專利名稱：鑒別大黃魚精子活力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類精子活力的檢測。
背景技術(shù)：
魚類精子活力的好壞是反映受精率高低的重要指標(biāo)之一，因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中，客觀準(zhǔn)確評價魚類精子的活力具有非常重要的理論意義與應(yīng)用價值。在評價魚類精子活力時，目前主要有以下幾種方法 —、利用普通顯微鏡觀察記錄精子的活動狀況和運(yùn)動時間，這種方法受人為因素的影響較大，不能客觀反應(yīng)精子的活動狀況； 二、利用魚類精子直接開展受精試驗(yàn)，統(tǒng)計受精率、孵化率、出膜率等，這種方法受外界環(huán)境因子較多，且隨著不同魚類的早期發(fā)育時間的長短試驗(yàn)周期會有較大變化；
三、用計算機(jī)輔助分析系統(tǒng)(CASA)分析精子的運(yùn)動速率和運(yùn)動距離，這種方法能客觀反應(yīng)精子的活動情況，但儀器設(shè)備昂貴。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種準(zhǔn)確客觀鑒別大黃魚精子活力的方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案配備試劑盒和紫外分光光度計，采集大黃魚的精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計下分別測定大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性，精子中ATP酶的活性高于60. 16±5. 88U/ml， CK的活性高于11. 91 ±0. 76U/ml， SDH的活性高于51±2. 16U/ml， LDH的活性高于7806. 44±110. 11U/L，為精子活力較好；精子中ATP酶的活性介于3. 54±0. 37U/ml和60. 16±5. 88U/ml之間，CK的活性介于10. 22±0. 32U/ml和11. 91 ±0. 76U/ml之間，SDH的活性介于31. 5±2. 08U/ml禾P51士2. 16U/ml之間，LDH的活性介于2654. 13±70. 06U/L和7806. 44±110. 11U/L之間，則精子活力一般；精子中ATP酶的活性低于3. 54±0. 37U/ml，CK的活性低于10. 22 ±0. 32U/ml， SDH的活性低于31. 5 ±2. 08U/ml， LDH的活性低于2654. 13±70. 06U/L，則精子活力差。 本發(fā)明的突出特點(diǎn)是研究了不同活力的大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性有較大差別，提供了鑒別大黃魚精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)活性的相應(yīng)數(shù)據(jù)，并通過精子相關(guān)能量代謝酶活性檢測，根據(jù)酶活性的高低，并運(yùn)用本方法提供的相應(yīng)數(shù)據(jù)來鑒別大黃魚精子的活力，具有準(zhǔn)確客觀的顯著效果，鑒別準(zhǔn)確率達(dá)到98%以上。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明在大黃魚的繁殖季節(jié)，分批采集大黃魚的精子，每批次取5尾魚精子，采用魚類專用試劑盒(按照南京建成生物工程研究所公開的該產(chǎn)品操作指導(dǎo)書進(jìn)行)在紫外分光光度計下分別測定不同批次精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，每個樣重復(fù)三次，結(jié)果取平均值，運(yùn)用統(tǒng)計軟件對結(jié)果進(jìn)行分析處理，如果精子中ATP酶的平均活性高于60. 16±5. 88U/ml， CK的平均活性高于11. 91±0. 76U/ml， SDH的平均活性高于51±2. 16U/ml， LDH的平均活性高于7806. 44±110. 11U/L，則為精子活力好；如果精子中ATP酶的平均活性介于3. 54±0. 37U/ml和60. 16±5. 88U/ml之間，CK的平均活性介于10. 22±0. 32U/ml和11. 91 ±0. 76U/ml之間，SDH的平均活性介于31. 5±2. 08U/ml和51 ±2. 16U/ml之間，LDH的平均活性介于2654. 13±70. 06U/L和7806. 44±110. 11U/L之間，則為精子活力一般；如果精子中ATP酶的平均活性低于3. 54±0. 37U/ml，CK的平均活性低于10. 22 ±0. 32U/ml， SDH的平均活性低于31. 5±2. 08U/ml， LDH的平均活性低于2654. 13±70. 06U/L，則為精子活力差。
權(quán)利要求
鑒別大黃魚精子活力的方法，配備試劑盒和紫外分光光度計，采集大黃魚的精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計下分別測定大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性，精子中ATP酶的活性高于60.16±5.88U/ml，CK的活性高于11.91±0.76U/ml，SDH的活性高于51±2.16U/ml，LDH的活性高于7806.44±110.11U/L，為精子活力較好；精子中ATP酶的活性介于3.54±0.37U/ml和60.16±5.88U/ml之間，CK的活性介于10.22±0.32U/ml和11.91±0.76U/ml之間，SDH的活性介于31.5±2.08U/ml和51±2.16U/ml之間，LDH的活性介于2654.13±70.06U/L和7806.44±110.11U/L之間，則精子活力一般；精子中ATP酶的活性低于3.54±0.37U/ml，CK的活性低于10.22±0.32U/ml，SDH的活性低于31.5±2.08U/ml，LDH的活性低于2654.13±70.06U/L，則精子活力差。
全文摘要
鑒別大黃魚精子活力的方法，涉及魚類精子活力檢測，需要提供鑒別大黃魚精子活力的方法，本發(fā)明配備試劑盒和紫外分光光度計，采集大黃魚精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計下測定大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性，精子中ATP酶的活性高于60.16±5.88U/ml，CK的活性高于11.91±0.76U/ml，SDH的活性高于51±2.16U/ml，LDH的活性高于7806.44±110.11U/L，活力較好；精子中ATP酶的活性低于3.54±0.37U/ml，CK的活性低于10.22±0.32U/ml，SDH的活性低于31.5±2.08U/ml，LDH的活性低于2654.13±70.06U/L，活力差。
文檔編號G01N21/33GK101776586SQ200910045180
公開日2010年7月14日 申請日期2009年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月12日
發(fā)明者馮廣朋, 劉鑒毅, 莊平, 張濤, 江琪, 章龍珍, 趙峰, 閆文罡, 黃曉榮 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所