專利名稱：：用于檢測青蒿素衍生物的分析方法、試劑盒和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是關(guān)于一種用于確定青蒿素衍生物(artemisininderivatives,ARTS)在樣品中的存在的分析方法，和在該方法中使用的裝置和試劑盒。
背景技術(shù)：
：青蒿素衍生物(ARTS)和青蒿素衍生物的組合(artemisininderivativecombination,ACTs)被認(rèn)為是目前可獲得的最有效的抗瘧藥物，可以提供快速的治療，并且沒有關(guān)于寄生菌株出現(xiàn)抗藥性的報告。所有成功的藥物都存在通過不符合標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)，以更低的成本在缺乏質(zhì)量控制的情況下被仿造或生產(chǎn)的風(fēng)險。世界衛(wèi)生組織(WHO)給仿造藥物(counterfeitdrug)做出如下定義"故意地欺騙性地貼錯關(guān)于性質(zhì)和/或來源的標(biāo)簽。仿造既可以針對品牌產(chǎn)品也可以針對普通產(chǎn)品，仿造的藥物可以包括成份正確的產(chǎn)品，也包括成份錯誤、沒有活性成份、具有不充分的活性成份、或具有偽造的包裝的產(chǎn)品"[2]。另外，WHO估計，在發(fā)展中國家銷售的藥物約25%為仿造藥物，并且，在某些國家這一比例高達(dá)40%或更高[3，4]。由于漠視優(yōu)良的生產(chǎn)實踐，生產(chǎn)出了不符合標(biāo)準(zhǔn)的藥物；并且由于較差的質(zhì)量控制，這些不符合標(biāo)準(zhǔn)的藥物的成份和/或分解時間可能超出可接受的范圍數(shù)倍。對于在主要的藥物公司中執(zhí)行的為獲得專利的產(chǎn)品而設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)，很多發(fā)展中國家不具有實施所需要的技術(shù)、財力或人力資源。今天，不能被接受的事實是，在受控制的藥店之外的出售的藥品由于其低價而吸引了最貧困的人群，對于這部分人來說通過藥效和安全性指示的藥物的質(zhì)量更加不可靠。額外的復(fù)雜因素還在于，貧困的人不僅購買最便宜的產(chǎn)品，而且購買市場中可獲得的最小的包裝。在需求超過產(chǎn)量的情況下，還存在仿造藥物占據(jù)市場的威脅。青蒿琥酯(artesimate)是一種常用的青蒿素衍生物，它被制成片劑和注射劑的形式，最近還與阿莫地喹共同制備以作為聯(lián)合治療來施用。偽造的青蒿琥酯片劑在東南亞大陸流行，已經(jīng)在那里成為非常嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，并且已經(jīng)不可避免地導(dǎo)致很多原本可以在瘧疾感染中活下來的人發(fā)生死亡。盡管標(biāo)示的很像通常使用的由桂林南藥股份有限公司(GuilinPharmaceuticalCompany,中國，桂林)生產(chǎn)的青蒿琥酯，但是在測試時，在那些青蒿琥酯片劑中并沒有發(fā)現(xiàn)含有活性化合物[5，6]。目前，在東南亞大陸中流通的青蒿琥酯中有三分之一到二分之一為仿造的。還存在很嚴(yán)重的憂慮，那就是，正如近來在肯尼亞和剛果進(jìn)行的研究所證明的，在非洲，這可能同樣會成為一個主要的問題[7]。如果仿造的青蒿素衍生物隨著真正的產(chǎn)品進(jìn)入非洲，將會帶來非常嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。這將會導(dǎo)致ARTs和ACTs效果的降低，從而失去對其作用的信心。由于仿造的藥物繞過了傳統(tǒng)的銷售渠道，因此稅收將會受到損失；并且由于監(jiān)督藥物[9]的作用和安全，以及額外的治療受感染的人帶來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，健康體系的成本將會增加。由于缺乏發(fā)色團(tuán)(具有紫外/可見吸收性質(zhì)的化學(xué)基團(tuán))，ARTs是無色的，并且不能通過簡單的比色試驗被檢測到。己經(jīng)開發(fā)了一些復(fù)雜的技術(shù)(()高效液相色譜(HPLC)/e.d.c,高效液相色譜(HPLC)/紫外(UV)柱后衍生化檢測，液-質(zhì)聯(lián)用(LC/MS))，但這些方法不能在這一領(lǐng)域使用，并且對發(fā)展中國家來說非常昂貴。因此，目前在商業(yè)上已經(jīng)開發(fā)出了一種用于現(xiàn)場檢測仿造青蒿琥酯的分析方法。這一方法經(jīng)過改進(jìn)，包括了對蒿甲醚(artemether)和雙氫青蒿素(dihydroartemisinin)的檢測[6]。該方法為試管測試法，依賴于商業(yè)上可獲得的重氮鹽，固紅ITR鹽(FastRedITRsalt,Sigma公司)的反應(yīng)，與它們一起，三個青蒿素衍生物(ARTS)導(dǎo)致黃色產(chǎn)物生成。不幸的是，這一測試是不確定的，因為黃色有可能是與其它藥物，如強(qiáng)力霉素(doxycycline)和葉酸產(chǎn)生的。另外，其它黃色的抗瘧疾劑，如阿莫地喹(amodiaquine)、強(qiáng)力霉素、苯苑醇(lumefantrine)和米帕林(mepacrine)，在以聯(lián)合制劑的形式被使用時(例如，很快將被廣泛使用的青蒿琥酯/阿莫地喹)，將會引起混淆。通過目前可以獲得的技術(shù)，不可能在聯(lián)合治療時(例如阿莫地喹/ARTs聯(lián)合治療)確定ARTs的存在，因為ART或阿莫地喹的存在都會產(chǎn)生假"陽性"的黃色結(jié)果。
發(fā)明內(nèi)容考慮到目前現(xiàn)場檢測方法的限制，本發(fā)明人發(fā)明并驗證了一種使用者/現(xiàn)場友好的方法；特別地，適用于對所有實驗室研究人員可獲得的青蒿素衍生物進(jìn)行鑒定。本發(fā)明人開發(fā)的這一方法特別地實用，因為它允許對ART的存在進(jìn)行確定，并對陽性結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。根據(jù)本發(fā)明，提供了一種用于確定青蒿素衍生物在樣品中的存在的方法，該方法包括將樣品與選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR(FastBlueRR)的試劑進(jìn)行結(jié)合；觀察樣品的顏色變化，以所述顏色變化做為存在有青蒿素衍生物的指示。由于允許快速并便宜地確定青蒿素衍生物的存在，因而本發(fā)明的方法特別地實用。青蒿素衍生物的存在通過顏色變化來指示。沒有發(fā)現(xiàn)其它的抗瘧疾藥物能夠產(chǎn)生同樣的顏色變化。另外，該方法提供了兩種獨(dú)立的試劑，可以用于確認(rèn)青蒿素衍生物的存在。僅僅需要使用一種試劑。由于可以根據(jù)使用者的偏好或者哪一種對使用者最容易獲得而選擇試劑，因此具有顯著的優(yōu)點(diǎn)。并且這也允許對所得的結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)，減少了由于試劑的問題或使用者的失誤而產(chǎn)生錯誤結(jié)果的可能性。具體實施例方式青蒿素是一種公知的基于植物黃花蒿(herbArtemisiaannua)提取物的抗瘧疾藥物。該術(shù)語為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知。青蒿素衍生物是以青蒿素為基礎(chǔ)的具有相同或相似的性質(zhì)的化合物。特別地，青蒿素衍生物包括雙氫青蒿素、蒿乙醚(arteether)、青蒿琥酯、青蒿酮(artemisone)和對羧基苯甲醚(artelinicacid)。作為在此使用的術(shù)語，青蒿素衍生物也包括基于青蒿素的合成化合物，例如OZ277。僅僅作為例子，一些青蒿素衍生物的結(jié)構(gòu)如圖1所示。所述固藍(lán)RR是一種用作偶聯(lián)劑的常用試劑，以在不同介質(zhì)中測定酶的活性。簡單地說，酶的活性是通過與固藍(lán)B鹽一起將醋酸萘轉(zhuǎn)化成萘酚并形成相應(yīng)的紫色的重氮染料而測定的。在本領(lǐng)域中，固藍(lán)RR表示的是4'-氨基-2',5-二甲氧基苯甲酰苯胺，為公知術(shù)語。二硝基苯肼也是已知的班特尼試劑(Brady'sreagent),為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知。優(yōu)選情況下，本方法在強(qiáng)酸性介質(zhì)中實施。這使得青蒿素衍生物發(fā)生降解，分解的產(chǎn)物可以和試劑進(jìn)行反應(yīng)。特別地，本方法優(yōu)選在pH小于2的條件下實施，更優(yōu)選在pH小于1的條件下實施。任何適合的酸都可以用于制備所述酸性介質(zhì)，例如但不限于，鹽酸、硝酸、磷酸和硫酸。優(yōu)選使用鹽酸。任何其它適合的介質(zhì)也可以使用。術(shù)語"樣品"包括任何使用者希望對其中是否存在有青蒿素衍生物進(jìn)行檢測的樣品。特別地，術(shù)語樣品在此是指任何含有青蒿素衍生物的片劑或其它藥物樣品。所述樣品可以為任何形式，例如可以為固態(tài)或液態(tài)。當(dāng)所述樣品為固態(tài)形式時，使用者可以將樣品溶解在溶劑中，特別是水或有機(jī)溶劑中，例如甲醇。替代性地，固態(tài)樣品可以直接溶解在試劑中。所述樣品也可以在添加試劑之前溶解在酸性介質(zhì)中。優(yōu)選情況下，所述樣品為固態(tài)形式，優(yōu)選地為粉碎的片劑形式。當(dāng)檢測潛在的仿造片劑時，實用的方法是將片劑粉碎，并對得到的粉末進(jìn)行檢測，從而確定青蒿素或其衍生物是否在整個藥片中存在。已知的是，一些仿造藥物在不含有青蒿素衍生物或其衍生物的藥片表面附著一薄層青蒿素。對這些藥物的表面進(jìn)行的測定表明它們是真正的藥物，但事實上，包含在藥片中的活性成分與它應(yīng)當(dāng)具有的含量相比，則顯著的降低。特別是在測定可能含有包括賦形劑在內(nèi)的其它成份的藥物樣品時，由于ARTs溶解在這些溶劑中，但很多賦形劑和藥物不溶解，因此將樣品溶解在有機(jī)溶劑中(特別是甲醇、乙醇或乙氰)具有特別的優(yōu)點(diǎn)。這提供了能夠除去一些化合物的額外的選擇步驟。優(yōu)選地，所述溶劑為甲醇。為了在酸性介質(zhì)中實施本方法，并且使用有機(jī)溶劑，所述溶劑優(yōu)選為被酸化的。使用酸化的溶劑特別實用，因為這可以使兩個優(yōu)選的方法步驟相結(jié)合，從而減少步驟的總數(shù)，減少了實施該方法的時間。特別地，可以使用酸化的甲醇，例如用鹽酸酸化的甲醇。甲醇和鹽酸可以以適當(dāng)?shù)谋壤褂茫?，?:1，1:1，和l:2的比例?？梢允褂萌魏芜m當(dāng)濃度的鹽酸，例如1M，2M，5M或8M。術(shù)語"樣品"也可以包括從受試對象得到的樣品，如尿或血液樣品。特別地，對尿樣進(jìn)行檢測能夠有幫助于檢查受試對象是否排泄出青蒿素或其衍生物。優(yōu)選地，所述樣品和試劑在載體上進(jìn)行結(jié)合。所述載體可以為任何合適的成份，可以將所述樣品和試劑在所述載體上進(jìn)行結(jié)合，并觀察顏色的變化。特別優(yōu)選地，所述載體為濾紙或薄層色譜層析板(thinlayerchromatographyplate,TLC板)。可以使用任何適合的薄層色譜層析板，例如，具有氧化鋁底襯的薄層色譜層析板。所述樣品和試劑可以以任何適當(dāng)?shù)男问竭M(jìn)行結(jié)合。例如，當(dāng)試劑為液態(tài)而樣品為固態(tài)時，所述樣品可以溶解在試劑中。替代性的，所述樣品可以為液態(tài)，或者在與試劑結(jié)合之前溶解在液體中。當(dāng)試劑和樣品在載體上結(jié)合時，二者可以以任何適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行結(jié)合。例如，二者可以如上述方式進(jìn)行結(jié)合，然后施加于載體上，例如通過噴霧、滴加或傾倒而被施加至載體上，或者將載體浸在結(jié)合物中。替代性的，可以將試劑和樣品中的一個施加在載體上，然后再施加另外一個。例如，可以先將樣品施加在載體上，然后再將試劑施加在樣品所在的區(qū)域，或者可以先將試劑施加在載體上，然后將載體浸入溶解的樣品中。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知，存在很多能夠使樣品和試劑結(jié)合并對其進(jìn)行施加的方式，并不受上述例子所限。當(dāng)使用二硝基苯肼作為試劑時，優(yōu)選情況下，所述樣品在溶液中變成黃色或橙色，或者在載體上為粉色。當(dāng)使用固藍(lán)RR為試劑時，優(yōu)選情況下，所述樣品變成藍(lán)色。'本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，其它抗瘧疾藥物、賦形劑和如止疼藥、抗生素和抗病毒藥(antiretroviral)等在內(nèi)其它藥物使用本發(fā)明的方法并不產(chǎn)生陽性結(jié)果。大部分被測試的化合物根本不產(chǎn)生顏色變化。一部分產(chǎn)生輕微的顏色變化，但與青蒿素或其衍生物的顏色變化的程度不同或顏色不同。本發(fā)明的方法對青蒿素或其衍生物是特定的并且敏感的。本發(fā)明人測試了在生產(chǎn)抗瘧疾制劑時所使用的超過30種賦形劑、80種藥物(純物質(zhì)但為藥丸)和30種抗瘧疾藥。沒有在任何測試中發(fā)現(xiàn)干擾。在二硝基苯肼的二硝基苯肼(DNP)分析(兩個載體)或固藍(lán)RR在薄層色譜層析上的分析都沒有發(fā)現(xiàn)干擾。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅霉素抗生素可能帶來干擾，因為在使用固藍(lán)RR進(jìn)行檢測時，紅霉素在每個載體上都產(chǎn)生藍(lán)色。紅霉素帶來的干擾可以通過顏色測試而進(jìn)行確認(rèn)，并且該步驟可以包含在本方法中。另外，通過使用二硝基苯肼進(jìn)行重復(fù)檢測，使用固藍(lán)RR時所產(chǎn)生的任何干擾都可以輕松地被確認(rèn)為干擾，而不是陽性結(jié)果。如上文指出的，本方法還可以與紅霉素的顏色檢測相結(jié)合，以確認(rèn)陽性結(jié)果是由青蒿素衍生物導(dǎo)致的，而不是紅霉素。本方法可以包括使所述樣品與咕噸氫醇(xanthydrol)和乙酸、鹽酸的混合溶液進(jìn)行反應(yīng)；和對得到的溶液進(jìn)行加熱。如果存在紅霉素，則可以觀察到紅色。優(yōu)選地，所述咕噸氫醇的用量為約0.2g/L;優(yōu)選地，所述乙酸與鹽酸組合的比例為1:99。替代性地，本方法可以包括將所述樣品與鹽酸溶液進(jìn)行反應(yīng)。如果存在紅霉素，則在數(shù)分鐘后將觀察到黃色。優(yōu)選地，本方法包括將所述載體進(jìn)行干燥。這可以以任何適當(dāng)?shù)姆绞酵瓿?，包括簡單地將所述載體置于室溫下直至被干燥。優(yōu)選地，本方法包括將一部分樣品與二硝基苯肼組合，并且將一部分樣品與固藍(lán)RR組合，觀察兩種組合的顏色變化。由于本方法提供了對青蒿素衍生物的存在的雙重確認(rèn)，從而有利于避免出現(xiàn)假陽性，因此特別實用。本發(fā)明還提供了一種用于檢測青蒿素衍生物在樣品中的存在的試劑盒，該試劑盒包括載體、和選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR的試劑。優(yōu)選地，所述試劑盒包括如何對青蒿素衍生物進(jìn)行檢測的說明。所述試劑盒優(yōu)選含有兩種試劑。優(yōu)選地，如上文所述，所述試劑盒含有溶劑，待測樣品可以溶解在所述溶劑中。特別地，所述試劑盒優(yōu)選含有酸化溶劑。所述試劑盒還可以包括指南，例如顏色圖，以幫助使用者確認(rèn)是否達(dá)到了陽性結(jié)果。在測試中產(chǎn)生的顏色的強(qiáng)度用于指示存在的青蒿素或其衍生物的量。所述顏色圖可以包括許多不同的顏色強(qiáng)度，允許使用者了解存在的青蒿素或其衍生物的量。所述試劑盒還可以包括陽性樣品，以用于與測試樣品平行運(yùn)行，作為對照或?qū)Ρ取Ａ硗?，還提供了一種用于檢測青蒿素衍生物的存在的裝置，該裝置包括載體，該載體負(fù)載有選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR的試劑。優(yōu)選地，所述載體負(fù)載有二硝基苯肼和固藍(lán)RR兩種試劑。所述試劑以任何方式負(fù)載在所述載體上，當(dāng)含有青蒿素衍生物的樣品施加在載體上時，可以看到顏色變化。所述裝置的至少一部分可以為彩色的，優(yōu)選具有在得到陽性結(jié)果時可以被觀察到的一種或多種顏色。使用者可以輕松地將施加樣品后的試劑顏色與裝置上的顏色相比較，從而對陽性結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。可以對所述裝置進(jìn)行設(shè)置，從而使樣品可以以任何方式進(jìn)行施加。所述樣品可以通過噴霧、滴加或傾倒的方式加到裝置上含有所述試劑的區(qū)域。優(yōu)選地，所述裝置為測試棒(dipstick)。術(shù)語測試棒為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知，指一種用于測試樣品的裝置。測試棒通常為載體，一般是伸長的形狀，可以浸入到液態(tài)樣品中。所述測試棒負(fù)載有試劑，該試劑在樣品中存在特定化合物時能夠改變顏色。所述裝置，例如測試棒，可以具有涂層，特別是其中嵌有所述試劑的涂層。所述涂層可以為任何適當(dāng)?shù)耐繉樱缪趸X、纖維素或二氧化硅。下面通過實施例具體地描述本發(fā)明。實施例樣品的制備使用2.5毫克純化學(xué)物質(zhì)作為參考藥物，替代性地，將5毫克從待分析樣品(片劑、膠囊等)中得到的粉碎的粉末溶解在體積為200微升的甲醇中。將溶液混合30秒(搖晃或其它可用的方法，如漩渦或超聲波浴)，然后在工作臺上靜置數(shù)分鐘(沉淀)。試劑的制備DNP:將25毫克2，4-二硝基苯肼溶解在50毫升80%甲醇1M鹽酸溶液中。FBS:將125毫克固藍(lán)RR鹽溶解在25毫升的水中。將該溶液與25毫升80%甲醇2M硫酸溶液混合。測試材料在板/濾紙上的實施薄層色譜層析(TLC):使用硅膠60F254A1板(Merck)。濾紙可以使用任何標(biāo)準(zhǔn)的濾紙。使用微量吸液管或帶刻度的毛細(xì)管在TLC或濾紙上施加(緩慢施加溶液，以避免出現(xiàn)大的點(diǎn))體積為5-10微升的溶液(見樣品的制備)。噴霧過程使用兩種試劑進(jìn)行噴霧，直到板/濾紙飽和(濕)。將TLC/濾紙置于室溫下至干燥。替代性地，可以將試劑緩慢地滴加到TLC或濾紙上。觀察結(jié)果DNP:在室溫下，約30分鐘至1小時左右，觀察到ARTS為粉色的點(diǎn)(黃色背景)。FBS:在室溫下，約l-3小時左右，觀察到ARTS為藍(lán)色的點(diǎn)(白色背景)。兩個反應(yīng)在TLC上進(jìn)行的都比在濾紙上進(jìn)行的要快。表1、2和3顯示了根據(jù)上述方法對不同抗瘧疾藥物、賦形劑和其他藥物的檢測結(jié)果。標(biāo)明了格林前、格林后、改進(jìn)的格林前、改進(jìn)的格林后的列，分別表示使用格林(Green等.)發(fā)明的方法測試得到的樣品顏色。格林前和格林后分別表示添加了最初的格林方法中用于檢測青蒿琥酯的格林試劑之前和之后，其中該方法使用的是水溶性試劑。改進(jìn)的格林前和改進(jìn)的格林后分別表示添加了改進(jìn)的格林方法中用于檢測衍生物的試劑之前和之后，其中，該方法中使用的是有機(jī)溶劑。標(biāo)明了FBS、DNP和H2S04(分別為前和后)的列，分別表示在載體上的溶液中添加固藍(lán)鹽、二硝基苯肼和硫酸之前和之后的顏色。術(shù)語"nc"用來表示沒有顏色。術(shù)語"nt"表示沒有測試?？梢钥闯觯袡z測的青蒿素衍生物都可以觀察到顏色的變化，而其它物質(zhì)中則沒有觀察到顏色的變化。兩個溶解度的列表示在水中的溶解度和在有機(jī)溶劑中的溶解度。參考文獻(xiàn)Newton，P.，S.Proux，etal.(2001).FakeartesunateinsoutheastAsia,Lancet357(9272):1948-1950.Newton,P.N.，A.Dondorp,etal.(2003).CounterfeitartesunateantimalarialsinsoutheastAsia.Lancet362(9378):169.GPHF-Minilab,pdfdocumentsavailableusingthefollowinglink:Http:〃www,gphf.org/web—en/publikationen/manuals.htmGabriels,M.，Plaizier-Vercammen,J.(2004).DevelopmentofaReverse-PhaseThin-layerchromatrographicmethodforartemisininanditsderivatives.JournalofChromatrographicScience,42，341-347.[5]Green,M.D.，D.LMount,etal.(2000)."Acolorimetricfieldmethodtoassesstheauthenticityofdrugssoldastheantimalarialartesunate."JournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysis24(1):65-70.Green,M.D.，D.L.Mount,etal.(2001)."Authenticationofartemether，artesunateanddihydroartemisininantimalarialtabletsusingasimplecolorimetricmethod."TropicalMedicine&InternationalHealth:TM&IH6(12):980-982.[7](PaulNNewton,RoseMcGreaddy,FacundoFernandez,MichaelDGreen,SoulyPhanouvong,ChristopherJMWhitty,AmbroseO.Talisuna,StephaneProux，EvaMariaChristophel,GraceMalenga,PratapSinghasivanon,KalifaBojang，HarparkashKaur,KevinPalmer,NicholasPJDay,BrianMGreenwood,FrancoisNosten,NicholasJWhite(2006)，ManslaughterbyfakeartesunateinAsia-willAfricabecome'infected'next;PLoSMed.Jun13;3(6):e197)AtemkengMA，CockdeKandPlaizier-VercammenJ(2007)."Qualitycontrolofactiveingredientsinartemisinin國derivativeantimalarialswithinKenyaandDRCongo".TropicalMedicine&InternationalHealth,Vol12,No1，pp68-74.ScheerA,http:〃www.abnh.com/security/pharm—whitepaper_WEBSITE.pdf，2003.表l<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>;表2<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表3<table>complextableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>權(quán)利要求1、一種用于確定青蒿素衍生物在樣品中的存在的方法，其中，該方法包括將樣品與選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR的試劑進(jìn)行結(jié)合；觀察樣品的顏色變化，以該顏色變化作為存在有青蒿素或它的衍生物的指示。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述樣品和試劑在載體上進(jìn)行^t人^口口o3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述載體為濾紙、薄層色譜層析板和測試棒中的一種。4、一種用于檢測青蒿素衍生物在樣品中的存在的試劑盒，其中，該試劑盒包括載體，并提供有選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR的試劑。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其中，該試劑盒包括二硝基苯肼和固藍(lán)RR兩種試劑。6、根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的試劑盒，其中，該試劑盒還包括用于溶解樣品的溶劑。7、根據(jù)權(quán)利要求4、5或6所述的試劑盒，其中，所述載體為濾紙、薄層色譜層析板和測試棒中的一種。8、一種用于確定青蒿素衍生物在樣品中的存在的裝置，其中，該裝置包括載體，該載體負(fù)載有選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR的試劑。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的裝置，其中，所述載體為濾紙、薄層色譜層析板和測試棒中的一種。10、根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的裝置，其中，所述載體負(fù)載有兩種試劑。全文摘要本發(fā)明是關(guān)于一種用于確定青蒿素衍生物在樣品中的存在的方法，該方法包括將所述樣品與選自二硝基苯肼和固藍(lán)RR(FastBlueRR)的試劑或它們的組合進(jìn)行結(jié)合；觀察樣品的顏色變化，以該顏色變化作為存在有青蒿素衍生物的指示。文檔編號G01N33/94GK101365952SQ200780001884公開日2009年2月11日申請日期2007年1月3日優(yōu)先權(quán)日2006年1月3日發(fā)明者H·考爾,J·R·約瑟特申請人:倫敦衛(wèi)生及熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院