重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其是采用序列生物強化的修復策略，先接入芽孢桿菌和枝頂孢霉菌，處理一段時間后再接入黃孢原毛平革菌，使芽孢桿菌和枝頂孢霉菌、黃孢原毛平革菌聯(lián)合作用，實現(xiàn)現(xiàn)場修復石油污染土壤或油泥，顯著地提高了重度石油污染土壤或油泥的降解效率，大大縮短修復周期。CCTCC NO: M 201611720160314CCTCC NO: M201611620160314
【專利說明】
重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于重度石油污染土壤或油泥的修復技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及對油田開采區(qū)利 用微生物菌群修復處理石油污染的土壤或油泥的新方法。 技術(shù)背景
[0002] 隨著人類對石油產(chǎn)品需求量不斷增大，石油的開采量也越來越大。在采用過程中， 一旦發(fā)生石油泄露事故，便極易造成產(chǎn)油區(qū)附近土壤、沉積物及水體的污染。石油污染的土 壤的主要類型包括石油開采過程中產(chǎn)生的落地原油污染;含油礦渣、污泥、垃圾的堆置;采 油廢水排放造成的土壤污染;石油泄露事件污染;大氣污染及汽車尾氣的排放(與大氣中的 顆粒物質(zhì)結(jié)合、沉降進入土壤造成污染）；其他污染源，特別是石油開采過程中產(chǎn)生的落地 原油，已成為石油污染土壤的重要來源。
[0003] 目前，對于石油污染土壤的處理技術(shù)主要包括物理方法、化學方法與生物處理方 法。與物理、化學修復污染土壤技術(shù)相比，生物修復技術(shù)具有成本低，不破壞植物生長所需 要的土壤環(huán)境，污染物處理安全，無二次污染，處理效果好，操作簡單等優(yōu)點而備受親萊。
[0004] 在多種生物修復策略中，生物強化（B i 〇 a u g m e n t a t i ο η )和生物刺激 (Biostimulation)在實踐中應(yīng)用較多，尤其是生物強化。越來越多的實踐事實證明，生物強 化策略在特定條件下是有助于污染土壤的修復，尤其是在含氯廢水或土壤的修復過程中。 影響生物強化修復策略成功與否的主要因素有生物強化菌株對環(huán)境的耐受能力、對污染物 的代謝潛力及污染物的生物可利用性等。除此之外，環(huán)境因子如溫度、濕度、PH、透氣性和營 養(yǎng)物質(zhì)含量等都是影響生物強化有效性的重要元素。
[0005] 法德國家環(huán)境技術(shù)中心的Bouchez、Patureau等曾證明，強化微生物的使用不當很 可能造成微生物在接種后很快便開始出現(xiàn)消亡，或者不能針對實際污染環(huán)境中的污染物種 類進行有效的修復，此時的降解效果往往不理想。即便這些強化微生物沒有很快地被吞噬 掉，其對污染物的降解也很快進入了 一個平臺期，降解速率也不再提高，且微生物數(shù)量及活 性也都開始下降，這種情況下便很難保證修復策略的成功。除此之外，R〇drig Uez、Pelaez 等證明了生物強化修復策略中的重接種策略雖然提高了污染物的降解效率，然而其修復的 起始污染水平往往較低，且在一定程度上增加了實際的修復成本。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法， 是一種新的利用真菌-細菌菌群的序列生物強化的修復策略，可以顯著地提高重度石油污 染土壤或油泥的降解效率，特別是對于難降解的多環(huán)芳香烴效果明顯。
[0007] 本發(fā)明所涉及的三種菌分別為芽孢桿菌、枝頂孢霉菌以及黃孢原毛平革菌，其中： 芽抱桿菌Bacillus sp.，菌株保藏號CCTCC Ν0:ΑΒ 2014248,屬于已知固體菌劑，該菌菌落 呈乳白色，菌落圓形，表面光滑、凸起，邊緣整齊，背面顏色與正面一致，無色素分布。枝頂孢 霉菌Acremonium sp.Y0997,菌株保藏號為CCTCC Ν0:Μ 2016117,保藏單位是中國典型培養(yǎng) 物保藏中心，地址:武漢武漢大學，保藏日期是2016年3月14日，該菌菌落呈白色，菌落圓 形，背面奶油色至赭黃色，菌絲無色，光滑且具隔膜，孢子囊梗直接從菌絲上長出，呈錐形多 單生，分生孢子無色，光滑，形成簇狀或鏈狀，長紡錘形，兩頭尖，未見厚垣孢子。黃孢原毛平 革菌Phanerochaete sp.F0996,菌株保藏號為CCTCC N0:M2016116,保藏單位是中國典型培 養(yǎng)物保藏中心，地址:武漢武漢大學，保藏日期是2016年3月14日，該菌菌落白色，圓形，背 面無色，菌落僅有少量凸起;菌絲為無色，蓬松棉絮狀，隨著培養(yǎng)時間的延長，絨毛狀凸起逐 漸變平，菌絲消失，形成粉末孢子。
[0008] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：
[0009] 本發(fā)明的一種重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法由以下步驟組 成：
[0010] (1)采集重度石油污染土壤或油泥置于處理池中，將其敲碎，混勻；
[0011] (2)將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽孢桿 菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，混 勻，再加入有機肥料和表面活性劑，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將處理 池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~35°C下，現(xiàn)場處理 20~40天；
[0012] (3)將黃孢原毛平革菌序列接入經(jīng)步驟（2)處理的土壤或油泥中，接種量為35~ 50g/kg土壤，混勻，用塑料薄膜將處理池的表面覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定， 在15~35°C下，現(xiàn)場處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化。
[0013] 上述重度石油污染土壤或油泥的總石油烴起始含量為50000~120000mg/kg 土壤 或油泥。
[0014] 上述芽孢桿菌的活菌含量為4.0 X IO8~6.0 X IO9CFlVg，枝頂孢霉菌的活菌含量是 7 · 2 X IO7~8 · 5 X IO9CFlVg，黃孢原毛平革菌的活菌含量是5 · 6 X IO7~8 · 0 X 109CFU/g。
[0015] 上述步驟優(yōu)選(2)為:將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤 或油泥中，芽孢桿菌的接種量為15~20g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~23g/ kg土壤或油泥，混勻，再加入有機肥料和表面活性劑，其中有機肥料的添加量為500~2 000mg/kg，表面活性劑的添加量為1 000~2 500mg/kg，加水至土壤或油泥的含水率達20~ 25%，混勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在17~ 35 °C下，現(xiàn)場處理30~35天。
[0016] 上述步驟(3)優(yōu)選是:將培養(yǎng)好的黃孢原毛平革菌序列接入重度石油污染土壤或 油泥中，接種量為38~45g/kg土壤，混勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤 或油泥的含水率穩(wěn)定，在17~35°C下，現(xiàn)場處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的 序列生物強化。
[0017] 本發(fā)明還提供了一種重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其是由 以下步驟組成：
[0018] (1)采集重度石油污染土壤或油泥置于處理池中，將其敲碎，混勻；
[0019] (2)將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽孢桿 菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，混 勻，再加入有機肥料和表面活性劑，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將處理 池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~35°C下處理20~40 天；
[0020] (3)取與步驟(2)等量的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌，重復接入步驟(2)處理后的土壤 或油泥中，混勻，在用塑料薄膜將處理池的表面覆蓋，通氣，補水攪拌維持土壤或油泥的含 水率穩(wěn)定，在15~35°C下處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處 理。
[0021] 步驟(2)優(yōu)選是:將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油 泥中，芽孢桿菌的接種量為15~20g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~23g/kg 土 壤或油泥，混勻，再加入有機肥料和表面活性劑，其中有機肥料的添加量為800~1200mg/ kg，表面活性劑的添加量為1200~1600mg/kg，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混 勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在25~35°C下 處理30~35天。
[0022] 步驟(2)進一步優(yōu)選是:將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土 壤或油泥中，芽孢桿菌的接種量為15~20g/kg土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~ 23g/kg土壤或油泥，混勻，再加入有機肥料、磷酸二氫鉀、尿素和表面活性劑，其中有機肥料 的添加量為800~1200mg/kg，表面活性劑的添加量為1200~1600mg/kg，加水至土壤或油泥 的含水率達20 %，土壤或油泥中C:N: P = 100:10:1，混勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋， 通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在25~35°C下處理30~35天。
[0023]本發(fā)明的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，是一種新的真菌-細菌菌群的序列生物強化修復技術(shù)，具體利用芽孢桿菌及枝頂孢霉菌與黃孢原毛平革菌對 重度石油污染土壤或油泥進行序列強化處理，能夠極顯著地的提高TPH及PAHs的降解效率， 并且大大縮短了修復周期，試驗結(jié)果表明：試驗土壤或油泥中總石油經(jīng)(Total petroleum hydrocarbon，TPH)起始含量為110000~120000mg/kg，經(jīng)過50~70天的修復處理后，土壤或 油泥中TPH含量為10000~34500mg/kg，降解效率達到了91 %~97%，對5種難降解的多環(huán)芳 香經(jīng)：萘（Naphthalene，NAP)、荷（Fluorene，F(xiàn)L0)、菲（Phenanthrene，PHE)、蒽（Anthracene， ANT)及熒蒽(Fluoranthene，F(xiàn)LA)的降解效果也比較顯著，降解率均達到了90%以上，分別 為97.95%，99.20%，97.05%，95.89%和93.87%。
【附圖說明】
[0024]圖1為采用一次強化處理的對比例及采用序列強化處理的實施例1 土壤中TPH降解 結(jié)果；
[0025]圖2為處理60天空白例土壤或油泥中石油烴組分的氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分析結(jié) 果；
[0026]圖3為處理60天對比例土壤或油泥中石油烴組分的氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分析結(jié) 果；
[0027]圖4為處理60天實施例1 土壤或油泥中石油烴組分的氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分析結(jié) 果；
[0028]圖5為不同生物強化處理組輕鏈與重鏈石油烴組分的降解結(jié)果；
[0029]圖6為不同生物強化處理組脂肪烴、芳香烴與極性組分的降解結(jié)果；
[0030] 圖7為不同生物強化處理組5種芳香烴組分的降解結(jié)果。
【具體實施方式】
[0031] 現(xiàn)結(jié)合試驗和實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行進一步說明，但是本發(fā)明不僅限于 下述的實施方式。
[0032] 本發(fā)明所涉及的三種菌分別為芽孢桿菌、枝頂孢霉菌以及黃孢原毛平革菌，其中： [0033] 芽抱桿菌Bacillus sp.，菌株保藏號CCTCC Ν0:ΑΒ 2014248,屬于已知固體菌劑， 該菌菌落呈乳白色，菌落圓形，表面光滑、凸起，邊緣整齊，背面顏色與正面一致，無色素分 布。
[0034] 枝頂孢霉菌Acremonium sp.Y0997,菌株保藏號為CCTCC Ν0:Μ 2016117,保藏單位 是中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日期是2016年3月14日，其18SrDNA序列為：
[0035]
[0036] 該菌菌落呈白色，菌落圓形，背面奶油色至赭黃色，菌絲無色，光滑且具隔膜，孢子 囊梗直接從菌絲上長出，呈錐形多單生，分生孢子無色，光滑，形成簇狀或鏈狀，長紡錘形， 兩頭尖，未見厚垣孢子。
[0037] 黃孢原毛平革菌Phanerochaete sp.F0996,菌株保藏號為CCTCC N0:M2016116,保 藏單位是中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日期是2016年3月14日，其18SrDNA序列為：
[0038]
[0039] 該菌菌落白色，圓形，背面無色，菌落僅有少量凸起;菌絲為無色，蓬松棉絮狀，隨 著培養(yǎng)時間的延長，絨毛狀凸起逐漸變平，菌絲消失，形成粉末孢子。
[0040] 實施例1
[0041]利用上述三種菌對重度石油污染土壤進行序列生物強化處理，具體方法由以下步 驟組成：
[0042] (1)將油井附近采集的重度石油污染土壤置于處理池中，敲粹、混勻，粒徑為30~ 40mm左右；
[0043] (2)將培養(yǎng)好的芽孢桿菌及枝頂孢霉菌菌劑混合接入污染土壤中，混勻，再加入有 機肥料和表面活性劑，加水調(diào)節(jié)土壤含水率，將處理池表面覆蓋塑料薄膜，并適量通氣，每 周補水維持土壤或油泥含水量穩(wěn)定，在15~35°C下，現(xiàn)場處理20~40天。
[0044] (3)將黃孢原毛平革菌序列接入污染的土壤中，混勻，用塑料薄膜將處理池的表面 覆蓋，通氣，補水維持土壤含水量穩(wěn)定，在15~35°C下，現(xiàn)場處理20~30天，完成重度石油污 染土壤或油泥的序列生物強化。
[0045]按照該方法進行實驗，具體的工藝條件和降解效率參見表1和表2所示。表1為各 實施例的工藝條件
[0047] 表2為各實施例的強化降解率
[0048]

[0050] 實施例2
[0051] 利用上述三種菌對重度石油污染土壤進行序列生物強化處理，具體方法由以下步 驟組成：
[0052] (1)采集重度石油污染土壤置于處理池中，將其敲碎，混勻；
[0053] (2)將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤中，混勻，再加入有 機肥料和表面活性劑、磷酸二氫鉀、尿素，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將 處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~35°C下處理20 ~40天；
[0054] (3)取與步驟(2)等量的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌，重復接入步驟(2)處理后的土壤 中，混勻，在用塑料薄膜將處理池的表面覆蓋，通氣，補水攪拌維持土壤的含水率穩(wěn)定，在15 ~35 °C下處理20~30天，完成重度石油污染土壤的序列生物強化處理。
[0055] 按照該方法進行實驗，具體的工藝條件和降解效率參見表3和表4所示。
[0056]表3為各實施例的工藝條件
[0057]

[0059]表4為各實施例的強化降解率
[0061]上述實驗中的處理對象重度石油污染土壤可以用重度石油污染油泥來替換，其處 理效果接近。
[0062]上述實施例中所用的表面活性劑是生物可兼容性表面活性重油清洗劑KD-L315， 屬于市售產(chǎn)品。
[0063] 為了驗證本發(fā)明的技術(shù)效果，
【申請人】做了大量的實驗進行驗證，現(xiàn)將芽孢桿菌和 枝頂孢霉菌使用常規(guī)的一次強化策略進行處理作為對比例與實施例1的實驗1降解處理效 果進行對比，同時還以空白實驗作為參照，具體如下：
[0064] 對比例1
[0065] (1)將油井附近采集的污染土壤或油泥，敲粹、混勻，粒徑30~40mm左右；
[0066] (2)將芽孢桿菌和枝頂孢霉菌菌劑按1:1的比例混合接種，將固體菌劑接入總石油 烴起始含量為119260mg/kg的污染土壤或油泥中，菌劑活菌含量分別為5.3 X 109CFU/g、8.0 X IO9CFlVg，接種量分別為40g/kg土壤，再加入有機肥料和表面活性劑。
[0067] (3)調(diào)節(jié)土壤或油泥含水率為20%。將處理池表面覆蓋塑料薄膜，通氣，每周補水 維持土壤或油泥含水量穩(wěn)定，在18~35°C下，現(xiàn)場處理60天。
[0068] 空白例：
[0069] (1)與對比例1相同；
[0070] (2)向總石油烴起始含量為119260mg/kg的污染土壤或油泥中加入有機肥料和表 面活性劑；
[0071] (3)與對比例1相同。
[0072]對上述對比例和空白例所處理后的土壤或油泥中總石油烴的降解情況進行檢測， 并與實施例1的實驗1進行比較，其處理后的土壤或油泥中TPH含量如下表5所示。
[0073]表5為對比例和空白例所與實施例1的對比結(jié)果
[0075]由圖1和表5可知，對比例菌株芽孢桿菌及枝頂孢霉菌一次強化處理組及實施例1 的序列強化處理組的處理結(jié)果對比表明，采用序列強化處理組的實施例1與一次強化處理 組對比例相比，有極顯著提高，提高了約25.64%。試驗結(jié)果表明，采用序列的生物強化方式 可以極顯著地提高總石油烴的降解效率。
[0076]對上述對比例所處理后的土壤或油泥中石油烴組分的降解情況進行檢測，并與實 施例1的實驗1進行比較，處理后土壤或油泥中石油烴組分降解率分別如下表6、表7所示。 [0077]表6為對比例所處理后土壤或油泥中石油烴組分與實施例1的對比結(jié)果-1
[0079] 由表6及圖2、3、4、5的對比結(jié)果表明，采用了序列強化處理的實施例1的實驗1(圖 4)與空白例（圖2)、對比例（圖3)的降解效果相比，輕、重鏈的降解效果都有極顯著提高，分 別提高了 13.00%、19.61%。試驗結(jié)果表明，采用序列的生物強化方式可同時顯著地提高輕 鏈和重鏈的降解效率。
[0080] 表7為對比例所處理后土壤或油泥中石油烴組分與實施例1的對比結(jié)果-2
[0082]由表7及圖6對比結(jié)果表明，采用了序列強化處理的實施例1的實驗1對于脂肪烴組 分、芳香烴組分及極性組分的降解效果均有極顯著的提高，分別提高了 14.38%、29.94%、 42.37%〇
[0083]對上述對比例所處理后的土壤或油泥中5種多環(huán)芳香烴組分的降解情況進行檢 測，并與實施例1的實驗1進行比較，結(jié)果如下表8所示。
[0084] 表8為對比例所處理后土壤或油泥中5種多環(huán)芳香烴組分與實施例1的對比結(jié)果
[0086]由表8及圖7對比結(jié)果表明，處理30天時，不同處理組對萘(Naphthalene，NAP)、芴 (Fluorene，F(xiàn)L0)、菲（Phenanthrene，P HE)的降解效率均達到90%以上，而對蒽 (Anthracene，ANT)的降解效率最低。處理60天后，采用了序列強化處理的實施例1對5種 PAHs的降解效率均達到90%以上，而采用了一次強化處理的對比例對蒽(Anthracene，ANT) 及熒蒽(Flu 〇ranthene，F(xiàn)LA)的降解也有提高，但沒有實施例1處理組的強化作用顯著。 [0087]綜上所述，本發(fā)明的真菌-細菌菌群結(jié)合序列生物強化的方法對重度石油污染土 壤或油泥的降解效率顯著提高，特別是對難降解的石油烴組分和多環(huán)芳香烴組分均有較好 的降解效果。
【主權(quán)項】
1. 一種重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征在于由以下步驟組 成： (1) 采集重度石油污染土壤或油泥置于處理池中，將其敲碎，混勻； (2) 將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽孢桿菌的 接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，混勾，再 加入有機肥料和表面活性劑，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將處理池的表 面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~35°C下，現(xiàn)場處理20~40 天； (3) 將黃孢原毛平革菌序列接入經(jīng)步驟(2)處理的土壤或油泥中，接種量為35~50g/kg 土壤，混勻，用塑料薄膜將處理池的表面覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~ 35°C下，現(xiàn)場處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于所述重度石油污染土壤或油泥的總石油烴起始含量為50000~120000mg/kg 土壤或油 泥。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于所述枝頂孢霉菌的名稱為Acremonium sp.Y0997,菌株保藏號為CCTCC NO:M 2016117， 保藏日期為2016年3月14日，保藏單位為中國典型培養(yǎng)物保藏中心;黃孢原毛平革菌的名稱 為Phanerochaete sp.R)996,菌株保藏號為CCTCC Ν0:Μ 2016116,保藏日期為2016年3月14 日，保藏單位為中國典型培養(yǎng)物保藏中心。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于所述芽孢桿菌的活菌含量為4.0 X IO8~6.0 X IO9CFlVg，枝頂孢霉菌的活菌含量是7.2 X IO7~8 · 5 X IO9CFlVg，黃孢原毛平革菌的活菌含量是5 · 6 X IO7~8 · 0 X 109CFU/g。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于所述步驟(2)為將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中， 芽孢桿菌的接種量為15~20g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~23g/kg 土壤或油 泥，混勻，再加入有機肥料和表面活性劑，其中有機肥料的添加量為500~2 000mg/kg，表面 活性劑的添加量為1000~2 500mg/kg，加水至土壤或油泥的含水率達20~25%，混勻，將處 理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在17~35°C下，現(xiàn)場處 理30~35天。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于所述步驟(3)是將培養(yǎng)好的黃孢原毛平革菌序列接入重度石油污染土壤或油泥中，接 種量為38~45g/kg土壤，混勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的 含水率穩(wěn)定，在17~35°C下，現(xiàn)場處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的序列生物 強化。7. -種重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征在于由以下步驟組 成： (1) 采集重度石油污染土壤或油泥置于處理池中，將其敲碎，混勻； (2) 將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽孢桿菌的 接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為15~25g/kg 土壤或油泥，混勾，再 加入有機肥料和表面活性劑，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將處理池的表 面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在15~35°C下處理20~40天； (3)取與步驟(2)等量的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌，重復接入步驟(2)處理后的土壤或油 泥中，混勻，在用塑料薄膜將處理池的表面覆蓋，通氣，補水攪拌維持土壤或油泥的含水率 穩(wěn)定，在15~35°C下處理20~30天，完成重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特征 在于步驟(2)是將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽孢 桿菌的接種量為15~20g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~23g/kg 土壤或油泥， 混勻，再加入有機肥料和表面活性劑，其中有機肥料的添加量為800~1200mg/kg，表面活性 劑的添加量為1200~1600mg/kg，加水至土壤或油泥的含水率達15~30%，混勻，將處理池 的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在25~35°C下處理30~35 天。9. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的重度石油污染土壤或油泥的序列生物強化處理方法，其特 征在于:步驟(2)是將培養(yǎng)好的芽孢桿菌和枝頂孢霉菌接入重度石油污染土壤或油泥中，芽 孢桿菌的接種量為15~20g/kg 土壤或油泥，枝頂孢霉菌的接種量為17~23g/kg 土壤或油 泥，混勻，再加入有機肥料、磷酸二氫鉀、尿素和表面活性劑，其中有機肥料的添加量為800 ~1200mg/kg，表面活性劑的添加量為1200~1600mg/kg，加水至土壤或油泥的含水率達 20 %，土壤或油泥中C: N: P = 100:10:1，混勻，將處理池的表面用塑料薄膜覆蓋，通氣，維持 土壤或油泥的含水率穩(wěn)定，在25~35 °C下處理30~35天。
【文檔編號】B09C1/10GK105921512SQ201610308584
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年5月11日
【發(fā)明人】馬小魁, 毛東霞, 李亭亭, 李郁, 宋雙紅
【申請人】陜西師范大學