一種微流體分析儀及其方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一個用于病理學檢測的微流體分析儀。所述微流體分析儀包含多個緩沖通道，樣本通道，中心流動通道，多個光刺激通道，和多個光接收通道。所述多個光刺激通道和所述多個光接收通道被以預設的角度放置在中心流動通道上。所述多個光刺激通道刺激流過中心流動通道上樣本溶液中的細胞。被刺激的細胞產(chǎn)生一個或多個光信號。所述一個或多個光信號被所述多個光接收通道接收。所述微流體分析儀包含放置在每個所述多個光接收通道上的多個檢測器，以檢測一個所述一個或多個光信號。被檢測的光信號被發(fā)送至一個計算單元，以用于病理學檢測。
【專利說明】一種微流體分析儀及其方法
[0001]相關申請
本發(fā)明已于2012年2月4日獲得了印度專利4067/CHE/2011的專利優(yōu)先權，此專利文件的全部內(nèi)容在此文被弓丨入?yún)⒖肌?br>
【技術領域】
[0002]本發(fā)明涉及一個微流體分析儀，具體涉及一種病理學檢測的微流體分析儀。

【背景技術】
[0003]人類免疫性缺陷病毒(HIV)是一種最危險的傳染病，在2009年全世界有將近有3330萬感染者。在這些感染者中，250萬人小于15歲，其中估計146萬人需要抗逆轉錄病毒治療(ART)。那些細胞計數(shù)小于350的人通常被推薦使用ART。
[0004]在獲得性免疫缺損綜合征(AIDS)病人中，HIV導致了⑶4細胞的顯著的減少。⑶4細胞是身體免疫響應的發(fā)起者。因此，一個監(jiān)測AIDS病人的有效途徑是在HIV治療過程中，檢測病人血液樣本中的CD4細胞的比例。病人需要每3至6個月監(jiān)測一次，以驗證此疾病的發(fā)展。
[0005]當前，HIV的診斷是使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)或通過傳統(tǒng)的流式細胞計技術進行。ELISA是一種用于診斷HIV的常見的定性方法，并且是一種對于HIV檢測的有效方法。通常，流式細胞計通過CD4細胞計數(shù)在免疫響應中的增加來測量HIV感染的程度。這些龐大的治療過程是一個不利之處，這需要昂貴的藥物，徹底的維護和有經(jīng)驗的醫(yī)護人員，來運行和維護它們的有效運轉。這使得AIDS的診斷在當前變成了一個非常昂貴和冗長的事件。
[0006]因而，需要一種更經(jīng)濟的系統(tǒng)和技術，以用于病理學檢測。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]現(xiàn)有技術的短處被克制，而額外的長處已在描述中通過一種方法和系統(tǒng)的配置來實現(xiàn)。
[0008]在一個實施例中，本發(fā)明提供一個微流體分析儀以用于病理學檢測。所述微流體分析儀包括多個緩沖通道，一個樣本通道，一個中心流動通道，多個第一光刺激通道，多個第一光接收通道，多個第一檢測器，其中還有一個或多個第二光刺激通道，一個或多個第二光接收通道和一個或多個第二檢測器。所述多個緩沖通道被配置用于承載緩沖溶液而樣本通道被配置用于承載樣本溶液。所述中心流動通道被配置接收緩沖溶液和樣本溶液，其特征在于，所述多個緩沖通道和所述樣本通道匯聚于所述中心流動通道的輸入端，以便在所述中心流動通道內(nèi)形成狹窄路徑，便于所示樣本溶液在所述中心流動通道內(nèi)流動。所述多個第一光刺激通道被垂直放置在所述中心流動通道。每個所述多個第一光刺激通道與一個第一套光纖耦合激光源連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道，以產(chǎn)生一個或多個第一光信號。每個所述多個第一光接收通道被以和每個所述多個第一光刺激通道的光軸相隔預設的角度分別放置，以接收一個或多個第一光信號。被放置在每個所述多個第一光接收通道上的每個所述多個第一檢測器檢測到至少一個信號，此信號屬于所述一個或多個第一光信號。
[0009]每個所述一個或多個第二光刺激通道以和所述中心流動通道預設的角度放置。每個所述一個或多個第二光刺激通道與一個第二套光纖耦合激光源連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道，以產(chǎn)生一個或多個第二光信號。每個所述一個或多個第二光接收通道被以和所述中心流動通道預設的角度放置，以接收一個或多個第二光信號。每個所述一個或多個第二檢測器被放置在每個所述一個或多個第二光接收通道上以檢測至少一個信號，此信號屬于所述一個或多個第二光信號。
[0010]在一個實施例中，本發(fā)明提供一個使用所述微流體分析儀進行病理學檢測的方法。所述方法包括接收緩沖溶液和樣本溶液分別通過一個中心流動通道流過多個緩沖通道和一個樣本通道，其中所述多個緩沖通道和所述樣本通道匯聚在所述中心流動通道的輸入端，以便在所述中心流動通道內(nèi)形成狹窄路徑，便于所示樣本溶液在所述中心流動通道內(nèi)流動。當通過所述中心流動通道接收所述緩沖溶液和所述樣本溶液時，所述樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道，并被多個第一套光纖耦合激光源所刺激，以產(chǎn)生一個或多個第一光信號。所述多個第一套光纖耦合激光源分別同多個第一光刺激通道相連。所述一個或多個第一光信號從多個第一接收光信號中接收。當接收所述一個或多個第一光信號時，每個多個第一檢測器被分別放置在每個所述多個第一光接收通道，以檢測一個信號，此信號屬于所述一個或多個第一光信號。所述檢測到的所述一個或多個第一光信號由用于病理學檢測的計算單元接收。所述方法也包括通過一個多個第二套光纖耦合激光源刺激樣本溶液中的細胞，以產(chǎn)生一個或多個第二光信號，其中所述多個第二套光纖耦合激光源分別連接一個或多個第二光刺激通道。所述一個和多個第二光信號由多個第二光接收通道接收。當接收所述一個或多個第一第二信號時，每個所述多個第二檢測器分別放置在每個所述多個第二光接收通道，檢測一個信號，此信號屬于一個或多個第二光信號。所述檢測到的所述一個或多個第二光信號由用于病理學檢測的計算單元接收。
[0011]前面所做的概要只是用于說明，并不做任何限制。除了上面的說明范圍，實施例和特征，更多的保護范圍，實施例和特征通過附圖和以下詳細描述是顯而易見相關的。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]此發(fā)明的新特征和特性在從屬權利要求中有詳盡的解釋。然而本發(fā)明自身，它的使用的優(yōu)先方式，它的未來的對象和優(yōu)點，可以被下列詳細描述的實施例和閱讀相關附圖所更好的理解。一個或多個實施例如今被描述成，以舉例的方式，與相關附圖有關，其中就像參考號代表元素并且其中:
圖1為本發(fā)明的一個微流體分析儀用于病理學檢測與相關實施例的方案設計；
圖2為本發(fā)明的一個微流體分析儀用于病理學檢測與又一個相關實施例的典型方案設計；
圖3為本發(fā)明的一個微流體分析儀用于病理學檢測與又一個相關實施例的典型方案設計；
圖4為本發(fā)明的一個微流體分析儀用于病理學檢測與又一個相關實施例的典型方案設計；
圖5為本發(fā)明的一個微流體分析儀用于病理學檢測與又一個相關實施例的典型方案設計；
圖6a顯示了產(chǎn)生于被刺激細胞的一個或多個光信號；
圖6b顯示了產(chǎn)生于當細胞被一個或多個以預設角度設置的光刺激通道刺激時，一個或多個光信號強度表。
[0013]圖7為本發(fā)明的用于病理學檢測與相關實施例的系統(tǒng)框圖；
圖8為一個硬件系統(tǒng)的結構框圖，以檢測和分析產(chǎn)生于被刺激細胞的光信號；
圖9a顯示了一個在樣本溶液上附帶的激光脈沖表；
圖9b顯示了一個檢測的脈沖附圖，其中檢測的脈沖附圖振幅被減少；并且圖10為本發(fā)明的用戶界面，用于泡沫的數(shù)據(jù)表示檢測與一個相關的實施例。
[0014]這些附圖指出了本發(fā)明的實施例，它只是為了說明的目的。一個本領域的技術人員可以輕易的從以下的描述中認出相關的具體的結構和方法，而此結構和方法可能并非與本發(fā)明所描述的原則所背離。
具體實施例
[0015]上文概述了本發(fā)明的特征和技術優(yōu)點。為了更好的理解本發(fā)明，接下來本發(fā)明額外的特征和優(yōu)點將會在下文中詳細描述。這形成了本發(fā)明的權利要求的主體。應當理解，對于本領域的技術人員，可能輕易的利用本發(fā)明的概念和具體的實施例，做一個基本的修改或設計成其它結構以用于實現(xiàn)與本發(fā)明相同的目的。也應當認識到，對于本領域的技術人員，如同附屬權利要求上解釋的那樣，這些相同的構造并沒有脫離本發(fā)明的精神和范圍。這些技術特征將會結合以下的描述和附圖被更好的理解。然而，應當理解，每附圖只是用于解釋和描述的目的，而不是作為本發(fā)明的限定。
[0016]在一個實施例中，本發(fā)明提供一個用于病理學檢測的微流體分析儀。
[0017]圖1為本發(fā)明的一個微流體分析儀，用于病理學檢測與相關實施例的方案設計。所述微流體分析儀包括多個緩沖通道(BI，B2)，一個樣本通道(S)，一個中心流動通道(C)，一個廢品儲存器(W)，多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)，多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)，多個第一檢測器(未在附圖中顯示)，一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)4a)，一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)4b)和一個或多個第二檢測器(未在附圖中顯示)。每個所述多個緩沖通道(BI和B2)被配置用于承載緩沖溶液而樣本通道(C)被配置用于承載樣本溶液。所述緩沖溶液包括，但并非限定于，水，熒光素溶液，血清，磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)和其它鹽緩沖溶液。所述樣本溶液包括,但并非限定于,血小板,培養(yǎng)細胞線中的單細胞,血清,細菌,純凈液體中的污染物和被貼上發(fā)光標簽的細胞。所述中心流動通道(C)被配置分別從所述多個緩沖通道(BI，B2 )和所述樣本通道(S )接收緩沖溶液和樣本溶液。所述多個緩沖通道(BI，B2 )和所述樣本通道(S)匯聚于所述中心流動通道(C)的輸入端，以便在所述中心流動通道(C)內(nèi)形成狹窄路徑，便于所示樣本溶液在所述中心流動通道(C)內(nèi)流動。所述樣本通道(S)的狹窄路徑允許樣本溶液內(nèi)的每個細胞線性運動。在一個實施例中，所述多個緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)被配置成一個微流體芯片。所述廢品儲存器(W)被配置在所述中心流動通道(C)的出料側以在從中心流動通道分析后收集樣本。
[0018]在一個實施例中，每個所述多個緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)和一個輸液泵連接以控制緩沖溶液和樣本溶液的流動，使它們分別流過所述多個緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)。與每個所述多個緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)相連的輸液泵被連接至一個計算單元。每個所述多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)被垂直放置在所述中心流動通道。
[0019]每個所述多個第一光刺激通道(FRl，F(xiàn)R2)與一個第一套光纖耦合激光源連接。所述多個第一光刺激通道終止于一個透鏡光纖。每個所述多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)被以和每個所述多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)的光軸相隔預設的角度分別放置。在一個實施例中，每個所述多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)中的預設角度被設置為分別與每個所述多個第一光刺激通道(FRl，F(xiàn)R2)的光軸相隔±5度角。
[0020]所述第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)連接，以刺激樣本溶液(S)中的細胞流過所述中心流動通道(C)。被刺激的細胞產(chǎn)生一個或多個第一光信號。所述一個或多個第一光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。每個所述多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)來自被刺激細胞中收到一個或多個第一光信號。
[0021 ] 在一個實施例中，每個所述多個第一檢測器被放置在每個所述多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)。所述多個第一檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器,娃基光探測器,和娃雪崩光電二極管稱合的光纖之一。所述在FR3上的第一檢測器檢測一個所述一個或多個第一光信號。被所述第一光探測器檢測的一個所述一個或多個第一光信號是來自被刺激細胞正向散射的信號。所述在FR3上的第一檢測器發(fā)送被檢測的一個所述一個或多個第一光信號至一個計算單元。所述計算單元分析來自被刺激細胞正向散射的信號，對其進行病理學檢測。來自被刺激細胞正向散射的信號的強度大約與細胞的大小或直徑成比例。所述在FR4上的第一檢測器檢測一個所述一個或多個第一光信號。被所述第一光探測器檢測的一個所述一個或多個第一光信號是來自被刺激細胞正向散射的信號。所述在FR4上的第一檢測器發(fā)送被檢測的一個所述一個或多個第一光信號至一個計算單元。所述計算單元分析來自被刺激細胞正向散射的信號，對其進行病理學檢測。從所述多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)收到的控制反饋被用于控制一個注射泵，此泵依次控制緩沖溶液和樣本溶液的流動速率。
[0022]在一個實施例中，每個所述一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)4a)以預設的角度放置于所述中心流動通道(C)。例如，F(xiàn)l被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)而F4被以45度角放置于所述中心流動通道(C)。每個所述一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)4a)與一個第二套光纖耦合激光源相連，以刺激樣本溶液中的細胞。所述第二套光纖耦合激光源終止于一個透鏡光纖。所述第二光刺激通道Fl與一個終止于一個透鏡光纖的第二套光纖耦合激光源相連，所述第二光刺激通道F4a與一個終止于一個透鏡光纖的第二套光纖耦合激光源相連。與每個所述一個或多個第二光刺激通道Fl和F4a相連的所述第二套光纖耦合激光源刺激了樣本溶液中的細胞，以產(chǎn)生一個或多個第二光信號。所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
[0023]每個所述一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)4b)接收所述一個或多個第二光信號。每個所述一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)4b)以預設的角度放置于所述中心流動通道(C)。F2被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)而F4b被以45度角放置于所述中心流動通道(C)。Fl和F2的光軸是相同的。所述微流體分析儀進一步包括一個或多個第二檢測器，其特征在于，每個所述一個或多個第二檢測器放置在每個一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)4b)。所述多個第二檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器,娃基光探測器，和娃雪崩光電二極管稱合的光纖之一。所述一個或多個第二檢測器檢測一個所述一個或多個第二光信號。在F2上的所述第二檢測器檢測來自被刺激細胞上發(fā)出的熒光信號并發(fā)送檢測到的熒光信號至所述計算單元。所述計算單元分析熒光信號以用于病理學檢測。在F4b上的所述第二檢測器檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號并發(fā)送檢測信號至所述計算單元。所述計算單元分析了從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號以用于病理學檢測。在一個實施例中，一個所述一個或多個第二光接收通道被配置了一個從每個所述一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)4a)發(fā)出的激光，此激光通過布拉格光纖光柵濾光片發(fā)出。例如，F(xiàn)2被配置成布拉格光纖柵格。
[0024]圖2結合另一個本發(fā)明的實施例說明了一個微流體分析儀用于病理學檢測的方案設計。所述微流體分析儀包含兩個緩沖通道(BI，B2)和一個樣本通道(S)。所述緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)匯聚于所述中心流動通道(C)的輸入端。所述微流體分析儀包含多個以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)的第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)。所述第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道(FRl，F(xiàn)R2)連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道(C)以產(chǎn)生一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀包含多個所述第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)，此通道分別以和光軸相隔預設的角度放置，以接收所述一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀使用光通道FR1，F(xiàn)R2，F(xiàn)R3和FR4進行病理學檢測的過程在圖1中顯示。
[0025]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光刺激通道。在這個實施例中，所述微流體分析儀包含一個第二光刺激通道(F1)，它以預設的角度放置于所述中心流動通道。例如，F(xiàn)l被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)。此外，F(xiàn)l與一個第二套光纖耦合激光源相連，以刺激樣本溶液中的細胞。所述第二套光纖耦合激光源終止于一個透鏡光纖。與Fl相連的所述第二套光纖耦合激光源刺激樣本溶液中的細胞以產(chǎn)生一個或多個第二光信號。所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
[0026]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光接收通道以接收所述一個或多個第二光信號。在此實施例中，所述微流體分析儀包含一個第二光接收通道(F2)，它被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)。此外，F(xiàn)l和F2的光軸是相同的。所述微流體分析儀包含一個或多個第二檢測器，其特征在于，每個所述一個或多個第二檢測器放置在所述第二光接收通道(F2)上。所述多個第二檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和硅雪崩光電二極管耦合的光纖之一。所述一個或多個第二檢測器檢測一個所述一個或多個第二光信號。在F2上的所述第二檢測器檢測來自被刺激細胞上發(fā)出的熒光信號并發(fā)送檢測到的熒光信號至所述計算單元。所述計算單元分析熒光信號以用于病理學檢測。在一個實施例中，F(xiàn)2被配置了一個從所述第二光刺激通道(Fl)發(fā)出的激光,此激光通過布拉格光纖光柵濾光片發(fā)出。
[0027]所述微流體分析儀也包含多個第三檢測器。每個所述第三檢測器被放置在所述中心流動通道(C)的中軸和一個多個第一光刺激通道的光軸交叉點上，以檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的一個所述一個或多個第一光信號。所述第三檢測器被放置在所述中心流動通道的中軸和F2的光軸交叉點上。
[0028]所述第三檢測器檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的光信號。所述第三檢測器發(fā)送檢測到的光信號至一個所述計算單元，其特征在于，所述計算單元分析從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號以用于病理學檢測。每個所述第三檢測器被放置在所述中心流動通道的中軸和一個或多個第二光刺激通道的光軸交叉點上，以檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的一個所述一個或多個第二光信號。
[0029]又一個第三檢測器也被放置在在所述中心流動通道(C)的中軸和Fl的光軸交叉點上。所述第三檢測器檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的光信號。所述第三檢測器發(fā)送檢測到的光信號至一個所述計算單元，其特征在于，所述計算單元分析從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號以用于病理學檢測。
[0030]圖3結合另一個本發(fā)明的實施例說明了一個微流體分析儀用于病理學檢測的方案設計。所述微流體分析儀包含兩個緩沖通道(BI，B2)和一個樣本通道(S)。所述緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)匯聚于所述中心流動通道(C)的輸入端。所述微流體分析儀包含多個以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)的第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)。所述第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道(FRl，F(xiàn)R2)連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道(C)以產(chǎn)生一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀包含多個所述第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)，此通道分別以和光軸相隔預設的角度放置，以接收所述一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀使用光通道FR1，F(xiàn)R2，F(xiàn)R3和FR4進行病理學檢測的過程在圖1中顯示。
[0031]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)3a和F4a)。每個所述一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)3a和F4a)以預設的角度放置在所述中心流動通道(C)。Fl被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)，而F3a和F4a被以45度角放置于所述中心流動通道(C)。Fl, F3a和F4a與第二套光纖耦合激光源相連以刺激樣本溶液中的細胞。Fl與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。F3a與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。F4a與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。與每個所述多個第二光刺激通道Fl，F(xiàn)3a和F4a相連的所述第二套光纖耦合激光源刺激樣本溶液中的細胞以產(chǎn)生一個或多個第二光信號。所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
[0032]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)3b和F4b)以接收一個或多個第二光信號。例如，F(xiàn)2被垂直放置于所述中心流動通道(C)。而F3b被以45度角放置于所述中心流動通道(C)，而F4b被以±40度角放置于所述中心流動通道(C)。在另一個實施例中，F(xiàn)4b如圖4中所示以45度角放置于所述中心流動通道(C)。所述微流體分析儀包含一個或多個第二檢測器，其特征在于，每個所述一個或多個第二檢測器放置在每個所述一個或多個第二光接收通道(F2，F(xiàn)3b和F4b)。所述多個第二檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和硅雪崩光電二極管耦合的光纖之一。所述一個或多個第二檢測器檢測一個所述一個或多個第二光信號。在F2上的所述第二檢測器檢測來自被刺激細胞上發(fā)出的熒光信號并發(fā)送檢測到的熒光信號至所述計算單元。所述計算單元分析熒光信號以用于病理學檢測。在一個實施例中，F(xiàn)2被配置了一個從所述一個或多個第二光刺激通道發(fā)出的激光，此激光通過布拉格光纖光柵濾光片發(fā)出。F3b上的所述第二檢測器檢測到從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號并發(fā)送檢測信號至所述計算單元。所述計算單元分析從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號以用于病理學檢測。F4b上的所述第二檢測器檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號并發(fā)送檢測信號至所述計算單元。所述計算單元分析從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號以用于病理學檢測。
[0033]圖5結合另一個本發(fā)明的實施例說明了一個微流體分析儀用于病理學檢測的方案設計。所述微流體分析儀包含兩個緩沖通道(BI，B2)和一個樣本通道(S)。所述緩沖通道(BI，B2)和所述樣本通道(S)匯聚于所述中心流動通道(C)的輸入端。所述微流體分析儀包含多個以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)的第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)。所述第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道(C)以產(chǎn)生一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀包含多個所述第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)，此通道分別以和光軸相隔預設的角度放置，以接收所述一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀包含多個第一光接收通道(FR3，F(xiàn)R4)被以預設的角度和每個所述多個第一光刺激通道(FR1，F(xiàn)R2)的光軸分別放置，以接收所述一個或多個第一光信號。所述微流體分析儀使用光通道FRl，F(xiàn)R2，F(xiàn)R3和FR4進行病理學檢測的過程在圖1中顯示。
[0034]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)3a和F4a)。每個所述一個或多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)3a和F4a)以預設的角度放置在所述中心流動通道(C)。Fl被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)，而F3a和F4a被以45度角放置于所述中心流動通道(C)。Fl, F3a和F4a與第二套光纖耦合激光源相連以刺激樣本溶液中的細胞。Fl與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。F3a與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。F4a與一個第二套光纖耦合激光源相連，并終止于一個透鏡光纖。與每個所述多個第二光刺激通道(Fl，F(xiàn)3a和F4a)相連的所述第二套光纖耦合激光源刺激樣本溶液中的細胞以產(chǎn)生一個或多個第二光信號。所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
[0035]所述微流體分析儀包含一個或多個第二光接收通道以接收一個或多個第二光信號。在此實施例中，所述微流體分析儀包含一個第二光接收通道(F2)，它被以垂直的角度放置于所述中心流動通道(C)。所述微流體分析儀包含一個或多個第二檢測器，其特征在于，每個所述一個或多個第二檢測器放置在每個所述一個或多個第二光接收通道。所述一個或多個第二檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和硅雪崩光電二極管耦合的光纖之一。每個所述一個或多個第二檢測器檢測一個所述一個或多個第二光信號。在F2上的所述第二檢測器檢測來自被刺激細胞上發(fā)出的熒光信號并發(fā)送檢測到的熒光信號至所述計算單元。所述計算單元分析熒光信號以用于病理學檢測。在一個實施例中，F(xiàn)2被配置了一個從所述一個或多個第二光刺激通道發(fā)出的激光，此激光通過布拉格光纖光柵濾光片發(fā)出。
[0036]在一個實施例中，來自被刺激細胞正向散射的信號提供了樣本溶液中細胞的大小和存活信息。從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號提供了細胞的表面光潔度和內(nèi)部結構(如間隔尺寸)的信息。熒光信號是用來計數(shù)對那些被污染的細胞做的特殊標記。
[0037]圖6a顯示了一個或多個產(chǎn)生于被刺激細胞的光信號。當樣本溶液中的細胞被一個光纖耦合激光源刺激時，細胞會產(chǎn)生一個或多個光信號。所述一個或多個光信號是來自被刺激細胞正向散射的信號和從其它方向(直角方向)而非來自被刺激細胞正向散射的信號。所述產(chǎn)生的一個或多個光信號將會擁有同光纖耦合激光源相同的波長。如圖6b所示，一個或多個光信號的強度在小角度是較高，而在大角度是較小。來自被刺激細胞正向散射的信號強度大約和細胞的大小或半徑成比例，而從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號強度大約和細胞或細胞表面復合物的顆粒結構數(shù)量成比例。
[0038]在一個實施例中，來自被刺激細胞正向散射的信號(FS )和從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號(LS)被用于分辨人體血液樣本中淋巴細胞，單核細胞和粒性白細胞的區(qū)別。淋巴細胞由于更小，并呈顆粒狀，它們顯示出更弱的FS和LS。嗜中性粒細胞由于更大，并呈顆粒狀，它們顯示出更強的FS和LS。單核細胞的信號強度介于淋巴細胞和嗜中性粒細胞之間。
[0039]圖7結合另一個本發(fā)明的實施例說明了一個病理學檢測的系統(tǒng)附圖。系統(tǒng)包含一個微流體分析儀，激光器件，一個計算單元，檢測器和泵電子器件和多個注入泵。所述微流體分析儀包含多個緩沖通道(BI，B2)，一個樣本通道(S)，一個中心流動通道(C)，一個廢品儲存器(W)和多個光通道(FR1，F(xiàn)R2，F(xiàn)R3，F(xiàn)R4，F(xiàn)l, F2，F(xiàn)4a和F4b)，這些光通道被以預設的角度放置在一個中心流動通道(C)上。每個所述多個注入泵與每個所述多個緩沖通道(BI，B2)及所述樣本通道(S)相連。所述注入泵控制緩沖溶液和所述樣本溶液的流動，這些溶液分別流過所述多個緩沖通道(BI，B2)及所述樣本通道(S)。每個所述多個注入泵被檢測器和泵電子器件所控制，其特征在于，所述檢測器和所述泵電子器件提供所需要的緩沖溶液和樣本溶液以提供分析。FRl和FR2被用于刺激流過中心流動通道(C)的樣本溶液中的細胞，其特征在于，被刺激的細胞產(chǎn)生一個或多個第一光信號。FR3和FR4被用于接收由被刺激細胞產(chǎn)生的一個或多個第一光信號。Fl和F4a被用于刺激流過中心流動通道(C)的樣本溶液中的細胞，其特征在于，被刺激的細胞產(chǎn)生一個或多個第二光信號。F2和F4b被用于接收由被刺激細胞產(chǎn)生的一個或多個第二光信號。所述激光器件包括第一套光纖耦合激光源和一個第二套光纖耦合激光源。所述第一套光纖耦合激光源終止于一個透鏡光纖并且與FRl和FR2相連，所述第二套光纖耦合激光源終止于一個透鏡光纖并且與Fl和F4a相連。所述激光器件控制用于在樣本溶液中刺激細胞的激光的波長。至少一個第一光探測器被放置在FR3和FR4上，以檢測至少一個(一個或多個第一光信號)。被檢測到的一個(一個或多個第一光信號)被發(fā)送到所述計算單元。所述計算單元分析接收到的檢測信號以用于病理學檢測。所述檢測器連同泵電子設備控制控制所述第一和第二光探測器。
[0040]圖8說明了一個硬件系統(tǒng)檢測和分析從一個被刺激細胞產(chǎn)生的光信號的框圖。例如，所述微流體分析儀使用一個雪崩光敏二極管作為一個光探測器以檢測一個所述一個或多個來自被刺激細胞產(chǎn)生的光信號。這些被檢測的光信號被送至可編程門陣列(FPGA)或是一個計算單元，它們通過一個模數(shù)轉換器(ADC)來進行分析，因為被檢測的光信號是模擬的。從APD檢測到的模擬光信號被ADC轉換成數(shù)字數(shù)據(jù)并被提供至FPGA。模數(shù)轉換器(ADC)的采樣率被FPGA所控制，并被設置成72MHz。FPGA控制一個激光驅(qū)動器，偏量電壓被提供至APD。APD通過一個數(shù)模轉換器(DAC)連接至FPGA。ATO的偏量電壓典型的范圍是30V至70V，并且它被FPGA所控制以使檢測器的靈敏性最大化，以減少錯誤檢測。激光驅(qū)動控制激光源的波長使其能夠入射到樣本溶液上。一個5V電源被提供至ADC并且一個3.3V電源被提供至DAC和APD偏量。
[0041]APD被用作檢測器以擁有更好的靈敏性。一個跨阻抗放大器被用于把入射功率轉換成電壓。一個激光驅(qū)動器有兩個通道，每個都可以在脈沖狀態(tài)時提供合適的電流，這會允許兩個不同的激光器處于低電流運行，或是一個激光器運行于更高能量。運行的激光器的數(shù)量可以在未來隨著使用更多激光驅(qū)動芯片而增加。在激光源的入射光照射下，附著在細胞上的分解物會發(fā)散出熒光。這些發(fā)散的信號被所述光接收通道截取，然后傳送到一個或多個檢測器。這些抵達檢測器的光會在APD內(nèi)引起一個成比例的電流?？缱杩狗糯笃鬓D換電流至一個成比例的電壓。在這個實施例中，模數(shù)轉換器(ADC)的采樣率被FPGA所控制，并被設置成72MHz。APD的偏量電壓典型的范圍是30V至70V，并且它被FPGA所控制以使檢測器的靈敏性最大化，以減少錯誤檢測。
[0042]在一個實施例中，APD的的偏量電壓在未來會被第二門脈沖電壓的應用所激發(fā)。在一個實施例中，門脈沖電壓被從激光激勵源中獲取。在另一個實施例中，門脈沖電壓從FPGA中產(chǎn)生。激勵信號和門檢測的調(diào)制有助于增加信號的信噪比。
[0043]在一個實施例中，所述微流體分析儀通過調(diào)整樣本及其保護液體的流速來監(jiān)視和控制樣本的流速。所述微流體分析儀打開一個小功率紅外線激光器，并產(chǎn)生一個正弦信號以調(diào)制此激光。此光線被所述光接收通道檢測，從而激勵光通道形成一條直線。被檢測的光線也被正弦調(diào)制。一個電子的低通濾波器移除了光噪音并且此過濾后的正弦信號將會被發(fā)送至一個混合器。在混合器中，此正弦信號將會與另一個正弦信號相乘以產(chǎn)生一個D.C電壓。當激勵光通過細胞被收集光纖所阻擋時，D.C電壓減少。D.C電壓使用一個比較器同一個門限電壓相比較，比較器的輸出信號被傳送至一個微控制器。一個第二對光纖在未來放置在流體通道的下游并且從那個電路導出的D.C電壓也會被送到此微控制器。所述微控制器將會有一個時鐘以測量兩個比較器信號的時間差并計算細胞的速度。所述微控制器改變了緩沖溶液和樣本溶液的流速，因此細胞的速度是一個常數(shù)。
[0044]在一個實施例中，所述微流體分析儀打開/關閉激勵激光并檢測了來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和熒光信號。所述微流體分析儀包括一個大電流驅(qū)動器，以適應高功率脈沖激光器。所述微流體分析儀中的一個微控制器產(chǎn)生一個數(shù)字脈沖，此脈沖被發(fā)送至大電流驅(qū)動器以產(chǎn)生一個脈沖電流，此電流隨后促使激光器產(chǎn)生一個光脈沖。同時，所述微流體分析儀產(chǎn)生三個另一脈沖的復制品。每個復制品將會當作這三個檢測器的門脈沖。每個檢測器的門脈沖在光脈沖擊中檢測器時同時應用于檢測器。每個檢測器的輸出信號被傳送到一個比較器并且它的電壓會與門限電壓相比較。比較器的輸出信號被發(fā)送至所述微控制器，此微控制器記錄了在每個檢測器內(nèi)的當前信號。所述微控制器隨后發(fā)送信息至一個計算單元以用于未來的處理，此計算單元隨后向用戶顯示一個圖形用戶界面。在一個實施例中，脈沖發(fā)生器，比較器和模數(shù)轉換器是所述微控制器的內(nèi)部組件。FPGA內(nèi)的應用程序使用激光功率和平均數(shù)作為輸入，計算和畫出在mV內(nèi)被APD檢測的功率。從激光源傳來的調(diào)制光，與光纖相連，被射入中心流動通道(C)，其中樣本溶液和緩沖溶液通過中心流動通道流過。如圖9a所示，此激光使用一個激光驅(qū)動電路，在一個很短的時間內(nèi)(?1nS,重復率為IMHz)被激發(fā)，并被一個數(shù)字電路控制。此檢測器的信號使用一個模數(shù)轉換器(ADC)轉成數(shù)字化。ADC的取樣率由FPGA設置。未來，通過平均每一微秒的采樣信號以減少噪聲。這些激光參數(shù)，如脈沖寬度，功率，重復時間，Aro偏離電壓，平均數(shù)可以通過一個用戶界面由用戶設置。每個周期的最大值被作為輸出發(fā)送。當樣本通過激光束時，光線被抵達的檢測器所阻止，脈沖的振幅減少，圖案被顯示在用戶界面板上，如圖9b所示。
[0045]在一個實施例中，一個布拉格光纖光柵濾光片被添加在所述光接收通道，以至于所述光刺激通道和所述光接收通道形成了一個具有高平均持續(xù)功率的激光腔。附著在細胞上的分解物被收集在光接收通道內(nèi)的光信號的下降所檢測到。
[0046]為了獲得連續(xù)數(shù)據(jù)采集，在用戶界面中提供了一個開始和一個停止按鈕，如圖10所示。附圖中顯示的數(shù)據(jù)是以水作留白以空氣作樣本實現(xiàn)的。當激光通過空氣泡時，光線的強度浸潤值會有一個下降。圖10說明了一個用于氣泡的數(shù)據(jù)表現(xiàn)的用戶界面，它通過所述微流體分析儀使用一個紅外脈沖激光和一個雪崩光電二極管檢測器檢測正向散射損耗來實現(xiàn)。
[0047]檢測的速度和角度被優(yōu)化，以便從小樣本中獲取快速散射信號。紅外線激光被一個可見的激勵源所替代，以隨著散射信號收集熒光信號。
[0048]為了克服背景描述中提到的缺點，本發(fā)明提供了一個微流體分析儀，它不僅檢測有熒光標簽的免疫細胞，而且給出諸如感染水平的數(shù)量信息。本發(fā)明所述微流體分析儀，如圖1中所示，極大的降低了 HIV篩查中心的基礎建設成本。傳統(tǒng)的流式血細胞計數(shù)儀售價范圍是50-100 Iakh (十萬盧比)，而當前的微流體分析儀大約為2-4 Iakh (十萬盧比)。相應的，這會使政府有動機去支持建設新的HIV篩查中心。
[0049]所述微流體分析儀不僅僅用于HIV監(jiān)測，也可以用于一個其它廣泛的應用，如用于細胞計數(shù)的大學模型，計算源于非熒光細胞人口背景的細胞，這對細胞培養(yǎng)化驗，環(huán)境控制，如水污染計數(shù)，血球計數(shù)和腫瘤學應用以檢測細胞增殖都有重要意義。
[0050]所述微流體分析儀具有如下的優(yōu)點:低成本，便于攜帶，低樣本采集量，易于使用，易于維護，易于修改和升級。
[0051]所述微流體分析儀可以和使用PIN光電二極管的廉價檢測技術一起使用。非線性震動光譜已經(jīng)和微流體設備結合以檢測細胞大小。
[0052]當前技術致力于尋求一種解決方案，它能解決在HIV測試中使用的傳統(tǒng)的流式血細胞計數(shù)儀的高成本和缺乏便攜性的問題。在與當前示量性HIV檢測技術比較中，本發(fā)明具有巨大的優(yōu)點。
[0053]最后，出于可讀性和教育性的目的，此說明書中使用的語言已經(jīng)被大部分的選擇過了，并且不會選擇那些具有描述性的限定的獨出心裁的主題。因而此發(fā)明的范圍并不被此詳細的描述所限定，但是被基于此應用的任何要求所限定。相應的，本發(fā)明的實施例規(guī)定為解說性的，而非限定的，以解釋下面的要求。
[0054]關于本質(zhì)上任何多個和/或單個條款在其中的使用，在本領域的技術人員可以從多數(shù)到單數(shù)和/或從單數(shù)到多數(shù)，翻譯成恰當?shù)奈谋竞?或應用。不同的單個/多個序列可以由于清晰的緣故明顯的被解釋。
[0055]除此之外,本發(fā)明的特征范圍由Markush組所描述,本領域的技術人員將會承認本發(fā)明也可以根據(jù)任何獨立成員或Markush的獨立的子成員所描述。
[0056]雖然本發(fā)明的不同方面和實施例在此被公開，但這些方面和實施例對本領域的技術人員來說將會是顯而易見的。這些不同方面和實施例的公開僅是用于說明的目的，而并非限定，下述權利要求指出了真正的保護范圍。
【權利要求】
1.一個微流體分析儀，用于病理學檢測，包括: 多個緩沖通道，其特征在于:每個所述多個緩沖通道承載緩沖溶液； 一個用以承載樣本溶液的樣本通道； 一個中心流動通道，被配置為接收緩沖溶液和樣本溶液，其中，所述多個緩沖通道和所述樣本通道匯聚于所述中心流動通道的輸入端，以便在所述中心流動通道內(nèi)形成狹窄路徑，便于所示樣本溶液在所述中心流動通道內(nèi)流動； 多個第一光刺激通道，被垂直放置在所述中心流動通道，其中，每個所述多個第一光刺激通道與一個第一套光纖耦合激光源連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道，以產(chǎn)生一個或多個第一光信號； 多個第一光接收通道，其中，多個第一光接收通道被以和每個所述多個第一光刺激通道的光軸相隔預設的角度分別放置，以接收一個所述一個或多個第一光信號； 多個第一檢測器，其中，被放置在每個所述多個第一光接收通道上的每個所述多個第一檢測器檢測到至少一個信號，此信號屬于所述一個或多個第一光信號； 一個或多個第二光刺激通道，其中，每個所述一個或多個第二光刺激通道以和所述中心流動通道以預設的角度放置，每個所述一個或多個第二光刺激通道與一個第二套光纖耦合激光源連接，以刺激樣本溶液中的細胞流過所述中心流動通道，以產(chǎn)生一個或多個第二光信號; 一個或多個第二光接收通道，其中，每個所述一個或多個第二光接收通道被以和所述中心流動通道預設的角度放置，以接收一個所述一個或多個第二光信號；和 一個或多個第二檢測器，其中，每個所述一個或多個第二檢測器被放置在每個所述一個或多個第二光接收通道上以檢測至少一個信號，此信號屬于所述一個或多個第二光信號。
2.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其進一步包括至少一個輸液泵與每個所述多個緩沖通道和樣本通道相連，其特征在于，至少一個輸液泵控制緩沖溶液和樣本溶液的流動，使它們分別流過所述多個緩沖通道和所述樣本通道。
3.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，所述多個緩沖通道和所述樣本通道被配置在一個微流體芯片上。
4.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其進一步包括多個第三檢測器，其特征在于，每個所述多個第三檢測器被放置在: 所述中心流動通道的中軸和一個所述多個第一光刺激通道的光軸交叉點上，以檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的一個所述一個或多個第一光信號；和 所述中心流動通道的中軸和一個所述一個或多個第二光刺激通道的光軸交叉點上，以檢測從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的一個所述一個或多個第二光信號。
5.根據(jù)權利要求4所述的微流體分析儀，其特征在于，每個多個第三檢測器至少是銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和硅雪崩光電二極管稱合的光纖中的一個。
6.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，每個所述多個第一光接收通道中的預設角度被設置為分別與每個所述多個第一光刺激通道的光軸相隔±5度角。
7.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，所述一個或多個第一光信號和所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞的正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
8.根據(jù)權利要求7所述的微流體分析儀，其特征在于，一個或多個第一光信號，其中之一被每個所述多個第一檢測器檢測到的是來自被刺激細胞的正向散射的信號。
9.根據(jù)權利要求7所述的微流體分析儀，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被垂直放置在所述中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器從所述一個或多個第二光信號中檢測到熒光信號。
10.根據(jù)權利要求7所述的微流體分析儀，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被以45度角放置在所述中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器檢測到從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號。
11.根據(jù)權利要求7所述的微流體分析儀，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被以±40度角放置在所述中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器檢測到從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號。
12.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，每個所述多個第一檢測器至少是銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和硅雪崩光電二極管稱合的光纖之一。
13.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，每個所述一個或多個第二檢測器至少是與銦鎵砷化物(InGaAs)檢測器，硅基光電倍增器(S1-PMT)檢測器，硅基光探測器，和娃雪崩光電二極管稱合的光纖之一。
14.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道相連，第二套光纖耦合激光源與每個所述一個或多個第二光刺激通道相連，它們都終止于一個透鏡光纖。
15.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，一個所述一個或多個第二光接收通道被配置了一個從每個所述一個或多個第二光刺激通道發(fā)出的激光，此激光通過布拉格光纖光柵濾光片發(fā)出。
16.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，每個所述一個或多個第二刺激光學通道被預設放置的角度范圍為40度至90度。
17.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其特征在于，每個所述一個或多個第二接收光學通道被預設放置的角度范圍為40度至90度。
18.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其進一步包括，至少一個廢品儲存器(W)以便在中心流動通道分析后收集廢棄樣本。
19.根據(jù)權利要求1所述的微流體分析儀，其進一步包括一個計算單元，它具有: 接收來自每個所述多個第一光探測器和每個所述多個第三光探測器上檢測的所述一個或多個第一光信號； 接收來自每個所述多個第二光探測器和每個所述多個第三光探測器上檢測的所述一個或多個第二光信號；分析收到的一個或多個第一光信號和所述一個或多個第二光信號，以用于病理學檢測。
20.一種使用一個微流體分析儀用于病理學檢測的方法，包括: 分別通過一個中心流動通道流過多個緩沖通道和一個樣本通道接收緩沖溶液和樣本溶液，其特征在于，所述多個緩沖通道和所述樣本通道匯聚在所述中心流動通道的輸入端，以便在所述中心流動通道內(nèi)形成狹窄路徑，便于所示樣本溶液在所述中心流動通道內(nèi)流動； 通過多個第一套光纖耦合激光源流過所述中心流動通道刺激樣本溶液中的細胞，以產(chǎn)生一個或多個第一光信號，其中，多個第一套光纖耦合激光源分別連接多個第一光刺激通道; 通過多個第一檢測器檢測一個所述一個或多個第一光信號，其中，每個所述多個第一檢測器分別放置在每個多個第一光接收通道； 通過一個計算單元接收檢測的一個所述一個或多個第一光信號，以用于病理學檢測； 通過多個第二套光纖耦合激光源刺激樣本溶液中的細胞，以產(chǎn)生一個或多個第二光信號，其中，多個第二套光纖耦合激光源分別連接一個或多個第二光刺激通道； 通過一個或多個第二檢測器檢測至少一個所述一個或多個第二光信號，其中，每個所述一個或多個第二檢測器分別放置在一個或多個第二光接收通道； 通過一個計算單元接收檢測的至少一個所述一個或多個第二光信號，以用于病理學檢測。
21.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，緩沖溶液從一組包括水，熒光素溶液，血清，磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)和其它含鹽溶液中選擇。
22.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，樣本溶液從一組包括血細胞，源于培養(yǎng)細胞系的單細胞，血清，細菌，純液體和有熒光標簽的細胞中的污染物中選擇。
23.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，所述一個或多個第一光信號和所述一個或多個第二光信號至少是來自被刺激細胞正向散射的信號，從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號，和來自被刺激細胞中發(fā)出的熒光信號之一。
24.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被垂直放置在中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器從一個或多個第二光信號中檢測突光信號。
25.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被以45度角放置在所述中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器檢測到從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號。
26.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，當一個所述一個或多個第二光接收通道被以±40度角放置在所述中心流動通道時，一個所述一個或多個第二檢測器檢測到從其它方向而非來自被刺激細胞正向散射的信號。
27.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，一個或多個第一光信號，其中之一被每個所述多個第一檢測器檢測到的是來自被刺激細胞正向散射的信號。
28.根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，第一套光纖耦合激光源與每個所述多個第一光刺激通道相連，第二套光纖耦合激光源與每個所述一個或多個第二光刺激通道相連，它們都終止于一個透鏡光纖。
【文檔編號】B81B1/00GK104136922SQ201380010282
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2013年2月1日 優(yōu)先權日:2012年2月4日
【發(fā)明者】塔斯里馬利夫·賽義德, 蘇迪普·蒙達爾, 阿尼爾·普拉哈卡, H·克里什納墨菲 申請人:細胞和分子平臺中心（C-Camp）