專利名稱：：濃度測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及根據(jù)來自含有測量對象物質(zhì)的反應體系的輸出值和測量線(表示測量對象物質(zhì)濃度和輸出值的關(guān)系的曲線)，進行測量對象物質(zhì)的濃度計算的濃度測定方法。
背景技術(shù)：
：測定尿等試樣中的抗原濃度的方法有將抗原抗體反應與光學方法組合使用的方法。在該方法中，是將試樣和抗體混合引發(fā)抗原抗體反應，根據(jù)向該反應體系照射光時的吸光度，進行濃度計算。在該方法中，可以看到當反應體系的抗原濃度在較小范圍內(nèi)時，隨著濃度增大，測得的吸光度也增大；反之，當反應體系的抗原濃度在較大范圍吋，隨著濃度的增大，測得的吸光度減小的現(xiàn)象(前帶現(xiàn)象)。這種現(xiàn)象不僅出現(xiàn)在利用抗原抗體反應的情況下，就是在整個生化學領(lǐng)域也能觀察到(下文中，包括生化學領(lǐng)域，將該現(xiàn)象稱為"前帶現(xiàn)象")。在產(chǎn)生前帶現(xiàn)象的反應體系中，出現(xiàn)了盡管實際測量對象成分的濃度大，但因測定的吸光度小，使得計算結(jié)果小于實際濃度的問題。為解決這種問題，例如需要在稀釋試樣的基礎上重新測定吸光度。但是，鑒于抗原價格高，不宜對同一檢測試樣反復進行測定，當然，考慮到操作性時，則操作次數(shù)越少越好。并且，測定尿中葡萄糖濃度等時，即使不產(chǎn)生前帶現(xiàn)象，也有高濃度下分辨率降低的問題。因此，即使在未產(chǎn)生前帶現(xiàn)象的反應體系中，也有高濃度區(qū)域中測定精度差的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于簡便而廉價地抑制因前帶現(xiàn)象的影響和高濃度區(qū)域中的分辨率降低導致的高濃度試料液的測量精度下降。由本發(fā)明第一方面提供的濃度測定方法是根據(jù)來自含有測量對象物質(zhì)以及能與該物質(zhì)進行反應的反應物的反應體系的輸出值，從多條測量線中選出最適于上述測量對象物質(zhì)的濃度計算的最優(yōu)測量線，并且根據(jù)該最優(yōu)測量線和上述輸出值進行上述測量對象物質(zhì)濃度計算的濃度測定方法，其特征在于，上述各測量線是對含有己知濃度的標準試劑和上述反應物的標準反應體系的輸出值分別用濃度不同的多個標準試劑，以相同反應時間進行測定，根據(jù)此時得到的多個輸出值制成的，上述多條測量線是以相互不同的反應時間為基礎制成的。在優(yōu)選實施方式中，上述多條測量線分為預測上述測量對象物質(zhì)濃度大于預先設定的濃度用閾值時選用的第一測量線和預測小于上述濃度用閾值時選用的第二測量線。并且，上述第一測量線根據(jù)已知濃度的標準物質(zhì)和上述反應物進行反應的反應初期階段測定的輸出值制成，上述第二測量線根據(jù)晚于測定上述第一測量線制作基礎的輸出值時測定的輸出值制成。此時，預測使用第二測量線計算的第二濃度計算值大于濃度用閾值時，優(yōu)選為將使用第一測量線計算的第一濃度計算值與第二濃度計算值進行比較，將較大的計算值用作最終計算值。反之，預測第二計算值小于濃度用閾值時，優(yōu)選為判斷第二濃度計算值是否反映了測量對象物質(zhì)的濃度。此時，當?shù)诙舛扔嬎阒捣从沉藴y量對象物質(zhì)的濃度時，優(yōu)選為將第二濃度計算值用作最終計算值；而當?shù)诙舛扔嬎阒滴茨芊从硿y量對象物質(zhì)的濃度時，將使用第一測量線計算的第一濃度計算值用作最終計算值。另一方面，也可根據(jù)使用第一測量線計算的第一濃度計算值決定選擇第一測量線還是第二測量線。例如，當預測第一濃度計算值大于濃度用閾值時，將第一濃度計算值用作最終計算值。反之，當預測第一濃度計算值小于濃度用閾值時，將使用第二測量線計算的第二濃度計算值用作最終計算值。預測測量對象物質(zhì)的濃度是大于還是小于濃度用閾值也可根據(jù)例如輸出值是大于還是小于預定的輸出值用閾值來進行。濃度計算用閾值的濃度例如可設定在第二測量線的線性高的濃度范圍內(nèi)，或設定為對應于第一測量線和第二測量線的交點的濃度。本發(fā)明中也可以準備3條以上的多條測量線，從中選擇最優(yōu)測量線。即，多條測量線也可以分別根據(jù)不同濃度的多個標準試劑在每一段預定時間，在多個(3個以上)測量點測定的含有已知濃度的標準試劑和上述反應物的標準反應體系的輸出值，由各個測量點制成。此時的最優(yōu)測量線的選擇，優(yōu)選為根據(jù)測量對象物質(zhì)和反應物在反應初期階段的時間范圍內(nèi)測定的輸出值進行。本發(fā)明第二側(cè)面是提供根據(jù)來自含有測量對象物質(zhì)和能與該物質(zhì)進行反應的反應物的反應體系的輸出值，以及表示上述測量對象物質(zhì)的濃度和輸出值關(guān)系的測量線進行上述測量對象物質(zhì)的濃度計算的濃度測定方法，其特征在于，上述測量線為分別對濃度不同的多個標準試劑在特定時間范圍內(nèi)按照時間測定含有已知濃度的標準試劑和上述反應物的標準反應體系的輸出值，根據(jù)使用各濃度標準試劑時輸出值的最大值的集合而制成。本發(fā)明的第三側(cè)面提供根據(jù)向含有測量對象物質(zhì)以及可與該物質(zhì)反應的反應物的反應體系照射光時的輸出值，以及表示上述測量對象物質(zhì)的濃度和輸出值關(guān)系的測量線，進行上述測量對象物質(zhì)的濃度計算的濃度測定方法，其特征在于，上述測量線由根據(jù)已知濃度的標準物質(zhì)與上述反應物進行反應的初期階段測得的輸出值制成的第一測量線，和根據(jù)晚于測定上述第一測量線制作基礎的輸出值時測定的輸出值制成的第二測量線復合制成，并且上述測量線，在大于相當于上述第一測量線和上述第二測量線交點的交點濃度的濃度區(qū)域，采用大于上述第二測量線中上述交點濃度的濃度區(qū)域部分；而在小于上述交點濃度的濃度區(qū)域，采用小于上述第一測量線中上述交點濃度的濃度區(qū)域部分。本發(fā)明中的輸出值，可由向反應體系照射光時的響應值(光學響應值)得到。當然，也可為給反應體系加電壓或通電流時的電學響應值。在本發(fā)明中，"光學響應值"包括吸光度、濁度、滲透率等概念。吸光度除在反應容器內(nèi)設定液相反應體系時，根據(jù)透過液相反應體系的光的光量決定外，還包括反應體系被固定形成于多孔質(zhì)體等固相的情況，根據(jù)來自固相的反射光的光量決定。.5圖1A和圖IB為光學響應值測定方法的示意圖。圖2為本發(fā)明實施方式1的濃度計算中所用的第一和第二測量線(1)、(2)的示意圖。圖3為不同濃度的多個標準反應液的吸光度隨時間變化的示意圖。圖4為標準反應液的動態(tài)范圍的示意圖。圖5為用于說明濃度計算程序的一例的流程圖。圖6為用于說明濃度計算程序的其它例的流程圖。圖7為本發(fā)明實施方式2的濃度計算所用多條測量線(A)(H)的示意圖。圖8為用于說明濃度計算程序的一例的示意圖。圖9為用于說明測量線(a)的示意圖。具體實施例方式下面，參照附圖具體說明本發(fā)明的優(yōu)選實施方式。本發(fā)明涉及根據(jù)向反應體系照射光時的光學響應值和測量線，進行測量對象物質(zhì)的濃度計算的方法。本文的測量線用于表示測量對象物質(zhì)的濃度和光學響應值的關(guān)系，至少包括以函數(shù)表示的關(guān)系和以圖表表示的關(guān)系。反應體系含有測量對象物質(zhì)和能與該物質(zhì)反應的反應物。該反應體系根據(jù)測量對象物質(zhì)與反應物反應生成的反應生成物的量，使色調(diào)和濁度等發(fā)生變化。結(jié)果，根據(jù)反應進行的情況和測量對象物質(zhì)的量，反應體系的光學響應狀態(tài)會發(fā)生變化。該反應體系除了如圖1A所示，將反應液11保存在容器10內(nèi)的結(jié)構(gòu)之外，有時也會如圖1B所示，采用將反應液保存在固相20中的結(jié)構(gòu)。固相20由紙、似毛氈一樣的物質(zhì)等吸水性好的材料構(gòu)成。測量對象物質(zhì)可以舉出白蛋白、葡萄糖、淀粉酶、肌酸酐等。當然，本發(fā)明不僅適用于測定特定物質(zhì)濃度的情況，也可適用于測定蛋白質(zhì)、膽甾醇總量等時的測定多種類似物的合計量的情況。對此，反應物可使用顯色指示劑，其種類可根據(jù)測量對象物質(zhì)進行選擇?？蓪⑽舛?、濁度、或透光度等用作光學響應值。在圖1A所示的反應體系中，來自發(fā)光元件12的光向反應體系照射后透過的光，由受光元件13接受。在該反應體系中，根據(jù)受光元件13的受光量和射入反應體系的入射光量(例如，發(fā)光元件12的發(fā)光量)計算光學響應值。另一方面，在圖1B所示的反應體系中，來自發(fā)光元件21的光向反應體系照射后的反射光，由受光元件22接受。在該反應體系中，根據(jù)受光元件22的受光量和射入反應體系的入射光量(例如，發(fā)光元件21的發(fā)光量)計算光學響應值。但在圖1B所示的反應體系中無法測定透光度和濁度，而是測定吸光度，以此作為光學響應值。本發(fā)明實施方式1的濃度測定方法，分別使用較高濃度試樣的測量線和較低濃度試樣的測量線進行濃度計算。對區(qū)別使用兩種測量線(1)、(2)的濃度計算的具體方法將在后文闡述，而在說明該方法之前，先對使用上述兩種測量線(1)、(2)的理由進行說明。圖2表示當測量對象物質(zhì)為蛋白質(zhì)(人體血清蛋白)時的兩種測量線(1)、(2)。該測量線(1)、(2)用在測量例如人體尿液中的蛋白質(zhì)濃度等情況時。測量線(O使用高濃度蛋白質(zhì)反應液(1000mg/dL)，并根據(jù)反應初期階段測得的吸光度作成。本發(fā)明的反應初期階段是指在高濃度反應液內(nèi)的吸光度隨時間變化時，吸光度最大或接近最大的狀態(tài)下的反應階段。另一方面，測量線(2)使用低濃度蛋白質(zhì)反應液(100mg/dL)，并根據(jù)反應液中達到反應平衡、或在大致達到反應平衡后的反應平衡階段測得的吸光度作成。本發(fā)明的反應平衡階段是指在低濃度反應液內(nèi)的吸光度隨時間變化時，吸光度趨進一定值或近似于達到該狀態(tài)的反應階段。圖3表示蛋白質(zhì)濃度分別在01000mg/dL范圍內(nèi)時，11種蛋白質(zhì)標準液各自的與反應物反應后的吸光度隨時間的變化。在圖3中，從反應開始每21.5秒測量吸光度時，將各測量點表示為測量點1、測量點2。如測量點10對應的反應時間為215秒(21.5秒xl0)。測量點這一用語也用于隨后的說明或其它附圖，此時，該用語與上述說明中具有同樣意味。測定吸光度隨時間的變化時，測量對象物質(zhì)和反應物的反應原理采用色素金屬結(jié)合法。即，反應物使用溴鄰苯三酚紅(色素)和銦(金屬)結(jié)合形成的配位化合物。另一方面，蛋白質(zhì)標準液使用的是在健康者尿液中添加人體血清蛋白(HAS),調(diào)制蛋白質(zhì)濃度制成的試樣。吸光度使用全自動尿液成分定量分析裝置(AutionMasterUM3410:愛科來(株)制)，測量波長設定為600nm。由圖3可知，低濃度蛋白質(zhì)標準液(100mg/dL)在測量點14、15時，吸光度漸趨于定值，使吸光度呈定值。即，當使用低濃度蛋白質(zhì)標準液(100mg/dL)日寸，在測量點14、15呈趨于反應平衡的狀態(tài)。反之，蛋白質(zhì)標準液的蛋白質(zhì)濃度越高、反應時間越長，則吸光度有可能越小。也即，當?shù)鞍踪|(zhì)標準液的蛋白質(zhì)濃度是400mg/dL以上時，將產(chǎn)生前帶現(xiàn)象。產(chǎn)生該現(xiàn)象的測量點隨著蛋白質(zhì)標準液的蛋白質(zhì)濃度的增大而減小。例如，在中等濃度的蛋白質(zhì)標準液(400mg/dL)的測量點7，吸光度達到峰值，而在高濃度蛋白質(zhì)標準液(1000mg/dL)的測量點1、2，吸光度達到峰值。由圖3的結(jié)果可知當反應液中的測量對象物(如蛋白質(zhì))的濃度大時，優(yōu)選使用根據(jù)吸光度達到峰值前后的時間范圍內(nèi)測得的吸光度制成的測量線(1)(參照圖2)。反之，當反應液中的測量對象物(如蛋白質(zhì))的濃度低時，優(yōu)選使用根據(jù)反應達到平衡、或即將達到平衡前的時間范圍內(nèi)測得的吸光度制成的測量線(2)(參照圖2)。根據(jù)參照圖3說明的理由足以理解為什么區(qū)別使用圖2所示的兩條測量線(1)、(2)。但是也有這樣的疑問不特地區(qū)別使用兩條測量線(1)、(2)，所有濃度范圍中均采用測量線(O難道不行么？即，會對使用較低濃度的試樣用測量線的測量線(2)的使用意義產(chǎn)生疑問。該疑問可根據(jù)下述動態(tài)范圍和重現(xiàn)性的討論結(jié)果而得到解答。動態(tài)范圍使用HAS濃度為0或100mg/dL的蛋白質(zhì)標準液,在測量點1、2和測量點14、15，與上述說明同樣地測量了吸光度，以測量點1、2的平均值和測量點14、15的平均值的方式對其進行了討論。其結(jié)果如下述表1和圖4所示，與使用測量線(1)時相比，使用測量線(2)時的動態(tài)范圍更大。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>另一方面，使用濃度不同的3名患者的尿液A、B、C測定吸光度，對根據(jù)其吸光度分別使用測量線(1)計算時和使用測量線(2)計算時的重現(xiàn)性進行了研究。根據(jù)濃度平均值、濃度標準偏差(S.D.)和濃度相對標準偏差(C.V.)3項對重現(xiàn)性進行了研究。在研究重現(xiàn)性時，將各患者的尿液A、B、C的試樣數(shù)設為10，同上所述地測量了作為濃度計算基礎的吸光度。下述表2表示上述3項的計算結(jié)果。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>患者尿液A、B、C為相當?shù)偷臐舛?，與使用測量線(1)時相比，使用測量線(2)時的該低濃度試樣中的標準偏差(S.D.)和相對標準偏差(C.V)減小。g卩，在低濃度區(qū)域，使用測量線(2)的重現(xiàn)性好(測量誤差小)。所以，從動態(tài)范圍和重現(xiàn)性的研究結(jié)果可知在低濃度區(qū)域，使用測量線(2)比使用測量線(1)的效果好。根據(jù)上述事實，在本實施方式中，相對濃度較高的反應液，使用根據(jù)測量點l、2的吸光度平均值制成的測量線(1);相對濃度較低的反應液，使用根據(jù)測量點14、15的吸光度平均值制成的測量線(2)。另外，之所以根據(jù)兩個測量點的平均值制成測量線，是為減少因測量誤差帶來的影響。下面，參照圖2、按照圖5所示的流程說明本實施方式的濃度計算程序。首先，測量位于測量點1、2的吸光度(A)和(B)(Sl)，同時，測量位于測量點14、15的吸光度(a)禾P(b)(S2)。當然，也可每隔一定時間(如每隔21.5秒)測量吸光度，從其測量值集合中選取相當于測量點1、2和測量點14、15的測量值(吸光度)。然后，計算測量點1、2的吸光度(A)、(B)的平均值(C)(S3),根據(jù)該平均值(C)和測量線(1)計算第一濃度(D)(S4)。另外，計算測量點14、15的吸光度(a)、(b)的平均值(c)(S5)，根據(jù)該平均值(c)和測量線(2)計算第二濃度(d)(S6)。接著，判斷第二濃度(d)是否大于濃度計算用閾值(S7)。艮P，預測測量對象物質(zhì)的濃度是相對較大還是相對較小。在本實施方式中，濃度計算用閾值設定在例如兩條測量線(1)、(2)均為線性高濃度范圍(200300mg/dL的范圍)內(nèi)，或設定為相當于測量線(1)和測量線(2)交點的濃度(約400mg/dL)。對測量對象物質(zhì)的濃度是大于還是小于濃度用閾值的預測，也可不通過計算第二濃度(d)，而是可根據(jù)光學響應值(如吸光度)是大于還是小于預定的光學響應值用閾值來進行。當判斷第二濃度(d)濃度大于計算用閾值時(S7:YES),則比較第--濃度(D)和第二濃度(d)的大小(S8)，采用值較大的計算值(S9，SIO)。即，當?shù)谝粷舛?D)大于第二濃度(d)日寸(S8:YES)，取第一計算濃度(D)為最終計算結(jié)果(S10);而當?shù)诙舛?d)大于第一計算濃度(D)時(S8:N0)，取第二濃度(d)為最終計算結(jié)果(S9)。如圖2所示，測量線(2)是根據(jù)產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象時的吸光度制成的，而測量線(1)是根據(jù)未產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象時的吸光度制成的。因此，當比較測量線(1)的計算結(jié)果和測量線(2)的計算結(jié)果后采用較大值時，由于類前帶現(xiàn)象，當使用測量線(2)時，在出現(xiàn)的計算結(jié)果低于實際濃度值的濃度區(qū)域，采用由測量線(1)得到的計算值。由此，計算就可避免類前帶現(xiàn)象的影響。另一方面，當判斷第二濃度(d)低于濃度計算用閾值時(S7:N0)，判斷是由于產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象還是僅由于濃度低導致第二濃度(d)低(Sll)。當是由于產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象導致第二濃度(d)低時(S11:YES)，采用測量線(1)計算值的第一濃度(D)為最終計算結(jié)果(SIO)。而當未產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象，僅是第二濃度(d)低時(Sll:NO)，則就用第二濃度(d)為最終計算值(S9)。按照如上所述的程序，當使用測量線(2)時'，對于受類前帶現(xiàn)象影響較大的相對較高濃度范圍，采用測量線.(O的計算結(jié)果。因此，根據(jù)區(qū)別使用測量線(1)、(2)這種簡單方法，就可盡可能避免類前帶現(xiàn)象的影響，可在不用再次測定的情況下就能恰當?shù)剡M行高濃度區(qū)域的計算。此外，在低濃度區(qū)域，因采用由測量線(2)計算的第二濃度(d)，正如上述重現(xiàn)性研究結(jié)果所述，低濃度區(qū)域的重現(xiàn)性提高。這種效果也適用于按照圖6所示程序進行計算的情況。根據(jù)該濃度計算程序，首先與圖5所示流程S1S6—樣，計算第一濃度(D)和第二濃度(d)(S20S25)。然后判斷第一濃度(D)是否大于濃度計算用閾值(S26)。SP，以第一濃度(D)為基準，將其與濃度計算用閾值比較，判斷測量對象物質(zhì)的濃度是相對較大還是較小。在這點上，不同于圖5所示的判斷使用測量線(2)計算的第二濃度(d)是否大于濃度計算用閾值的濃度計算程序。當S26的判斷結(jié)果為第一濃度(D)大于濃度計算用閾值時(S26:YES)，即判斷濃度相對較高時，以測量線(1)計算結(jié)果的第一濃度(D)為最終計算結(jié)果(S27)。另一方面，當?shù)谝粷舛?D)小于濃度計算用閾值時(S26:NO)，即判斷濃度相對較低時，以重現(xiàn)性高的測量線(2)的計算結(jié)果的第二濃度(d)為最終計算結(jié)果(S28)。該濃度計算程序的優(yōu)點是無需檢測類前帶現(xiàn)象。另外，在圖6所示的濃度測定程序中，濃度計算用閾值也設定在兩條測量線(1)、(2)均為線性高的濃度范圍(200300mg/dL)內(nèi)，或設定為相當于測量線(1)和測量線(2)交點的濃度(稍高于400mg/dL)。當在后者情況下確定濃度計算用閾值時，結(jié)果，在S27和S28中，在測量線(1)、(2)的計算結(jié)果中，將較大值用作最終計算結(jié)果。也即，比較第一濃度(D)和第二濃度(d)的大小，與將較大值用作最終計算結(jié)果的結(jié)果相同。與此類似的計算手法，可舉出下述使用測量線的方法。此時的測量線以測量線(1)和測量線(2)的交點為界，在較高濃度區(qū)域，采用測量線(1)的對應部分，而在較低濃度區(qū)域，采用測量線(2)的對應部分。在此情況下，優(yōu)點是無需將第一濃度(D)和第二濃度(d)與濃度計算用閾值比較，也無需將第一濃度(D)和第二濃度(d)進行比較。下面說明本發(fā)明實施方式2的濃度測定方法。在該濃度測定方法中，區(qū)別使用圖7所示的多條測量線(A)(H)計算濃度。這些測量線(A)(H)是根據(jù)制成圖3圖表時測定的多個吸光度測定值制成的。具體而言，多條測量線(A)(H)是將多條吸光度測定值按同樣的測量點分成各組，按各組(各測量點)制成的。換言之，多條測量線(A)(H)是按不同的反應時間(多個測量點)分別制成的。用這些測量線(A)(H)計算濃度時，如圖8所示，首先在上述各測量點測量吸光度(S30)。然后根據(jù)測量點1的吸光度，從多條測量線(A)(H)中選擇最適于進行濃度計算的測量線(S31)。為此，參照圖3可知測量對象物質(zhì)的濃度越大，初始吸光度(測量點l的吸光度)就越大。因此，根據(jù)初始測量值，可以恰當?shù)仡A測測量對象物質(zhì)的濃度。所以，在S31中，可根據(jù)其預測值選擇最優(yōu)測量線。具體而言，根據(jù)預測值越大、測量點越小(反應時間短)時的吸光度選擇測量線。當測量點1的吸光度大、預測濃度900mg/dL以上時。選擇測量線(A);當測量點1的吸光度小、預測濃度150mg/dL以下時，選擇測量線(H)。最后，根據(jù)最優(yōu)測量線和對應該最優(yōu)測量線的測量點實測吸光度計算濃度(S32)。按照如(S31)所述的方法選擇最優(yōu)測量線時，對應于該最優(yōu)測量線的測量點的吸光度，如圖3所預測，為吸光度隨時間變化的最大值或接近最大值。所以，用本實施方式的計算方法，就可抑制類前帶現(xiàn)象，進行恰當?shù)臐舛扔嬎?。在本實施方式中，需制作多條測量線，但另一方面，卻無需檢測類前帶現(xiàn)象，也無需設定濃度計算用閾值，也無需在與該閾值比較的基礎上選擇測量線，所以其優(yōu)點是可簡化濃度測定程序。并且，對于低濃度試樣，由于選擇的是根據(jù)測量點大(反應時間長)時的吸光度制成的測量線，所以測定低濃度物質(zhì)時的重現(xiàn)性好。另外，在本實施方式中，對使用8個測量點制成的測量線(A)(H)進行濃度計算的情況進行了說明。而測量線的數(shù)量既可多于8個，也可少于8個。且如實施方式1的濃度測定方法所述，還可以制成多條測量線，取兩個測量點的平均值，用其以同樣程序計算濃度。在本實施方式中，以每個測量點制成多條測量線，根據(jù)吸光度隨時間變化的最大值或接近最大值進行濃度計算。與此類似的計算方法，可舉出使用圖9的實線所示的測量線(a)的方法。該測量線(a)是將圖3中的同濃度的多個離散點的最大吸光度為一集合而制成的。圖9中同時表示了本發(fā)明實施方式1中所用的測量線(1)和測量線(2)。由圖9可知在相對較高濃度區(qū)域，測量線(a)與不產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象的測量線(1)相關(guān)，而在相對較低濃度區(qū)域，則與重現(xiàn)性高的測量線(2)相關(guān)。因此，當使用測量線(a)時，則可取得與本發(fā)明實施方式1同樣的效果。并且，無需檢測類前帶現(xiàn)象，也無需選擇測量線的程序。在上述實施方式中，舉例說明了根據(jù)光學響應值計算濃度的情況，而本發(fā)明隨著反應體系的種類不同，也可適用于根據(jù)給反應體系加電壓或通電流時的電響應值、隨反應進行的波數(shù)變化、向反應體系照射光和使之波動時的熱響應等進行計算的情況。在實施方式1和2中，舉例說明了產(chǎn)生類前帶現(xiàn)象的情況，但本發(fā)明也可適用于高濃度區(qū)域中分辨率低的情況。g卩，可適用于使用高濃度區(qū)域中吸光度趨進定值的反應體系進行濃度測定時，在高濃度區(qū)域下恰當?shù)剡M行濃度測定的情況。權(quán)利要求1.一種濃度測定方法，它根據(jù)來自含有測量對象物質(zhì)和能與所述測量對象物質(zhì)反應的反應物的反應體系的輸出值，以及表示所述測量對象物質(zhì)的濃度和輸出值關(guān)系的測量線進行所述測量對象物質(zhì)的濃度計算，其特征在于，所述測量線是在特定時間范圍內(nèi)，分別對濃度不同的多個標準試劑測量含有已知濃度的標準試劑和所述反應物的標準反應體系隨時間變化的輸出值，根據(jù)使用各濃度的標準試劑時輸出值的最大值的集合制成。2.如權(quán)利要求1所述的濃度測定方法，其特征在于，所述輸出值為向所述反應體系照射光時的光學響應值。全文摘要本發(fā)明為根據(jù)來自含有測量對象物質(zhì)和反應物的反應體系的輸出值，從多條測量線中選擇最適于計算測量對象物質(zhì)濃度的最優(yōu)測量線，并使用該最優(yōu)測量線，根據(jù)輸出值計算測量對象物質(zhì)的濃度的濃度測定方法。各測量線是對含有已知濃度的標準試劑和反應物的標準反應體系的輸出值，分別用濃度不同的多個標準試劑，以相同反應時間進行測定，根據(jù)得到的多個輸出值制成。多條測量線基于相互不同的反應時間制成。多條測量線分為根據(jù)已知濃度的標準物質(zhì)和反應物進行反應的反應初期階段測定的輸出值制成的第一測量線及根據(jù)晚于測定第一測量線制作基礎的輸出值時測定的輸出值制成的第二測量線。文檔編號G01N33/53GK101299027SQ200810090799公開日2008年11月5日申請日期2002年12月25日優(yōu)先權(quán)日2001年12月27日發(fā)明者中山真人,福永悟志申請人:愛科來株式會社