專利名稱：一種用于油田采出水處理的菌株的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株本源耐鹽菌株及其應(yīng)用，特別涉及該菌株在低滲透油田高礦化度
采出水處理中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
油田開發(fā)過程中產(chǎn)出大量的高礦化度采出水，水中含有大量難以分離的原油和各 種有機物，若外排則產(chǎn)生嚴(yán)重的環(huán)境污染，其最佳出路是將采出水經(jīng)物理化學(xué)處理法處理 后回注油層。但在處理過程后獲得的回注水中存有少量的原油和固體雜質(zhì)，注入油層后對 油層產(chǎn)生堵塞傷害，使回注水壓力提高或注不進(jìn)地層，影響油田原油生產(chǎn)。而常規(guī)的物理化 學(xué)處理方法對水中原油處理效果較差，需投入大量的化學(xué)藥劑。另外處理后將產(chǎn)生大量的 含油污泥需要排放產(chǎn)生對環(huán)境的污染。物理化學(xué)處理法不僅處理成本高，而且增大了固體 廢棄物的處理量和處理難度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于油田采出水處理的酵母菌，能降解高礦化度采出 水中原油和有機物。 本發(fā)明采用的技術(shù)方案是用于油田采出水處理的酵母菌株是Candida viswanathii維斯假絲酵母菌株CY21-21，該菌株已于2009年11月15日保藏于中國微生 物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No. 3456。 在顯微鏡下觀察，該菌株形態(tài)為橢圓形或圓柱形，芽殖，在液體培養(yǎng)中成沉淀性生 長，固體培養(yǎng)菌體落為奶酪色，表面粗糙有褶皺，粘濕，邊緣整齊。 上述酵母菌株Candida viswanathii菌CY21-21CGMCC No. 3456的培養(yǎng)方法在無 菌條件下，以油田高礦化度采出水含油污泥或油污土壤為菌源，在溫度為35t:，含油基礎(chǔ)培 養(yǎng)基上培養(yǎng)3 5天，分離純化出以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的菌株。
在溫度為28 35t:范圍內(nèi)，斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 5天，再挑取斜面菌株于液體 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在28 35t:下培養(yǎng)3 5天，得到以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的酵母菌株。
將該菌株在高礦化度培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并將菌種接入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，定期加入原油， 3天為一個周期后，應(yīng)用物理誘變選育技術(shù)，得到所需的經(jīng)以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的耐 鹽酵母菌株candida viswanathiiCY21-21 CGMCC No. 3456。
所述斜面培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖
2. 0%，NaCl :1.0%，瓊脂2. 0%，其余為蒸餾水。 液體培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1. 5%，葡萄糖2. 0%， NaCl :1.0%，其余為蒸餾水。
高礦化度培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖
2. 0%， NaCl :1%，其余為高礦化度(32. 58 107. 04g/L)的油田采出水?；A(chǔ)培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為K2HP04 0.7 %， KH2P04 23.0 %， (NH4) 2S04
30. 05%，CaCl2 0. 01%， NaCll. 0%， FeCl3 0. 01 %，其余為蒸餾水。含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為K2HP04 0. 7 % ， KH2P0423. 0 % ， (NH4)2S04
0. 05%， CaCl2 0. 01%， NaCl 1. 0%， FeCl3 0. 01%，原油1. 02%，其余為蒸餾水。 本發(fā)明的另一個目的是提供一種利用該菌株處理油田采出水中原油和有機物的方法。 本發(fā)明所提供的處理油田采出水中原油和有機物的方法是利用Candidaviswanathii維斯假絲菌CY21-21對采出水中原油和有機物進(jìn)行降解處理，利用該菌生長的新陳代謝過程，將水中原油及有機物降解為二氧化碳和水。在每立方米油田采出水中，加入100克該菌株的菌液，攪拌均勻。不需投加培養(yǎng)基和其它的化學(xué)處理劑，僅需鼓風(fēng)機通過生化處理池底部的微孔曝氣器連續(xù)注入空氣。水溫保持在20 40°C，處理時間為8 10小時。 實驗證明在水溫20 40。C，采出水礦化度范圍10000 100000mg/L，水中含油在20 1000mg/L，該菌對水中原油的降解率在90%以上，且對長慶油田不同層位原油具有良好的適應(yīng)性及處理效果。 本發(fā)明的酵母菌Candida viswanathii維斯假絲菌CY21-21 CGMCCNo. 3456是一株具有極高活性，對油田采出水中原油降解能力極強的菌株，其培養(yǎng)方法簡單，生長速度快，對環(huán)境適應(yīng)能力強，可用于低滲油田高礦化度采出水的處理，目前已在長慶油田采出水處理中得到應(yīng)用，具有良好的工業(yè)化應(yīng)用前景。 本發(fā)明的有益效果本發(fā)明所述的菌種CY21-21目前已對油田礦化度在30000mg/L 100700mg/L九個區(qū)塊的采出水進(jìn)行了生化處理試驗并進(jìn)行了現(xiàn)場應(yīng)用試驗，對水中原油降解率達(dá)90%以上，處理后水中含油基本在10. Omg/L以下，且對來水水質(zhì)變化耐受力強，現(xiàn)場應(yīng)用已取得了明顯的效果。采用生物化學(xué)法處理，其最終產(chǎn)物為二氧化碳和水，對環(huán)境友好且處理成本低，能在油田采出水處理中將得到更多的應(yīng)用。 本發(fā)明是從本油田被原油污染的土壤或高礦化度含油污水中篩選、培養(yǎng)并進(jìn)行誘導(dǎo)變異后取得的對低滲油田高礦化度采出水中原油和有機物具有良好降解效果的本源微生物CY21-21，經(jīng)鑒定為維斯假絲酵母菌，其對采出水中原油的降解率達(dá)到了 90%以上。該微生物能在礦化度為100000mg/L的采出水中有效降解水中原油和有機物，處理后水中含油低于10mg/L，水質(zhì)基本達(dá)到油田采出水回注的標(biāo)準(zhǔn)要求。


圖1是采出水經(jīng)本發(fā)明處理后含油量變化示意圖。
圖2是采出水經(jīng)本發(fā)明處理除油效果圖。
圖3是采出水經(jīng)本發(fā)明處理后含油量變化示意圖。
圖4是采出水經(jīng)本發(fā)明處理除油效果圖。 圖5 圖8是酵母菌Candida viswanathii維斯假絲菌CY2121CGMCC No. 3456的測序序列表。
具體實施例方式
下屬實施例中所用方法如無特別說明均為常規(guī)方法，所有百分比濃度均為質(zhì)量百分比，所有培養(yǎng)基中的溶劑均為水。
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實施例l、 Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456菌體的培養(yǎng)、誘變選育
和對原油的處理效果 菌體的培養(yǎng)、誘變選育 稱取10g礦化度為32. 58g/L的油田采出水含油污泥，放入盛有90ml無菌水(礦化度為32. 58g/L油田采出水)的三角瓶中振動20min，用無菌吸管吸取1ml 土壤懸液加入盛有9ml無菌水(礦化度為32. 58g/L油田采出水)試管中充分混勻，以此推制成10—、 10—2，10一3， 10—4， 10—5， 10—6不同土壤稀釋液。分別從10—4， 10—5， 10—6三管土壤稀釋液中各吸取0. 10ml放入已編號的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基各組分為1(2昍04 0. 7%，KH2P04 23.0%，(NH4)2S04 0 . 05%， CaCl2 0. 01%， NaCl 1. 0%， FeCl3 0. 01%，原油1. 02%，瓊月旨2. 0%，其余蒸餾水。于35t:溫室中培養(yǎng)3天，分離純化出經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的菌株。 用接種環(huán)挑取上述菌株到斜面培養(yǎng)基上。斜面培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1.0%，瓊脂2.0%，其余為蒸餾水。在溫
度設(shè)置為3(TC的培養(yǎng)箱里，培養(yǎng)3天，出現(xiàn)奶酪色的菌體。再用接種環(huán)從斜面上挑取生長
良好的菌種接到液體培養(yǎng)基中，液體培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0.7%，蛋白胨
1.5%，葡萄糖2.0%，NaCl :1.0%，其余為蒸餾水。在3(TC下培養(yǎng)3天，即可得經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的酵母菌株。
將該酵母菌株在高礦化度培養(yǎng)基中培養(yǎng)，高礦化度培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為
酵母膏0. 7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1%，礦化度為32. 58g/L油田采出水。并將菌種接入100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為K2HP04 0. 7%，KH2P0423.0%， (NH4)2S04 0 . 05%，CaCl2 0.01%， NaCl 1.0%，F(xiàn)eCl3 0.01%，其余蒸餾水。加入混合原油10iiL，每12h加原油一次，3天為一個周期。取上述過程中得到的微生物菌液5ml，加入小10cm的無菌平板，在距離為30cm處用紫外燈照射2、4、6分鐘，每次處理間隔將該菌液1ml涂于含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)72h，將得到的菌株在液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，得到所需的經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的耐鹽酵母菌株candidaviswanathii CY21-21CGMCC No. 3456。 上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為32. 58g/L的采出水均在125°C、0. IMpa下滅菌30min。 酵母菌株Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對原油的降解能力
試驗過程用液體培養(yǎng)基(酵母膏O. 7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl1. 0 % )將菌株Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456培養(yǎng)到對數(shù)期，按5 %(V/V)的接種量轉(zhuǎn)接到含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP040. 7%， KH2P04 23.0%， (NH4)2S04 0 . 05%，CaCl2 0.01%，NaCl 1. 0 % ， FeCl30. 01 % ，原油1. 02 % ，其余蒸餾水)中，在溫度為30°C 、轉(zhuǎn)速200rpm搖床上培養(yǎng)10h。將上述液體在酸性條件下用CC14萃取，在紅外光譜儀上測定含油濃度，并以不含菌液的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)液為對照。計算原油降解率，以確定對原油的降解能力。降解率(％) = (A-B)/AX100(A——降解前含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的原油濃度，B——降解后含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的原油濃度)。實驗結(jié)果表明，100mg/L的原油經(jīng)過與candidaviswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456的同步培養(yǎng)，降解率為90. 4% 。
上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為32. 58g/L的采出水均在125°C、0. IMpa下滅菌
溫度對酵母菌株Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456降解原油能力的影響 圖4為在室內(nèi)生化處理試驗裝置中利用礦化度為66. 04g/L的采出水對Candidaviswanathii菌CY21-21進(jìn)行馴化培養(yǎng)，大約6天左右菌種生長良好后，連續(xù)進(jìn)水分別運行于不同溫度下，運行時間分別達(dá)7天后，測定處理前后水中含油量的變化，試驗表明在試驗溫度范圍內(nèi)(18 40°C )對Candida viswanathii菌CY21-21降解原油效果無影響，出水含油濃度在6. 23mg/L左右。 酵母菌株candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對油田高礦化度采出水中原油和有機物的處理效果 圖1為在室內(nèi)生化處理試驗裝置中，對礦化度為32. 58g/L采出水進(jìn)行處理，進(jìn)水含油88. 10mg/L，處理后出水含油10. 57mg/L。試驗溫度23。C，處理時間8h。
在油一聯(lián)建設(shè)采出水生化處理試驗裝置，設(shè)計采出水處理量為1500m3/d，處理水溫低于4(TC，水力停留時間10h。每立方米油田采出水加入100克酵母菌株Candidaviswanathii CY21-21菌液，攪拌均勻。不需投加培養(yǎng)基和其它的化學(xué)處理劑，僅需鼓風(fēng)機通過生化處理池底部的微孔曝氣器連續(xù)注入空氣。試驗水樣礦化度為14. 9g/L，水中含油在300. 0 1100mg/L之間，試驗運行時間12個月，試驗過程中未投加其它化學(xué)處理劑，經(jīng)多次取樣測定結(jié)果表明，試驗期間處理后出水含油均低于10. Omg/L，對原油降解率在92. 0%以上。 實施例2、 Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456菌體的培養(yǎng)、誘變選育
和對原油的處理效果 菌體的培養(yǎng)、誘變選育 稱取10g礦化度為66. 04g/L的油田采出水含油污泥，放入盛有90ml無菌水(礦化度為66. 04g/L油田采出水)的三角瓶中振動20min，用無菌吸管吸取1ml 土壤懸液加入盛有9ml無菌水(礦化度為66. 04g/L油田采出水)試管中充分混勻，以此推制成10—、IO一2， 10—3， 10—4， 10—5， 10—6不同土壤稀釋液。分別從10—4， 10—5， 10—6三管土壤稀釋液中各吸取0. 10ml放入已編號的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0.7%，KH2P04 23.0%， (NH4)2S04 0 . 05%，CaCl2 0. 01%，NaCl 1.0%，F(xiàn)eCl3 0. 01 % ，原油1. 02% ，瓊脂2. 0% ，其余蒸餾水)中，于35t:溫室中培養(yǎng)3天，分離純化出經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的菌株。
用接種環(huán)挑取上述菌株到斜面培養(yǎng)基(培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl : 1. 0 % ，瓊脂2. 0 % ，其余為蒸餾水)上，在溫度設(shè)置為30°C的培養(yǎng)箱里，培養(yǎng)3天，出現(xiàn)奶酪色的菌體。再用接種環(huán)從斜面上挑取生長良好的菌種接到液體培養(yǎng)基(酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1.0%，其余為蒸餾水)中，在3(TC下培養(yǎng)3天，即可得經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的酵母菌株。 將該菌株在高礦化度培養(yǎng)基(酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%，NaCl :l^，礦化度為66.04g/L油田采出水)中培養(yǎng)，并將菌種接入100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0.7%，KH2P04 23. 0%， (NH4)2S040 . 05%，CaCl2 0.01%，NaCl 1.0%，F(xiàn)eCl3 0.01%，其余蒸餾水)中，加入混合原油10yL，每12h加原油一次，3天為一個周期。取上述過程中得到的微生物菌液5ml，加入小10cm的無菌平板，在距離為30cm處用紫外燈照射2、4、6分鐘，每次處理間隔將該菌液1ml涂于含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)72h，將得到的菌株在液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，得到所需的經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的耐鹽酵母菌株candidaviswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456。 上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為66. 04g/L的采出水均在125°C、0. IMpa下滅菌30min。 酵母菌株Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對原油的降解能力
按照實施例1的方法，將酵母菌株Candida viswanathii CY21-21CGMCC No. 3456在含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0.7%，KH2P04 23.0%， (NH4)2S040. 05%， CaCl2 0.01%， NaCl1.0%，F(xiàn)eCl3 0.01%，原油1.02%，其余蒸餾水)里培養(yǎng)10h。將上述液體在酸性條件下用CC14萃取，在紅外光譜儀上測定含油濃度，并以不含菌液的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)液為對照。計算原油降解率，以確定對原油的降解能力。實驗結(jié)果表明，100mg/L的原油經(jīng)過與Candidaviswanathii酵母菌株CY21-21 CGMCC No. 3456的同步培養(yǎng)，降解率為91. 3%。
上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為66. 04的采出水均在125°C、0. IMpa下滅菌30min。
酵母菌株candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對油田高礦化度采出水中原油和有機物的處理效果 圖2為在室內(nèi)生化處理試驗裝置中，對礦化度為66. 04g/L采出水進(jìn)行處理，進(jìn)水
含油210. 00mg/L，處理后出水含油5. 81mg/L。試驗溫度25。C，處理時間8h。 在新五站建設(shè)采出水生化處理試驗裝置，設(shè)計采出水處理量為85mVd，處理水
溫低于4(TC，水力停留時間10h。每立方米油田采出水加入100克酵母菌株Candida
viswanathii CY21-21菌液，攪拌均勻。不需投加培養(yǎng)基和其它的化學(xué)處理劑，僅需鼓風(fēng)機
通過生化處理池底部的微孔曝氣器連續(xù)注入空氣。試驗水樣礦化度為14. 9g/L，水中含油在
240 308mg/L之間，試驗運行時間5個月，試驗過程中未投加其它化學(xué)處理劑，經(jīng)多次取樣
測定結(jié)果表明，試驗期間處理后出水含油均低于30. Omg/L，對原油降解率在90. 0%以上。 實施例3、 Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456菌體的培養(yǎng)、誘變選育
和對原油的處理效果 菌體的培養(yǎng)、誘變選育 稱取10g礦化度為107. 04g/L的油田采出水含油污泥，放入盛有90ml無菌水(礦化度為107. 04g/L油田采出水)的三角瓶中振動20min，用無菌吸管吸取1ml 土壤懸液加入盛有9ml無菌水(礦化度為107. 04g/L油田采出水)試管中充分混勻，以此推制成10—、IO一2， 10—3， 10—4， 10—5， 10—6不同土壤稀釋液。分別從10—4， 10—5， 10—6三管土壤稀釋液中各吸取0. 10ml放入已編號的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0. 7%， KH2P0423. 0%， (NH4)2S04 0 . 05%，CaCl2 0. 01%，NaCl 1.0%，F(xiàn)eCl3 0. 01 % ，原油1. 02% ，瓊脂2. 0% ，其余蒸餾水)中，于35t:溫室中培養(yǎng)3天，分離純化出經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的菌株。
用接種環(huán)挑取上述菌株到斜面培養(yǎng)基(培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1.0%，瓊脂2.0%，其余為蒸餾水)上，在溫度設(shè)置為30°C的培養(yǎng)箱里，培養(yǎng)3天，出現(xiàn)奶酪色的菌體。再用接種環(huán)從斜面上挑取生長良好的菌種接到液體培養(yǎng)基(酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1.0%，其余為蒸餾水)中，在3(TC下培養(yǎng)3天，即可得經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的酵母菌株。 將該菌株在高礦化度培養(yǎng)基(酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%，NaCl :1%，礦化度為107.04g/L油田采出水)中培養(yǎng)，并將菌種接入100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0.7%，KH2P04 23. 0%， (NH4)2S040 . 05%，CaCl2 0.01%，NaCl 1.0%，F(xiàn)eCl3 0.01%，其余蒸餾水)中，加入混合原油10yL，每12h加原油一次，3天為一個周期。取上述過程中得到的微生物菌液5ml，加入小10cm的無菌平板，在距離為30cm處用紫外燈照射2、4、6分鐘，每次處理間隔將該菌液lml涂于含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)72h，將得到的菌株在液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，得到所需的經(jīng)碳源(以原油為碳源)適應(yīng)性馴化的耐鹽酵母菌株candidaviswanathii CY21-21CGMCC No. 3456。 上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為107. 04g/L的采出水均在125°C、0. 1Mpa下滅菌30min。 酵母菌株Candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對原油的降解能力
按照實施例1的方法，將酵母菌株Candida viswanathii CY21-21CGMCC No. 3456在含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基(K2HP04 0.7%，KH2P04 23.0%， (NH4)2S040. 05%， CaCl2 0.01%， NaCl1.0%，F(xiàn)eCl3 0.01%，原油1.02%，其余蒸餾水)里培養(yǎng)10h。將上述液體在酸性條件下用CC14萃取，在紅外光譜儀上測定含油濃度，并以不含菌液的含油基礎(chǔ)培養(yǎng)液為對照。計算原油降解率，以確定對原油的降解能力。實驗結(jié)果表明，100mg/L的原油經(jīng)過與Candidaviswanathii酵母菌株CY21-21 CGMCC No. 3456的同步培養(yǎng)，降解率為90. 5%。
上述培養(yǎng)基、培養(yǎng)液和礦化度為107. 04g/L的采出水均在125°C、0. IMpa下滅菌30min。 酵母菌株candida viswanathii CY21-21 CGMCC No. 3456對油田高礦化度采出水中原油和有機物的處理效果 圖3為在室內(nèi)生化處理試驗裝置中，對礦化度為107. 04g/L采出水進(jìn)行處理，進(jìn)水含油81. 08mg/L，處理后出水含油4. 33mg/L。試驗溫度29。C，處理時間8h。
權(quán)利要求
一種酵母菌，其特征在于其學(xué)名為candida viswanathii菌株CY21-21，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為CGMCC No.3456。
2. 如權(quán)利要求1所述的酵母菌，其特征在于其培養(yǎng)方法是在無菌條件下，以油田高 礦化度采出水含油污泥或油污土壤為菌源，在溫度為35t:，含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 5 天，分離純化出以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的菌株；首先在溫度為28 35t:范圍內(nèi)，斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 5天，再挑取斜面菌株于液體 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在28 35t:下培養(yǎng)3 5天，得到以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的酵母菌株；將碳源的適應(yīng)性馴化的酵母菌株在高礦化度培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并將菌種接入基礎(chǔ)培養(yǎng)基 中，定期加入原油，3天為一個周期后，應(yīng)用物理誘變選育技術(shù)，得到所需的經(jīng)以原油為碳源 的適應(yīng)性馴化的耐鹽酵母菌株Candida viswanathii CY21-21CGMCC No. 3456 ;所述斜面培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1. 5%，葡萄糖2. 0%， NaCl :1.0%，瓊脂2.0%，其余為蒸餾水；液體培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0.7%，蛋白胨1.5%，葡萄糖2.0%， NaCl :1.0%，其余為蒸餾水；高礦化度培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為酵母膏0. 7%，蛋白胨1. 5%，葡萄糖2. 0%，NaCl :1%，其余為高礦化度(32. 58 107. 04g/L)的油田采出水；基礎(chǔ)培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為K2HP040. 7 % ， KH2P0423. 0 % ， (NH4) 2S040 . 05 % ， CaCl20. 01%， NaCl 1. 0%， FeCl30. 01%，其余為蒸餾水；含油基礎(chǔ)培養(yǎng)基各組分質(zhì)量百分比為K2HP040. 7%， KH2P0423. 0%， (NH4)2S040. 05%， CaCl20. 01%， NaCll. 0%， FeCl30. 01%，原油1. 02%，其余為蒸餾水。
3. 如權(quán)利要求2所述的酵母菌，其特征在于處理油田采出水中原油和有機物的方法 是在每立方米油田采出水中，加入100克經(jīng)以原油為碳源的適應(yīng)性馴化的耐鹽酵母菌株 Candida viswanathii維斯假絲菌CY21-21菌株，攪拌均勻，鼓風(fēng)機通過生化處理池底部的 微孔曝氣器連續(xù)注入空氣，水溫保持在20 4(TC，處理時間為8 10小時。
全文摘要
本發(fā)明公開了一株從活性污泥和油污土壤中富集、篩選、培養(yǎng)出的好氧菌株，其目的是高效降解低滲透油田高礦化度采出水中的原油和有機物，來源于菌株CY21-21，經(jīng)鑒定為維斯假絲酵母菌(candidaviswanathii)，具有極高的活性，其培養(yǎng)方法簡單，成本低，生長迅速，對水中原油和有機物去除效果好；采出水化學(xué)特征不變；生化處理后水的腐蝕性降低；在密閉無氧條件下對原油無降解作用。該菌株具有在低滲透油田高礦化度采出水處理的工業(yè)化應(yīng)用前景。
文檔編號C02F103/34GK101781624SQ200910243239
公開日2010年7月21日 申請日期2009年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月29日
發(fā)明者任建, 向忠遠(yuǎn), 李文宏, 武平倉, 謝珍, 高春寧 申請人:中國石油天然氣股份有限公司