專利名稱：治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是對治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的有效藥用成分進行檢測的一種方法。
穿龍骨刺片是一種用于治療骨質(zhì)增生病癥的藥物。目前對其有效藥用成分尚無明確規(guī)范的檢測方法，對于保證其質(zhì)量和療效的穩(wěn)定可靠是一個不容忽視的影響因素。
鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種經(jīng)試驗表明是對其有效藥用物質(zhì)成分進行檢測的簡單方便的方法。
本發(fā)明用于治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的檢測方法，是將粉碎狀的待測藥物用溶劑提取，將提取液分別與對照用的淫羊藿甙、枸杞標準品以薄層層析方式進行對照鑒別，其中a)將粉碎狀藥物以甲醇提取，除去甲醇后的提取物再用水溶解，對該提取物水溶液以用水飽和的正丁醇提取，提取液用2％碳酸氫鈉溶液洗滌后除去正丁醇，得到的剩余提取物用甲醇溶解而成為第一待測試液。將其與對照用的淫羊藿甙標準品的甲醇溶液按常規(guī)方式用硅膠G薄層板進行層析展開后晾干，在其表面噴以重量/體積比為0.8-1.0的三氯化鋁乙醇溶液后，于365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點。
b)將粉碎狀藥物用水浸提，該水溶提取液再用乙酸乙酯提取，對除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用乙醇溶解而成為第二待測試液。另將對照用枸杞子藥材的水煎提取物用乙酸乙酯提取，對除去乙酸乙酯得到的剩余提取物用乙醇溶解作為對照用的枸杞標準品溶液，將其與第二待測試液按常規(guī)方式用硅膠G薄層板進行層析展開后晾干，于365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點。
上述方法中，所說的a)操作中將粉碎狀藥物以甲醇進行提取時，可以采用目前常用的多種方法。例如，采用甲醇加熱下的回流方式就是試驗表明有較好效果的方式之一。
在上述方法中所說的a)操作中進行薄層層析時，所用的展開試劑可以有多種選擇。例如，采用體積比為10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液體系，或是采用體積比為65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的混合溶液體系等，都是可供選擇的方式之一。眾所周知，選擇的展開試劑不同，對樣品中的各類成分在層析推進過程中的分離程度會有不同的影響。在現(xiàn)有的試驗中顯示，其中以選擇略有偏小極性的展開劑體系可以使上述的薄層層析有較好的分離效果。例如，在上述所列兩種展開劑體系的試驗中，前者的展開分離效果優(yōu)于后者。
在上述方法中所說的b)操作中，對粉碎狀的藥物用水浸提時，根據(jù)具體情況也可以有多種選擇。例如，可以采用水浸、煎煮或回流等不同方法，其中采用以熱水，例如可以采用溫度為40℃-50℃的溫熱水浸泡提取，在試驗中顯示是操作簡便和提取效果較好的方式之一。
方法中所說的b)操作中進行薄層層析時所用的展開試劑，如上述，同樣也可以有多種選擇。例如，采用體積比為6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液體系，或是采用體積比為6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液體系，都是可供選擇的方式之一?，F(xiàn)有的試驗也顯示，在所選用的展開劑中，仍以極性偏小的展開劑體系的分離效果較好。例如，對于此處所列的兩種展開劑體系，試驗結(jié)果也顯示，前者的展開分離效果優(yōu)于后者。
試驗表明，采用本發(fā)明的上述檢測方法對治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的成分進行檢測，可以具有較為理想的專屬性和準確性，且能較少受到外界因素的干擾。
以下通過具體的實施例對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅局限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖1是本發(fā)明檢測方法對藥物中淫羊藿成分的一種薄層層析的展開結(jié)果圖2是本發(fā)明檢測方法對藥物中淫羊藿成分的另一種薄層層析的展開結(jié)果圖3是本發(fā)明檢測方法對藥物中枸杞成分的一種薄層層析展開結(jié)果圖4是本發(fā)明檢測方法對藥物中枸杞成分的另一種薄層層析展開結(jié)果本例治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的檢測方法，是將粉碎狀的待測藥物分別用適當?shù)娜軇┨崛〔⒆鬟m當分離純化處理后，再將提取液成分分別與對照用的淫羊藿甙、枸杞子標準品以薄層層析方法展開并進行對照鑒別。具體操作為
(1)取藥片10片，研細并加甲醇30毫升加熱回流1小時后過濾，濾液揮盡甲醇后剩余的提取物加水約20毫升溶解，用以水飽和的正丁醇25毫升分別提取兩次，對合并的正丁醇提取液用2％碳酸氫鈉溶液20毫升洗滌兩次后，將除去正丁醇后得到的剩余物用1毫升甲醇溶解，成為第一待測試液。另取對照用的淫羊藿甙標準品用甲醇溶解，制成淫羊藿甙含量為1毫克/毫升的對照試液。按《中國藥典》(一)[2000版]附錄中規(guī)定的薄層層析方法，分別取上述第一待測試液和對照用淫羊藿甙標準品試液各5-10微升點樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水組成的混合溶液展開劑體系推進展開后，取出并晾干，在其表面噴以重量/體積比為0.8-1.0的三氯化鋁乙醇溶液后，在105℃烘干15分鐘后，置365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點。其薄層層析結(jié)果如圖1所示。若上述的薄層層析中采用由體積比為65∶35∶10的氯仿-甲醇-水組成的混合溶液的展開劑體系，其層析展開結(jié)果如圖2所示。
(2)取同樣的藥片15片研細后，加溫度為40℃-50℃的熱水30毫升浸泡溶解提取1小時后，對該水溶提取液分別用乙酸乙酯25毫升提取兩次，將合并并除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解，成為第二待測試液。另取對照用的枸杞子藥材0.5克，加水50毫升煎煮20分鐘，冷卻后過濾，濾液用乙酸乙酯15毫升振搖提取，提取液除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解后，作為對照用的枸杞標準品試液。同樣按《中國藥典》(一)[2000版]附錄中規(guī)定的薄層層析方法，分別取上述的第二待測試液和對照用枸杞標準品試液各5-10微升點樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液展開劑體系推進展開后晾干，置365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點。其薄層層析結(jié)果如圖3所示。若在上述的薄層層析中采用由體積比為6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液展開劑體系，其層析展開的結(jié)果如圖4所示。
權(quán)利要求
1.治療骨質(zhì)增生病藥物穿龍骨刺片的檢測方法，其特征在于將粉碎狀的待測藥物用溶劑提取，將提取液分別與對照用的淫羊藿甙、枸杞標準品以薄層層析方式進行對照鑒別，其中a)將粉碎狀藥物以甲醇提取，除去甲醇后的提取物再用水溶解，對該提取物水溶液以用水飽和的正丁醇提取，提取液用2％碳酸氫鈉溶液洗滌后除去正丁醇，得到的剩余提取物用甲醇溶解而成為第一待測試液，將其與對照用的淫羊藿甙標準品的甲醇溶液按常規(guī)方式用硅膠G薄層板進行層析展開后晾干，在其表面噴以重量/體積比為0.8-1.0的三氯化鋁乙醇溶液后，于365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點；b)將粉碎狀藥物用水浸提，該水溶提取液再用乙酸乙酯提取，對除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用乙醇溶解而成為第二待測試液，另將對照用枸杞子藥材的水煎提取物用乙酸乙酯提取，對除去乙酸乙酯得到的剩余提取物用乙醇溶解作為對照用的枸杞標準品溶液，將其與第二待測試液按常規(guī)方式用硅膠G薄層板進行層析展開后晾干，于365納米紫外燈下檢視相應(yīng)位置處的相同顏色熒光斑點。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的a)操作中將粉碎狀藥物以甲醇提取時，采用甲醇加熱下的回流方式。
3.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的a)操作中進行薄層層析所用的展開試劑是體積比為10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液體系。
4.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的在a)操作中進行薄層層析所用的展開試劑是體積比為65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的混合溶液體系。
5.如權(quán)利要求1至4之一所述的檢測方法，其特征在于所說的a)操作中，將粉碎狀藥物以甲醇提取時的藥物用量為10片待測藥物，對除去正丁醇后得到的剩余提取物用1毫升甲醇溶解成為第一待測試液，對照用的淫羊藿甙標準品甲醇溶液濃度為含淫羊藿甙1毫克/毫升，進行薄層層析時各樣品的點樣量分別為5-10微升。
6.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的b)操作中對粉碎狀藥物用水浸提時采用以熱水浸泡的方式。
7.如權(quán)利要求6所述的檢測方法，其特征在于所說的b)操作中對粉碎狀藥物用水浸提時采用的熱水溫度為40℃-50℃。
8.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的b)操作中進行薄層層析所用的展開試劑是體積比為6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液體系。
9.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所說的b)操作中進行薄層層析所用的展開試劑是體積比為6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液體系。
10.如權(quán)利要求1至9之一所述的檢測方法，其特征在于所說的b)操作中，對粉碎狀藥物用水浸提時的藥物用量為15片待測藥物，對除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解成為第二待測試液，對照用的枸杞子標準品溶液為用0.5克枸杞子藥材加水煎煮20分鐘后的水溶液先用乙酸乙酯進行提取，除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物再用1毫升乙醇溶解作為對照用的枸杞標準品溶液，進行薄層層析時各樣品的點樣量分別為5-10微升。
全文摘要
治療骨質(zhì)增生藥物穿龍骨刺片的檢測方法:將待測藥物的溶劑提取液分別與對照用的淫羊藿甙、枸杞標準品以薄層層析方式進行對照鑒別。其中:a)藥物的甲醇提取物經(jīng)水溶、水飽和的正丁醇提取、洗滌并除去正丁醇的提取物用甲醇溶解,與淫羊藿甙標準品甲醇溶液薄層析展開、晾干并噴以三氯化鋁乙醇溶液;b)藥物的水浸提液用乙酸乙酯提取,除去溶劑的提取物乙醇溶解,與以同樣方法得到的枸杞子提取物的乙醇溶液對照,薄層析展開后晾干。分別檢視紫外燈下相應(yīng)的熒光斑點。
文檔編號G01N30/90GK1382987SQ0110737
公開日2002年12月4日 申請日期2001年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月25日
發(fā)明者尹述凡, 鄧道清, 肖華, 夏都靈, 蘇澤華, 賀云, 盧燕君, 張永昱, 陳樂 申請人:四川普瑞藥業(yè)有限責任公司