專利名稱：腐蝕接頭毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于腐蝕接頭毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置，涉及兩種分析化學(xué)方法的連接，特別涉及毛細(xì)管電泳和電化學(xué)發(fā)光兩種技術(shù)的連接。
背景技術(shù)：
毛細(xì)管電泳作為近些年發(fā)展起來的分離分析技術(shù)，因其具有分辨率高、分離時間短、樣品試劑用量小的優(yōu)點(diǎn)而廣泛用于環(huán)境、生物以及臨床分析。細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管在有效散發(fā)毛細(xì)管電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱的同時，也限制了樣品的裝載量。因此，與液相色譜相比，毛細(xì)管電泳需要更靈敏的檢測方法。激光誘導(dǎo)熒光和質(zhì)譜可為毛細(xì)管電泳提供高靈敏檢測，然而，高的儀器價格限制了它們的廣泛使用。另一方面，許多分析物無天然熒光，使用激光誘導(dǎo)熒光所需的衍生化無疑增加了分析過程的復(fù)雜性。基于三聯(lián)吡啶釕的電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)結(jié)合了電化學(xué)檢測的微型、原位和化學(xué)發(fā)光的高靈敏，可用于胺類、醇類、DNA以及免疫分析。毛細(xì)管電泳和電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)的結(jié)合可以成為一種低費(fèi)用、低成本、簡便快速的分離分析技術(shù)。
毛細(xì)管電泳—電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)的關(guān)鍵在于如何巧妙設(shè)計(jì)電化學(xué)發(fā)光池既能保證電化學(xué)發(fā)光高靈敏，又能有效消除毛細(xì)管電泳高壓電場對電化學(xué)發(fā)光過程的影響。多數(shù)工作采用場分離器來消除高壓電場對檢測過程的影響。但場分離器可能引起信號峰展寬；另外，使用場分離器，調(diào)整毛細(xì)管末端和工作電極間的相對位置也比較困難；某些場分離器的制備也比較麻煩。采用小內(nèi)徑毛細(xì)管或低電導(dǎo)率電泳緩沖溶液也可大大降低高壓電場對檢測過程影響，然而，這種方法限制了毛細(xì)管電泳的可變因素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是設(shè)計(jì)一種腐蝕接頭毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置。
本發(fā)明針對上述情況，通過腐蝕毛細(xì)管提供電泳電回路有效解決了電泳高壓電場對電化學(xué)發(fā)光過程的影響。氫氟酸可以腐蝕剝?nèi)ゾ埘０吠繉硬糠值拿?xì)管，通過部分地剝?nèi)ッ?xì)管外聚酰胺涂層，腐蝕毛細(xì)管圓周的一面來增強(qiáng)毛細(xì)管腐蝕部分的強(qiáng)度。腐蝕寬度2-3毫米可以滿足毛細(xì)管電泳導(dǎo)電的需要。腐蝕部分和毛細(xì)管出口之間7毫米的距離在有效消除高壓電場對電化學(xué)發(fā)光檢測的影響的同時，并不明顯降低分離毛細(xì)管的有效長度。腐蝕部分和毛細(xì)管出口之間纏繞的封口膜，一方面用于準(zhǔn)直毛細(xì)管，另一方面起隔離三聯(lián)吡啶釕儲液池和接地池的作用，毛細(xì)管電泳接地電極直接插入接地池。
腐蝕毛細(xì)管的制作用刀片輕輕刮去毛細(xì)管圓周一面的聚酰胺涂層，將1毫升的醫(yī)用塑料離心管的蓋子切去，沿著直徑方向在離心管壁切出2毫米深的V行槽，把毛細(xì)管剝?nèi)ゾ埘０吠繉拥牟糠旨茉陔x心管的V行槽上，在離心管內(nèi)滴入氫氟酸，表面張力的作用可使毛細(xì)管浸泡于氫氟酸內(nèi)而氫氟酸不會溢出，每隔一定時間通過測定毛細(xì)管腐蝕部分和毛細(xì)管入口端之間的電流來監(jiān)測毛細(xì)管的腐蝕情況，用42％的氫氟酸，對于75微米內(nèi)徑，375微米外徑的毛細(xì)管，一般腐蝕120-130分鐘即可在毛細(xì)管腐蝕部分和毛細(xì)管入口端獲得與毛細(xì)管出入口一樣的電流。


附圖一為電化學(xué)發(fā)光池的示意圖，圖中a和b分別是毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置沿工作電極8和毛細(xì)管7的剖面圖和沿檢測池5的剖面圖。圖中1)檢測池體；2)底板；3)光學(xué)玻璃窗；4)O形密封圈；5)檢測池；6)電泳接地電極和接地池；7)毛細(xì)管；8)工作電極；9)工作電極準(zhǔn)直螺絲；10)封口膜；11)毛細(xì)管腐蝕部分；12)對電極安裝孔；13)參比電極安裝孔；14)固定螺絲；15)光電倍增管。
本發(fā)明檢測池體1)呈長方體形，池體底部為長方形底板2)，池體1)與底板2)之間通過固定螺絲14)固定，固定螺絲14)共4個；池體1)底部對應(yīng)于檢測池5)有直徑大于檢測池5)的凹槽用于固定光學(xué)玻璃窗3)；底板2)對應(yīng)于檢測池5)的位置開有和檢測池5)直徑一樣的小孔用于光信號的透過；光學(xué)玻璃窗3)為一片圓形光學(xué)玻璃，光學(xué)玻璃窗3)與底板2)之間用O形密封圈4)密封；檢測池5)貫穿整個池體，底部與光學(xué)玻璃窗3)連接；準(zhǔn)直螺絲9)，用于調(diào)節(jié)工作電極8)與毛細(xì)管7)準(zhǔn)直，準(zhǔn)直螺絲9)共3個，分別沿垂直和水平方向安裝于池體上；參比電極安裝孔12)和對電極安裝孔13)分別用于安裝參比電極和對電極。參比電極安裝孔12)和對電極安裝孔13)以傾斜方式與檢測池16)相連通；工作電極8)與毛細(xì)管7)從池體1)相對的兩側(cè)伸入到檢測池5)中，且工作電極8)的中心線與毛細(xì)管7)的中心線在一條直線上；工作電極8)與毛細(xì)管7)的準(zhǔn)直通過調(diào)整3個準(zhǔn)直螺絲9)實(shí)現(xiàn)；接地池6)內(nèi)滴入分離緩沖溶液插上接地電極實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管電泳的接地。
本發(fā)明構(gòu)思巧妙，作為一個整體，本發(fā)明既保留了毛細(xì)管電泳的高分離效率，又實(shí)現(xiàn)了電化學(xué)發(fā)光的高靈敏。通過腐蝕接頭有效消除毛細(xì)管電泳高壓電場對電化學(xué)發(fā)光檢測的影響，解決了毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測中的關(guān)鍵性問題。腐蝕毛細(xì)管圓周的一面可有效增強(qiáng)了毛細(xì)管腐蝕部分的強(qiáng)度。利用這種設(shè)計(jì)，為毛細(xì)管電泳和電化學(xué)發(fā)光提供了一件簡單實(shí)用的連接裝置。由于消除了高壓電場對電化學(xué)發(fā)光檢測的影響，分離毛細(xì)管末端和工作電極之間的距離可以更小(～100微米)，從而進(jìn)一步降低檢測死體積。由于消除了高壓電場對電化學(xué)發(fā)光檢測的影響，可以使用大內(nèi)徑毛細(xì)管從而有利于提高樣品裝載量由于消除了高壓電場對電化學(xué)發(fā)光檢測的影響，可以選擇不同離子強(qiáng)度的分離緩沖溶液。與常規(guī)的使用場分離器裝置相比，具有制備簡單，死體積小的特點(diǎn)?？傊?，本發(fā)明既保留了毛細(xì)管電泳的分辨率高、分離時間短和樣品試劑用量小的優(yōu)點(diǎn)，又實(shí)現(xiàn)了電化學(xué)發(fā)光的原位，高靈敏和試劑用量小等優(yōu)點(diǎn)。
實(shí)施例1用42％的氫氟酸，對于75微米內(nèi)徑，375微米外徑的毛細(xì)管，腐蝕120-130分鐘，在毛細(xì)管腐蝕部分和毛細(xì)管入口端獲得和毛細(xì)管出入口一樣的電流，將腐蝕好的毛細(xì)管7按圖所示的方式安裝到檢測池體1，本發(fā)明的毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光裝置由池體1，光學(xué)玻璃窗3，底板2三部分及相應(yīng)的連接螺絲14組成；參比電極和對電極分別插入?yún)⒈入姌O安裝孔12和對電極安裝孔13；利用3個準(zhǔn)直螺絲調(diào)整毛細(xì)管7末端和工作電極8的相對位置；將上述部分連接好后，檢測池5充入三聯(lián)吡啶釕溶液實(shí)現(xiàn)電化學(xué)發(fā)光過程；接地池6充入分離緩沖溶液、插入接地電極實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管電泳的電回路。需要說明的是，2-3毫米的腐蝕毛細(xì)管可以滿足毛細(xì)管電泳導(dǎo)電的需要；腐蝕部分和毛細(xì)管末端之間7毫米的距離在有效消除毛細(xì)管電泳高壓電場對電化學(xué)發(fā)光過程影響的同時，并不明顯降低毛細(xì)管的有效長度。利用此裝置既保留了毛細(xì)管電泳的分辨率高、分離時間短、樣品試劑用量小的優(yōu)點(diǎn)，又實(shí)現(xiàn)了電化學(xué)發(fā)光的原位、高靈敏和試劑用量小等優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置，池體1)呈長方體形，池體底部為長方形底板2)，池體1)與底板2)之間通過固定螺絲14)固定，固定螺絲14)共4個；池體1)底部對應(yīng)于檢測池5)有直徑大于檢測池5)的凹槽用于固定光學(xué)玻璃窗3)；底板2)對應(yīng)于檢測池5)的位置開有和檢測池5)直徑一樣的小孔用于光信號的透過；光學(xué)玻璃窗3)為一片圓形光學(xué)玻璃，光學(xué)玻璃窗3)與底板2)之間用0形密封圈4)密封；檢測池5)貫穿整個池體，底部與光學(xué)玻璃窗3)連接；準(zhǔn)直螺絲9)，用于調(diào)節(jié)工作電極8)與毛細(xì)管7)準(zhǔn)直，準(zhǔn)直螺絲9)共3個，分別沿垂直和水平方向安裝于池體上；參比電極安裝孔12)和對電極安裝孔13)分別用于安裝參比電極和對電極，參比電極安裝孔12)和對電極安裝孔13)以傾斜方式與檢測池16)相連通；工作電極8)與毛細(xì)管7)從池體1)相對的兩側(cè)伸入到檢測池5)中，且工作電極8)的中心線與毛細(xì)管7)的中心線在一條直線上；工作電極8)與毛細(xì)管7)的準(zhǔn)直通過調(diào)整3個準(zhǔn)直螺絲9)實(shí)現(xiàn)；接地池6)內(nèi)滴入分離緩沖溶液插上接地電極實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管電泳的接地。
2.按照權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置，其特征在于，部分地剝?nèi)ッ?xì)管外聚酰胺涂層，腐蝕毛細(xì)管圓周的一面來增強(qiáng)毛細(xì)管腐蝕部分的強(qiáng)度，腐蝕寬度2-3毫米，腐蝕部分和毛細(xì)管出口之間7毫米的距離，毛細(xì)管腐蝕部分和出口之間纏繞封口膜10)。
全文摘要
本發(fā)明屬于腐蝕接頭毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測裝置，利用氫氟酸腐蝕毛細(xì)管，通過剝?nèi)ゲ糠值木埘０吠繉?，腐蝕毛細(xì)管的一面來增強(qiáng)毛細(xì)管腐蝕部分的強(qiáng)度；毛細(xì)管腐蝕部分和毛細(xì)管末端7毫米的距離可以有效消除毛細(xì)管電泳高壓電場對電化學(xué)發(fā)光過程，且不明顯降低毛細(xì)管的有效長度；此裝置的主體為長方體，包括池體，光學(xué)玻璃窗，底板三部分，池體和底板用螺絲連接固定，光學(xué)玻璃窗安裝于池體和底板之間用O形密封圈密封。本發(fā)明既保留了毛細(xì)管電泳的分辨率高、分離時間短、樣品試劑用量小的優(yōu)點(diǎn)，又有效消除毛細(xì)管電泳高壓電場對電化學(xué)分離過程的影響，實(shí)現(xiàn)了電化學(xué)發(fā)光的原位，高靈敏檢測。
文檔編號G01N21/66GK1544924SQ20031011583
公開日2004年11月10日 申請日期2003年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月27日
發(fā)明者汪爾康, 尹學(xué)博, 楊秀榮 申請人:中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所