植物工廠的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)和環(huán)境控制參見以下文獻(xiàn)賀冬仙,發(fā)明專利密閉式完全利用人工光的環(huán)境控制型植物工廠;申請(qǐng)?zhí)?00610076205.3。賀冬仙、朱本海、楊珀、李保明,人工光型密閉式植物工廠的設(shè)計(jì)與環(huán)境控制,2007,農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),23(3):151-157。所述營(yíng)養(yǎng)缽或穴盤優(yōu)選規(guī)格為10*12cm的營(yíng)養(yǎng)缽或50穴盤,在組培生根苗移栽后1年內(nèi)可選用規(guī)格8*10cm的營(yíng)養(yǎng)缽或128穴盤,到組培生根苗移栽后1年后再移栽到規(guī)格為10*12cm的營(yíng)養(yǎng)缽或50穴盤。所述光照的光源由與鐵皮石斛葉片的光合吸收光譜特性相近的三基色超高亮度熒光燈(色溫4200K)提供。本發(fā)明有益效果(1)縮短了生產(chǎn)周期。利用本發(fā)明方法栽培鐵皮石斛植株在1.5-2.0年以后可以采收,以后連續(xù)O.5-1.0年均可采收一次,而自然光栽培的鐵皮石斛需在組培苗移栽3年以后才能采收。因?yàn)樽匀还庠耘嘀性谙募竞投居捎谠O(shè)施環(huán)境得不到有效調(diào)控,鐵皮石斛幾乎都處于生長(zhǎng)緩慢或維持生存狀態(tài)。(2)保證了均勻一致的品質(zhì)。自然光栽培的鐵皮石斛植株常年生長(zhǎng)于波動(dòng)的環(huán)境條件中,且每年的氣候條件有很大的差異,故每期收獲的植株品質(zhì)有很大差異。人工光栽培的鐵皮石斛長(zhǎng)期生長(zhǎng)于固定的適宜環(huán)境,故其生長(zhǎng)發(fā)育比較均一,品質(zhì)也比較穩(wěn)定。(3)提高了產(chǎn)量。由于人工光栽培為鐵皮石斛提供了適宜的光、溫、水、氣、肥等環(huán)境,不僅可以提高栽培密度,還促進(jìn)了生長(zhǎng)發(fā)育,因此,鐵皮石斛在人工光下栽培的產(chǎn)量比在自然光下有很大程度的提高。(4)易于實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、規(guī)模化生產(chǎn)。由于鐵皮石斛的人工光栽培方法有效地利用了設(shè)施建筑結(jié)構(gòu)與環(huán)境調(diào)控技術(shù),可以不受外界環(huán)境和地理位置的影響在全國(guó)各地建場(chǎng)生產(chǎn),從而實(shí)現(xiàn)真正意義上的藥用植物工廠化生產(chǎn),還可實(shí)現(xiàn)周年可連續(xù)性計(jì)劃生產(chǎn)與質(zhì)量控制。(5)環(huán)保與節(jié)能。鐵皮石斛的人工光栽培方法一般利用多層立體栽培,大大提高了替地利用效率,其水、電、氣等都能得到循環(huán)利用和有效利用,與外界隔絕的環(huán)境還能進(jìn)一步降低病蟲害的危險(xiǎn)和對(duì)周邊環(huán)境的污染。因此,與自然光栽培方法相比,人工光栽培放在在環(huán)保與節(jié)能方面有很大的優(yōu)勢(shì)。具體實(shí)施例方式種苗的來源將云南西雙版納思茅市郊區(qū)自然野生的一株鐵皮石斛苗進(jìn)行脫毒培育為圓球莖,其后多次繁殖、繼代后培育為組培生根苗。具體實(shí)施例中所有種苗均來源于該株母本。繁殖種苗的方法參照發(fā)明名稱為一種鐵皮石斛莖尖組培繁殖方法的中國(guó)專利,申請(qǐng)?zhí)枮?00710066480.1。種苗的馴化方法將帶透氣孔的組培容器放置在栽培室(光照強(qiáng)度約60-70ymo1*m—2s—0內(nèi)7天后即可進(jìn)行移栽。移栽時(shí),清洗根部培養(yǎng)基后并用800倍百菌清蘸根部進(jìn)行消毒后,晾干根部再進(jìn)行移栽。栽培設(shè)施人工光型密閉式植物工廠為中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)按照上述參考文獻(xiàn)自建。栽培容器10*12cm的營(yíng)養(yǎng)缽栽培基質(zhì)松磷(粒徑5-10mm)、松磷(3-8mm)、蛭石、鋸末按照體積比為i:i:i:o.5進(jìn)行混合,加水使其濕透,65t:以上發(fā)酵3天以上后使用。大量元素營(yíng)養(yǎng)液的配制將硝酸鈣Ca(N03)241120、硫酸鎂MgS047H20、磷酸二氫鉀KH2P04、硝酸銨NH4N03溶于水中,上述溶質(zhì)的濃度依次為205mg/L、60mg/L、136mg/L、80mg/L,配制成的溶液為營(yíng)養(yǎng)液原液,在使用時(shí)按照1000倍稀釋進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)液灌溉。微量元素營(yíng)養(yǎng)液的配制將硫酸錳MnS041120、硼酸113803、硫酸亞鐵FcS047H20、硫酸銅CuS0451120、硫酸鋅ZnS047H20和鉬酸銨(NH4)6Mo70244H20溶于水中,各組分濃度依次為3.6mg/L、2.7mg/L、13.4mg/L、0.Img/L、0.4mg/L、0.lmg/L,配制的溶液為微量元素營(yíng)養(yǎng)液原液,在使用時(shí)按照1000倍稀釋進(jìn)行微量元素的灌溉。栽培方法將馴化一周左右的無糖組培生根苗移栽至含有基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽或穴盤內(nèi),置于人工光型密閉式植物工廠的立體栽培架上,其中,溫度26±1°C;濕度60±5%;〇02濃度500士50iimo1mo1—1;氣流速度0.5±0.lms—1;按照上述栽培條件結(jié)合以下8組光照強(qiáng)度(PPF)和光照時(shí)間(H)對(duì)種苗進(jìn)行栽培(l)光照強(qiáng)度(PPF)60iimo1*m—2s—、光照時(shí)間(H)9hd-1;簡(jiǎn)寫為PPF60和H9;(2)光照強(qiáng)度(PPF)90iimolm—2s—\光照時(shí)間(H)9hd—1;簡(jiǎn)寫為:PPF90和H9;(3)光照強(qiáng)度(PPF)120iimolm—2s—\光照時(shí)間(H)9hd—1;簡(jiǎn)寫為:PPF120和H9;(4)光照強(qiáng)度(PPF)150iimolm—2s—\光照時(shí)間(H)9hd—1;簡(jiǎn)寫為:PPF150和H9;(5)光照強(qiáng)度(PPF)60iimolm—2s—\光照時(shí)間(H)12hd—1;簡(jiǎn)寫為PPF60和H12;(6)光照強(qiáng)度(PPF)90iimolm—2s-\光照時(shí)間(H)12hd—1;簡(jiǎn)寫為:PPF90和H12;(7)光照強(qiáng)度(PPF)120iimolm—2s—\光照時(shí)間(H)12hd—1;簡(jiǎn)寫為:PPF120和H12;(8)光照強(qiáng)度(PPF)150iimolm—2s—'、光照時(shí)間(H)12hd—1;簡(jiǎn)寫為PPF150和H12。移栽后前2周用噴霧保持葉面濕潤(rùn)狀態(tài),移栽2周后澆水,按照保持基質(zhì)濕潤(rùn)的原則,其后每3-5天進(jìn)行底面灌水1次,每7-17天施1次大量元素營(yíng)養(yǎng)液,每25-35天施1次微量元素營(yíng)養(yǎng)液。采用自然光栽培法作為對(duì)照,同時(shí)將相同的種苗移栽后置于溫室中,進(jìn)行培養(yǎng)。溫室冬季由水暖提供加溫,夏季通過濕簾降溫,溫度基本上控制在15-40度,濕度無控制,溫室的覆蓋材料為陽光板。水分和營(yíng)養(yǎng)液的管理方法與人工光栽培方法相同。移栽鐵皮石斛種苗2年后進(jìn)行了采收,并在其后以每半年作為一個(gè)采收期,5年內(nèi)共采收了6次,不同時(shí)期的鐵皮石斛在多糖檢測(cè)中均為26_30%左右,試驗(yàn)區(qū)之間未顯示出顯著性差異。以2009年2月收獲以后的營(yíng)養(yǎng)缽栽培的新芽在3個(gè)月之內(nèi)的生長(zhǎng)發(fā)育為例,對(duì)鐵皮石斛在8種光照環(huán)境下的生長(zhǎng)發(fā)育情況做一統(tǒng)計(jì),主要包括以下幾個(gè)方面莖節(jié)數(shù)、株高、莖粗、干物率和光合速率,具體結(jié)果見表1。由表1可見,光照時(shí)間12hd—1和光照強(qiáng)度120iimo1m—2s—1組合的試驗(yàn)區(qū)表現(xiàn)最好。而在5年期內(nèi)的各期收獲中都表現(xiàn)出同樣的趨勢(shì)。12個(gè)月的生長(zhǎng)量比溫室栽培的對(duì)照增加150%;人工光栽培的2年期植株與自然光栽培的3年期的多糖含量均能達(dá)到25%以上。其中,鐵皮石斛的多糖含量采用了苯酚硫酸法進(jìn)行比色測(cè)量(李亞芳等,2002,中國(guó)藥事,16(7):426-428),具體的測(cè)量方法如下(1)對(duì)照品溶液的制備稱取干燥至恒重的無水葡萄糖對(duì)照品0.100g,置于100ml容量瓶中,加水溶解,并加水稀釋至刻度,搖勻,準(zhǔn)確量取5ml置10ml容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得每lml含O.5mg的對(duì)照品溶液。(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備量取對(duì)照品溶液O.l,O.2,0.3,0.4,0.5,0.6ml分別置10ml具塞試管中,分別加水適量至1.Oml,并加入5%苯酚溶液1.Oml,搖勻;然后迅速加入濃硫酸5ml,充分搖勻,置8(TC水浴中,放置10min取出,立即置冰水中冷卻2min,再取出振蕩3min混勻,在室溫中放置5min,利用分光光度計(jì)(UV-3150,ShimadzuCo.,Japan)測(cè)量其在488nm波長(zhǎng)處的吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo)(x)、葡萄糖含量為縱坐標(biāo)(y,Pg/ml)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制并求得回歸方程。(3)樣品測(cè)定方法稱取不同樣本的鐵皮石斛過篩細(xì)粉O.5g,置離心管中,每種樣品做3個(gè)平行。加水20ml,微火煮沸l(wèi)h(在加熱過程中適時(shí)添加少量水,以維持原水體積),用脫脂棉濾過,濾液置100ml容量瓶中。如上重復(fù)提取3次(lh,O.5h,0.5h),濾液合并至100ml容量瓶中,冷卻至室溫,加水至刻度,搖勻;用移液管取lml溶液,加乙醇10ml,攪拌,離心(4000r/m,20min),棄去上層清液,沉淀置濾紙上,用80%乙醇25ml洗滌,棄去稀乙醇液。沉淀用熱水溶解,濾入10ml容量瓶中,放置冷卻至室溫,然后定容10ml搖勻。分別精取各鐵皮石斛樣品0.lmL,利用分光光度計(jì)(UV-3150,ShimadzuCo.,J即an),測(cè)量樣品的吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸公式計(jì)算樣本溶液中的葡萄糖濃度,按下式折算出多糖含量多糖含量(%)=:—^上u丄v一『Cs(iig/mL):供試品中葡萄糖的濃度;D:供試品的稀釋因素(D=1000);F:換算因素(F=1.042);V(mL):供試品的體積(V=0.5mL);W(iig):供試品的質(zhì)量(W=500000iig)。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>測(cè)定.中成藥,1999,21(12):658-659。2、葉紀(jì)溝.鐵皮石斛試管苗的人工栽培研究.中藥天地,2001,10(1):53。3、朱艷,秦民堅(jiān).鐵皮石斛莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究.中國(guó)野生植物資源,2003,4(22):56-57。4、朱艷,秦民堅(jiān).促進(jìn)鐵皮石斛試管苗移栽成活的研究.中國(guó)野生植物資源,2004,6(4):62-6。5、廖俊杰,許繼勇,李進(jìn)進(jìn),麥瑜玲,徐清華,周愛芳.鐵皮石斛試管種苗產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)因素分析.中藥材.2006.29(6):533-535。6、鄭勇平,王春,俞繼英,等.鐵皮石斛試管苗移栽技術(shù).林業(yè)科技開發(fā),2006,20(6):56-58。7、袁正仿,張衛(wèi)明,丁小余,等.鐵皮石斛的栽培研究.中國(guó)醫(yī)學(xué)生物技術(shù)應(yīng)用雜志,2002,4(3):54-56。8、李鳳華,宋錫全,王承錄,等.貴州幾種野生石斛的引種栽培和繁殖技術(shù).貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2002,8(3):5-8。9、付開聰,馮德強(qiáng),張紹云,等.鐵皮石斛集約化高產(chǎn)栽培技術(shù)研究.中草藥,2003,(2):177。10、袁正仿,張?zhí)K鋒.遠(yuǎn)凌威.鐵皮石斛高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù).園藝學(xué)報(bào),2004,2:49。11、張泉鋒,毛碧增.鐵皮石斛培養(yǎng)的產(chǎn)業(yè)化研究.中草藥,2004,4(6):438-440。12、鄭志仁,彭貴湖.鐵皮石斛的人工大面積栽培方法,發(fā)明專利號(hào)ZL200410084496.1。13、壽偉康.一種鐵皮石斛的培育方法,發(fā)明專利號(hào)ZL200410017380.6。14、蘇文華,張光飛,王冰.鐵皮石斛的全光照栽培方法,發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)?00710066268.5。15、LinLY.,Y.C.Hew,S.C.Wongetal.Effectsoflightintensity,sugarandC02concentrationsongrowthandmineraluptakeofDendrobiumplantlets.J.ofHort.Sci.1992,67(5):601-611。16、LeeY.H.,J.D.Park,N.I.Baek,etal.InvitroandinvivoantitumoralphenanthrenesfromtheaerialpartsofDendrobiumnobile.PlantaMed,1995,61(2):178-182。17、曾宋君,程式君.石斛的試管苗快速繁殖.中藥材,1996,19(10):490-491。18、劉驊,張治國(guó).鐵皮石斛試管苗壯苗培養(yǎng)基的研究.中國(guó)中藥雜志,1998,(11)。19、劉端駒,蒙愛冬,鄧錫清等.鐵皮石斛試管苗快速繁殖的研究.藥學(xué)學(xué)報(bào),1998,23(8):636-640。20、劉驊,張治國(guó).鐵皮石斛試管苗壯苗培養(yǎng)基的研究.中國(guó)中藥雜志,1998,23(11):654-656。21、Lau,_D.T.W.;Shaw,_P.C.;Wang,-J.;But,_P.P.H.AuthenticationofmedicinalDendrobiumspeciesbytheinternaltranscribedspacerofDNA.Planta-med.Stuttgart:GeorgThiemeVerlag,2001.67(5):456-460。22、ShiauY.J.,S.M.NalawadeSM,C.N.Hsia,V.MulabagalandH.S.Tsay.InvitropropagationoftheChinese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技術(shù)領(lǐng)域
的鐵皮石斛的人工光栽培方法,該方法包括如下操作步驟將馴化后的種苗移栽至含有基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽或穴盤內(nèi),置于人工光型密閉式植物工廠的立體栽培架上,其中,栽培條件是光照強(qiáng)度為60-150μmol·m-2·s-1,光照時(shí)間為9-12h·d-1,溫度為24-27℃,相對(duì)濕度為65-80%,CO2濃度為400-800μmol·mol-1,氣流速度為0.3-0.6m·s-1;移栽后前2周用噴霧保持葉面濕潤(rùn)狀態(tài),移栽2周后澆水,按照保持基質(zhì)濕潤(rùn)的原則,每7-15天施1次大量元素營(yíng)養(yǎng)液,每25-35天施1次微量元素營(yíng)養(yǎng)液,每3-5天底面灌水一次;培養(yǎng)1.5-2.0年后進(jìn)行采收,然后以每半年作為一個(gè)采收期。該方法縮短了生產(chǎn)周期,保證了產(chǎn)品均勻一致的品質(zhì),提高了產(chǎn)量,易于實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、規(guī)?;a(chǎn)。文檔編號(hào)G01N21/31GK101699984SQ20091023803公開日2010年5月5日申請(qǐng)日期2009年11月23日優(yōu)先權(quán)日2009年11月23日發(fā)明者杜維芬,賀冬仙申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
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