專利名稱：石蠟組織芯片制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種石蠟組織芯片制備方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的石蠟組織芯片制備，設(shè)備價(jià)格貴，方法復(fù)雜，難操作，制作 效果不理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種方法簡(jiǎn)便、易操作，實(shí)驗(yàn)效果好的石蠟 組織芯片制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是
一種石蠟組織芯片制備方法，其特征是包括下列步驟
(1) 定制石蠟?zāi)Ｍ庥^呈矩形多孔立方體。按橫向多排孔、縱向 二排孔形式制作石蠟?zāi)?，石蠟?zāi)Ｍ獗谏显O(shè)有與組織陣列孔板匹配的凹形 吻合口；可用于定制組織芯片石蠟也可制作普通石蠟包埋塊。其厚度有 多種模式。
(2) 定制組織陣列孔板陣列孔板板體一端呈喙樣凸與石蠟?zāi)０?相互凸凹匹配；其另一端設(shè)有將陣列孔板與石蠟?zāi)９潭ǖ墓潭ü潭?絲；陣列孔板縱向上設(shè)有上下分隔的二組陣列，每組陣列僅排列方式不 同，每組陣列的面積與石蠟?zāi)５目灼ヅ洌?br> (3) 定制芯棒呈多節(jié)狀直徑不等的實(shí)心圓柱體，插在陣列孔板上的孔中，與陣列孔板和石蠟?zāi)Ｂ?lián)合匹配使用制作石蠟組織芯片受體石 蠟塊；
(4) 定制采樣針采樣針采用針管中穿裝活動(dòng)式針芯的形式；用 于對(duì)存檔石蠟或新鮮組織的取樣。
(5) 制作受體組織芯片陣列石蠟塊
1. 將組織陣列孔板安裝在石蠟?zāi)Ｉ喜⒐潭萁z旋緊；石蠟?zāi)５膬?端下方用木條墊高，以便芯棒伸入；
2. 向組織陣列孔板上的孔依次插入與其孔徑匹配的芯棒，并直到布 滿或按預(yù)設(shè)二維陣列排布表按序插入；
3. 用一平板壓在芯棒粗端形成的平面，組成含芯棒的從下到上的石 蠟?zāi)?組織陣列孔板+平板的"三明治"樣結(jié)構(gòu)；
4. 然后，將其倒置，此時(shí)最上方為石蠟?zāi)５恼婧蛷钠淇字猩斐龅?芯棒細(xì)端平面；
5. 臨注蠟時(shí)用電吹風(fēng)吹拂芯棒細(xì)端平面進(jìn)行預(yù)加熱，然后，再向芯 棒平面注入85。C左右的液態(tài)石蠟，使其充滿每根芯棒桿的周圍，連續(xù)注 蠟直至需要的厚度即可；
6. 在石蠟剛呈固態(tài)時(shí)，倒翻恢復(fù)到原來(lái)的石蠟?zāi)?組織陣列孔板+ 平板"三明治"樣結(jié)構(gòu)，而此時(shí)最下面是芯棒細(xì)端陣列平面；將平板從 芯棒粗端平面取下轉(zhuǎn)移到芯棒細(xì)端陣列平面，即"三明治"樣結(jié)構(gòu)最下 方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蠟?zāi)?組織陣列孔板的結(jié)構(gòu)，其最 上面是芯棒粗端橫截面形成的平面；
7. 雙手握牢石蠟?zāi)?組織陣列孔板組合結(jié)構(gòu)，輕輕用力向下壓，使石蠟?zāi)５淖钕旅娴钠矫孢_(dá)到平板，而頂在平板上的芯棒細(xì)端平面受其反 作用力使芯棒的陣列向上運(yùn)動(dòng)，此時(shí)芯棒的芯棒粗端平面突出于組織陣 列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面(下方)與組織陣列孔板上方平 面間的間隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒桿；
8. 用鑷子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次將芯棒全 部撥出，
9. 旋松固定螺絲，拿開組織陣列孔板，退出石蠟塊，
10. 再用醫(yī)用縫合線按芯棒節(jié)段的距離，纏繞其厚度側(cè)一周，在繞線 的啟始端；線的一端固定不動(dòng)，把握另一端并將著力點(diǎn)穩(wěn)定在繞線的啟
始端，稍用力將繞線全部拉出，可獲所需芯穴直徑的石蠟塊。即受體石
蠟組織芯片陣列蠟塊； 一次操作可獲得相同陣列，不同直徑，〉2個(gè)的 受體組織芯片石蠟塊；
(6)供體石蠟塊的采樣及其組織芯片石蠟塊的制備 搜集或制備供體石蠟組織塊將供體石蠟塊常規(guī)石蠟切片和HE染
色，閱片確定有典型病變的石蠟塊及其擬定的采樣部位或區(qū)域并記錄存
檔；
取一塊石蠟?zāi)７旁谄桨迳?，然后，將制成的受體組織芯片石蠟塊放
入石蠟?zāi)５目字写茫?采樣和植入
對(duì)石蠟組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管對(duì) 供體石蠟塊的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入供體石蠟塊 中，使供體組織蠟芯進(jìn)入針管內(nèi)；將采樣針針管插進(jìn)采樣針管，再均勻用力推動(dòng)針芯柄將供體組織蠟芯從針管中推出，依次插入受體石蠟塊的
芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織芯片陣列；
對(duì)于新鮮組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管 對(duì)新鮮組織的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入新鮮組織中， 使新鮮組織進(jìn)入針管內(nèi)，再用針芯將采樣新鮮組織推出，然后按常規(guī)石
蠟組織制片方法到浸蠟結(jié)束后，取出組織蠟芯待用；植入時(shí)選取待用組 織蠟芯用鑷子放入受體石蠟塊的芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織 芯片陣列；此時(shí)，石蠟組織芯片蠟塊芯片種植完成，即可進(jìn)入待熔合階 段；
熔合震動(dòng)"石蠟?zāi)?石蠟組織芯片蠟塊+玻璃板"組合結(jié)構(gòu)，使種 植的全部組織蠟芯片在同一平面，再放到約50 — 55T:烘箱中，使組織蠟 芯與受體石蠟塊互相融合；
修整取出石蠟塊，用玻璃片輕壓含有組織蠟芯柱的一面，盡量使
所有組織芯片的組織蠟芯的橫截面保持在一個(gè)平面上，放冰箱待用。
芯棒采用有》2 3段不同直徑段的芯棒模式。 本發(fā)明工具簡(jiǎn)單、方法簡(jiǎn)便、易操作，實(shí)驗(yàn)效果好，并且，初學(xué)者 容易學(xué)習(xí)和掌握。


下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。 圖l是石蠟?zāi)５慕Y(jié)構(gòu)示圖。
圖2是組織陣列孔板的結(jié)構(gòu)示圖。 圖3是一種芯棒的結(jié)構(gòu)示圖。圖4是另一種多節(jié)段芯棒的結(jié)構(gòu)示圖。 圖5是采樣針的結(jié)構(gòu)示圖。圖6是受體石蠟組織芯片陣列蠟塊的結(jié)構(gòu)示圖。
具體實(shí)施例方式一種石蠟組織芯片制備方法，包括下列步驟(1) 定制石蠟?zāi)Ｍ庥^呈矩形多孔立方體。按橫向多排孔、縱向 二排孔形式制作石蠟?zāi)?，石蠟?zāi)Ｍ獗谏显O(shè)有與組織陣列孔板匹配的凹形 吻合口；可用于定制組織芯片石蠟也可制作普通石蠟包埋塊。其厚度有 多種模式。(2) 定制組織陣列孔板陣列孔板整體縱向外側(cè)面略似呈U形， 其板體一端呈喙樣凸與石蠟?zāi)０枷嗷ネ拱计ヅ?；其另一端設(shè)有將陣列孔 板與石蠟?zāi)９潭ǖ墓潭ü潭萁z；陣列孔板縱向上設(shè)有上下分隔的二組 陣列，每組陣列僅排列方式不同，每組陣列的面積與石蠟?zāi)５目灼ヅ洌?3) 定制芯棒呈多節(jié)狀直徑不等的實(shí)心圓柱體。插在陣列孔板 上的孔中，與陣列孔板和石蠟?zāi)Ｂ?lián)合匹配使用制作石蠟組織芯片受體石 蠟塊。(4) 定制采樣針采樣針采用針管中穿裝活動(dòng)式針芯的形式；用 于對(duì)存檔石蠟或新鮮組織的取樣。(5) 制作受體組織芯片陣列石蠟塊1. 將組織陣列孔板安裝在石蠟?zāi)Ｉ喜⒐潭萁z旋緊；石蠟?zāi)５膬啥讼路接媚緱l墊高，以便芯棒伸入；2. 向組織陣列孔板上的孔依次插入與其孔徑匹配的芯棒，并直到布滿或按預(yù)設(shè)二維陣列排布表按序插入；3. 用一平板壓在芯棒粗端形成的平面，組成含芯棒的從下到上的石 蠟?zāi)?組織陣列孔板+平板的"三明治"樣結(jié)構(gòu)；4. 然后，將其倒置，此時(shí)最上方為石蠟?zāi)５恼婧蛷钠淇字猩斐龅?芯棒細(xì)端平面；5. 臨注蠟時(shí)用電吹風(fēng)吹拂芯棒細(xì)端平面進(jìn)行預(yù)加熱，然后，再向芯 棒平面注入85'C左右的液態(tài)石蠟，使其充滿每根芯棒桿的周圍，連續(xù)注 蠟直至需要的厚度即可；6. 在石蠟剛呈固態(tài)時(shí)，倒翻恢復(fù)到原來(lái)的石蠟?zāi)?組織陣列孔板+ 平板"三明治"樣結(jié)構(gòu)，而此時(shí)最下面是芯棒細(xì)端陣列平面；將平板從 芯棒粗端平面取下轉(zhuǎn)移到芯棒細(xì)端陣列平面，即"三明治"樣結(jié)構(gòu)最下 方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蠟?zāi)?組織陣列孔板的結(jié)構(gòu)，其最 上面是芯棒粗端橫截面形成的平面；7. 雙手握牢石蠟?zāi)?組織陣列孔板組合結(jié)構(gòu)，輕輕用力向下壓，使 石蠟?zāi)５淖钕旅娴钠矫孢_(dá)到平板，而頂在平板上的芯棒細(xì)端平面受其反 作用力使芯棒的陣列向上運(yùn)動(dòng)，此時(shí)芯棒的芯棒粗端平面突出于組織陣 列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面(下方)與組織陣列孔板上方平 面間的間隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒桿；8. 用鑷子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次將芯棒全 部撥出，9. 旋松固定螺絲，拿開組織陣列孔板，退出石蠟塊，10. 再用醫(yī)用縫合線按芯棒節(jié)段的距離，纏繞其厚度側(cè)一周，在繞線的啟始端；線的一端固定不動(dòng)，把握另一端并將著力點(diǎn)穩(wěn)定在繞線的啟 始端，稍用力將繞線全部拉出，可獲所需芯穴直徑的石蠟塊。即受體石 蠟組織芯片陣列蠟塊； 一次操作可獲得相同陣列，不同芯穴直徑，》2
個(gè)的受體組織芯片石蠟塊。
(6)供體石蠟塊的采樣及其組織芯片石蠟塊的制備 搜集或制備供體石蠟組織塊將供體石蠟塊常規(guī)切片和HE染色，
閱片確定有典型病變的石蠟塊及其擬定的采樣部位或區(qū)域并記錄存檔；
取一塊石蠟?zāi)７旁谄桨迳希缓?，將制成的受體組織芯片石蠟塊放
入石蠟?zāi)５目字写茫?br> 采樣和植入
對(duì)石蠟組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管對(duì) 供體石蠟塊的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入供體石蠟塊 中，使供體組織蠟芯進(jìn)入針管內(nèi)；將采樣針針管插進(jìn)采樣針管，再均勻 用力推動(dòng)針芯柄將供體組織蠟芯從針管中推出，依次插入受體石蠟塊的 芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織芯片陣列；
對(duì)于新鮮組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管
對(duì)新鮮組織的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入新鮮組織中， 使新鮮組織進(jìn)入針管內(nèi)，再用針芯將采樣新鮮組織推出，然后按常規(guī)石
蠟組織制片方法到浸蠟結(jié)束后，取出組織蠟芯待用；植入時(shí)選取待用組 織蠟芯用鑷子放入受體石蠟塊的芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織 芯片陣列；此時(shí)，石蠟組織芯片蠟塊芯片種植完成，即可進(jìn)入待熔合階 段；熔合震動(dòng)"石蠟?zāi)?石蠟組織芯片蠟塊+玻璃板"組合結(jié)構(gòu)，使種 植的全部組織蠟芯片在同一平面，再放到約50 — 55"C烘箱中，使組織蠟 芯與受體石蠟塊互相融合；
修整取出石蠟塊，用玻璃片輕壓含有組織蠟芯柱的一面，盡量使 所有組織芯片的組織蠟芯的橫截面保持在一個(gè)平面上，放冰箱待用。
芯棒采用有^2 3節(jié)段不同直徑段的芯棒模式。
權(quán)利要求
1、一種石蠟組織芯片制備方法，其特征是包括下列步驟(1)定制石蠟?zāi)０礄M向多排孔、縱向二排孔形式制作石蠟?zāi)?，外形呈矩形多孔立方體，石蠟?zāi)Ｍ獗谏显O(shè)有與組織陣列孔板匹配的凹形吻合口；(2)定制組織陣列孔板板體一端呈喙樣凸與石蠟?zāi)０夹挝呛峡谙嗷ネ拱计ヅ?，其另一端設(shè)有將陣列孔板與石蠟?zāi)Ｎ呛系墓潭萁z；陣列孔板縱向設(shè)有上下分隔的二組陣列，每組陣列排列方式不同，每組陣列的面積與石蠟?zāi)５目灼ヅ洌?3)定制芯棒呈多節(jié)狀直徑不等的實(shí)心圓柱體，插在陣列孔板上的孔中，與陣列孔板和石蠟?zāi)Ｂ?lián)合匹配使用制作石蠟組織芯片受體石蠟塊；(4)定制采樣針采樣針采用針管中穿裝活動(dòng)式針芯的形式；(5)制作受體組織芯片陣列石蠟塊將組織陣列孔板安裝在石蠟?zāi)Ｉ喜⒐潭萁z旋緊；石蠟?zāi)５膬啥讼路接媚緱l墊高，以便芯棒伸入；向組織陣列孔板上的孔依次插入與其孔徑匹配的芯棒，插滿或按預(yù)設(shè)二維陣列排布表按序插入；用一平板壓在芯棒粗端形成的平面，組成含芯棒的從下到上的石蠟?zāi)?組織陣列孔板+平板的“三明治”樣結(jié)構(gòu)；然后，將其倒置，此時(shí)最上方為石蠟?zāi)５恼婧蛷钠淇字猩斐龅男景艏?xì)端平面；臨注蠟時(shí)用電吹風(fēng)吹拂芯棒細(xì)端平面進(jìn)行預(yù)加熱，然后，再向芯棒平面注入85℃左右的液態(tài)石蠟，使其充盈每根芯棒桿的周圍，連續(xù)注蠟直至需要的厚度即可；在石蠟剛呈固態(tài)時(shí)，倒翻恢復(fù)到原來(lái)的石蠟?zāi)?組織陣列孔板+平板“三明治”樣結(jié)構(gòu)，而此時(shí)最下面是芯棒細(xì)端陣列平面；將平板從芯棒粗端平面取下轉(zhuǎn)移到芯棒細(xì)端陣列平面，即“三明治”樣結(jié)構(gòu)最下方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蠟?zāi)?組織陣列孔板的結(jié)構(gòu)，其最上面是芯棒粗端橫截面形成的平面；雙手握牢石蠟?zāi)?組織陣列孔板組合結(jié)構(gòu)，輕輕用力向下壓，使石蠟?zāi)５淖钕旅娴钠矫孢_(dá)到平板，而頂在平板上的芯棒細(xì)端平面受其反作用力使芯棒的陣列向上運(yùn)動(dòng)，此時(shí)芯棒的芯棒粗端平面突出于組織陣列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面與組織陣列孔板上方平面間的間隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒桿；用鑷子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次將芯棒全部撥出，旋松固定螺絲，拿開組織陣列孔板，退出石蠟塊，再用醫(yī)用縫合線按芯棒節(jié)段的距離，纏繞其厚度側(cè)一周，在繞線的啟始端；線的一端固定不動(dòng)，把握另一端并將著力點(diǎn)穩(wěn)定在繞線的啟始端，稍用力將繞線全部拉出，可獲取所需芯穴直徑的石蠟塊，即受體石蠟組織芯片陣列蠟塊；(6)供體石蠟塊的采樣及其組織芯片石蠟塊的制備搜集或制備供體石蠟組織塊將供體石蠟塊常規(guī)切片和HE染色，閱片確定有典型病變的石蠟塊并擬定可采樣部位或區(qū)域，最后記錄存檔；取一塊石蠟?zāi)７旁诓Ａ桨迳希缓?，將制成的受體組織芯片石蠟塊放入石蠟?zāi)５目字写茫徊蓸雍椭踩雽?duì)石蠟組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管對(duì)供體石蠟塊的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入供體石蠟塊中，使供體組織蠟芯進(jìn)入針管內(nèi)；將采樣針針管插進(jìn)采樣針管，再均勻用力推動(dòng)針芯柄將供體組織蠟芯從針管中推出，依次插入受體石蠟塊的芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織芯片陣列；對(duì)于新鮮組織的采樣方法為取采樣針，先撥出針芯并用采樣針管對(duì)新鮮組織的擬定采樣部位進(jìn)行采樣，即將采樣針管壓入新鮮組織中，使新鮮組織進(jìn)入針管內(nèi)，再用針芯將采樣新鮮組織推出，然后按常規(guī)石蠟組織制片方法到浸蠟結(jié)束后，取出組織蠟芯待用；植入時(shí)選取待用組織蠟芯用鑷子放入受體石蠟塊的芯片穴位中；直到完成預(yù)設(shè)的二維組織芯片陣列；此時(shí)，石蠟組織芯片蠟塊芯片種植完成，即可進(jìn)入待熔合階段；熔合輕輕震動(dòng)“石蠟?zāi)?石蠟組織芯片蠟塊+玻璃板”組合結(jié)構(gòu)，使種植的全部組織蠟芯片在同一平面，再放到約50-55℃烘箱中，使組織蠟芯與受體石蠟塊互相融合；修整取出石蠟塊，用玻璃片輕壓含有組織蠟芯柱的一面，盡量使所有組織芯片的組織蠟芯的橫截面保持在一個(gè)平面上，放冰箱待用。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的石蠟組織芯片制備方法，其特征是芯 棒釆用有》2 3段不同直徑段的芯棒模式。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種石蠟組織芯片制備方法，包括定制石蠟?zāi)?、定制組織陣列孔板、定制芯棒、定制采樣針、制作受體組織芯片陣列石蠟塊、供體石蠟塊的采樣及其組織芯片石蠟塊的制備等步驟。本發(fā)明方法簡(jiǎn)便、易操作，實(shí)驗(yàn)效果好。
文檔編號(hào)G01N33/48GK101319971SQ200810022170
公開日2008年12月10日 申請(qǐng)日期2008年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月1日
發(fā)明者群 鄂, 鄂裘愷, 莉 陳 申請(qǐng)人:南通大學(xué)