專利名稱：：血紅蛋白類的測(cè)定方法及電泳裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及可以在短時(shí)間內(nèi)以高精度進(jìn)行血紅蛋白類、特別是成為糖尿病的診斷指標(biāo)的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的測(cè)定的血紅蛋白類的測(cè)定方法，及適于采用該測(cè)定方法的電泳裝置。
背景技術(shù)：
：由于血紅蛋白(Hb)類，特別是作為糖化血紅蛋白類的一種的血紅蛋白Alc(以下，也稱為HbAlc)反映過(guò)去12個(gè)月間血液中的平均糖濃度，因此其作為用于糖尿病的篩選檢查、掌握糖尿病患者的血糖控制情況的檢查項(xiàng)目而被廣泛利用。一直以來(lái)，作為該HbAlc的測(cè)定方法，使用HPLC法、免疫法、電泳法等。其中，在臨床檢查領(lǐng)域多用的HPLC法中，能夠以12分鐘來(lái)測(cè)定1份試樣，另夕卜，實(shí)現(xiàn)了在批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)的CV值為1.0%左右的測(cè)定精度。作為用于掌握糖尿病患者的血糖控制情況的測(cè)定方法，其水平的性能是必需的。另一方面，電泳法由于裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，因此是可以制造微裝置電泳之類便宜且小型的系統(tǒng)的技術(shù)，電泳法中HbAlc的高精度測(cè)定技術(shù)向臨床檢查的應(yīng)用可以期待在成本方面的非常有益的效果。一直將利用電泳法的Hb類的測(cè)定作為具有與通常不同氨基酸序列的異常Hb類的分離方法來(lái)使用，但HbAlc的分離非常困難，在凝膠電泳的方法中需要30分鐘以上的時(shí)間。這樣，當(dāng)電泳法應(yīng)用于臨床檢查領(lǐng)域時(shí)，在測(cè)定精度以及測(cè)定時(shí)間方面存在問(wèn)題，因此不能完全應(yīng)用于糖尿病診斷。針對(duì)于此，1990年前后出現(xiàn)的毛細(xì)管電泳法一般可以實(shí)現(xiàn)高分離高精度測(cè)定，例如，在專利文獻(xiàn)l中，公開了通過(guò)毛細(xì)管電泳法分離HbAlc的方法。但是，使用專利文獻(xiàn)1所公開的方法時(shí)，沒(méi)有解決測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題，另外使用的緩沖液的PH較高，為912，因此Hb有可能變性，因此難以將該方法應(yīng)用與臨床檢查。另外，專利文獻(xiàn)2中公開了以下的方法在毛細(xì)管電泳法中，將離子性聚合物通入到毛細(xì)管中，從而在毛細(xì)管內(nèi)面動(dòng)態(tài)涂布離子性聚合物，并使用含有硫酸多糖類的緩沖液的方法。通過(guò)該方法，能夠以10分鐘左右來(lái)進(jìn)行測(cè)定，與凝膠電泳法比較，可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。然而，該動(dòng)態(tài)涂布法而形成的涂布層一旦進(jìn)行試樣的測(cè)定就會(huì)大幅變化，不能直接進(jìn)行后續(xù)試樣的測(cè)定。為了在每次測(cè)定開始時(shí)形成同樣的涂布狀態(tài)，需要在一次測(cè)定結(jié)束之后，通過(guò)清洗操作剝?nèi)埩舻耐坎紝?，之后再次進(jìn)行涂布操作。也就是說(shuō)，進(jìn)行連續(xù)測(cè)定時(shí)，必需在測(cè)定期間插入清洗和涂布操作，因此導(dǎo)致測(cè)定時(shí)間的延長(zhǎng)。另外，該清洗和涂布操作是產(chǎn)生測(cè)定誤差的主要原因，另外，由于在測(cè)定時(shí)必需涂布用的試劑，因此在成本方面是不利的。再者，即使不進(jìn)行連續(xù)測(cè)定，io分鐘左右的測(cè)定時(shí)間比起HPLC法來(lái)也非常長(zhǎng)，應(yīng)用于臨床檢查還不理想。另外，進(jìn)行糖尿病診斷時(shí)，即使HbAlc中，也必需分離作為糖尿病的指標(biāo)的穩(wěn)定型HbAlc，排除不穩(wěn)定型HbAlc、氨基甲?；疕b、乙酰化Hb等修飾Hb類的影響。但是，通過(guò)專利文獻(xiàn)1及專利文獻(xiàn)2所公開的方法而得的電泳圖中，分離性能及測(cè)定精度不理想，根據(jù)這些方法記載的技術(shù)范圍難以分離穩(wěn)定型HbAlc。專利文獻(xiàn)1日本專利特表平9-510792號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2日本專利特開平9-105739號(hào)公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明根據(jù)上述現(xiàn)狀，目的在于提供一種血紅蛋白類的測(cè)定方法及適于使用該測(cè)定方法的電泳裝置，通過(guò)該血紅蛋白類的測(cè)定方法可以在短時(shí)間內(nèi)高精度地進(jìn)行血紅蛋白類特別是作為糖尿病診斷指標(biāo)的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的測(cè)定。本發(fā)明是血紅蛋白類的測(cè)定方法及適于采用該測(cè)定方法的電泳裝置，該血紅蛋白類的測(cè)定方法是使用電泳法測(cè)定血紅蛋白類的方法，其使用內(nèi)面用陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布了的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成的泳道，且作為電泳用緩沖液使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。以下來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。本發(fā)明人經(jīng)過(guò)認(rèn)真的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，利用電泳法的血紅蛋白類的測(cè)定中，通過(guò)使用內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成的泳道，且作為電泳用緩沖液使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液來(lái)進(jìn)行電泳，可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行高精度的測(cè)定，于是完成了本發(fā)明。另外，發(fā)現(xiàn)了適于采用上述測(cè)定方法的使用了可小型化、低成本化的微裝置的電泳裝置的結(jié)構(gòu)和條件，于是完成了本發(fā)明。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，使用內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成的泳道。通過(guò)使泳道的內(nèi)面為陽(yáng)離子性，可以抑制測(cè)定成分的非特異吸附等，能夠以高精度進(jìn)行測(cè)定。另外，不需要如動(dòng)態(tài)涂布法那樣的每次測(cè)定的涂布操作、清洗操作等工序，可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定，而且在測(cè)定體系中也不需要涂布試劑，因此在成本方面也十分有利。另外，對(duì)于動(dòng)態(tài)涂布法不能進(jìn)行的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc與異常血紅蛋白類等的分離，也成為可能。另外，測(cè)定精度也比動(dòng)態(tài)涂布法大幅提高。上述泳道是指，進(jìn)行電泳時(shí)試樣移動(dòng)及/或分離的部位(從注入試樣的部位到檢測(cè)試樣的部位)。具體而言，例如為毛細(xì)管電泳法時(shí)，是指毛細(xì)管內(nèi)的從注入試樣的部位到由檢測(cè)器檢測(cè)試樣的部位；為微裝置M電泳法時(shí)，是指微裝置型電泳裝置中微裝置槽內(nèi)從注入試樣的部位到由檢測(cè)器檢測(cè)試樣的部位。另外，對(duì)于上述泳道的內(nèi)面具體而言，例如為毛細(xì)管電泳法時(shí)，是指毛細(xì)管的泳道內(nèi)面，為微裝置型電泳法時(shí)，是指微裝置型電泳裝置中的微裝置槽的泳道內(nèi)面。本發(fā)明的測(cè)定方法中使用的上述泳道是(1)內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道、或(2)內(nèi)面由陽(yáng)離子性材料形成的泳道。首先，對(duì)(1)內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道進(jìn)一步進(jìn)行詳細(xì)地說(shuō)明。上述固定涂布是指使構(gòu)成泳道的內(nèi)表面材料例如玻璃(硼硅酸玻璃、石英等)、二氧化硅(熔凝硅石、聚二甲基硅氧烷等)、金屬、樹脂(聚丙烯酸系樹脂、聚苯乙烯系樹脂、聚乳酸系樹脂、聚碳酸酯系樹脂、烯烴系樹脂等)等的表面，通過(guò)上述泳道的材料與涂布劑之間的離子性相互作用或疏水性相互作用等相互作用，永久吸附涂布劑來(lái)涂布，或者通過(guò)共價(jià)鍵使兩者結(jié)合來(lái)涂布。該相互作用或共價(jià)鍵非常穩(wěn)定，通常進(jìn)行的測(cè)定、清洗操作不會(huì)引起影響測(cè)定值的變化。由于不是如動(dòng)態(tài)涂布那樣將涂布劑對(duì)泳道原料的吸附作用所形成的平衡狀態(tài)作為模擬的涂布層，因此可以不進(jìn)行再次涂布，而進(jìn)行重復(fù)測(cè)定。另外，不需要如動(dòng)態(tài)涂布那樣在臨測(cè)定前進(jìn)行涂布，因此可以在涂布操作后長(zhǎng)期間保存。另外，為了更牢固地使固定化涂布固定，也可以對(duì)上述泳道的表面進(jìn)行表面改性處理。對(duì)于上述表面改性處理沒(méi)有特別的限定，例如，紫外線照射、等離子體處理等光學(xué)的處理；各種化學(xué)物質(zhì)引起的反應(yīng)結(jié)合等化學(xué)處理；利用各種化合物聚合物等的涂布處理等；以往公知的化學(xué)改性處理及/或物理改性處理等。作為上述固定涂布法，更具體優(yōu)選例如(a)將陽(yáng)離子性聚合物涂布到上述泳道的內(nèi)面進(jìn)行固定化的方法、(b)使具有陽(yáng)離子性基的低分子量的親水性化合物通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合到上述泳道的內(nèi)面的方法。首先，對(duì)上述(a)將陽(yáng)離子性聚合物涂布到上述泳道的內(nèi)面進(jìn)行固定化的方法進(jìn)行說(shuō)明。本說(shuō)明書中，陽(yáng)離子性聚合物是指在分子內(nèi)具有陽(yáng)離子性的官能基的聚合物。作為上述陽(yáng)離子性的官能基沒(méi)有特別的限定，可列舉如伯叔氨基、季銨基等。上述陽(yáng)離子性聚合物優(yōu)選有親水性。作為上述陽(yáng)離子性聚合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如，氨基化多糖類、含有氨基的有機(jī)合成高分子等。作為上述氨基化多糖類特別特別的限定，可列舉如、甲殼質(zhì)、殼聚糖等殼聚糖衍生物及其鹽類；氨基纖維素、N-甲基氨基纖維素等N-取代纖維素的衍生物及其鹽類；葡聚糖、瓊脂糖、甘露聚糖、淀粉等中性多糖類以及衍生物的氨基導(dǎo)入物及其鹽類等公知的氨基化多糖類等。作為上述含有氨基的有機(jī)合成高分子，沒(méi)有特別的限定，可列舉如聚乙烯亞胺、聚戊烯、聚2-二乙基氨基乙基(甲基)丙烯酸酯、聚丙烯酰胺等含有氨基的(甲基)丙烯酸酯及共聚物等公知的含有氨基的有機(jī)合成高分子等。上述陽(yáng)離子性聚合物的重均分子量的優(yōu)選下限為500。如果不到500，則難以充分涂布上述泳道的內(nèi)面，血紅蛋白類的分離性能不充分。作為將上述陽(yáng)離子性聚合物固定化到上述泳道的方法，沒(méi)有特別的限定，可以使用以往公知的方法，例如，使上述陽(yáng)離子性聚合物接觸到上述泳道的內(nèi)面，利用疏水性的或靜電的相互作用等，使上述陽(yáng)離子性聚合物物理吸附到上述泳道的內(nèi)面進(jìn)行固定化的方法；通過(guò)各自物質(zhì)具有的官能基或其他物質(zhì)，將上述泳道內(nèi)面與上述陽(yáng)離子性聚合物利用共價(jià)鍵進(jìn)行固定化的方法等。具體地講，例如以下的方法向上述泳道內(nèi)部通入含有上述陽(yáng)離子性聚合物的溶液，再向該泳道注入空氣從而將該溶液趕出后，反復(fù)進(jìn)行加熱干燥等的處理。使用該方法時(shí)，由于經(jīng)過(guò)了加熱工序、干燥工序等處理，可以實(shí)現(xiàn)難以剝離、可重復(fù)測(cè)定的陽(yáng)離子性聚合物的固定化。將上述陽(yáng)離子性聚合物固定化到上述泳道時(shí)，上述陽(yáng)離子性聚合物受其種類、固定化的方法的限制，然而優(yōu)選作為上述陽(yáng)離子性聚合物溶液供于固定化方法。上述陽(yáng)離子性聚合物溶液的濃度的優(yōu)選下限為0.01%，優(yōu)選上限為20%。如果不到0.0PZ，則有時(shí)出現(xiàn)固定化不充分。如果超過(guò)20%，則不能均一形成由上述陽(yáng)離子性聚合物形成的層，有時(shí)會(huì)成為血紅蛋白類的測(cè)定過(guò)程中導(dǎo)致剝離、重現(xiàn)性降低的原因。上述泳道在最內(nèi)面固定化有上述陽(yáng)離子性聚合物即可，但在上述泳道內(nèi)面與上述陽(yáng)離子性聚合物層之間固定化有由非離子性的親水性聚合物形成的涂布層時(shí)，可以有效地抑制電泳時(shí)的非特異吸附的發(fā)生、電浸透流導(dǎo)致的分離性能的降低等，因此優(yōu)選。艮口，該涂布方法為在上述泳道的內(nèi)面固定涂布非離子性的親水性聚合物，再在上述非離子性的親水性聚合物層上固定涂布陽(yáng)離子性聚合物的方法。對(duì)于上述非離子性的親水性聚合物沒(méi)有特別的限定。例如優(yōu)選為沒(méi)有離子交換基的親水性聚合物。具體可例舉如，結(jié)構(gòu)中具有羥基、二醇基、環(huán)氧基等非離子性的親水性官能基、且不具有其他離子交換基的聚合物。對(duì)于上述非離子性的親水性聚合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如非離子性的多糖類、非離子性的有機(jī)合成高分子等。對(duì)于上述非離子性的多糖類沒(méi)有特別的限定，可列舉如纖維素、葡聚糖、瓊脂糖、甘露聚糖、淀粉等多糖類、它們的衍生物類以及混合物。對(duì)于上述非離子性的有機(jī)合成高分子沒(méi)有特別的限定，可列舉如聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮等水溶性聚合物；2-羥基乙基(甲基)丙烯酸酯、2-羥基丙基(甲基)丙烯酸酯、聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯、聚丙二醇(甲基)丙烯酸酯、甘油(甲基)丙烯酸酯、縮水甘油(甲基)丙烯酸酯等丙烯酸系單體，以及將它們的鹽類和衍生物類等聚合而得的聚合物和共聚物。上述非離子性的親水性聚合物可以是由上述原料形成的混合物，也可以是由上述原料形成的共聚物，可以是由上述原料與上述原料之外的成分形成的共聚物。接著，對(duì)(b)通過(guò)共價(jià)鍵使具有陽(yáng)離子性基、低分子量的親水性化合物結(jié)合到上述泳道的內(nèi)面的方法，進(jìn)行說(shuō)明。此時(shí)，上述泳道的表面需要具有通過(guò)共價(jià)反應(yīng)可以與該親水性化合物結(jié)合的結(jié)構(gòu)(以下，也稱為"共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)")。作為上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)，只要是通過(guò)以往公知的化學(xué)反應(yīng)可以生成共價(jià)鍵的結(jié)構(gòu)就沒(méi)有特別的限定，可列舉如具有氫氧基、羧基、磺酸基、氨基、酯基、醚基、環(huán)氧基、鹵基、亞氨基、咪唑基、硅烷醇基、三垸基甲硅烷基等官能基等的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)類等。上述泳道可以是構(gòu)成上述泳道的原料本身具有上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)，也可以是通過(guò)施以上述表面改性處理，對(duì)上述泳道的表面賦予了上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)。其中，優(yōu)選為構(gòu)成上述泳道的原料本身具有上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)。使具有該共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)的泳道通過(guò)共價(jià)鍵與具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物結(jié)合。本說(shuō)明書中，具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物是指在結(jié)構(gòu)內(nèi)具有陽(yáng)離子性的親水性官能基的化合物。對(duì)于上述陽(yáng)離子性的親水性官能基沒(méi)有特別的限定，可列舉如伯叔氨基、季銨基、亞氨基、胍基(guadinino基)、磷鑰基等鑰基等。其中，更優(yōu)選伯叔氨基，再更優(yōu)選伯仲氨基。具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的分子量的優(yōu)選下限為20，優(yōu)選上限為800。分子量未滿20時(shí)，親水性化合物所起的親水性化效果減小，有時(shí)會(huì)難以進(jìn)行非特異吸附的抑制。分子量超過(guò)800時(shí)，與泳道的表面結(jié)合時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)血紅蛋白類的分離性能不理想、測(cè)定精度下降的情況，特別是當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)使用時(shí)，電泳圖產(chǎn)生變化，有時(shí)會(huì)不能正確地測(cè)定。更優(yōu)選的下限為30，更優(yōu)選的上限為500。具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的分子量如果為800以下，則也可以為2聚體、3聚體等具有重復(fù)結(jié)構(gòu)的化合物。具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物具有通過(guò)共價(jià)反應(yīng)可以與具有上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)的泳道的表面相結(jié)合的結(jié)構(gòu)(以下，也稱為"共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)")。通過(guò)具有上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)，與上述泳道的表面所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)之間生成共價(jià)鍵，上述親水性化合物可以牢固結(jié)合到上述泳道的表面。對(duì)于上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)沒(méi)有特別的限定，可列舉如通過(guò)以往公知的化合反應(yīng)可以生成共價(jià)鍵的結(jié)構(gòu)。具體可例舉如與上述泳道的表面所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)相同的結(jié)構(gòu)。對(duì)于具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如尿素等尿素衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、丙胺、二丙胺、異丙胺、二異丙胺、三丁胺、甲基氨基丙胺、二甲基氨基丙胺、縮水甘油基氨基丙胺、二乙醇氨基丙胺等氨基垸類及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；乙二胺、丙二胺、四亞甲基二胺、1，3-丙二胺、六亞甲基二胺、肼基丙二胺等二氨基烷及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、單異丙醇胺、二異丙醇胺、三異丙醇胺、二甲基甲醇胺、二乙基乙醇胺等烷醇胺及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；賴氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、鳥氨酸、Y-氨基丁酸、3-氨基丙氨酸等氨基酸類及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；胍、氨基胍、雙胍、三亞甲基亞胺等亞氨"酰亞胺類及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等；3-氨基丙基三乙氧基硅垸、3-(2-氨基乙基)氨基丙基三甲氧基硅垸、3-(2-氨基乙基)氨基丙基甲基二甲氧基硅烷、氨基硅垸、3-氨基丙基三甲氧基硅垸等含有氨基的硅烷偶聯(lián)劑及及其衍生物類、鹽類、取代物、聚合物等。其中，更優(yōu)選氨基垸類、二氨基烷類、硅烷偶聯(lián)劑。具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)與上述泳道的表面所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)的組合，只要可以進(jìn)行共價(jià)反應(yīng)即可，沒(méi)有特別的限定，具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)與上述泳道的表面所具有的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)可以為相同的結(jié)構(gòu)，也可以為不同的結(jié)構(gòu)。上述泳道的表面的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)與具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)優(yōu)選通過(guò)直接反應(yīng)形成共價(jià)鍵，也可以是通過(guò)具有官能基的化合物(以下，也稱為間隔物)，使具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物與上述泳道的表面間接結(jié)合，該官能基為具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)和上述泳道的表面的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)相反應(yīng)而形成共價(jià)鍵的官能基。上述間隔物至少具有通過(guò)共價(jià)反應(yīng)可以與具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)相結(jié)合的官能基，以及通過(guò)共價(jià)反應(yīng)可以與上述泳道的表面的共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)相結(jié)合的官能基。即，作為上述間隔物為1分子中具有2個(gè)以上的上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)的物質(zhì)即可。上述間隔物中，作為2個(gè)以上的上述共價(jià)鍵性結(jié)構(gòu)，可以是相同的結(jié)構(gòu)，也可以是不同的結(jié)構(gòu)。上述間隔物具體可例舉如具有酰亞胺基的碳化二亞胺類；具有氨基和羧基的氨基羧酸類；具有氨基的烷基甲二胺類；具有鹵基的環(huán)氧氯丙垸等表囟醇類；二縮水甘油醚；二環(huán)氧化物等二環(huán)氧化物類等。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，通過(guò)上述間隔物使具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物與上述泳道的表面結(jié)合時(shí)，上述間隔物的分子量與具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的分子量?jī)?yōu)選合計(jì)為20800。將具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合到上述泳道的最表面即可，可以僅將其結(jié)合到上述泳道的最表面，也可以將其結(jié)合到上述泳道的最表面和除該泳道之外的其他的流路最表面。對(duì)于通過(guò)共價(jià)鍵使具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物與上述泳道的表面結(jié)合的方法，沒(méi)有特別的限定，根據(jù)上述親水性化合物的種類，在以往公知的反應(yīng)條件下使之進(jìn)行反應(yīng)即可。具體可例舉如將含有上述親水性化合物的溶液通入到泳道的內(nèi)部，使該親水性化合物與泳道的表面接觸，在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件下使之反應(yīng)的方法。在此，也可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓倌芑幕钚曰幚?，也可以在反?yīng)時(shí)或反應(yīng)后進(jìn)行加熱處理、干燥處理等。通過(guò)將含有具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的溶液通入泳道的內(nèi)部，使具有該陽(yáng)離子性基的親水性化合物與泳道的表面相接觸，從而使之反應(yīng)時(shí)，含有具有該陽(yáng)離子性基的親水性化合物的溶液的濃度的優(yōu)選下限為O.1重量％，優(yōu)選上限為30重量％。如果為O.1%以下，則濃度不充分，則通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物而形成的效果有時(shí)難以顯現(xiàn)。如果為30重量％以上，則根據(jù)具有上述陽(yáng)離子性基的親水性化合物的種類不同，有時(shí)會(huì)難以處理，出現(xiàn)反應(yīng)生成物堵塞到泳道中等不良情況。接著，進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明作為本發(fā)明中所使用的另一泳道的(2)內(nèi)面由陽(yáng)離子性材料形成的泳道。本說(shuō)明書中，"由陽(yáng)離子性原料形成"的泳道是指，由具有陽(yáng)離子性的原料通過(guò)各種公知的成型方法或加工方法而形成的泳道。因此，不包含通過(guò)以往技術(shù)以及本說(shuō)明書所公開的各種涂布來(lái)改變泳道內(nèi)面的性質(zhì)，從而被賦予了陽(yáng)離子性而得到的陽(yáng)離子性泳道。也就是說(shuō)，"由陽(yáng)離子性原料形成"的泳道不是指對(duì)該泳道進(jìn)行動(dòng)態(tài)涂布法及固定涂布法中的任一種操作，而是指形成泳道之前，具有來(lái)自于原料所具有的結(jié)構(gòu)的陽(yáng)離子性的泳道。上述陽(yáng)離子性的原料是指結(jié)構(gòu)中具有陽(yáng)離子性官能基的原料，在實(shí)施電泳時(shí)的環(huán)境下，該陽(yáng)離子性官能基顯示陽(yáng)離子性。對(duì)于上述陽(yáng)離子性官能基沒(méi)有特別的限定，可列舉如伯叔氨基、季銨基、苯基偶氮二氨基吡啶基(Pyridium)、胍基(guadinino)以及含有它們的官能基等。其中優(yōu)選伯叔氨基和季銨基。對(duì)于上述陽(yáng)離子性原料沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選為具有上述陽(yáng)離子性基的高分子材料。作為制備具有上述陽(yáng)離子性基的高分子材料的方法沒(méi)有特別的限定，可列舉如將具有上述陽(yáng)離子性基的單體聚合的方法，或者在成為基材的高分子材料中導(dǎo)入上述陽(yáng)離子性基的方法等。其中，優(yōu)選將具有上述陽(yáng)離子性基的單體聚合的方法。另外，具有上述陽(yáng)離子性基的原料優(yōu)選為親水性。對(duì)于具有上述陽(yáng)離子性基的單體沒(méi)有特別的限定，可列舉如(甲基)丙烯酰胺；甲基(甲基)丙烯酰胺、二甲基(甲基)丙烯酰胺、乙基(甲基)丙烯酰胺、乙基己基(甲基)丙烯酰胺、N-異丙基(甲基)丙烯酰胺等烷基(甲基)丙烯酰胺類；甲基氨基乙基(甲基)丙烯酰胺、二乙基氨基丙基(甲基)丙烯酰胺、二甲基氨基羥基丙基(甲基)丙烯酰胺、N-叔丁基-(甲基)丙烯酰胺等垸基氨基垸基(甲基)丙烯酰胺類；甲基氨基(甲基)丙烯酸酯、乙基氨基(甲基)丙烯酸酯等烷基氨基(甲基)丙烯酸酯類；二甲基氨基乙基(甲基)丙烯酸酯、二乙基氨基乙基(甲基)丙烯酸酯、二乙基氨基丙基(甲基)丙烯酸酯等二垸基氨基烷基(甲基)丙烯酸酯類；(甲基)丙烯酰胺丙基氯化三甲基銨氯化物、(甲基)丙烯酰氧基乙基三甲基銨氯化物、(甲基)丙烯酰氧基2-羥基丙基三甲基銨氯化物、(甲基)丙烯酰氨基丙基三甲基銨氯化物等三甲基銨類；烯丙胺、烯丙胺酰胺、二烯丙胺、二甲基烯丙胺、二烯丙基二甲基銨氯化物、二烯丙基(甲基)丙烯酰胺、二烯丙基烷基(甲基)丙烯酰胺等烯丙基化合物、吖丙啶、三亞甲基亞胺、四亞甲基亞胺等亞胺類；乙烯胺；乙烯吡咯烷酮；鳥氨酸、賴氨酸等氨基酸類；以及基于這些單體的單鹵化物的季銨鹽類等。具有上述陽(yáng)離子性基的單體可以單獨(dú)使用，也可以使用多種，也可以作為與其他單體的共聚物使用。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，上述泳道的內(nèi)面由上述陽(yáng)離子性原料形成即可，上述泳道的除內(nèi)表面之外的泳道部分、通路部分以及裝置部分可以由陽(yáng)離子性原料形成，也可以由陽(yáng)離子性原料以外的原料形成。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中使用的泳道優(yōu)選內(nèi)面還經(jīng)臭氧處理過(guò)。通過(guò)對(duì)上述內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或者內(nèi)面由陽(yáng)離子性的原料形成的泳道進(jìn)行臭氧處理，可以將少量的疏水性部分也親水性化。通過(guò)進(jìn)行該親水性化，可以抑制作為通過(guò)泳道的內(nèi)部的試樣的人血液中的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等各成分的非特異吸附，可以對(duì)作為測(cè)定對(duì)象的血紅蛋白類進(jìn)行充分的分離測(cè)定。對(duì)于上述臭氧處理沒(méi)有特別的限定，可列舉如臭氧氣處理、臭氧水處理等。對(duì)進(jìn)行上述臭氧氣處理的方法沒(méi)有特別的限定，可列舉如使臭氧氣與泳道接觸來(lái)進(jìn)行。對(duì)于進(jìn)行上述臭氧水處理的方法沒(méi)有特別的限定，可列舉如使臭氧水與泳道相接觸來(lái)進(jìn)行。其中，優(yōu)選上述臭氧水處理。上述臭氧水處理中使用的臭氧水中，對(duì)于溶解臭氧氣的濃度沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選的下限為20ppm。如果不到20ppm，則臭氧處理中花費(fèi)時(shí)間，或不能充分抑制測(cè)定對(duì)象物質(zhì)等的非特異吸附。更優(yōu)選的下限為50ppm。上述泳道也可以在進(jìn)行上述臭氧處理之后，還用陽(yáng)離子性物質(zhì)進(jìn)行固定涂布。即使在上述臭氧處理后，進(jìn)行基于陽(yáng)離子性物質(zhì)的固定涂布處理，也可以維持事先進(jìn)行的臭氧處理的效果。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中使用的泳道優(yōu)選被離子交換體填充。上述離子交換體可以填充在上述泳道的內(nèi)部整體，也可以僅填充到上述泳道的內(nèi)部的一部分。試樣中的血紅蛋白類被導(dǎo)入到填充有離子交換體的泳道后，其一邊通過(guò)電泳而移動(dòng)一邊與該離子交換體相接觸，由此分離成各成分。因此，可以通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)出被分離的各成分。本說(shuō)明書中，離子交換體是指具有離子交換基的不溶性載體。對(duì)于上述離子交換體沒(méi)有特別的限定，可列舉如具有離子交換性的官能基的不溶性的高分子。對(duì)于上述離子交換性的官能基沒(méi)有特別的限定，可列舉如羧基、磷酸基、磺酸基等陽(yáng)離子交換基；氨基等陰離子交換基。對(duì)于具有上述離子交換性的官能基的高分子的骨架沒(méi)有特別的限定，可列舉如有機(jī)合成高分子、多糖類等有機(jī)系高分子；二氧化硅系、陶瓷系等無(wú)機(jī)系高分子等。這些離子交換體只要在電泳時(shí)為不溶性的粒子即可，可以是交聯(lián)物，也可以是非交聯(lián)物，優(yōu)選為交聯(lián)物。該離子交換體可以是通過(guò)將具有上述離子交換性的官能基的單體重合而得到的高分子，也可以是制備高分子后再導(dǎo)入了上述離子交換性的官能基的離子交換體。優(yōu)選為通過(guò)將具有離子交換性的官能基的單體重合而得到的高分子。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，由于將血液作為試樣，因此需要抑制試樣中的成分對(duì)上述離子交換體的非特異吸附。因此，該離子交換體優(yōu)選具有親水性。具體可例舉如由親水性原料形成的離子交換體、或者優(yōu)選由實(shí)施了親水化處理的多糖類、有機(jī)合成高分子、二氧化硅等形成的離子交換體，更優(yōu)選親水性的有機(jī)合成高分子。對(duì)于作為上述離子交換體使用的多糖類沒(méi)有特別的限定，可列舉如甲殼質(zhì)、殼聚糖等殼聚糖衍生物類及其鹽類；氨基纖維素、N-甲基氨基纖維素等N-取代纖維素的衍生物類及其鹽類；葡聚糖、瓊脂糖、甘露聚糖、淀粉等中性多糖類以及其衍生物類的氨基導(dǎo)入化物及其鹽類等含有陽(yáng)離子性基的多糖類等不溶化物。另外，可列舉如硫酸軟骨素、葡聚糖硫酸、肝素、類肝素(h印aran)、巖藻依聚糖(fucoidan)等含有磺酸基的多糖類及其鹽類；褐藻酸、果膠酸等含有羧基的多糖類及其鹽類；纖維素、葡聚糖、瓊脂糖、甘露聚糖、淀粉等中性多糖類及其衍生物的陰離子性基導(dǎo)入化物、及其鹽類等公知的含有陰離子性基的多糖類等不溶化物。也可以將上述具有離子交換性的多糖類與淀粉、葡聚糖、諒脂糖、甘露聚糖等中性多糖類作為混合物、結(jié)合物使用。對(duì)于作為上述離子交換體而使用的有機(jī)合成高分子沒(méi)有特別的限定，可列舉如通過(guò)將具有離子交換基的單體本體聚合而得到的高分子，或通過(guò)將具有離子交換基的單體與其他不具有離子交換基的親水性單體共聚而得到的高分子。具體優(yōu)選通過(guò)將丙烯酸單體聚合而得到的丙烯酸系高分子。具有上述離子交換基的單體沒(méi)有特別的限定，可列舉如具有羧基的(甲基)丙烯酸、具有磺酸基的2-丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸、具有氨基的2-二乙基氨基乙基(甲基)丙烯酸酯、將縮水甘油(甲基)丙烯酸酯聚合后再將縮水甘油基取代成羧基、磺酸基等后的化合物等。另外，也可以使用具有氨基的聚乙烯亞胺、聚戊烯的不溶化物等。對(duì)于不具有上述離子交換基的親水性單體沒(méi)有特別的限定，可列舉如2-羥基乙基(甲基)丙烯酸酯、聚乙二醇二(甲基)丙烯酸酯、聚羥甲基鏈烷聚(甲基)丙烯酸酯、(甲基)丙烯酰胺、縮水甘油(甲基)丙烯酸酯等。另外，也可以使用聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等不溶化物等。對(duì)于上述離子交換體的形狀沒(méi)有特別的限定，可列舉如球形、破碎形等。其中，優(yōu)選球形，更優(yōu)選圓球或接近圓球的形狀。上述離子交換體的大小只要可以填充到上述泳道即可，沒(méi)有特別的限定，直徑的優(yōu)選下限為O.lpm、優(yōu)選上限為30um。如果不到O.lum，則空隙過(guò)小，試樣難以移動(dòng)，因此有時(shí)會(huì)不能進(jìn)行充分的電泳。如果超過(guò)30ym，則空隙過(guò)大，試樣與離子交換體之間的相互作用不充分，因此分離性能會(huì)下降。更優(yōu)選的下限為l"m，更優(yōu)選的上限為20um。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，作為電泳用緩沖液使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。本說(shuō)明書中電泳用緩沖液(以下，也簡(jiǎn)稱為"緩沖液")是指，(A)電泳時(shí)充滿于上述泳道的內(nèi)部的緩沖液、(B)電泳時(shí)充滿于設(shè)置在上述泳道的兩端的陽(yáng)極槽和陰極槽的緩沖液、(C)清洗上述泳道的內(nèi)部的緩沖液、(D)將試樣溶解稀釋的溶血稀釋液、(E)其他緩沖液等。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，這些所有的緩沖液可以為含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液，也可以是僅一部分的緩沖液為含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。優(yōu)選至少上述(A)及(B)的緩沖液中含有具有陰離子性基的水溶性聚合物。上述緩沖液只要是含有具有緩沖能力的以往公知的緩沖液組合物的溶液即可，沒(méi)有特別的限定，可列舉如含有枸櫞酸、琥珀酸、酒石酸、蘋果酸等有機(jī)酸及其鹽類等的溶液等；含有甘氨酸、牛黃酸、精氨酸等氨基酸類的溶液；含有鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、硼酸、乙酸等無(wú)機(jī)酸及其鹽類等的溶液等。上述緩沖液中也可以適當(dāng)添加表面活性劑、各種聚合物、親水性的低分子化合物等一般使用的添加劑。對(duì)于具有上述陰離子性基的水溶性聚合物的陰離子性基沒(méi)有特別的限定，可列舉如羧基、磷酸基、磺酸基等以往公知的具有陰離子性的官能基。其中，優(yōu)選具有磺酸基。具有上述陰離子性基的水溶性聚合物在分子中可以具有多個(gè)上述陰離子性基，也可以具有不同種類的上述陰離子性基。具有上述陰離子性基的水溶性聚合物只要在使用是為完全溶解于上述緩沖液的狀態(tài)即可，對(duì)水的溶解度的優(yōu)選下限為lg/L。如果不到lg/L，則只能以低濃度使用具有陰離子性基的水溶性聚合物，因此效果難以顯現(xiàn)，測(cè)定精度有時(shí)會(huì)不充分。更優(yōu)選的下限為5g/L。具有上述陰離子性基的水溶性聚合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如具有陰離子性基的水溶性多糖類以及具有陰離子性基的水溶性的有機(jī)合成聚合物。對(duì)于具有上述陰離子性基的水溶性多糖類沒(méi)有特別的限定，可列舉如硫酸軟骨素、葡聚糖硫酸、肝素、類肝素、巖藻依聚糖等含有磺酸基的多糖類及其鹽類；褐藻酸、果膠酸等含有羧基的多糖類及其鹽類；纖維素、葡聚糖、瓊脂糖、甘露聚糖、淀粉等中性多糖類及其衍生物的陰離子性基導(dǎo)入化物、及其鹽類等具有公知的陰離子性基的多糖類等。其中，優(yōu)選硫酸軟骨素、葡聚糖硫酸等硫酸多糖類。具有上述陰離子性基的水溶性的有機(jī)合成聚合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如含有陰離子性的官能基的水溶性的公知的有機(jī)合成聚合物。其中，優(yōu)選具有陰離子性官能基的水溶性丙烯酸系聚合物，即，以丙烯酸或甲基丙烯酸及其衍生物類以及酯類為主要成分的聚合物等。具體可列舉如將(甲基)丙烯酸、2-(甲基)丙烯酰氧基乙基琥珀酸等具有羧基的單體聚合而得的丙烯酸系聚合物；將((甲基)丙烯酰氧基乙基)酸性磷酸酯、(2-(甲基)丙烯酰氧基乙基)酸性磷酸酯、(3-(甲基)丙烯酰氧基丙基)酸性磷酸酯等具有磷酸基的單體聚合而得的丙烯酸系聚合物；將2-(甲基)丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸、(甲基)丙烯酰胺丙烷磺酸、磺基丙基(甲基)丙烯酸酯、(甲基)丙烯酰氧基萘磺酸等具有磺酸基的單體聚合而得的丙烯酸系聚合物等。其中，優(yōu)選將具有磺酸基的單體聚合而得的丙烯酸系聚合物。上述丙烯酸系聚合物也可以是具有陰離子性基的(甲基)丙烯酸單體與不具有陰離子性基的(甲基)丙烯酸單體的共聚物。作為不具有上述陰離子性基的(甲基)丙烯酸單體，只要是可以與具有上述陰離子性基的(甲基)丙烯酸單體共聚的(甲基)丙烯酸單體即可，就沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選例如為非離子性的親水性的(甲基)丙烯酸酯類。具體可列舉如2-羥基乙基(甲基)丙烯酸酯、2-羥基丙基(甲基)丙烯酸酯、甘油(甲基)丙烯酸酯；縮水甘油(甲基)丙烯酸酯、聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯、聚丙二醇(甲基)丙烯酸酯等。作為不具有上述陰離子性基的(甲基)丙烯酸單體的添加量，只要所得的共聚物為水溶性即可，沒(méi)有特別的限定，相對(duì)于上述具有陰離子性基(甲基)丙烯酸單體100重量份，優(yōu)選上限為1000重量份。如果超過(guò)1000重量份，則所得的共聚物有可能不是水溶性的。上述緩沖液中具有上述陰離子性基的水溶性聚合物的含量的優(yōu)選下限為0.01重量Q/^、優(yōu)選上限為10重量％。如果不到0.01重量％，則難以表現(xiàn)添加水溶性聚合物而產(chǎn)生的效果，血紅蛋白類的測(cè)定中，分離等有時(shí)會(huì)不理想。如果超過(guò)10重量％，有時(shí)會(huì)造成測(cè)定時(shí)間的延長(zhǎng)、分離不良。上述緩沖液優(yōu)選還含有離液序列高的化合物。.本說(shuō)明書中，離液序列高的化合物是指具有破環(huán)水分子間的相互作用的性質(zhì)，且具有減弱疏水性分子之間的疏水相互作用、增加疏水性分子的水溶性的作用的化合物。對(duì)于上述離液序列高的化合物沒(méi)有特別的限定，可列舉如含有三溴乙酸離子、三氯乙酸離子、硫氰酸離子、碘化物離子、高氯酸離子、二氯乙酸離子、硝酸離子、氯化物離子、氯化物離子、乙酸離子等陰離子性的離液序列高的離子，鋇離子、鈣離子、鋰離子、銫離子、鉀離子、鎂離子、胍離子等陽(yáng)離子性的離液序列高的離子的化合物；尿素、硫尿素等尿素化合物等。其中，優(yōu)選含有硫氰酸離子、高氯酸離子、硝酸離子、胍離子的化合物以及尿素化合物等。上述離液序列高的化合物的添加量沒(méi)有特別的限定，根據(jù)種類的不同而不同，優(yōu)選下限為0.01重量％、優(yōu)選上限為30重量％。如果不到0.01重量％，則有時(shí)會(huì)不能發(fā)揮充分的血紅蛋白類的分離性能等。如果超過(guò)30重量％，則電泳時(shí)產(chǎn)生熱量，所得的電泳圖中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)峰的變形等。更優(yōu)選下限為0.05重量％，更優(yōu)選的上限為20重量％。上述離液序列高的化合物可以添加到所有的上述緩沖液(A)(E)中，也可以僅添加到一部分的緩沖液中。優(yōu)選至少在上述(A)及(B)的緩沖液中添加離液序列高的化合物。上述緩沖液優(yōu)選還含有亞硝酸鹽。上述亞硝酸鹽沒(méi)有特別的限定，可列舉如亞硝酸鈉、亞硝酸鉀、亞硝酸牽丐等。其中，優(yōu)選亞硝酸鈉或亞硝酸鉀。上述緩沖液中，作為上述亞硝酸鹽的濃度只要是使用時(shí)亞硝酸鹽溶解即可，沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選下限為0.0001摩爾/U優(yōu)選上限為5摩爾/L。如果不到0.0001摩爾/L，則有時(shí)會(huì)不能發(fā)揮優(yōu)良的分離性能等。如果超過(guò)5摩爾/L，則有時(shí)會(huì)導(dǎo)致測(cè)定時(shí)間時(shí)間的延長(zhǎng)、分離不良。更優(yōu)選下限為0.001摩爾/L，更優(yōu)選的上限為1摩爾/L。上述亞硝酸鹽可以添加到所有的上述緩沖液(A)(E)中，也可以僅添加到一部分的緩沖液中。優(yōu)選為至少在上述(D)或(E)的緩沖液中添加亞硝酸鹽。在本發(fā)明的利用電泳法的血紅蛋白類的測(cè)定方法中所使用的電泳裝置沒(méi)有特別的限定，可列舉如毛細(xì)管電泳裝置、微裝置電泳裝置等。圖1中，顯示了在本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中所使用的毛細(xì)管電泳裝置的一例。如圖1所示，毛細(xì)管電泳裝置11由陽(yáng)極槽12、陰極槽13、毛細(xì)管14、高壓電源15、檢測(cè)器16以及一對(duì)電極17、18構(gòu)成。毛細(xì)管14的兩端被浸入到陽(yáng)極槽12內(nèi)以及陰極槽13內(nèi)的緩沖液中，管狀的毛細(xì)管14的內(nèi)部充滿了緩沖液。另外，電極17及18與高壓電源15電連接。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，作為泳道的毛細(xì)管14的內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布，或者，毛細(xì)管14由陽(yáng)離子性的原料形成。另外，優(yōu)選的是，陽(yáng)極槽12內(nèi)、陰極槽13內(nèi)或毛細(xì)管14內(nèi)的緩沖液為含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。測(cè)定血紅蛋白類時(shí)，經(jīng)毛細(xì)管14的一方注入試樣，從高壓電源15施加規(guī)定的電壓，利用檢測(cè)器16來(lái)測(cè)定在毛細(xì)管14內(nèi)移動(dòng)的目的成分。對(duì)于上述毛細(xì)管14的長(zhǎng)度沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選下限為10mm、優(yōu)選上限為800mm。不到10腿時(shí)，不能充分分離測(cè)定試樣，因此有時(shí)不能正確測(cè)定。如果超過(guò)800mm，則由于測(cè)定時(shí)間的延長(zhǎng)、所得電泳圖中峰形狀出現(xiàn)變形，因此有時(shí)不能正確測(cè)定。對(duì)于上述毛細(xì)管14的寬度或直徑?jīng)]有特別的限定，優(yōu)選下限為1"m、優(yōu)選上限為200um。如果不到lum，則檢測(cè)器檢測(cè)用的光路長(zhǎng)度減小，測(cè)定精度有時(shí)會(huì)下降。如果超過(guò)200nm，則試樣在泳道內(nèi)擴(kuò)散，因此得到的電泳圖中峰變寬，測(cè)定精度有時(shí)會(huì)下降。在本發(fā)明的利用電泳法的血紅蛋白類的測(cè)定方法中使用的電泳裝置特別優(yōu)選微裝置電泳裝置。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中使用的電泳裝置是由測(cè)定部、電源部和檢測(cè)部構(gòu)成的電泳裝置，該測(cè)定部由微裝置構(gòu)成，該微裝置具有電極、以及內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性材料形成的泳道，該電泳裝置也是本發(fā)明的內(nèi)容之一。將本發(fā)明的電泳裝置的一例示于圖2。圖2a是顯示微裝置電泳裝置的上面圖的模式圖。如圖2a所示，微裝置電泳裝置具有測(cè)定部2，該測(cè)定部2具有循環(huán)槽(reserver)21、設(shè)置于該循環(huán)槽內(nèi)的電極22、具有含電泳時(shí)測(cè)定試樣移動(dòng)分離的泳道23的流路。循環(huán)槽21是儲(chǔ)存緩沖液用的液體貯槽。圖2a是如下的微裝置電泳裝置的一個(gè)示例含有泳道23的流路形成交叉十字型，在泳道23的各末端4個(gè)位置設(shè)置有循環(huán)槽21、各循環(huán)槽21中設(shè)置有電極22。各電極22通過(guò)電壓供給線與作為高壓電源的電源部3相連接。圖2b為顯示微裝置電泳裝置的橫斷面圖的模式圖。如圖2b所示，微裝置電泳裝置1具有檢測(cè)部4。檢測(cè)部4具有光源41和受光部42。檢測(cè)部4中，光源41和受光部42隔著測(cè)定部2位于相反側(cè)。光源41在形成于測(cè)定部2的泳道23的規(guī)定位置，產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光。受光部42測(cè)定在泳道23中被分離的測(cè)定對(duì)象成分的吸光度。本發(fā)明的上述電泳裝置具有由微裝置形成的測(cè)定部，該微裝置具有由電極、及內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的原料形成的泳道。本說(shuō)明書中，微裝置由無(wú)機(jī)系或有機(jī)系原料形成，是具有150皿見(jiàn)方以下左右尺寸的板狀的基板。具體例舉如在稱為y-TAS、Lab-on-a-chip(實(shí)驗(yàn)室芯片)的技術(shù)中所用以往公知的微芯片等。作為構(gòu)成上述微裝置的原料沒(méi)有特別的限定，可以使用以往公知的原料，優(yōu)選硼硅酸玻璃、石英等玻璃系，熔凝硅石、聚二甲基硅氧烷等二氧化硅系，聚丙烯酸系樹脂、聚苯乙烯系樹脂、聚乳酸系樹脂、聚碳酸酯系樹脂、烯烴系樹脂等樹脂系等原料。其中，優(yōu)選玻璃系、二氧化硅系、丙烯酸樹脂系原料。優(yōu)選后述的不吸收特定波長(zhǎng)的原料。上述微裝置的泳道的長(zhǎng)度的下限為10mm,上限為100mra。如不到10mm，則由于不能充分分離試樣，因此有時(shí)不能進(jìn)行正確的測(cè)定。如果超過(guò)100mm，則會(huì)出現(xiàn)測(cè)定時(shí)間的延長(zhǎng)、所得電泳圖中峰形狀的變形，因此有時(shí)候不能進(jìn)行正確的測(cè)定。上述微裝置的泳道的寬度的下限為10"m、上限為100lim。如果不到10um，則檢測(cè)器檢測(cè)用的光路長(zhǎng)減小，測(cè)定精度有時(shí)會(huì)下降。如果超過(guò)100um，則試樣在泳道內(nèi)擴(kuò)散，因此得到的電泳圖中峰變寬，測(cè)定精度有時(shí)會(huì)下降。上述微裝置的泳道的形狀沒(méi)有特別的限定，可列舉如直線狀、具有一定曲率的曲線狀、或渦旋狀等。其中，優(yōu)選直線狀。上述泳道的斷面的形狀沒(méi)有特別的限定，可列舉如矩形、圓形等。上述微裝置可以具有單個(gè)泳道，也可以具有多個(gè)泳道。另外，上述微裝置根據(jù)上述陽(yáng)離子性官能基的固定化方法等不同而不同，可以反復(fù)使用，也可以僅使用l次。上述微裝置的泳道是通過(guò)上述方法內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道，或者內(nèi)面由陽(yáng)離子性的原料形成的泳道。另外，實(shí)施電泳時(shí)，上述泳道內(nèi)充滿緩沖液，該緩沖液是上述測(cè)定方法中使用的緩沖液，即，含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。上述測(cè)定部?jī)?yōu)選具有循環(huán)槽。上述循環(huán)槽形成于上述泳道的端部，起到電泳中所用緩沖液、測(cè)定試樣等的供給口、排出口以及電極的插入部的作用。上述循環(huán)槽的形狀沒(méi)有特別的限定，可以使用以往公知形狀的。上述循環(huán)槽的大小沒(méi)有特別的限定，可以使用以往公知大小的。為了進(jìn)行緩沖液、測(cè)定試樣等的供給和排水，上述循環(huán)槽也可以根據(jù)需要，在底部或上部進(jìn)行給排水用的連接。上述測(cè)定部具有電極。該電極在測(cè)定部?jī)?nèi)的流路中與緩沖液相接觸，與下述的電源部相連接。通過(guò)來(lái)自電源部的電壓供給，經(jīng)過(guò)充滿于測(cè)定部?jī)?nèi)的流路的緩沖液，對(duì)測(cè)定試樣施加電壓，進(jìn)行電泳。上述電極的設(shè)置位置只要可以與測(cè)定部?jī)?nèi)的流路內(nèi)的緩沖液相接觸就沒(méi)有特別的限定，可以固定于上述測(cè)定部，也可以固定于上述測(cè)定部的蓋部或固定上述測(cè)定部的支持臺(tái)(芯片支撐體)等。另外，與緩沖液相接觸的位置只要在夾入泳道的流路上就沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選在上述循環(huán)槽內(nèi)與緩沖液相接觸。對(duì)于上述電極的原料沒(méi)有特別的限定，可以使用白金等導(dǎo)電性金屬等以往公知原料。本發(fā)明的上述電泳裝置具有電源部。上述電源部起到供給用于電泳的電壓的作用。上述電源部負(fù)荷的電壓的優(yōu)選下限為100V、優(yōu)選上限為3000V。如果不滿IOOV，則利用電泳的測(cè)定對(duì)象成分的移動(dòng)有可能不會(huì)充分進(jìn)行。如果超過(guò)3000V，則產(chǎn)生焦耳熱而導(dǎo)致所得電泳圖中發(fā)生峰變形等，因而測(cè)定精度有可能受損。上述電源部與設(shè)置于上述測(cè)定部?jī)?nèi)的循環(huán)槽等的電極相連接，因此起到向上述測(cè)定部?jī)?nèi)的緩沖液供給電壓的作用。作為將上述電源部與上述電極相連接的方法，沒(méi)有特別的限定，可列舉如以往公知的使用線等的方法。本發(fā)明的上述電泳裝置具有檢測(cè)部。上述檢測(cè)部為對(duì)經(jīng)電泳分離了的測(cè)定試樣成分進(jìn)行光學(xué)檢測(cè)的機(jī)構(gòu)。光學(xué)檢測(cè)的原理只要可以檢測(cè)作為測(cè)定試樣的血紅蛋白類，就沒(méi)有特別的限定，優(yōu)選為血紅蛋白類的在最大吸收波長(zhǎng)區(qū)域的可見(jiàn)光下的吸光度測(cè)定法。該可見(jiàn)光的吸光度具體可例舉如來(lái)自光源的包括可見(jiàn)光的光，通過(guò)照射到上述泳道上的規(guī)定位置，在隔著該泳道的反對(duì)側(cè)設(shè)置的受光器中，可以測(cè)定在泳道內(nèi)移動(dòng)的血紅蛋白類的各種成分對(duì)可見(jiàn)光的吸光度。上述檢測(cè)部?jī)?yōu)選具有光源和受光器。上述檢測(cè)部中，作為上述光源及上述受光器的設(shè)置方式?jīng)]有特別的限定，可列舉如夾著上述泳道被設(shè)置在上述測(cè)定部的上部和下部設(shè)置的方式，也可以為夾著上述泳道被設(shè)置在上述測(cè)定部的側(cè)部的方式。上述檢測(cè)部中，來(lái)自上述光源被照射到上述受光部的光根據(jù)上述光源及上述受光器的設(shè)置狀態(tài)，可以從上部照射到下部，也可以從下部照射到上部，也可以從側(cè)面照射到側(cè)面，可以從具有規(guī)定角度的傾斜處照射。本發(fā)明的電泳裝置優(yōu)選在泳道中預(yù)先有填充緩沖液。上述"預(yù)先填充有緩沖液"是指沒(méi)有必要在臨實(shí)施電泳之前進(jìn)行向泳道中填充緩沖液的操作。是指，例如自泳道中填充緩沖液開始保存一定時(shí)間，不是之后重新向泳道填充緩沖液，而是可以使用已經(jīng)填充的緩沖液實(shí)施電泳。另外，是指從測(cè)定操作開始到測(cè)定操作結(jié)束之間，不用向泳道添加泳道內(nèi)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)以外的物質(zhì)。以往的微裝置電泳裝置中，在臨測(cè)定之前，將緩沖液填充到微裝置上的泳道內(nèi)，再安裝到電泳裝置，開始測(cè)定?；蛘撸晕⒀b置上的泳道中沒(méi)有填充緩沖液的狀態(tài)下將微裝置安裝到電泳之后，在臨進(jìn)行測(cè)定之前，使用設(shè)置有電泳裝置的充填機(jī)構(gòu)，向微裝置上的泳道中填充緩沖液。這樣，以往的電泳裝置中，在手邊準(zhǔn)備在泳道中沒(méi)有填充緩沖液的微裝置之后，開始測(cè)定操作。與此相對(duì)，在預(yù)先泳道中填充了緩沖液的本發(fā)明的電泳裝置中，沒(méi)有必要在臨測(cè)定之前，向泳道中填充緩沖液，因此沒(méi)有必要具有向電泳裝置的充填緩沖液的機(jī)構(gòu)等。另外，以預(yù)先填充了緩沖液的狀態(tài)可以長(zhǎng)時(shí)間保存。這是由于本發(fā)明的電泳裝置具有內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道，或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的原料形成的泳道。將本發(fā)明的電泳裝置中所用泳道的長(zhǎng)度為10100mm、寬度為10100ym時(shí)，優(yōu)選使用所用緩沖液的pH為5.06.0、作為緩沖液組合物的鹽的濃度為10300mM的緩沖液，電泳時(shí)的施加電壓為1002000V。血紅蛋白類的測(cè)定方法也是本發(fā)明之一，其是使用本發(fā)明的電泳裝置的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，使用具有長(zhǎng)度為10100mm、寬度為10100um的泳道的微裝置，以及pH為5.06.0、鹽濃度為10300mM的緩沖液，施加1002000V的電壓。該情況中所用的緩沖液是含有具有陰離子性基的水溶性聚合物、且pH為5.06.0、鹽濃度為10300mM的緩沖液，可以調(diào)整上述緩沖液組合物的pH、濃度而使用。本發(fā)明的電泳裝置的檢測(cè)部中，優(yōu)選選擇400430nni的一個(gè)波長(zhǎng)為主波長(zhǎng)，選擇450600nm的一個(gè)波長(zhǎng)為副波長(zhǎng)，同時(shí)測(cè)定主波長(zhǎng)的吸光度及副波長(zhǎng)的吸光度。通過(guò)使用該特定的波長(zhǎng)，能夠以低成本在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行高精度的測(cè)定。血紅蛋白類的測(cè)定方法又是本發(fā)明之一，其是使用本發(fā)明的電泳裝置的測(cè)定血紅蛋白類的方法，其中，檢測(cè)部中照射選自400430nm的主波長(zhǎng)，和選自450600nm的副波長(zhǎng)。上述主波長(zhǎng)的優(yōu)選范圍為410420nm，副波長(zhǎng)的優(yōu)選范圍為500550nm。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法中，也可以通過(guò)僅照射主波長(zhǎng)范圍和副波長(zhǎng)范圍的可見(jiàn)光，來(lái)測(cè)定主波長(zhǎng)的吸光度及副波長(zhǎng)的吸光度，也可以測(cè)定含有主波長(zhǎng)范圍以及副波長(zhǎng)范圍的多波長(zhǎng)的所有的吸光度之后，再僅選擇主波長(zhǎng)的吸光度及副波長(zhǎng)的吸光度。這樣，在各種情況下，均可以從同時(shí)間的主波長(zhǎng)的吸光度與副波長(zhǎng)的吸光度之差(主波長(zhǎng)的吸光度-副波長(zhǎng)的吸光度)得到電泳圖，從而計(jì)算出作為目的的血紅蛋白類的峰面積。對(duì)于測(cè)定上述主波長(zhǎng)的吸光度及副波長(zhǎng)的吸光度的方法沒(méi)有特別的限定，可列舉如濾波器、分光器、各種鏡類、各種透鏡類等以往公知的檢測(cè)技術(shù)。本發(fā)明的上述電泳裝置除了上述的測(cè)定部、電源部、檢測(cè)部的基本機(jī)構(gòu)之外，也可以具有其他附屬部件。通過(guò)具有該附屬部件，可以更高效率地實(shí)施電泳。對(duì)于上述附屬部件沒(méi)有特別的限定，可列舉如控制上述電源部的電壓、極性、負(fù)荷時(shí)間，或?qū)嵤┮贿B串自動(dòng)化工序用的控制機(jī)構(gòu)，根據(jù)需要可列舉如將清洗上述循環(huán)槽、上述泳道、上述電極用的清洗液等供給、排水等用的供給排水機(jī)構(gòu)，從測(cè)定的吸光度制成電泳圖、或計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值并打印用的數(shù)據(jù)處理機(jī)構(gòu)，測(cè)定試樣的自動(dòng)稀釋或向測(cè)定部的自動(dòng)供給機(jī)構(gòu)，進(jìn)行試樣容器、稀釋槽或流路的清洗以及試樣容器的架設(shè)、供給等的機(jī)構(gòu)等。本發(fā)明的上述電泳裝置的測(cè)定部中可以安裝用于測(cè)定葡萄糖的機(jī)構(gòu)。通過(guò)使用該測(cè)定部，可以同時(shí)測(cè)定作為糖尿病診斷的指標(biāo)的穩(wěn)定型HbAlc和葡萄糖兩者。作為測(cè)定上述葡萄糖用的機(jī)構(gòu)沒(méi)有特別的限定，可以使用以往公知的測(cè)定機(jī)構(gòu)?？闪信e如使用了利用堿性溶液中的葡萄糖的還原作用的還原法的機(jī)構(gòu)；使用了利用葡萄糖與芳香族胺的縮合反應(yīng)的縮合法的機(jī)構(gòu)；使用了利用葡萄糖與葡萄糖脫氫酶、葡萄糖氧化酶、己糖激酶等酶的反應(yīng)的酶法的機(jī)構(gòu)等。其中，優(yōu)選使用了酶法的機(jī)構(gòu)。測(cè)定上述葡萄糖用的機(jī)構(gòu)優(yōu)選設(shè)置于作為上述電泳裝置的測(cè)定部的微裝置上。將上述葡萄糖的測(cè)定機(jī)構(gòu)例如使用了酶法的機(jī)構(gòu)微裝置化時(shí)，可以使用如下方法等公知方法，該方法為通過(guò)濺射法等在微裝置上形成白金薄膜電極等，在該電極上將葡萄糖脫氫酶、葡萄糖氧化酶等固定化，從而將酶?jìng)鞲衅髦谱鲈谖⒀b置上的方法?；谏鲜鲭娪痉ǖ难t蛋白類的測(cè)定機(jī)構(gòu)和葡萄糖測(cè)定機(jī)構(gòu)可以分別形成在不同的微裝置上，也可以形成于同一微芯片上。形成于同一微裝置上時(shí)，可以獨(dú)立設(shè)置各自測(cè)定用的流路，也可以設(shè)置可以在同一流路內(nèi)實(shí)施兩測(cè)定的機(jī)構(gòu)。將具體的結(jié)構(gòu)圖示于圖3(a)(c)。圖3(a)所示的結(jié)構(gòu)例為將導(dǎo)入試樣用的試樣導(dǎo)入口設(shè)置成血紅蛋白類測(cè)定用(圖中26)、葡萄糖測(cè)定用(圖中27)獨(dú)立的示例。該結(jié)構(gòu)中，血紅蛋白類的測(cè)定是向試樣導(dǎo)入口26導(dǎo)入試樣之后，向電極22施加電壓進(jìn)行電泳，在泳道23內(nèi)分離成各成分，在檢測(cè)位置25進(jìn)行上述光學(xué)檢測(cè)。葡萄糖是通過(guò)酶電極28對(duì)另外導(dǎo)入到試樣導(dǎo)入口27的試樣進(jìn)行測(cè)定的。圖3(b)所示的結(jié)構(gòu)例中，將試樣導(dǎo)入試樣導(dǎo)入口29之后，將同一試樣導(dǎo)入到血紅蛋白類測(cè)定用循環(huán)槽211及葡萄糖測(cè)定用循環(huán)槽212中，在循環(huán)槽211及循環(huán)槽21間施加電壓,血紅蛋白類在泳道23中進(jìn)行電泳。另一方面，葡萄糖通過(guò)循環(huán)槽212內(nèi)的酶電極32來(lái)測(cè)定。圖3(c)所示的結(jié)構(gòu)例中，將試樣導(dǎo)入到試樣導(dǎo)入口29之后，首先通過(guò)該試樣導(dǎo)入口29內(nèi)的酶電極28測(cè)定葡萄糖之后，向設(shè)置于該試樣導(dǎo)入口29和循環(huán)槽21的電極施加電壓，在泳道23內(nèi)實(shí)施電泳，進(jìn)行血紅蛋白類的分離。對(duì)于任一個(gè)結(jié)構(gòu)例，均是上述的血紅蛋白類的電泳裝置與該裝置的測(cè)定部中追加的公知的葡萄糖測(cè)定結(jié)構(gòu)的構(gòu)成，對(duì)于以該基本構(gòu)成作為必要構(gòu)成要件之外的構(gòu)成沒(méi)有特別的限定，本發(fā)明也可以含有上述圖3以外的構(gòu)成。通過(guò)該電泳裝置可以用同一裝置進(jìn)行血紅蛋白類和葡萄糖的測(cè)定的血紅蛋白類與葡萄糖的同時(shí)測(cè)定方法也包括在本發(fā)明中?；谏鲜鲭娪痉ǖ难t蛋白類的測(cè)定和葡萄糖的測(cè)定可以是基于與圖3(a)類似機(jī)構(gòu)的獨(dú)立的測(cè)定系，也可以是基于與圖3(b)及圖3(c)相類似機(jī)構(gòu)的連動(dòng)的測(cè)定系。如果為獨(dú)立的機(jī)構(gòu)，可以僅測(cè)定血紅蛋白類，或僅測(cè)定葡萄糖，由于沒(méi)有測(cè)定項(xiàng)目的機(jī)構(gòu)不工作，因此可以節(jié)約試劑等的消耗。另一方面，連動(dòng)的機(jī)構(gòu)中，通過(guò)測(cè)定試樣注入可以同時(shí)測(cè)定兩者。當(dāng)然為連動(dòng)機(jī)構(gòu)時(shí)，也可以僅測(cè)定任一者。另外，如上述圖3(c)的機(jī)構(gòu)的說(shuō)明所述，觀l淀的順序沒(méi)有限定?？梢詼y(cè)定一個(gè)項(xiàng)目之后，再測(cè)定另一者，也可以同時(shí)實(shí)施測(cè)定。通過(guò)使用該裝置進(jìn)行測(cè)定，可以在短時(shí)間內(nèi)，用低成本制造的同一裝置對(duì)上述血紅蛋白類和葡萄糖同時(shí)或分別進(jìn)行高精度測(cè)定。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法及電泳裝置中，對(duì)于成為測(cè)定對(duì)象的血紅蛋白類沒(méi)有特別的限定，可列舉如以往公知的血紅蛋白類。具體可例舉如HbAla、HbAlb、HbF、不穩(wěn)定型HbAlc、穩(wěn)定型HbAlc、HbA0、HbA2;乙酰化Hb、氨基甲酰化Hb等修飾血紅蛋白；HbS、HbC等異常血紅蛋白等。其中，優(yōu)選測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。通過(guò)使用上述血紅蛋白類的測(cè)定方法及電泳裝置，可以同時(shí)分離穩(wěn)定型血紅蛋白Alc與異常血紅蛋白。利用上述血紅蛋白類的測(cè)定方法及測(cè)定裝置的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc及異常血紅蛋白類的同時(shí)測(cè)定方法也是本發(fā)明之一。進(jìn)行糖尿病診斷時(shí)，即使對(duì)于HbAlc成分，也必需特別將成為糖尿病的指標(biāo)的穩(wěn)定型HbAlc與不穩(wěn)定型HbAlc、氨基甲?；疕b等修飾Hb類、HbS等異常血紅蛋白、胎兒血紅蛋白分離。通過(guò)本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法，可以得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與其他的血紅蛋白的峰被分離了的電泳圖。利用該電泳圖，可以進(jìn)行比以往更正確且穩(wěn)定的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的測(cè)定。以往的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的測(cè)定中，通過(guò)求得穩(wěn)定型HbAlc的峰面積值相對(duì)于全部Hb成分的峰面積值的比率，來(lái)計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值。但是，該計(jì)算方法中，當(dāng)對(duì)含有異常Hb類等的試樣進(jìn)行測(cè)定時(shí)，每次測(cè)定所得的穩(wěn)定型HbAlc值均大幅變動(dòng)，存在不能正確計(jì)算出穩(wěn)定型HbAlc值的問(wèn)題。本發(fā)明人經(jīng)過(guò)認(rèn)真的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以往通過(guò)電泳法測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc值時(shí)，特別是測(cè)定含有異常Hb類的試樣時(shí)，穩(wěn)定型HbAlc值大幅變動(dòng)是由于以下原因造成的，艮P，所得電泳圖中包括了計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值中不需要的峰面積值，而進(jìn)行計(jì)算。由此，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)了以下兩種方法在所得的電泳圖中，將穩(wěn)定型HbAlc值的算出中不需要的峰面積值排除，計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值的方法(第l計(jì)算方法)；以及，僅選擇穩(wěn)定型HbAlc值的計(jì)算中必要的峰面積值而計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值的方法(第2計(jì)算方法)。通過(guò)可以得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與其他的血紅蛋白的峰被分離了的電泳圖，該計(jì)算方法成為可能。第l計(jì)算方法中，首先，通過(guò)本發(fā)明的電泳法或電泳裝置，得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與異常血紅蛋白類的峰、胎兒血紅蛋白的峰、分離了的電泳圖。在所得的電泳圖中，計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc的峰面積值a。接著，計(jì)算全部Hb成分的峰面積值d、異常Hb類的峰面積值及胎兒血紅蛋白的峰面積值。進(jìn)一步，求出從上述全部Hb成分的峰面積值d中除去了異常Hb類的峰面積值及胎兒血紅蛋白的峰面積值之外的峰面積值b。通過(guò)將所得面積值a除以面積值b后的值100倍，即下式(1)，可以得到穩(wěn)定型HbAlc值(％)。作為計(jì)算上述各Hb成分的峰面積值的方法，沒(méi)有特別的限定，可以使用例如以往公知的數(shù)據(jù)處理方法等。穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值=-峰蹄口"直a-x100(%)(1)峰面積值b第2計(jì)算方法中，首先，通過(guò)本發(fā)明的電泳法或電泳裝置，得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與血紅蛋白A。的峰分離了的電泳圖。在所得的電泳圖中，計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc的峰面積值a。接著，計(jì)算血紅蛋白A。的峰的面積值c。通過(guò)將所得面積值a除以面積值a與面積值c相加的面積值后的值100倍，即下式(2)，可以得到穩(wěn)定型HbAlc值(％)。對(duì)于計(jì)算上述各Hb成分的峰面積值的方法沒(méi)有特別的限定，例如可以使用以往公知的數(shù)據(jù)處理方法等。峰面積值a穩(wěn)定^血紅蛋白六化值=-x100(%)(2)峰面積值a+峰面積值c通過(guò)這些穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值的計(jì)算方法，對(duì)于含有異常Hb類等的試樣，可以正確計(jì)算出作為糖尿病的指標(biāo)的穩(wěn)定型HbAlc值。上述第1計(jì)算方法中，作為得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與異常血紅蛋白類的峰、胎兒血紅蛋白的峰相分離了的電泳圖的方法，以及上述第2計(jì)算方法中，得到穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與血紅蛋白A。的峰相分離了的電泳圖的方法，可以例舉本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法。通過(guò)本發(fā)明可以提供能夠在短時(shí)間內(nèi)高精度地進(jìn)行血紅蛋白類、特別是作為糖尿病的診斷指標(biāo)的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的測(cè)定的血紅蛋白類的測(cè)定方法，以及適于使用該測(cè)定方法的電泳裝置。圖1是顯示本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法所用的毛細(xì)管電泳裝置的一例的模式圖。圖2a是顯示本發(fā)明的微裝置電泳裝置的上面圖的模式圖。圖2b是顯示本發(fā)明的微裝置電泳裝置的橫斷面圖的模式圖。圖3ac為顯示具有葡萄糖測(cè)定機(jī)構(gòu)的本發(fā)明的微裝置電泳裝置的一例的模式圖。圖4是實(shí)施例1中經(jīng)健康人血的測(cè)定而得的電泳圖。圖5是實(shí)施例1中通過(guò)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定而得的電泳圖。圖6是實(shí)施例3中實(shí)施例1(3)所得的健康人血經(jīng)測(cè)定而得的電泳圖。圖7是實(shí)施例3中實(shí)施例1(4)所得的含有修飾Hb的試樣經(jīng)測(cè)定而得的電泳圖。圖8是比較例2中經(jīng)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定而得的電泳圖。圖9是實(shí)施例24中，使用含有HbS及HbC作為異常Hb類的試樣，進(jìn)行與基于健康人試樣的電泳的測(cè)定相同的測(cè)定而得的電泳圖。圖10是實(shí)施例24中，使用含有HbA2的試樣，進(jìn)行與基于健康人試樣的電泳的測(cè)定相同的測(cè)定而得的電泳圖。圖11是顯示實(shí)施例2426、比較例12所進(jìn)行的基于電泳的測(cè)定而得的穩(wěn)定型HbAlc值(Q^)與保存天數(shù)之間的關(guān)系的示圖。圖12a是顯示實(shí)施例27、28中，使枸櫞酸緩沖液的pH變化的同時(shí)進(jìn)行批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)的結(jié)果的圖。圖12b是顯示實(shí)施例27、28中，使枸櫞酸緩沖液的鹽濃度變化的同時(shí)進(jìn)行批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)的結(jié)果的圖。圖13是實(shí)施例31中所得而得電泳圖。圖14是實(shí)施例32中所得的電泳圖。符號(hào)說(shuō)明11毛細(xì)管電泳裝置12陽(yáng)極槽13陰極槽14毛細(xì)管15高壓電源16檢測(cè)器17、18電極2測(cè)定部21循環(huán)槽211血紅蛋白類測(cè)定用循環(huán)槽212葡萄糖測(cè)定用循環(huán)槽22電極23泳道25檢測(cè)位置26血紅蛋白類測(cè)定用試樣導(dǎo)入口27葡萄糖測(cè)定用試樣導(dǎo)入口28酸素電極29試樣導(dǎo)入口(兩者共通)3電源部31電壓供給線314檢測(cè)部41光源42受光部具體實(shí)施方式以下，例舉實(shí)施例迸一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的方式，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。(實(shí)施例1)實(shí)施例13中，使用將陽(yáng)離子性聚合物固定化了的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性丙烯酸系聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，來(lái)進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的涂布制備含有殼聚糖(殼聚糖100、和光純藥社制)0.2重量％作為陽(yáng)離子性聚合物的0.2N鹽酸溶液。接著，向熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)制內(nèi)徑25ymX全長(zhǎng)30cm)中依次通入0.2N的NaOH水溶液、離子交換水、0.5N的HC1水溶液，將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，通入所得殼聚糖溶液20分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)將殼聚糖溶液趕出，在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)使之干燥12小時(shí)。之后，再次注入殼聚糖溶液，將空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此將毛細(xì)管內(nèi)面涂布。將用作為陽(yáng)離子性聚合物的殼聚糖將內(nèi)面涂布了的毛細(xì)管安裝到毛細(xì)管電泳裝置(PAC/EMDQ、BeckmanCoulter社制)。(2)緩沖液的制備將作為具有陰離子性基的丙烯酸系單體的2-丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸(和光純藥社制)3.0g以及作為不具有陰離子性基的丙烯酸系單體的羥基乙基甲基丙烯酸酯(和光純藥社制)2.0g溶解于50mL的離子交換水中，制備溶液。在所得的溶液中，加入過(guò)硫酸鉀0.05g，在氮?dú)夥障乱贿厰嚢枰贿吷郎刂?(TC進(jìn)行聚合。聚合10小時(shí)之后，將所得的內(nèi)容物全部移至透析管(三光純藥社制UCC65-50)中，在離子交換水中進(jìn)行12小時(shí)透析，由此得到緩沖液中使用的丙烯酸系聚合物。將含有所得丙烯酸系聚合物2.0重量％的枸櫞酸緩沖液(pH4.7)安放到毛細(xì)管的兩端，充滿于毛細(xì)管內(nèi)。(3)健康人血的測(cè)定向從健康人血經(jīng)肝素采血的健康人全血70uL中，加入上述(2)所得的含有丙烯酸系聚合物2重量％的枸櫞酸緩沖液(p朋.O)200iiL，得到溶血稀釋品，將其作為試樣。向毛細(xì)管的一方注入試樣，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液施加20kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此通過(guò)毛細(xì)管電泳法測(cè)定人血液中的穩(wěn)定型HbAlc。圖4為實(shí)施例1中，由健康人血的測(cè)定而得的電泳圖。圖4中，峰l表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbA0。可以進(jìn)行穩(wěn)定型HbAlc的分離。(4)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定向從健康人血經(jīng)肝素采血的健康人全血中，添加葡萄糖并使其成為2000mg/dL,人工制備含有大量作為修飾Hb之一的不穩(wěn)定型HbAlc的試樣。從毛細(xì)管的一方注入試樣，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液施加20kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此通過(guò)毛細(xì)管電泳法測(cè)定人血液中的穩(wěn)定型HbAlc。圖5是實(shí)施例1中通過(guò)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定而得到的電泳圖。圖5中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbA0、峰3表示修飾Hb(不穩(wěn)定型HbAlc)。如圖5所示，穩(wěn)定型HbAlc與作為修飾Hb的不穩(wěn)定型HbAlc被良好分離。(5)修飾Hb的分離性能試驗(yàn)制備以下試樣上述(4)記載所示的向健康人血中添加葡萄糖并使其成為2000mg/dL而得的不穩(wěn)定型HbAlc含有試樣，以及向從同一人采血而得健康人血中加入氰酸鈉并使其成為50mg/dL所獲得的氨基甲酰化Hb含有試樣，與健康人血試樣一起在上述條件下進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定氨基甲酰化Hb含有試樣時(shí)，也可以得到與圖5同樣的電泳圖，與穩(wěn)定型HbAlc良好地分離。將從各修飾Hb含有試樣的穩(wěn)定型HbAlc值減去健康人血試樣的穩(wěn)定型HbAlc值之差(AHbAlc值)示于表1。(6)批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)使用實(shí)施例1的條件，測(cè)定將健康人血試樣的同一試樣連續(xù)測(cè)定10次時(shí)的穩(wěn)定型HbAlc值的CV值。另外，通過(guò)計(jì)算(標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值)而求得CV值。將結(jié)果示于表2。(實(shí)施例2)除了使用含有作為陽(yáng)離子性聚合物的聚戊烯(NacalaiTesque社制)0.5重量％的水溶液來(lái)代替殼聚糖溶液之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法進(jìn)行毛細(xì)管內(nèi)面的涂布。使用與實(shí)施例2所用的丙烯酸系聚合物含有緩沖液相同的緩沖液，進(jìn)行實(shí)施例1(3)及(4)中制備的健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖4相同的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖5相同的電泳圖。另外，通過(guò)與實(shí)施例l(5)及(6)相同的方法，進(jìn)行修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表1及表2。(實(shí)施例3)實(shí)施例3中，與上述實(shí)施例1及實(shí)施例2同樣，使用固定化了陽(yáng)離子性聚合物的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性丙烯酸系聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，并且制造具有測(cè)定部、電源部、檢測(cè)部的微裝置型的電泳裝置，進(jìn)行測(cè)定。制造圖2所示的微裝置電泳裝置。作為測(cè)定部使用具有白金電極(直徑1腿X長(zhǎng)5mm)及交叉十字型的泳道(長(zhǎng)度50mm、寬80ym)的玻璃制微裝置(外形尺寸50mmX75mmX3mm)。將該電極插入到微裝置上的循環(huán)槽中，將該電極與電源部(LabSmith社制、多通道高電壓程序控制電源裝置HVS448)用電壓供給線相連接，在微裝置上設(shè)置具有鹵燈光源(Moritex社制MHF-V501)、分光器(B&WTek社制、BTC112)、及數(shù)據(jù)處理用計(jì)算機(jī)的檢測(cè)部，由此制造電泳裝置。除了使用含有殼聚糖(殼聚糖100、和光純藥社制)O.2重量％的0.2N鹽酸溶液之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，涂布上述微裝置內(nèi)的泳道。使用與實(shí)施例1所用丙烯酸系聚合物含有緩沖液同樣的緩沖液，利用1000V的微裝置電泳法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。圖6為實(shí)施例3中通過(guò)測(cè)定上述實(shí)施例1(3)所得健康人血而得的電泳圖。圖6中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbA0。圖7為實(shí)施例3中，通過(guò)測(cè)定上述實(shí)施例1(4)所得的含有修飾Hb的試樣而得的電泳圖。圖7中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc，峰2表示HbA0，峰3表示修飾Hb(不穩(wěn)定型HbAlc)。如圖7所示，穩(wěn)定型HbAlc與作為修飾Hb的不穩(wěn)定型HbAlc被良好分離。另外，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)相同的方法，進(jìn)行修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表1及表2。(比較例1)比較例1中，與實(shí)施例1及2同樣，使用固定化了陽(yáng)離子性聚合物的泳道，但使用不含具有陰離子性基的水溶性丙烯酸系聚合物的緩沖液進(jìn)行測(cè)定。在實(shí)施例1中除了使用不含丙烯酸系聚合物的枸櫞酸緩沖液(pH4.7)來(lái)代替丙烯酸系聚合物含有枸櫞酸緩沖液(實(shí)施例1中制備的)之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，進(jìn)行實(shí)施例1(3)及(4)中制備的健康人血及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定?？芍我辉嚇拥臏y(cè)定中，在所得電泳圖中均沒(méi)有檢測(cè)到峰，使用不含具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液時(shí)，不能進(jìn)行血紅蛋白類的分離。(比較例2)比較例2中，與實(shí)施例1及2同樣，陽(yáng)離子性聚合物用于涂布，但涂布法不是固定涂布法而是動(dòng)態(tài)涂布法，另外，緩沖液使用含有具有非丙烯酸系陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液，來(lái)進(jìn)行測(cè)定。向熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)制內(nèi)徑25umX全長(zhǎng)30cm)中依次通入0.2N的NaOH水溶液、離子交換水、0.5N的HC1水溶液，來(lái)清洗毛細(xì)管內(nèi)。通入含有0.5重量％的馬血清白蛋白(陽(yáng)離子性聚合物)的蘋果酸緩沖液(pH4.7)l分鐘，將毛細(xì)管內(nèi)動(dòng)態(tài)涂布。接著，在上述毛細(xì)管的兩端放置含有0.2重量％硫酸軟骨素(和光純藥社制非丙烯酸系聚合物)的蘋果酸緩沖液(pH4.7)，填滿毛細(xì)管內(nèi)。通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，進(jìn)行實(shí)施例1(4)制備的含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。圖8是比較例2中測(cè)定含有修飾Hb的試樣而得的電泳圖。圖8中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbAO、峰3表示修飾Hb(不穩(wěn)定型HbAlc)。如圖8所示，所得的電泳圖中，顯示穩(wěn)定型HbAlc的峰l與顯示修飾Hb的峰3重疊?？梢源_認(rèn)，沒(méi)有使用本發(fā)明的固定涂布法而使用動(dòng)態(tài)涂布法、并不使用丙烯酸系聚合物含有緩沖液時(shí)，穩(wěn)定型HbAlc不能與修飾Hb分離，不能正確測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。另夕卜，通過(guò)與實(shí)施例l(5)及(6)同樣的方法，進(jìn)行修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。另外，比較例2的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，在l次測(cè)定結(jié)束時(shí)，依次通入0.2N的NaOH1分鐘，.含有0.2重量％的硫酸軟骨素的蘋果酸緩沖液(pH4.7)2分鐘來(lái)清洗毛細(xì)管。另外，在下次試樣測(cè)定之前，再次進(jìn)行比較例2所示的動(dòng)態(tài)涂布，從而實(shí)施連續(xù)測(cè)定，進(jìn)行批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表1及表2。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>由表1可知，在實(shí)施例l的測(cè)定條件中，AHbAlc值非常小，即修飾Hb含有試樣與不含修飾Hb的健康人血試樣的穩(wěn)定型HbAlc值幾乎沒(méi)有差別，即使存在修飾Hb類，也可以正確地測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。另外，實(shí)施例2、3也與實(shí)施例1同樣，得到了良好的結(jié)果。但是，在比較例2的測(cè)定條件下，AHbAlc值大，不能進(jìn)行正確的測(cè)定。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>由表2可知，于實(shí)施例l的測(cè)定條件下，在批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，顯示離散程度的CV值為1%左右，是良好的結(jié)果。另外，實(shí)施例2、3中也與實(shí)施例1同樣，得到了良好的結(jié)果。但是，比較例2的測(cè)定條件下，CV值極大，在控制糖尿病患者的HbAlc值方面是完全不理想的值。(實(shí)施例4)在實(shí)施例46中，使用共價(jià)鍵合了分子量200800的具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的制造將熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制、內(nèi)徑25umX全長(zhǎng)30cm)安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckmanCoulter社制、PAC/EMDQ)。依次通入0.2N的NaOH溶液、離子交換水、0.5N的HC1溶液，將毛細(xì)管內(nèi)清洗后，通入含有1.0重量％的3-氨基丙基三乙氧基硅垸(親水性化合物、分子量221、信越silicone社制)的水溶液60分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)，將上述的水溶液趕出之后，在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)使之干燥12小時(shí)，這樣得到最表面共價(jià)鍵合了親水性化合物的毛細(xì)管。(2)測(cè)定試樣的制備測(cè)定試樣為向從健康人經(jīng)EDTA采血而得的健康人全血70uL中添加含有0.01重量％的TritonX-100(和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(pH6.0)200uL，將這樣溶血稀釋了的試樣作為健康人血試樣使用。另外，從同一健康人經(jīng)EDTA采血而得的健康人全血70uL中添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，將其在37"C加熱3小時(shí)，從而人工制備大量含有作為修飾Hb之一的不穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定試樣，將其作為修飾Hb含有試樣使用。(3)利用電泳的測(cè)定使用在上述的表面共價(jià)鍵合了親水性化合物的毛細(xì)管，進(jìn)行上述的健康人試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。使用含有2.0重量％的硫酸軟骨素(陰離子性聚合物、和光純藥社制)的240mM枸櫞酸緩沖液(pH5.0)作為電泳用緩沖液，從毛細(xì)管的一方注入上述的健康人試樣、修飾Hb含有試樣，利用20kV的電壓進(jìn)行電泳，進(jìn)行415nm下吸光度的測(cè)定。實(shí)施例4中，由健康人血試樣的測(cè)定而得的電泳圖與圖4同樣，穩(wěn)定型HbAlc的峰良好地被分離。另外，實(shí)施例4中，由修飾Hb含有試樣的測(cè)定而得的電泳圖與圖5同樣，穩(wěn)定型HbAlc與作為修飾Hb的不穩(wěn)定型HbAlc被良好分離。使用上述(2)的試樣，通過(guò)與實(shí)施例l(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表3及表4。(實(shí)施例5)(1)泳道的制造實(shí)施例5中，與上述實(shí)施例4同樣，使用共價(jià)鍵合了分子量200800的具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物的泳道，并且，使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，除此之外，還制造與上述實(shí)施例3同樣的具有測(cè)定部、電源部、檢測(cè)部的微裝置型的電泳裝置，進(jìn)行測(cè)定。在聚二甲基硅氧烷制的微裝置(外形尺寸50腿X75誦X3腿)中，形成寬90ym的雙T型的電泳用流路。向形成的流路中依次通入0.1N的NaOH溶液、離子交換水、0.2N的HC1溶液，將流路內(nèi)清洗之后，通入含有l(wèi).O重量％的3-氨基丙基三甲氧基硅烷(親水性化合物、分子量179、信越silicone社制)的水溶液30分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)，將上述水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)，這樣得到了最表面共價(jià)鍵合有親水性化合物的流路。(2)測(cè)定試樣通過(guò)與實(shí)施例4相同的方法，制備健康人血試樣及修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定使用在上述的表面共價(jià)鍵合了親水性化合物的流路，進(jìn)行上述的健康人試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。使用含有2.0重量％的硫酸軟骨素(陰離子性聚合物、和光純藥社制)的250mM琥珀酸緩沖液(pH5.2)作為電泳用緩沖液，從流路的一方注入上述的健康人試樣、修飾Hb含有試樣，利用0.8kV的電壓進(jìn)行電泳，進(jìn)行415nm下吸光度的測(cè)定。健康人血試樣的測(cè)定中，得到了與圖6同樣的電泳圖。修飾Hb含有試樣的測(cè)定中，得到了與圖7同樣的電泳圖。使用上述(2)的測(cè)定試樣，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表3和表4。.(實(shí)施例6)(1)泳道的制備在甲基丙烯酸甲酯及縮水甘油甲基丙烯酸酯的共聚物制的微裝置(外形尺寸50,X75腦X3誦)中，形成寬80ym的雙T型的電泳用流路。向形成的流路中依次通入0.01N的NaOH溶液、離子交換水、0.01N的HC1溶液將流路內(nèi)清洗之后，通入20重量％的乙二胺(親水性化合物、分子量60、和光純藥社制)水溶液5分鐘，將該水溶液充滿之后直接將流路的兩端密封，之后將其在50。C的恒溫槽內(nèi)靜置3小時(shí)。之后，將上述流路內(nèi)用離子交換水清洗后，向該流路內(nèi)通入0.05N的硫酸3分鐘，將該水溶液充滿后直接將泳道的兩端密封，之后，將其于5(TC在恒溫槽內(nèi)靜置5小時(shí)。之后，將上述的流路內(nèi)用離子交換水清洗，得到最表面共價(jià)鍵合有親水性化合物的流路。(2)測(cè)定試樣的制備通過(guò)與實(shí)施例4同樣的方法，制備健康人血試樣及修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定使用在上述的表面共價(jià)鍵合了親水性化合物的流路，進(jìn)行上述的健康人試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。使用含有1.7重量％的2-丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸(東亞合成化學(xué)社制)共聚物的300mM蘋果酸緩沖液(pH5.2)作為電泳用緩沖液，從流路的一方注入上述的健康人試樣或修飾Hb含有試樣，利用l.OkV的電壓進(jìn)行電泳，進(jìn)行415nm下吸光度的測(cè)定。健康人血試樣的測(cè)定中，得到了與圖6同樣的電泳圖。修飾Hb含有試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。使用上述(2)的測(cè)定試樣，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將得到的結(jié)果分別示于表3和表4。(比較例3)比較例3中使用了共價(jià)鍵合了具有較本發(fā)明所用親水性化合物(分子量200800)更大分子量、且具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物的泳道，還使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的制備除了使用0.1重量％的聚賴氨酸(分子量10004000:和光純藥社制)作為親水性化合物之外，與上述實(shí)施例6進(jìn)行同樣的操作，得到最表面共價(jià)鍵合有親水性化合物的流路。(2)測(cè)定試樣的制備使用上述實(shí)施例4所述的修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定在與上述實(shí)施例6同樣的條件下，進(jìn)行修飾Hb含有試樣的測(cè)定，結(jié)果所得的電泳圖與圖7同樣，所有的峰均被良好分離。使用上述(2)的測(cè)定試樣，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表3和表4。表3AHbAlc值(%)(修飾Hb試樣一健康人試樣)不穩(wěn)定型HbAlc含有試樣氨基甲?；疕b含有試樣實(shí)施例40.1_0.1實(shí)施例50.0_0.1實(shí)施例6-O.10.1比較例3-O.20.3表3可知，在實(shí)施例46的測(cè)定條件下，AHbAlc值非常小，即使存在修飾Hb類，也可以正確測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。另一方面，比較例3的測(cè)定條件中，AHbAlc值較實(shí)施例46大若干，受到了修飾Hb類的影響。表4重現(xiàn)性試驗(yàn)CV(%)實(shí)施例41.06實(shí)施例51.08實(shí)施例60.99比較例34.22由表4可知，在實(shí)施例46的測(cè)定條件下的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，表示離差程度的CV值為1%左右，為良好的結(jié)果。另一方面，在比較例3的測(cè)定條件下的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，表示離差程度的CV值非常大，為4%以上，對(duì)于控制糖尿病患者的HbAlc方面是完全不理想的值。(實(shí)施例7)實(shí)施例79中，使用在由非離子性的親水性聚合物形成的固定涂布層上被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道內(nèi)面的涂布將熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制、內(nèi)徑75umX全長(zhǎng)50cm)安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckraanCoulter社制、PAC/EMDQ)。依次通入0.2N的NaOH、離子交換水、0.5N的HC1將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，通入1.0重量%的聚乙烯醇(日本合成化學(xué)社制、G0HSEN0LGH-20、非離子性的親水性聚合物)水溶液20分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)趕出上述聚乙烯醇水溶液后，使其在40。C的千燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將上述的聚乙烯醇水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，在毛細(xì)管內(nèi)面涂布非離子性的親水性聚合物。接著，除了使用5.0重量％的聚戊烯(和光純藥社制、離子性的親水性聚合物)水溶液來(lái)代替上述1.0重量％的聚乙烯醇之外，通過(guò)與上述方法相同的方法，將通液、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，進(jìn)一步在毛細(xì)管內(nèi)面涂布離子性聚合物。(2)測(cè)定試樣的制備測(cè)定試樣為向從健康人血經(jīng)肝素采血而得的健康人全血70yL中添加含有0.01重量％的TritonX-100(和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(pH6.0)200uL，將這樣溶血稀釋了的試樣作為健康人血試樣使用。另外，向從健康人血經(jīng)肝素采血而得的健康人全血70yL中添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，將其在37'C加熱3小時(shí)，從而人工制備大量含有作為修飾Hb之一的不穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定試樣，將其作為修飾Hb含有試樣使用。(3)利用電泳的測(cè)定使用上述的毛細(xì)管，進(jìn)行制備的健康人血試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。作為電泳用緩沖液，使用含有2.0重量％的硫酸軟骨素(和光純藥社制，具有陰離子性基的水溶性聚合物)的200mM的枸櫞酸緩沖液(pH5.0)，通過(guò)毛細(xì)管的一方注入上述試樣，通過(guò)22kV的電壓進(jìn)行電泳，通過(guò)測(cè)定415nm下吸光度來(lái)進(jìn)行測(cè)定。實(shí)施例7的測(cè)定條件中所得的電泳圖與圖4及圖5同樣，所有的峰均被良好地分離。使用上述(2)的測(cè)定試樣，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)相同地方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表5及表6。(實(shí)施例8)(1)泳道內(nèi)面的涂布在熔凝硅石制微裝置(7cmX5cm)中制備寬lOOym的雙T型的電泳用泳道。向該微裝置內(nèi)的泳道依次通入O.1N的NaOH、離子交換水、0.2N的HC1，將泳道內(nèi)清洗之后，通入1.0重量％的聚乙烯吡咯烷酮(日本觸媒社制、PVP-K-90W、非離子性的親水性聚合物)水溶液20分鐘。之后，將空氣注入到泳道內(nèi)將上述的聚乙烯吡咯烷酮水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將聚乙烯吡咯垸酮水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，向泳道內(nèi)面涂布非離子性的親水性聚合物。接著，除了使用含有2.0重量％的殼聚糖(和光純藥社制、陽(yáng)離子性的親水性聚合物)的0.2N的鹽酸來(lái)代替上述的1.0重量％的聚乙烯吡咯烷酮水溶液之外，通過(guò)與上述方法同樣的方法，將通液、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，進(jìn)一步在泳道內(nèi)面涂布陽(yáng)離子性聚合物。(2)測(cè)定試樣的制備通過(guò)與實(shí)施例7同樣的方法，制備健康人血試樣及修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定使用上述泳道，對(duì)制備的健康人試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定進(jìn)行測(cè)定。使用含有1.5重量％的葡聚糖硫酸(和光純藥社制、具有陰離子性基的水溶性聚合物)的250mM的琥珀酸緩沖液(pH5.2)作為電泳用緩沖液，從泳道的一方注入上述的測(cè)定試樣，利用0.8kV的電壓進(jìn)行電泳，利用415nm下吸光度測(cè)定來(lái)進(jìn)行測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。使用上述(2)的測(cè)定試樣，通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表5及表6。(實(shí)施例9)(1)泳道內(nèi)面的涂布向聚二甲基硅氧烷制的微裝置(7cmX5cm)中，制造寬80um的雙T型的電泳用泳道。向該微裝置內(nèi)的泳道內(nèi)依次通入O.1N的Na0H、離子交換水、0.2N的HC1將泳道內(nèi)清洗之后，通入含有1.0重量％的2-羥基乙基甲基丙烯酸酯(和光純藥社制)共聚物(非離子性的親水性聚合物)的聚合物水溶液20分鐘。之后，將空氣注入到泳道內(nèi)，將上述的聚合物水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將上述的聚合物水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，涂布非離子性的親水性聚合物。接著，使用含有2.0重量％的殼聚糖(和光純藥社制、離子性的親水性聚合物)的0.2N的鹽酸代替含有1.0重量％的2-羥基乙基甲基丙烯酸酯共聚物的聚合物水溶液之外，通過(guò)與上述方法相同的方法，將通液、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，進(jìn)一步在泳道內(nèi)面涂布陽(yáng)離子性聚合物。(2)測(cè)定試樣的制備通過(guò)與實(shí)施例7同樣的方法，制備健康人血試樣及修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定使用上述的泳道，對(duì)制備的健康人試樣及修飾Hb含有試樣進(jìn)行測(cè)定。使用含有1.7重量％的2-丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸(東亞合成化學(xué)社制)共聚物(具有陰離子性基的水溶性聚合物)的300mM蘋果酸緩沖液(pH5.2)作為電泳用緩沖液，從泳道的一方注入上述的測(cè)定試樣，利用1.0kV的電壓進(jìn)行電泳，利用415nm下的吸光度測(cè)定來(lái)進(jìn)行測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。通過(guò)與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表5及表6。(比較例4)比較例4中，示例了以與上述實(shí)施例79所用的非離子性親水性聚合物及陽(yáng)離子性聚合物的涂布相反的順序進(jìn)行涂布的示例，即首先在泳道內(nèi)面涂布陽(yáng)離子性聚合物，之后再涂布非離子性聚合物的示例。(1)泳道內(nèi)面的涂布將熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制內(nèi)徑75umX全長(zhǎng)50cm)安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckmanCoulter社制、PAC/EMDQ)。依次通入0.2N的NaOH、離子交換水、0.5N的HC1將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，通入5.0重量%的聚戊烯(和光純藥社制、陽(yáng)離子性聚合物)水溶液20分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)將上述的聚戊烯水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將上述聚戊烯水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此向毛細(xì)管內(nèi)面涂布陽(yáng)離子性聚合物。向所得的毛細(xì)管中，以與上述相同的方法通入1.0重量％的聚乙烯醇(日本合成化學(xué)社制、G0HSEN0LGH-20、非離子性的親水性聚合物)水溶液20分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)將上述的聚乙烯醇水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將上述的聚乙烯醇水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此在毛細(xì)管內(nèi)面的陽(yáng)離子性聚合物(聚戊烯)上涂布非離子性的親水性聚合物。(2)測(cè)定試樣的制備使用與實(shí)施例7同樣的健康人試樣及修飾Hb含有試樣。(3)利用電泳的測(cè)定使用與實(shí)施例7同樣的緩沖液作為電泳用緩沖液，從毛細(xì)管的一方注入上述的測(cè)定試樣，利用20kV的電壓進(jìn)行電泳，由415nm下的吸光度測(cè)定來(lái)進(jìn)行測(cè)定。對(duì)于健康人血及修飾Hb含有試樣的任一試樣，均沒(méi)有確認(rèn)血紅蛋白的峰?？芍?dāng)最內(nèi)面不存在陽(yáng)離子性時(shí)，不能進(jìn)行血紅蛋白類的測(cè)定。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>由表5可知，在實(shí)施例78的測(cè)定條件下，AHbAlc值非常小，即使不存在修飾Hb類的情況下，也可以正確測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>由表6可知，在實(shí)施例78的測(cè)定條件下的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，表示離差程度的CV值為1%左右，是良好的結(jié)果。(實(shí)施例10)實(shí)施例10中，使用固定化了陽(yáng)離子性聚合物、且泳道內(nèi)填充了離子交換體的泳道，還使用含有具有陰離子性基的水溶性丙烯酸系聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，進(jìn)行測(cè)定。(1)離子交換體的制備向4%聚乙烯醇水溶液2.0L中，添加四乙二醇二甲基丙烯酸酯(非離子性單體新中村化學(xué)社制)300g、2-羥基甲基甲基丙烯酸酯50g(非離子性單體新中村化學(xué)社制)、二乙基氨基乙基甲基丙烯酸酯(具有氨基的單體和光純藥社制)100g以及過(guò)氧化苯甲酰1.0g的混合物，一邊攪拌，一邊在氮?dú)夥障律郎氐?0。C進(jìn)行10小時(shí)聚合。將所得聚合物清洗回收，得到具有氨基的離子交換體。(2)泳道的制備在由聚二甲基硅氧烷形成的電泳用微裝置(50mmX100mm)中，形成交叉十字型的槽，由此成為寬100ymX長(zhǎng)度70mm的泳道。在形成的泳道內(nèi)，通過(guò)與實(shí)施例2同樣的方法，進(jìn)行殼聚糖溶液的涂布，進(jìn)而，填充上述的(1)離子交換體的制備中所得的具有氨基的離子交換體。(3)健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定除了使用含有2.0重量％的硫酸軟骨素的枸櫞酸緩沖液(pH4.7)作為緩沖液、在1000V的電壓下進(jìn)行電泳之外，通過(guò)與實(shí)施例8同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖4同樣的電泳圖。在含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖5同樣的電泳圖。(實(shí)施例11)實(shí)施例1113中，使用內(nèi)面實(shí)施了臭氧處理的泳道，進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的制備在毛細(xì)管電泳裝置(PAC/EMDQ、BeckmanCoulter社制)中，安裝熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制內(nèi)徑25"mX全長(zhǎng)30cni)，向該毛細(xì)管內(nèi)依次通入0.2N的NaOH水溶液、離子交換水、0.5N的HC1水溶液將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，通入含有0.5重量％的殼聚糖的0.2N鹽酸溶液20分鐘。之后，向毛細(xì)管內(nèi)注入空氣將殼聚糖溶液趕出，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將殼聚糖溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次。向所得的毛細(xì)管填滿溶解臭氧氣濃度為100ppm的臭氧水后靜置。10分鐘后，將臭氧水抽出，再次將同樣的臭氧水注入并靜置10分鐘，得到含有完成了臭氧水處理的泳道的毛細(xì)管。向所得的毛細(xì)管中，填滿含有2.0重量％的硫酸軟骨素的150mM枸櫞酸緩沖液(pH5.2)。(2)健康人血的測(cè)定向從健康人血經(jīng)肝素采血的健康人全血100uL中，加入含有0.05重量XTritonX-100(表面活性劑、和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(pH6.0)150uL，進(jìn)行溶血稀釋，得到健康人血溶血試樣。向所得的完成了臭氧水處理的毛細(xì)管的一個(gè)端部，添加所得的溶血試樣，向毛細(xì)管的兩端施加25kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nra的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行人血液中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。健康人血的測(cè)定所得的電泳圖與圖6相同。(3)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定向健康人血的測(cè)定中所用的健康人全血中添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，在37。C下加入3小時(shí)，人工制備大量含有作為修飾Hb之一的不穩(wěn)定型HbAlc的試樣。使用與上述的健康人血的測(cè)定同樣的方法，進(jìn)行含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到了與圖7同樣的電泳圖。(實(shí)施例12)(1)泳道的制備在聚二甲基硅氧烷制微裝置中形成長(zhǎng)度75mm、寬60wm的泳道，制備交叉十字型的電泳用微裝置。在泳道中填滿0.5重量％的聚凝胺(polybrene)水溶液，將其放置20分鐘。之后，將空氣注入到泳道內(nèi)將聚凝胺水溶液趕出后，使其在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將聚凝胺水溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此得到泳道被涂布了的電泳用微裝置。進(jìn)而，使用與實(shí)施例11同樣的方法，對(duì)由此得到的泳道被涂布了的電泳用微裝置實(shí)施臭氧水處理，由此得到完成了臭氧水處理的電泳用微裝置。向得到的完成了臭氧水處理的電泳用微裝置的泳道中填滿含有1.5重量％的葡聚糖硫酸的50謹(jǐn)琥珀酸緩沖液(pH5.8)。(2)含有健康人血的測(cè)定及修飾Hb的試樣的測(cè)定使用所得的完成了臭氧水處理的電泳用微裝置，在泳道的兩端施加500V的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行與實(shí)施例11中(2)健康人血的測(cè)定及(3)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定相同的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。(3)回收率試驗(yàn)實(shí)施例12的測(cè)定條件中，計(jì)算健康人血的測(cè)定中所得電泳圖的全部峰面積值。將實(shí)施例11中的全部峰面積值作為100，計(jì)算實(shí)施例12中全部峰面積值的相對(duì)值。將結(jié)果示于表7。(實(shí)施例13)(1)泳道的制備在熔凝硅石制微裝置中形成長(zhǎng)度90mm、寬50um的泳道，制備電泳用微裝置。在泳道中填滿含有0.5重量％殼聚糖的0.2N鹽酸溶液，將其放置20分鐘。之后，將空氣注入到泳道內(nèi)將殼聚糖溶液趕出后，使之在40°C的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次將殼聚糖溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此得到泳道被涂布了的微裝置。使用與實(shí)施例l同樣的方法，再對(duì)所得的泳道被涂布了的電泳用微裝置實(shí)施臭氧水處理，由此得到完成了臭氧水處理的電泳用微裝置。向所得的完成了臭氧水處理的電泳用微裝置的泳道中，填滿含有2.0重量％的硫酸軟骨素的lOOmM磷酸緩沖液(pH5.5)。(2)健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定除了使用所得的完成了臭氧水處理的電泳用微裝置，并向泳道的兩端施加700V的電壓進(jìn)行電泳之外，通過(guò)與實(shí)施例2同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。、(3)回收率試驗(yàn)通過(guò)與上述實(shí)施例12(3)同樣的方法，實(shí)施回收率試驗(yàn)。將所得的結(jié)果示于表7。(比較例57)除了沒(méi)有進(jìn)行臭氧水處理之外，使用與實(shí)施例1113同樣的方法制備泳道，測(cè)定含有修飾Hb的試樣。通過(guò)與實(shí)施例12(3)同樣的方法，實(shí)施回收率試驗(yàn)。將所得的結(jié)果示于表7。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>由表7可知，實(shí)施例12、13的全部峰面積值與實(shí)施例11的全部峰面積值同等。另一方面，與實(shí)施例1113的全部峰面積值相比較，比較例57的全部峰面積值小。認(rèn)為這是由于在泳道中未實(shí)施臭氧處理的比較例57的測(cè)定條件下，血紅蛋白成分的一部分非特異吸附到泳道內(nèi)面的緣故。(實(shí)施例14)實(shí)施例1416中，使用被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物及含有離液序列高的化合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，來(lái)進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的涂布制備作為陽(yáng)離子性聚合物的殼聚糖(殼聚糖-100:和光純藥社制)0.5重量％的0.5N鹽酸溶液。接著，向熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制內(nèi)徑25umX全長(zhǎng)30cm)中，依次通入0.2N-NaOH、離子交換水、0,5N-HC1將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，將所得的殼聚糖溶液通入20分鐘。之后，向毛細(xì)管內(nèi)注入空氣將殼聚糖溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12時(shí)間。之后，再次注入殼聚糖溶液，將空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此涂布毛細(xì)管內(nèi)面。將所得的殼聚糖固定化毛細(xì)管安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckmanCoulter社制PAC/EMDQ)。(2)緩沖液的制備制備含有硝酸鈉1.0重量。/^作為離液序列高的化合物以及硫酸軟骨素2.0X重量作為具有陰離子性基的水溶性聚合物的蘋果酸緩沖液(pH4.8)，作為緩沖液。(3)健康人血的測(cè)定作為測(cè)定試樣，使用從健康人血經(jīng)肝素采血而得的血液，向該健康人全血70uL中加入含0.05%的TritonX-100(表面活性劑和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(p朋.O)200uL而溶血稀釋了的樣品。從毛細(xì)管的一方注入試樣，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液中施加20kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，進(jìn)行基于毛細(xì)管電泳法的人血液中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。(4)含有修飾Hb試樣的測(cè)定向健康人血的測(cè)定所用的健康人全血中，添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，人工制備大量含有作為修飾Hb的一種的不穩(wěn)定型HbAlc的試樣。從毛細(xì)管的一方注入試樣，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液中施加20kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行基于毛細(xì)管電泳法的人血液中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。(5)修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)使用上述(3)及(4)的試樣，利用與實(shí)施例1(5)及(6)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得的結(jié)果分別示于表8及表9。(實(shí)施例15)除了使用作為陽(yáng)離子性聚合物的聚戊烯(和光純藥社制)的0.5重量%水溶液之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，將毛細(xì)管內(nèi)面涂布，得到電泳裝置。將作為具有陰離子性基的丙烯酸系單體的丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸(和光純藥社制)3.0g、以及作為不具有陰離子性基的丙烯酸系單體的羥基乙基甲基丙烯酸酯(和光純藥社制)2.0g溶解于50mL的離子交換水中，得到溶液。向所得的溶液中添加過(guò)硫酸鉀0.05g，在氮?dú)夥障乱贿厰嚢枰贿吷郎刂?(TC進(jìn)行聚合。聚合10小時(shí)后，將內(nèi)容物全部移至透析管(三光純藥社制UCC65-50)中，在離子交換水中進(jìn)行12小時(shí)透析，得到丙烯酸系具有的陰離子性基的水溶性聚合物。制備含有作為離液序列高的化合物的高氯酸鈉1.0重量％、以及上述的具有陰離子性基的水溶性聚合物2.0重量％的蘋果酸緩沖液(pH4.7)。除了使用所得的電泳裝置和緩沖液之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7相同的電泳圖。通過(guò)與上述實(shí)施例14(5)同樣的方法，進(jìn)行修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表8及表9。(實(shí)施例16)在聚二甲基硅氧烷制微裝置(50mmX75mmX3mm)中制造交叉十字型的泳道，在該泳道的兩端設(shè)置緩沖液槽。除了使用作為離子性聚合物的殼聚糖(0.5重量％的0.5N鹽酸溶液)之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，進(jìn)行泳道的涂布。使用含有作為離液序列高的化合物的尿素5.0重量％、作為具有陰離子性基的水溶性聚合物的硫酸軟骨素2.0重量的蘋果酸緩沖液(pH4.8)，在1000下進(jìn)行微裝置電泳法，除此之外與實(shí)施例1同樣操作，由此進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中得到了與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到了與圖7同樣的電泳圖。通過(guò)與實(shí)施例14(5)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表8及表9。(比較例8)除了不使用離液序列高的化合物之外，通過(guò)與實(shí)施例M同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。通過(guò)與實(shí)施例14(5)同樣的方法，實(shí)施修飾Hb的分離性能試驗(yàn)及批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)。將所得結(jié)果分別示于表8及表9。表8AHbAlc值(%)(修飾Hb試樣一健康人試樣)不穩(wěn)定型HbAlc含有試樣氨基甲?；疕b含有試樣實(shí)施例140.00.2實(shí)施例150.20.1實(shí)施例160.0一O.1實(shí)施例170.5_1.4由表8可知，在實(shí)施例1416的測(cè)定條件下，AHbAlc值非常小，即使在修飾Hb類的存在下，也可以正確測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。另一方面，在比較例8的測(cè)定條件下，AHbAlc值大，受修飾Hb類的影響。表9重現(xiàn)性試驗(yàn)CV(%)實(shí)施例140.92實(shí)施例151.03實(shí)施例160.98比較例83.32由表9可知，實(shí)施例1416的測(cè)定條件下的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，顯示離散程度的CV值為1%左右，為良好的結(jié)果。另一方面，在比較例8的測(cè)定條件下的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)中，顯示離散程度的CV值不良，為3%以上。(實(shí)施例17)實(shí)施例1720中，使用被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物及亞硝酸鹽的緩沖液作為電泳用緩沖液，進(jìn)行測(cè)定。(1)泳道的制備制備含有作為陰離子性聚合物的殼聚糖(和光純藥社制、殼聚糖ioo)0.2重量X的0.2N鹽酸溶液。接著，向熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制內(nèi)徑25iimX全長(zhǎng)30cm)中，依次通入0.2N-NaOH、離子交換水、0.5N-HC1，將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，將所得的殼聚糖溶液通入20分鐘。之后，將空氣注入到毛細(xì)管內(nèi)將殼聚糖溶液趕出后，使之在4CTC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再次注入殼聚糖溶液，將空氣的注入及干燥重復(fù)5次。將所得的得殼聚糖固定化毛細(xì)管安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckmanCoulter社制PAC/EMDQ)。之后，將含有亞硝酸鈉(亞硝酸鹽和光純藥社制)50mM及硫酸軟骨素(和光純藥社制)2.0重量％的枸櫞酸緩沖液(pH4.8)作為電泳用緩沖液放置在毛細(xì)管的兩端，充滿于毛細(xì)管內(nèi)。(2)健康人血的測(cè)定作為測(cè)定試樣，使用從健康人血經(jīng)氟化鈉采血而得的血液，使用向該健康人全血70"L中添加含有0.05重量％的TritonX—IOO及20mM的亞硝酸鈉的枸櫞酸緩沖液(p朋.O)200uL而得的溶血稀釋了的樣品。向毛細(xì)管的一方注入試樣，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液施加20kV的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行基于毛細(xì)管電泳法的人血液中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。(3)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定向健康人血的測(cè)定所用的健康人全血中添加葡萄糖(和光純藥社制)并使其為2000mg/dL，在37。C加溫3小時(shí)，人工制備大量含有作為修飾Hb的一種的不穩(wěn)定型HbAlc的試樣。在與上述同樣的條件下對(duì)所得修飾Hb含有試樣進(jìn)行測(cè)定而得的電泳圖與圖7同樣。(4)日間重現(xiàn)性試驗(yàn)的評(píng)價(jià)使用實(shí)施例17的測(cè)定條件，在同日內(nèi)將同一的健康人血試樣連續(xù)測(cè)定5次，將這一連續(xù)的測(cè)定連續(xù)實(shí)施5天，從所得的各電泳圖計(jì)算出穩(wěn)定型HbAlc值的CV值，將結(jié)果示于表2。(實(shí)施伊J18)使用作為陽(yáng)離子性聚合物的聚戊烯(NacalaiTesque社制)的0.5重量％水溶液，通過(guò)與實(shí)施例17同樣的方法，將毛細(xì)管內(nèi)面涂布，作為電泳用緩沖液，使用含有亞硝酸鈉30mM及硫酸軟骨素2.0重量％的蘋果酸緩沖液(pH4.8)，除此之外，與實(shí)施例17同樣操作，通過(guò)毛細(xì)管電泳法，進(jìn)行健康人血試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6及圖7相同。將實(shí)施日間重現(xiàn)性試驗(yàn)的結(jié)果與實(shí)施例1同樣示于表10。(實(shí)施例19)在玻璃制微裝置(寬50mmX長(zhǎng)度30mmX厚度2咖)中制造交叉十字型的泳道(流路寬100iim)，在泳道的兩端設(shè)置緩沖液槽。使用作為陽(yáng)離子性聚合物的殼聚糖(1.0重量％水溶液)，通過(guò)與實(shí)施例17同樣的方法，將泳道涂布之后，使用與實(shí)施例17同樣的電泳用緩沖液，在1000V下利用微裝置電泳法，進(jìn)行健康人血試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6及圖7同樣。將實(shí)施日間重現(xiàn)性試驗(yàn)的結(jié)果與實(shí)施例17同樣示于表10。(實(shí)施例20)在聚二甲基硅氧垸制微裝置(寬50mmX長(zhǎng)度30mmX厚2咖)中制造雙T型的泳道(流路寬80um)，在泳道的兩端設(shè)置緩沖液槽。使用作為陽(yáng)離子性聚合物的聚戊烯(1.0重量％水溶液)，利用與實(shí)施例17同樣的方法，將泳道涂布之后，使用與實(shí)施例18同樣的電泳用緩沖液，在900V下，利用微裝置電泳法，進(jìn)行健康人血試樣及修飾Hb含有試樣的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6及圖7同樣。將實(shí)施日間重現(xiàn)性試驗(yàn)與實(shí)施例17同樣示于表10。(比較例912)比較例912中，除了電泳用緩沖液及溶血稀釋液不含亞硝酸鹽類之外，與實(shí)施例1720同樣，測(cè)定健康人血試樣及修飾Hb含有試樣。將實(shí)施日間重現(xiàn)性試驗(yàn)的結(jié)果與實(shí)施例17同樣示于表10。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>由表10可知，實(shí)施例1720中，顯示健康人血試樣的穩(wěn)定型Alc值的日間重現(xiàn)性的CV值為1.6%，可以精度良好地測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc值。但是，比較例912中，CV值非常大，為4%以上，不能進(jìn)行正確地測(cè)定。(實(shí)施例21)實(shí)施例2123中，使用由陽(yáng)離子性原料形成的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液。利用(二乙基氨基乙基甲基丙烯酸酯(具有陽(yáng)離子性官能基的單體))-(2-羥基乙基甲基丙烯酸酯)-(甲基丙烯酸甲酯)的三元共聚物來(lái)制造微裝置(50腿X80mm)。在所得的微裝置內(nèi)制造流路(內(nèi)徑100uX50mm)。向上述流路內(nèi)注入含有2.0重量％硫酸軟骨素(陰離子性聚合物)的枸櫞酸緩沖液(pH5.0)作為緩沖液。向從健康人血經(jīng)氟化鈉采血而得的健康人全血70uL中添加含有0.5重量％的皂草苷的枸櫞酸緩沖液(pH6.0)200uL，形成溶血稀釋了的樣品(健康人試樣)，使用該樣品作為試樣。(健康人試樣的測(cè)定)向上述的流路內(nèi)注入所得的健康人試樣，向流路的兩端施加800V的電壓進(jìn)行電泳。向流路的途中照射415nm的可見(jiàn)光，測(cè)定通過(guò)的光的吸光度變化，結(jié)果所得的電泳圖與圖6同樣。(修飾Hb分離能試驗(yàn))向上述的健康人全血中，添加葡萄糖并使其成為2000mg/dL，人工制備含有大量不穩(wěn)定型HbAlc的試樣(L-Alc試樣)，并向上述的健康人全血中添加氰酸鈉并使其成為50mg/dL，人工制備含有大量氨基甲?；疕b的試樣(CHb試樣)。.測(cè)定L-Ale試樣及CHb試樣而得的電泳圖與圖7同樣。(實(shí)施例22)使用丙烯酰胺作為具有陽(yáng)離子性官能基的單體來(lái)制造微裝置，使用含有1.5重量％的硫酸葡聚糖的磷酸緩沖液(pH5.4)作為緩沖液，除此之外，與實(shí)施例1同樣操作，進(jìn)行健康人試樣、L-Alc試樣、CHb試樣的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6及圖7同樣。(實(shí)施例23)使用(吖丙啶(具有陽(yáng)離子性官能基的單體))_(亞乙基乙烯醇)-(甲基丙烯酸甲酯)的三元共聚物來(lái)制造微裝置，使用含有1.0重量％的(2-(甲基)丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸)-(2-羥基乙基甲基丙烯酸酯)共聚物的蘋果酸緩沖液(pH4.9)作為緩沖液，除此之外，與實(shí)施例1同樣實(shí)施，進(jìn)行健康人試樣、L-Alc試樣、CHb試樣的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6及圖7同樣。(實(shí)施例24)實(shí)施例2426中，使用具有被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道或由陽(yáng)離子性原料形成了的泳道的微裝置，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，再使用上述泳道中預(yù)先填充了該緩沖液的微裝置，進(jìn)行測(cè)定。另外也使用上述裝置進(jìn)行異常血紅蛋白類的、、(裝置支持部等的制做)以圖2所示的模式圖為基準(zhǔn)，制做血紅蛋白類的測(cè)定系統(tǒng)。作為電源裝置使用多通道高電壓程序控制電源裝置(LabSmith社制、HVS448)、作為光源使用50W卣光源裝置(Moritex社制、MHF-V501)，作為檢測(cè)器使用分光器(B&WTEK社制、CCD分光器、BTC112)，對(duì)分光的415rnn的吸光度用自制程序進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。相應(yīng)于后述的微裝置的大小，制做Teflon(注冊(cè)商標(biāo))制裝置支持部，向所得的裝置支持部中安裝白金電極(直徑lmmX長(zhǎng)度20mra)。用電源線將白金電極連接到電源裝置。其他的部件全部為自制的。(微裝置的制做)制做熔凝硅石制的交叉十字型電泳用微裝置(外觀尺寸-50腿X80腿)。微裝置內(nèi)的泳道為內(nèi)徑100uX長(zhǎng)度50mm的直線狀。向所得的微裝置內(nèi)的流路中，依次通入0.5N氫氧化鈉水溶液、蒸餾水、0.5N鹽酸水溶液及蒸餾水，將流路內(nèi)清洗。之后，向流路中填充含有0.5重量％的殼聚糖(殼聚糖100、陽(yáng)離子性聚合物、和光純藥社制)的0.5N鹽酸溶液。在室溫下靜置30分鐘之后，向流路中注入空氣，將殼聚糖溶液從流路中趕出之后，在4(TC下加溫5小時(shí)。接著，將所得具有陽(yáng)離子性聚合物涂布泳道的微裝置的流路中，填充含有2.0重量％的硫酸軟骨素(陰離子性聚合物、NacalaiTesque社制)的枸櫞酸緩沖液(pH5.0)，制備完成緩沖液充填的微裝置。(健康人試樣的制備與測(cè)定)使用從健康人血經(jīng)氟化鈉采血而得的血液作為健康人全血，來(lái)作為測(cè)定試樣。向所得的健康人全血70yL中，添加含有0.5重量％的皂草苷(和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(p朋.O)200uL，得到溶血稀釋了的樣品，將所得樣品作為健康人試樣使用。向所得的微裝置的流路內(nèi)注入所得的健康人試樣，向流路的兩端施加800V的電壓進(jìn)行電泳。向流路的途中照射415nm的可見(jiàn)光，測(cè)定透過(guò)的光的吸光度變化，結(jié)果所得的電泳圖與圖6同樣。(修飾Hb分離性能試驗(yàn))向所得的健康人全血中添加葡萄糖(和光純藥社制)并使其成為2000mg/dL，人工制備含有大量不穩(wěn)定型HbAlc的試樣(L-Alc試樣)，并且向所得的健康人全血中添加氰酸鈉(和光純藥社制)并使其成為50mg/dL，制備含有大量氨基甲?；疕b的試樣(CHb試樣)。對(duì)于所得L-Alc試樣及CHb試樣，進(jìn)行與上述健康人試樣的基于電泳的測(cè)定相同的測(cè)定，結(jié)果，對(duì)于該兩試樣所得的電泳圖與圖7相同。(實(shí)施例25)制做聚二甲基硅氧垸制的雙T型電泳用微裝置(外觀尺寸50mmX80mm)。微裝置內(nèi)的泳道為內(nèi)徑100UX長(zhǎng)度50mm的直線狀。所得的微裝置的流路中，依次通入0.IN氫氧化鈉水溶液、蒸餾水、0.1N鹽酸水溶液及蒸餾水，將流路內(nèi)清洗。之后，將含有0.5重量％的聚乙烯醇(G0HSEN0LGH20、日本合成化學(xué)社制)水溶液填充到流路。在室溫下靜置30分鐘后，向流路注入空氣，將聚乙烯醇水溶液從流路趕出之后，在40。C下加溫5小時(shí)。接著，向流路中填充4重量％的聚戊烯(陽(yáng)離子性聚合物、SIGMA—ALDRICHJAPAN社制)水溶液。在室溫下放置30分鐘之后，向流路中注入空氣，將聚戊烯水溶液從流路中趕出后，在4(TC下加溫5小時(shí)。將聚戊烯水溶液的充填和加溫重復(fù)3次，進(jìn)行陽(yáng)離子性聚合物的涂布。向所得的微裝置的流路中填充含有1.5重量°/。的硫酸葡聚糖(和光純藥社制)的磷酸緩沖液(pH5.4)，制備完成了緩沖液充填的微裝置。除了將施加電壓設(shè)為900V以外，與實(shí)施例24同樣操作，對(duì)健康人試樣、L-Alc試樣、及CHb試樣進(jìn)行測(cè)定。對(duì)于健康人試樣的測(cè)定而得的電泳圖與圖6同樣，對(duì)于L-Alc試樣及CHb試樣的測(cè)定所得的電泳圖與圖7同樣。(實(shí)施例26)利用(二乙基氨基乙基甲基丙烯酸酯(具有陽(yáng)離子性官能基的單體))-(2-羥基乙基甲基丙烯酸酯)-(甲基丙烯酸甲酯)的三元共聚物，制備交叉十字型電泳用微裝置(外觀尺寸50腿X80mm)。微裝置內(nèi)的泳道為內(nèi)徑100uX長(zhǎng)度50腿的直線狀。向所得的微裝置的流路中填充含有1.5重量％的硫酸軟骨素(和光純藥社制)的蘋果酸緩沖液(pH5.0)，制備完成了緩沖液充填的微裝置。除了將施加電壓設(shè)定為900V之外，與實(shí)施例24同樣操作，對(duì)健康人試樣、L-Alc試樣、及CHb試樣進(jìn)行測(cè)定。對(duì)健康人試樣的測(cè)定而得的電泳圖與圖6同樣，對(duì)L-Alc試樣及CHb試樣的測(cè)定而得的電泳圖與圖7同樣。(比較例13)制做熔凝硅石制的交叉十字型電泳用微裝置(外觀尺寸50mmX80mm)。微裝置內(nèi)的泳道為內(nèi)徑100uX長(zhǎng)度50mm的直線狀。向所得的微裝置內(nèi)的流路中，依次通入0.5N氫氧化鈉水溶液、蒸餾水、0.5N鹽酸水溶液及蒸餾水，將流路內(nèi)清洗。之后，向流路中通入含有0.5重量％的殼聚糖(殼聚糖100、陽(yáng)離子性聚合物、和光純藥社制)的0.5N鹽酸溶液2分鐘，進(jìn)行動(dòng)態(tài)涂布。接著，向所得具有陽(yáng)離子性聚合物涂布泳道的微裝置的流路中，填充含有2.0重量％的硫酸軟骨素(陰離子性聚合物NacalaiTesque制)的枸櫞酸緩沖液(pH5.0)，制備完成了緩沖液充填的微裝置。與實(shí)施例24同樣操作，對(duì)健康人試樣、L-Alc試樣、及CHb試樣進(jìn)行測(cè)定。對(duì)健康人試樣的測(cè)定所得的電泳圖與圖6同樣，對(duì)L-Alc試樣及CHb試樣的測(cè)定所得的電泳圖與圖7同樣。(異常Hb分離試驗(yàn))對(duì)于上述實(shí)施例24，作為異常Hb類，使用含有HbS及HbC的試樣(AFSChemocontrol、helena研究所社制)，進(jìn)行與上述的健康人試樣的基于電泳的測(cè)定同樣的測(cè)定，結(jié)果，將所得的電泳圖示于圖9。圖9中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbA。、峰3表示不穩(wěn)定型HbAlc、峰4表示HbF(胎兒性Hb)、峰5表示HbS、峰6表示Hb。如圖9所示，穩(wěn)定型HbAlc與HbS及Hb被良好分離。對(duì)實(shí)施例25、26及比較例13所得的電泳圖也與圖9同樣。另外，對(duì)于實(shí)施例24，使用含有HbA2的試樣(A2controllevel2、Bio-Rad社制)，進(jìn)行與上述的健康人試樣的基于電泳的測(cè)定相同的測(cè)定，結(jié)果將所得的電泳圖示于圖10。圖10中，峰1表示穩(wěn)定型HbAlc、峰2表示HbA。、峰4表示HbF(胎兒性Hb)、峰7表示HbA2。如圖10所示，穩(wěn)定型HbAlc與HbA2被良好分離。對(duì)實(shí)施例25、26及比較例13所得的電泳圖也與圖10同樣。(保存穩(wěn)定性試驗(yàn))向?qū)嵤├?426、比較例13所得的微裝置內(nèi)的流路中，填充上述含有2.0重量％的硫酸軟骨素(陰離子性聚合物、NacalaiTesque社制)的枸櫞酸緩沖液(pH5.0)，并進(jìn)行密封，在40。C保存。經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后將其取出，對(duì)上述的健康人試樣進(jìn)行基于電泳的測(cè)定。將所得的顯示穩(wěn)定型HbAlc值(％)與保存日數(shù)之間的關(guān)系的圖示于圖11。如圖11所示，實(shí)施例2426中所得的微裝置即使在20天后也可以得到與剛制備后同等的測(cè)定性能。另一方面，在比較例13中，穩(wěn)定性差，僅可以在剛涂布后進(jìn)行測(cè)定?？梢悦鞔_本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定系統(tǒng)中，具有預(yù)先填充了緩沖液的流路的微裝置在使用時(shí)不需要涂布操作，填充緩沖液后必需能夠穩(wěn)定保存一定時(shí)間，而比較例13的微裝置的保存穩(wěn)定性差，因此不能作為具有預(yù)先填充了緩沖液的泳道的微裝置使用。(實(shí)施例27)實(shí)施例27和28中，使用具有被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道的微裝置，并且使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，實(shí)施上述緩沖液的pH以及鹽濃度的影響試驗(yàn)。(1)微裝置的制做在聚二甲基硅氧烷制裝置中制做長(zhǎng)度80mm、寬80um的泳道，制造交叉十字型的電泳用微裝置。向泳道中填滿0.5Q^殼聚糖(陽(yáng)離子性聚合物)溶液，放置20分鐘。之后，向泳道內(nèi)注入空氣將殼聚糖溶液趕出之后，在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)使之干燥12小時(shí)。之后，再次將由殼聚糖溶液的注入、空氣的注入以及干燥形成的一連串的工序重復(fù)5次，由此得到泳道被涂布了的微裝置。在所得的殼聚糖涂布微裝置的泳道中，填滿含有2.0%的硫酸軟骨素的150mM枸櫞酸緩沖液(pH5.2)，由此得到測(cè)定用微裝置。(2)健康人血的測(cè)定向從健康人經(jīng)肝素采血而得的健康人全血70uL中，添加含有0.05%的TritonX-100(表面活性劑和光純藥制)的枸櫞酸緩沖液(pH6.0)200uU進(jìn)行溶血稀釋，得到溶血試樣。向上述微裝置的泳道的一端部添加所得的溶血試樣，向泳道的兩端施加1000V的電壓，進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6同樣。(3)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定向從健康人經(jīng)肝素采血而得健康人全血中，添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，在37X:加熱3小時(shí)，人工制備大量含有作為修飾Hb的一種的不穩(wěn)定型HbAlc的試樣。向得到的微裝置的泳道的一端部添加所得的溶血試樣，向泳道的兩端施加1000V的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。所得的電泳圖與圖7同樣。(實(shí)施例28)(1)微裝置的制造在烙凝硅石制裝置中，制造長(zhǎng)度50mm、寬50um的泳道，制造交叉十字型的電泳用微裝置。向泳道中填滿0.5%聚凝胺水溶液，放置20分鐘。之后，向泳道內(nèi)注入空氣將聚凝胺水溶液趕出后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再將聚凝胺水溶液的注入、空氣的注入、及干燥重復(fù)5次，這樣得到上述泳道的內(nèi)面被涂布了的微裝置。在所得的聚戊烯涂布微裝置的泳道中填滿含有1.5%的葡聚糖硫酸的50mM琥珀酸緩沖液(pH5.8)。這樣得到測(cè)定用微裝置。(2)健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定除了向泳道的兩端施加500V的電壓進(jìn)行電泳之外，按照與實(shí)施例27同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到與圖6同樣的電泳圖。在含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。(3)pH及鹽濃度的影響試驗(yàn)在實(shí)施例27及28的測(cè)定條件下，使實(shí)施例27所用的枸櫞酸緩沖液、及實(shí)施例28所用的琥珀酸緩沖液的pH及鹽濃度變化，同時(shí)進(jìn)行上述的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)，這樣來(lái)進(jìn)行緩沖液的pH及鹽濃度的影響。將使PH變化時(shí)的結(jié)果示于圖12a，將使鹽濃度變化時(shí)的結(jié)果示于圖12b。由圖12a及圖12b可知，實(shí)施例27、28中，在pH為5.06.0、鹽濃度為10300mM的條件下，CV值減小，均能夠以高精度來(lái)測(cè)定穩(wěn)定型HbAlc。實(shí)施例29及30中，使用含有具有被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道的微裝置的微裝置型電泳裝置，使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，確定測(cè)定波長(zhǎng)的設(shè)定的影響。另外，在上述電泳裝置中設(shè)置葡萄糖測(cè)定機(jī)構(gòu)，進(jìn)行葡萄糖和穩(wěn)定型HbAlc的同時(shí)測(cè)定。(實(shí)施例29)(1)電泳裝置的制造在聚二甲基硅氧烷制芯片中制造長(zhǎng)度80mm、寬80um的泳道，制造交叉十字型的電泳用微芯片。向泳道中填滿0.5%殼聚糖溶液，放置20分鐘。之后，向泳道中注入空氣將殼聚糖溶液趕出后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再將殼聚糖溶液的注入、空氣的注入及干燥重復(fù)5次，由此可以得到泳道被涂布了的微芯片。向所得的殼聚糖涂布微芯片的泳道中填滿含有2.0%的硫酸軟骨素的150mM枸櫞酸緩沖液(pH5.2)，得到測(cè)定用微芯片。將所得的測(cè)定用微芯片安置到具有白金電極(直徑1皿X長(zhǎng)度5mm)的支持臺(tái)，使該電極插入到微芯片上的循環(huán)槽中，用電壓供給線將該電極與電源(Labsmith社制)連接，將具有鹵燈光源(Moritex社制腿F-V501)、分光器(B&WTEK社制、BTC112)、及數(shù)據(jù)處理用計(jì)算機(jī)的檢測(cè)器設(shè)置于微芯片上，由此制造電泳裝置。(2)健康人血的測(cè)定向從健康人經(jīng)氟化鈉采血而得的健康人全血70uL中，添加含有0.05%的TritonX-100(表面活性劑、和光純藥社制)的枸櫞酸緩沖液(p服.O)200iiL，進(jìn)行溶血稀釋，得到健康人血溶血試樣。向形成于所得微芯片的泳道的一端部形成的循環(huán)槽中，添加上述溶血試樣，向泳道的兩端施加1000V的電壓進(jìn)行電泳，測(cè)定主波長(zhǎng)415nm及副波長(zhǎng)500nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行健康人血液中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。所得的電泳圖與圖6相同。(3)含有修飾Hb的試樣的測(cè)定向從健康人經(jīng)氟化鈉采血而得的健康人全血中，添加葡萄糖并使其成為2500mg/dL，在37。C下加熱3小時(shí)，人工制備大量含有作為修飾Hb的一種的不穩(wěn)定型HbAlc。與上述(2)同樣處理，得到修飾Hb含有溶血試樣。向形成于上述(1)所得的微芯片的泳道一端部的循環(huán)槽中，添加上述修飾Hb含有溶血試樣，向泳道的兩端施加1000V的電壓，進(jìn)行電泳。測(cè)定在主波長(zhǎng)415mn及副波長(zhǎng)500nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，由此進(jìn)行修飾Hb含有試樣中的穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定。所得的電泳圖與圖7同樣。(實(shí)施例30)在熔凝硅石制微芯片中，制造長(zhǎng)度50mm、寬50ym的泳道，制造交叉十字型的電泳用微芯片。向泳道內(nèi)填滿0.5%聚凝胺水溶液，放置20分鐘。之后，向泳道中注入空氣將聚凝胺水溶液趕出之后，使之在40。C的干燥機(jī)內(nèi)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后，再將聚凝胺水溶液的注入、空氣的注入、及干燥重復(fù)5次，由此得到泳道被涂布了的微芯片。向所得的聚戊烯涂布微芯片的泳道中，填滿含有1.5%的葡聚糖硫酸的50mM琥珀酸緩沖液(pH5.8)，得到測(cè)定用微芯片。除了使用所得的測(cè)定用微芯片之外，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，進(jìn)行健康人血的測(cè)定及含有修飾Hb的試樣的測(cè)定。健康人血的測(cè)定中，得到了與圖6同樣的電泳圖。含有修飾Hb的試樣的測(cè)定中，得到與圖7同樣的電泳圖。(測(cè)定波長(zhǎng)的影響試驗(yàn))在實(shí)施例29、30的測(cè)定條件中，使使用的測(cè)定波長(zhǎng)(主波長(zhǎng)及副波長(zhǎng))變化，進(jìn)行測(cè)定。具體為將同時(shí)間的主波長(zhǎng)的吸光度減去副波長(zhǎng)的吸光度所得的數(shù)值作為該時(shí)間的吸光度，得到電泳圖，由此計(jì)算出穩(wěn)定型HbAlc值。接著，通過(guò)進(jìn)行上述的批內(nèi)重現(xiàn)性試驗(yàn)，對(duì)測(cè)定波長(zhǎng)的影響進(jìn)行測(cè)定。將結(jié)果示于表ll。表n測(cè)定波長(zhǎng)(mm)CV值(％)主波長(zhǎng)副波長(zhǎng)實(shí)施例29實(shí)施例30415—3.052.984155001.030.964155000.970.95不設(shè)副波長(zhǎng)，僅根據(jù)主波長(zhǎng)為415mn時(shí)吸光度計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值時(shí)，實(shí)施例14的CV值均為3%左右。另一方面，選擇500nm及550nm作為副波長(zhǎng)，測(cè)定吸光度，由與主波長(zhǎng)為415nm時(shí)的吸光度之差來(lái)計(jì)算穩(wěn)定型HbAlc值時(shí)，CV值為1X左右，可以進(jìn)行更高精度的測(cè)定。(穩(wěn)定型HbAlc與葡萄糖的同時(shí)測(cè)定)在實(shí)施例29所用的聚二甲基硅氧烷制微芯片中，制造與圖3(c)同樣的流路(長(zhǎng)度80誦、寬80um)。另夕卜，葡萄糖測(cè)定用電極(該圖中28:王子計(jì)測(cè)機(jī)器社制BF-6M)中，在白金制過(guò)氧化氫電極的表面具有葡萄糖氧化酶(GOD)固定化成膜狀的酶固定化膜(厚0.6mm)，該固定化膜中的GOD與測(cè)定試樣中的葡萄糖反應(yīng)產(chǎn)生過(guò)氧化氫，該過(guò)氧化氫經(jīng)過(guò)氧化氫電極電氣分解，從而測(cè)定葡萄糖。向圖3(c)的試樣導(dǎo)入口29中導(dǎo)入測(cè)定試樣，利用上述原理測(cè)定葡萄糖后，通過(guò)與實(shí)施例1同樣的電泳條件，進(jìn)行電泳，實(shí)施穩(wěn)定型HbAlc的測(cè)定，將結(jié)果示于表12。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>將健康人血連續(xù)測(cè)定10次后的穩(wěn)定型HbAlc值及葡萄糖值的CV值分別為1.06%及0.46%，結(jié)果良好。另外，即使將微芯片的原料及電泳條件設(shè)定成實(shí)施例2的，CV值也同樣，可以得到良好的測(cè)定結(jié)果。另外，微芯片的構(gòu)成為與圖3(a)或(b)同樣的構(gòu)成時(shí)，也可以得到同樣的性能。(實(shí)施例31)實(shí)施例31和32中，使用被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布了的泳道，另外，使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液，分離異常血紅蛋白類等，而且，采用本發(fā)明的穩(wěn)定型HbAlc的算出方法，確認(rèn)其效果。在玻璃制微芯片(50畫X30mmX2腿)中制造泳道，在泳道的兩端設(shè)置緩沖液槽。通過(guò)與實(shí)施例1同樣的方法，向泳道中依次通入聚乙烯醇水溶液及5重量％的聚戊烯水溶液(和光純藥社制)，進(jìn)行固定化。使用與實(shí)施例1同樣的電泳用緩沖液作為緩沖液。作為測(cè)定試樣，將A2controllevel2(Bio-Rad社制)及健康人血混合，制備含有HbA2、且穩(wěn)定型HbAlc值為4.8X的評(píng)價(jià)用試樣。向泳道的一端的緩沖液槽中添加制備的評(píng)價(jià)用試樣，向泳道的兩端施加1000V的電壓，進(jìn)行微芯片電泳。通過(guò)測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，進(jìn)行評(píng)價(jià)用試樣中的穩(wěn)定型HbAlc及HbA2的分離。將所得的電泳圖示于圖13，圖13中，峰1表示HbAla、峰2表示HbAlb、峰3表示HbF、峰4表示不穩(wěn)定型HbAlc、峰5表示穩(wěn)定型HbAlc、峰6表示HbAo、峰9表示HbA2。由上述所得的電泳圖，計(jì)算各Hb成分的峰面積值。另外，將各Hb成分的峰面積值除以從全部Hb成分的峰面積值減去異常Hb類的峰面積值及HbF的峰面積值之外的峰面積值(面積值b)，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)(第1測(cè)定方法)。再將穩(wěn)定型HbAlc的峰面積值(a)除以該面積值a與HbAo的面積值(面積值c)的合計(jì)，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)(第2測(cè)定方法)。將結(jié)果示于表13。(比較例14)除了將各Hb成分的峰面積值除以全部Hb成分的峰面積值(面積值d)之外，與實(shí)施例31同樣，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)。將結(jié)果示于表13。<table>tableseeoriginaldocumentpage65</column></row><table>由表13可知，實(shí)施例31所進(jìn)行的第1計(jì)算方法及第2計(jì)算方法中，穩(wěn)定型HbAlc值為約4.8X，顯示正確的值。與此相對(duì)，比較例14所進(jìn)行的計(jì)算方法中，穩(wěn)定型HbAlc值為3.0%,顯示不正確的值。(實(shí)施例32)制備含有殼聚糖(和光純藥社制、殼聚糖100)0.2重量X的0.2N鹽酸水溶液。接著，向熔凝硅石制毛細(xì)管(GL科學(xué)社制內(nèi)徑25umX全長(zhǎng)30cm)中，依次通入0.2N-NaOH、離子交換水、0.5N-HC1，將毛細(xì)管內(nèi)清洗之后，將所得的殼聚糖水溶液通入20分鐘。之后，向毛細(xì)管內(nèi)注入空氣將殼聚糖水溶液趕出之后，使之在4(TC的干燥機(jī)內(nèi)干燥12小時(shí)。之后再注入殼聚糖水溶液，將空氣的注入及干燥重復(fù)5次。向所得的殼聚糖固定化毛細(xì)管安裝到毛細(xì)管電泳裝置(BeckmanCoulter社制PAC/EMDQ)。之后，將含有硫酸軟骨素(和光純藥社制)2.0重量％的枸櫞酸緩沖液(pH4.8)作為電泳用緩沖液，安裝到毛細(xì)管的兩端，向毛細(xì)管內(nèi)填滿。作為測(cè)定試樣，通過(guò)將AFSChemocontrol(helena研究所社制)及健康人血混合，制備含有異常Hb類、穩(wěn)定型HbAlc值為5.0X的評(píng)價(jià)用試樣。將制備的評(píng)價(jià)用試樣注入到毛細(xì)管的一方，向毛細(xì)管的兩端的緩沖液施加20kV的電壓，進(jìn)行電泳。通過(guò)測(cè)定415nm的可見(jiàn)光下的吸光度變化，進(jìn)行試樣中的穩(wěn)定型HbAlc及異常Hb類的分離。將所得的電泳圖示于圖14。圖14中，峰1表示HbAla、峰2表示HbAlb、峰3表示胎兒性Hb(HbF)、峰4表示不穩(wěn)定型HbAlc、峰5表示穩(wěn)定型HbAlc、峰6表示HbA。、峰7表示HbS、峰8表示HbC。由所得的電泳圖計(jì)算各Hb成分的峰面積值。另外，將各Hb成分的峰面積值除以從全部Hb成分的峰面積值減去異常Hb類的峰面積值及HbF的峰面積值之外的峰面積值b，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)(第l計(jì)算方法)。另夕卜，將穩(wěn)定型HbAlc的峰面積值a除以該峰面積值a與HbA。的峰面積值c的合計(jì)值，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)(第2計(jì)算方法)。將結(jié)果示于表14。(比較例15)將各Hb成分的峰面積值除以全部Hb成分的峰面積值，除此之外與實(shí)施例32同樣操作，對(duì)各Hb成分計(jì)算百分率(％)。表14<table>tableseeoriginaldocumentpage67</column></row><table>由表14可知，在實(shí)施例32進(jìn)行的第1計(jì)算方法及第2計(jì)算方法中，穩(wěn)定型HbAlc值顯示約5.0X，為正確的值。與此相對(duì)，比較例15所進(jìn)行的算出方法中，穩(wěn)定型HbAlc值為1.7%，顯示不正確的值。產(chǎn)業(yè)上利用的可能性通過(guò)本發(fā)明，可以提供能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)血紅蛋白類特別是成為糖尿病的診斷指標(biāo)的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc進(jìn)行高精度測(cè)定的血紅蛋白類的測(cè)定方法，及適于使用該測(cè)定方法的電泳裝置。權(quán)利要求1.血紅蛋白類的測(cè)定方法，其是使用電泳法測(cè)定血紅蛋白類的方法，其特征在于，使用內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成的泳道，且作為電泳用緩沖液使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，泳道的內(nèi)面被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，泳道的內(nèi)面在由非離子性的親水性聚合物形成的固定涂布層上，被陽(yáng)離子性聚合物固定涂布。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，于泳道的內(nèi)面通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合有分子量20800的具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，具有陽(yáng)離子性基的親水性化合物為硅垸偶聯(lián)劑。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，泳道的內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成。7.根據(jù)權(quán)利要求16中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，泳道的內(nèi)面還被實(shí)施了臭氧處理。8.根據(jù)權(quán)利要求17中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，泳道中填充有離子交換體。9.根據(jù)權(quán)利要求18中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，電泳用緩沖液中含有的具有陰離子性基的水溶性聚合物為硫酸多糖類。10.根據(jù)權(quán)利要求18中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，電泳用緩沖液中含有的具有陰離子性基的水溶性聚合物為具有陰離子性官能基的水溶性丙烯酸系聚合物。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，具有陰離子性官能基的水溶性丙烯酸系聚合物的陰離子性官能基為磺酸基。12.根據(jù)權(quán)利要求111中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，電泳用緩沖液還含有離液序列高的化合物。13.根據(jù)權(quán)利要求112中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，電泳用緩沖液還含有亞硝酸鹽。14.一種電泳裝置，其特征在于，其是權(quán)利要求113中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法中使用的電泳裝置，包括測(cè)定部、電源部和檢測(cè)部，測(cè)定部由具有電極、以及內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或內(nèi)面由陽(yáng)離子性的材料形成的泳道的微裝置形成。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的電泳裝置，其特征在于，微裝置內(nèi)的泳道中預(yù)先填充有緩沖液。16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的電泳裝置，其特征在于，測(cè)定部還具有用于測(cè)定葡萄糖的機(jī)構(gòu)。17.血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，使用權(quán)利要求1416中任一項(xiàng)所述的電泳裝置來(lái)測(cè)定血紅蛋白，使用具有長(zhǎng)度為10100mm、寬度為10100um的泳道的微裝置以及pH為5.06.0、鹽濃度為10300mM的緩沖液，負(fù)荷1002000V的電壓。18.血紅蛋白類的測(cè)定方法，其特征在于，使用權(quán)利要求1416中任一項(xiàng)所述的電泳裝置來(lái)測(cè)定血紅蛋白類，檢測(cè)部中，測(cè)定選自400430nm的主波長(zhǎng)和選自450600nm的副波長(zhǎng)下的兩個(gè)吸光度。19.血紅蛋白類和葡萄糖的同時(shí)測(cè)定方法，其特征在于，使用權(quán)利要求16所述的電泳裝置。20.穩(wěn)定型血紅蛋白Alc和異常血紅蛋白類的同時(shí)測(cè)定方法，其特征在于，使用權(quán)利要求113、17、18中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白類的測(cè)定方法，權(quán)利要求1416中任一項(xiàng)所述的電泳裝置，或權(quán)利要求19所述的血紅蛋白類和葡萄糖的同時(shí)測(cè)定方法。21.穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值的計(jì)算方法，其特征在于，使用權(quán)利要求113、17、18中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白的測(cè)定方法，采用了權(quán)利要求1416中任一項(xiàng)所述的電泳裝置的血紅蛋白類的測(cè)定方法，權(quán)利要求19所述的血紅蛋白類和葡萄糖的同時(shí)測(cè)定方法，或者權(quán)利要求20所述的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc和異常血紅蛋白類的同時(shí)測(cè)定方法，來(lái)計(jì)算穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值，在穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰、異常血紅蛋白類的峰與胎兒血紅蛋白的峰被分離了的電泳圖中，使用穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰面積值a、以及從總血紅蛋白類的峰面積值除去異常血紅蛋白類的峰面積值及胎兒血紅蛋白的峰面積值后的峰面積值b，將由下式(1)算出的值作為穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值，峰面積值a穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值=--x100(%〉(1)峰面積值b。22.穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值的計(jì)算方法，其特征在于，使用權(quán)利要求113、17、18中任一項(xiàng)所述的血紅蛋白的測(cè)定方法，采用了權(quán)利要求1416中任一項(xiàng)所述的電泳裝置的血紅蛋白類的測(cè)定方法，權(quán)利要求19所述的血紅蛋白類和葡萄糖的同時(shí)測(cè)定方法，或者權(quán)利要求20所述的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc和異常血紅蛋白類的同時(shí)測(cè)定方法，來(lái)計(jì)算穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值，在穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰與血紅蛋白Ao的峰被分離了的電泳圖中，使用穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的峰面積值a與血紅蛋白Ao的峰面積值c，將由、下式(2)算出的值作為穩(wěn)定型血紅蛋白Alc值，全文摘要本發(fā)明的目的在于提供在短時(shí)間內(nèi)可以高精度測(cè)定血紅蛋白類特別是作為糖尿病的診斷指標(biāo)的穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的血紅蛋白類的測(cè)定方法，以及適于使用該測(cè)定方法的電泳裝置。本發(fā)明的血紅蛋白類的測(cè)定方法是使用電泳法測(cè)定血紅蛋白類的方法，其中，使用內(nèi)面被陽(yáng)離子性物質(zhì)固定涂布的泳道或者內(nèi)面由陽(yáng)離子性的原料形成的泳道，并使用含有具有陰離子性基的水溶性聚合物的緩沖液作為電泳用緩沖液。文檔編號(hào)G01N27/447GK101568829SQ20078004826公開日2009年10月28日申請(qǐng)日期2007年12月26日優(yōu)先權(quán)日2006年12月26日發(fā)明者大本泉,大石和之,川邊俊樹,日下繪里子申請(qǐng)人:積水化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社