專利名稱：：具有自分解性的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑及醫(yī)療用樹脂的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及外科手術(shù)時及其他情況下用于生物體組織的粘接、填充、防止粘連、止血等的醫(yī)療用粘合劑和醫(yī)療用樹脂。尤其涉及通過將第1液與第2液混合進行反應(yīng)、固化，經(jīng)過一定時間后分解、流動化的醫(yī)療用粘合劑和醫(yī)療用樹脂。
背景技術(shù)：
：作為醫(yī)療用、尤其是外科手術(shù)用的粘合劑，一直以來主要使用(1)氰基丙烯酸酯類粘合劑和(2)血纖蛋白膠。(1)氰基丙烯酸酯類粘合劑起初，它是以瞬間粘接金屬、塑料、橡膠、木材、陶資等為目的而使用的工業(yè)用或家用粘合劑，而作為醫(yī)療用途直到1968年也已開發(fā)出了約IO種產(chǎn)品。這種粘合劑，利用以微量水分作為聚合引發(fā)劑使氰基丙烯酸酯單體聚合、固化，其聚合、固化迅速，且與生物體組織的粘接力高。但是，有時由于固化物缺乏柔軟性、堅硬而妨礙創(chuàng)傷治愈，另外，因其在生物體內(nèi)難以分解，而易被包裹形成異物。而且，有報告因其在分解過程中生成甲醛而顯示出細(xì)胞毒性和/或組織傷害性.(2)血纖蛋白膠血纖蛋白原是利用生物體內(nèi)的凝血機制，即通過凝血酶的作用形成不溶性血纖蛋白塊的粘合劑.血纖蛋白膠對生物體的適應(yīng)性和便利性高，可廣泛應(yīng)用于以防止外科手術(shù)后縫合部位等的出血、提高組織粘接/閉合為目的的場合.但是，由于該粘合劑粘接力相當(dāng)?shù)停视袝r生成的血纖蛋白塊會從組織上剝落.進而，因其為血液制劑，故病毒感染也成為擔(dān)心的問題。另一方面，近年來，提出了下述(3)(6)這樣的外科用2液反應(yīng)型粘合劑。(3)醛化右旋糖苷一高分子量殼聚糖(專利文獻l)提出了將醛化右旋糖普的15重量％水溶液作為第1液、將高分子量殼聚糖(protasanTMUPCL213，F(xiàn)MC生物高聚物)的2重量％或4重量％水溶液作為第2液的外科用2液反應(yīng)型粘合劑。這里，醛基/氨基的摩爾比至少為3(唯一的獨立權(quán)利要求1)，根據(jù)表2和表1的數(shù)據(jù)，通過使醛基/氨基的摩爾比為6以上(由表2和1所得的計算值)，可在150秒內(nèi)實現(xiàn)固化。另外，通過表3等顯示，其剪切粘接力也達(dá)到充分的數(shù)值，通過表8顯示，使用平均分子量為40萬以上的高分子量右旋糖苷時，可得到更佳的粘接力。進而，根據(jù)說明書正文最后部分(4.肝臟止血)的記述，醛基/氨基的摩爾比為約13.6(表3的"DA6")、混合液比例為1/1時的2液反應(yīng)型粘合劑，作為大鼠肝臟的止血劑是有效的。根據(jù)表2，該粘合劑的固化時間為約15秒。另外，根據(jù)表6和7及其相關(guān)說明，使用聚乙烯醇-乙烯胺接枝共聚物(PVALNH2)的20重量％水溶液代替殼聚糖水溶液時，也可以獲得充分的粘接力。不過，所用共聚物的分子量和組成不明。而且固化時間也不清楚。(4)膠束形成性的末端醛基聚合物一高分子量的聚烯丙胺(專利文獻2)公開了具有末端眵基(分子量5500的聚乙二醇鏈片斷)一(分子量4000的聚乳酸片斷)結(jié)構(gòu)的聚合物的膠束水溶液(pH5.0)作為第1液、高分子量(6萬以上)的多芳胺水溶液作為第2液的2液反應(yīng)型"動物組織用粘合劑"，作為第2液，可使用聚-L-賴氨酸的水溶液(表-3和表-5的RUN13-14,16)或殼聚糖水溶液(表-4)代替聚烯丙胺水溶液，另外，作為第l液，可使用氧化淀粉或氧化纖維素(段號0031)。但是，公開了聚-L-賴氨酸不能使用分子量為3萬的分子量較低的聚-L-賴氨酸，必須使用分子量為70萬的高分子量聚-L-賴氨酸(表-5的RUN13-14,16)。另外公開，作為第2液的聚-L-賴氨酸水溶液的pH應(yīng)為9.0以上(表誦3和表國5的RUN12-16)。(5)醛化淀粉一膠原(專利文獻3)將醛化可溶性淀粉溶液的5%水溶液0.5ml作為第1液，膠原的15。/。水溶液2ml作為第2液(實施例3的第l段)。這里，可溶性淀粉的分子量設(shè)為"在120萬道爾頓的范圍內(nèi)可變"(實施例1)。雖未提及膠原的分子量，但一般認(rèn)為和通常情況一樣、為約30萬左右。該粘合劑可以作為生物體組織粘合劑使用，具有防止粘連的效果(實施例3~實施例6)。(6)明膠一琥珀酰亞胺化聚-L-谷氨酸(專利文獻4)公開了將含有使膠原熱改性后所得明膠的水溶液作為第1液，含有琥珀酰亞胺化聚-L-谷氨酸的水溶液作為第2液的醫(yī)療用粘合劑。其他還提出了除上述2液反應(yīng)型粘合劑以外的如下述(7)(8)這樣的醫(yī)療用粘合劑.(7)明膠一二羧酸酐公開了通過將明膠與二羧酸酐反應(yīng)、使明膠的氨基變換為羧基的粘合劑(參照專利文獻5)。但是，這些明膠類醫(yī)療用粘合劑因來自牛的"危險部位"、可能發(fā)生瘋牛病(BSE)等，在醫(yī)療實踐中常避免使用.(8)氨基甲酸酯預(yù)聚物公開了例如由多元醇與多異氛酸酯的加成物構(gòu)成的轱合劑(參照專利文獻6).不過，該粘合劑具有因粘性高而難以處理、在血液、體液多的部位難以粘接等的缺點，專利文獻l:WO2003/035122(對應(yīng)AESCULAPAG&COKG(DE)，US2005/0002893A-1和EP1438079Bl)專利文獻2:日本特開2005-21454"以高分子膠束為有效成分的組織粘合劑，，西田博，橫山昌幸專利文獻3:W098/15299(對應(yīng)"高分子聚醛基的粘合劑組合物及膠原的交聯(lián)方法"日本專利323871)專利文獻4:日本特開平9(1997)-103479"醫(yī)用材料及其制造方法"專利文獻5:日本特開平11(1999)-239610"生物體組織粘合性醫(yī)用材料及其制造方法"專利文獻6:日本特開2004-261590"醫(yī)療用粘合劑"
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明要解決的課題如果是血纖蛋白膠，對于其固化物的物性，除了無法變更、調(diào)節(jié)其至更為適宜的柔軟度之外，也不能延長其在生物體內(nèi)的分解時間(通常為1~3日)。另外，有報道在使用氰基丙烯酸酯樹脂時，被生物體完全分解、吸收所需的時間相當(dāng)長，需1年以上。因此，要設(shè)計其在例如12周內(nèi)完全被分解并吸收，事實上是不可能的。如前所述的、所有此前的醫(yī)療用粘合劑也存在這樣的問題，其所得固化物在生物體內(nèi)的分解乃至崩解并不會在經(jīng)過某一指定時間后迅速進行，其維持粘接力等的時間充分時，不期望的樹脂層或樹脂成形物會在相當(dāng)長的時間內(nèi)殘留。另外，因疾病種類或?qū)嵤┦中g(shù)種類的不同，所期望的保持時間和分解起始時間也各不相同，要符合這樣細(xì)微的要求而控制分解時間，事實上也是不可能的。作為對經(jīng)過所設(shè)計的崩解時間后能迅速崩解的樹脂的設(shè)計的嘗試，因其是用于生物體內(nèi)的物質(zhì)，因此要求具有高度的安全性，同時必須無細(xì)胞毒性、組織傷害性或致癌性等，受到相當(dāng)多的制約.而且，作為醫(yī)療用粘合劑所通常要求的性質(zhì)，須滿足(l)對生物體等的含有水分的被粘接物具有高粘接性，(2)常溫常壓下對生物體組織表面具有較快的固化反應(yīng)性，以及(3)至創(chuàng)傷部位治愈時為止，對皮膚、血管或臟器等被粘接物可密實粘接，具有不妨礙被粘接物的物理運動程度的柔軟性等。本發(fā)明正是鑒于上述情況而完成的，提供了在充分滿足醫(yī)療用粘合劑的一般性質(zhì)、且經(jīng)過所設(shè)計的崩解時間后可迅速崩解的同時，能夠比較自由地調(diào)整、控制該設(shè)計時間的醫(yī)療用粘合劑及醫(yī)療用含水凝膠狀樹脂。解決課題的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，是由重均分子量為100020萬的醛化a-葡聚糖水溶液構(gòu)成的笫1液和由含氨基單元的鏈形成的含氨基聚合物水溶液構(gòu)成'的笫2液組成，上述含氨基聚合物的重均分子量為1000~2萬，上述第1液與第2液混合時，pH為5.0~8.0'本發(fā)明的含水凝膠狀醫(yī)療用樹脂，其特征在于，是由重均分子量為1000~20萬的醛化a-葡聚糖水溶液構(gòu)成的第1液和由含氨基單元的鏈形成的重均分子量為1000~2萬的含氨基聚合物水溶液構(gòu)成的第2液混合所得的含水凝膠狀醫(yī)療用樹脂，醛基/氨基的反應(yīng)摩爾比為0.2~2.0，只要以含水狀態(tài)保存，在經(jīng)過可任意設(shè)定在l日1個月的凝膠狀態(tài)保存期間后，通過自分解變化為溶膠狀態(tài)。發(fā)明效果在經(jīng)過所設(shè)計的崩解時間后可迅速崩解的同時，能夠比較自由地調(diào)整、控制該設(shè)計時間。而且，對生物體無毒性和其他不良影響，對生物體組織等的粘接力優(yōu)良，固化后的含水凝膠狀樹脂層有柔軟性.同時，關(guān)于固化反應(yīng)所需的時間，能夠在所期望的程度內(nèi)，進行一定程度的調(diào)整、控制.圖l為高碘酸鈉的添加量與醛基引入量的關(guān)系示意圖.(第l節(jié))圖2-1為將粘合劑涂布于橡膠手套后、使手套擴張時粘合劑固化物的狀況照片(1).(第4節(jié))圖2-2為將粘合劑涂布于橡膠手套后、使手套擴張時粘合劑固化物的狀況照片(2).(第4節(jié))圖3-1為添加殼聚糖的粘合劑固化物的至固化后3周為止時的分解狀況照片(1)。(第6節(jié))圖3-2為添加殼聚糖的粘合劑固化物的至固化后3周為止時的分解狀況照片(2)。(第6節(jié))圖3-3為添加殼聚糖的粘合劑固化物的至固化后3周為止時的分解狀況照片(3)。(第6節(jié))圖4-1為粘合劑固化物在家兔肝臟上逐漸分解狀況的照片(1)。(第7節(jié))圖4-2為粘合劑固化物在家兔肝臟上逐漸分解狀況的照片(2)。(第7節(jié))圖4-3為粘合劑固化物在家兔肝臟上逐漸分解狀況的照片(3)。(第7節(jié))圖4-4為粘合劑固化物在家兔肝臟上逐漸分解狀況的照片(4)。(第7節(jié))圖4-5為粘合劑固化物在家兔肝臟上逐漸分解狀況的照片(5)。(第7節(jié))圖5-1為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混合物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(1)。(第8節(jié))圖5-2為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混一^物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(2),(第8節(jié))圖5-3為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混合物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(3).(第8節(jié))圖5-4為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混合物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(4)。(第8節(jié))圖5-5為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混合物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(5)。(第8節(jié))圖5-6為用經(jīng)乙酸和檸檬酸的混合物調(diào)整pH后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的分解狀況的照片(6).(第8節(jié))圖6-1為熱處理后的聚賴氨酸電泳圖(1)。(第9節(jié))圖6-2為熱處理后的聚賴氨酸電泳圖(2)。(第9節(jié))圖7-1為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(1)。(第9節(jié))圖7-2為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(2)。(第9節(jié))圖7-3為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(3)。(第9節(jié))圖7-4為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(4)。(第9節(jié))圖7-5為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(5).(第9節(jié))圖7-6為用熱處理后的聚賴氨酸配制的粘合劑固化物的經(jīng)時分解狀況的照片(6)。(第9節(jié))圖8為粘合劑固化物的應(yīng)力一壓縮應(yīng)力曲線圖。(第ll節(jié))圖9-1為用實施例的粘合劑對兔肝臟止血狀況的照片(1)。(第13節(jié))圖9-2為用實施例的粘合劑對兔肝臟止血狀況的照片(2)。(第13節(jié))圖10-1為涂布在引起粘連部位4周后的患部組織切片圖(1)。(第14節(jié))圖10-2為涂布在引起粘連部位4周后的患部組織切片圖(2)。(第14節(jié))圖11-1為用實施例的粘合劑堵塞由人工制成的肺缺損部位的氣漏的狀況的照片(1).(笫16節(jié))圖11-2.為用實施例的粘合劑堵塞由人工制成的肺缺損部位的氣漏的狀況的照片(2)。(第16節(jié))具體實施例方式構(gòu)成第l液的醛化a-葡聚糖，是將a-葡聚糖氧化后引入醛基的、重均分子量在100020萬范圍內(nèi)的制品。a-葡聚糖是葡萄糖之間經(jīng)脫水縮合、以a鍵相連的糖鏈，葡聚糖中的糖殘基(葡糖酐單元)的分子量為162.14。本發(fā)明所用的a-葡聚糖包括右旋糖苷、糊精和茁霉多糖，也可以將它們混合使用。淀粉或直鏈淀粉也可以進行適度分解后使用。而且，高分子量的茁霉多糖制品也可以經(jīng)適度分解后使用。另外，可根據(jù)一般的高碘酸氧化法引入醛基，為了賦予每個葡糖酐單元適當(dāng)?shù)淖苑纸庑缘龋瑑?yōu)選為引入0.1~1.0個酪基，更優(yōu)選為引入0.2-0.9個，進一步優(yōu)選為引入0.30.8個醛基。為提高第1液的保存穩(wěn)定性，眵化程度較低為好，例如，每個葡糖酐單元可引入0.20.4個酪基。在醛化a-葡聚糖中，因粘合劑性能的穩(wěn)定性等理由，特別優(yōu)選為醛化右旋糖苷和醛化糊精。用于得到醛化右旋糖苷的右旋糖普的重均分子量優(yōu)選為2000~20萬，更優(yōu)選為200010萬。例如，可以使用PharmacosmosA/S公司市售的醫(yī)用級的右旋糖苷40、右旋糖苷60、右旋糖苷70，以及T-右旋糖苷系列的右旋糖苷T10右旋糖苷T2000。另一方面，作為用于得到醛化糊精的糊精，可以使用和光純藥公司市售的糊精等。糊精的童均分子量例如為1000-1萬。此外，醛化a-葡聚糖的最適分子量可根據(jù)具體用途而不同，通過選擇特定的分子量乃至分子量分布，能夠調(diào)節(jié)通過自分解直至液化為止的時間。醛化ot-葡聚糖的分子量過大時，會過度延遲由自分解產(chǎn)生的液化。另外，醛化a-葡聚糖的分子量過小時，凝膠化狀態(tài)的維持時間會過短。tt-葡聚糖的重均分子量及分子量分布，可以通過通常的水系GPC(凝膠滲透色譜，尺寸排阻色鐠(SEC))測定，容易地求得.具體來講，可通過將由水溶性聚合物交聯(lián)體(東曹公司TSKgelG3000PW和G5000PW、TSK保護柱PWH)構(gòu)成的GPC用色鐠柱加熱至40'C，以緩沖液(lOmMKH2PO4+10mMK2HP04)作為洗脫液進行測定、求得.構(gòu)成第2液的含氨基聚合物，因其由含氨基單元的鏈構(gòu)成，重均分子量為10002萬，優(yōu)選為10001萬，更優(yōu)選為1500-8000。而且，優(yōu)選為基本上不含分子量3萬以上的高分子量極分的聚合物。特別優(yōu)選的含氨基聚合物，在通過SDS凝膠電泳測定其分子量且不足3萬的分子量極分，更優(yōu)選為僅有10002.5萬的分子量極分，進一步優(yōu)選為僅有1000~2萬的分子量極分。這里，"基本上，，是指重量比率在總體的5%以下的分子量極分或忽略其染色點圖案。通過下述任一方法，可容易且高精度地求得聚賴氨酸及其他含氨基聚合物的分子量分布(聚合度分布)和平均分子量。(1)SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳)可以使用Atto(抹)制的電泳裝置和Densitograph(AE-6920V型)容易的測定。此時，使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白標(biāo)記物。(2)離子交換色鐠通過高效液相色鐠(HPLC)的離子交換色鐠法，使用反相色鐠柱(TSKgelODS-80TS)測定。此時，使用乙腈作為非水溶劑進行梯度測定.(3)水系GPC:使用向GPC級蒸餾水中添加有磷酸緩沖液和乙腈的洗脫液(5%磷酸二氫銨/3%乙腈(pH=4.0))，例如可將上述水系GPC柱加熱至40'C進行測定。此時，為測定絕對分子量，可使用與低角度激光散射法組合的方法(^PC-LALLS)。作為用于第2液的含氨基聚合物，例如可優(yōu)選為使用微生物或酶產(chǎn)生的分子量為10002萬、尤其是1000~6000的s-聚-L-賴氨酸。不過，ot-聚-L-賴氨酸也可以。另外，只要具有適當(dāng)?shù)姆肿恿亢头肿恿糠植?，也可以使用低聚殼聚?chitosanoligomer)或降解殼聚糖。隨情況不同，也可以是向聚甘油或聚乙烯醇中引入大量氨基側(cè)鏈的聚合物等.對于s-聚-L-賴氨酸，具體例如可使用如下所得的e-聚-L-賴氨酸.4吏用日本專利第35251卯號或日本專利第3653766號記述的菌林一白色鏈霉菌屬(Streptomyces.albulussubsp.)的Lysinopolymerus。然后，在含有葡萄糖5重量％、酵母提取物0.5重量％、硫酸銨l重量%、磷酸氫二鉀0.08重量％、磷酸二氫鉀0.136重量％、硫酸鎂七水合物0.05重量％、硫酸鋅七水合物0.004重量％、硫酸鐵七水合物0.03重量％、pH調(diào)節(jié)至6.8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，從所得培養(yǎng)物中分離、收集S-聚賴氨酸。當(dāng)聚賴氨酸及其他含氨基聚合物的分子量過大、或者過度含有分子量過大的極分時，通過自分解直至液化為止的時間會過度延長。處于規(guī)定分子量范圍的含氨基聚合物，可以部分的被更高分子量或更低分子量的含氨基聚合物所替代。例如，可在僅由10002萬的分子量極分構(gòu)成的聚賴氨酸中配合同等重量程度的高分子量(例如分子量20萬)的殼聚糖。另外，同樣地也可以配合分子量約5001000的多官能(羥基數(shù)為28)的聚乙二醇末端引入有氨基的氨基化聚乙二醇(PEG-NH2)。此時，優(yōu)選配合以蔗糖等為起始物質(zhì)的、官能數(shù)特別大的聚合物。在第2液中，可添加酸或酸性鹽等作為pH調(diào)節(jié)劑。這樣，在第1液與第2液混合時，pH值為5.0~8.0范圍內(nèi)，優(yōu)選為5.5~7.5范圍內(nèi)，更優(yōu)選為6.5~7.5范圍內(nèi)。另外，第2液的pH值優(yōu)選為7.0~9.0。作為pH調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選為添加一元或多元羧酸或其酸酐。作為該羧酸，例如可優(yōu)選為天然存在的羧酸，即乙酸、檸椽酸、琥珀酸、戊二酸、蘋果酸、富馬酸、馬來酸等。這樣的羧酸因緩沖作用而pH調(diào)節(jié)能力大，且對生物體無害。但是，若pH為5.08.0的適當(dāng)值時，也可以使用鹽酸、疏酸等無機酸或無機鹽，也可并用上述羧酸或其酸酐。另外，也可以使用磷酸緩沖鹽.作為pH調(diào)節(jié)劑的羧酸，可以通過選擇一元羧酸、二元羧酸和三元羧酸中的任一種，來調(diào)節(jié)固化后的凝膠體在含水條件下經(jīng)自分解直至液化的時間，認(rèn)為這是因為當(dāng)使用多元羧酸時，在聚賴氨酸及其他含氨基聚合物間生成類似的交聯(lián)，而延遲了由自分解所產(chǎn)生的液化的緣故.在第l液和第2液混合的狀態(tài)下，搭基/氨基的摩爾比為0.1以上、3以下，優(yōu)選為0.22.0，更優(yōu)選為0.51.5。醛基/氨基的摩爾比越接近1，殘留的醛基或氨基越少，這在進一步降低毒性方面具有顯著意義。笫1液中醛化a-葡聚糖的濃度通常為5~50重量％，優(yōu)選為1525重量％。另一方面，第2液中含氨基聚合物的濃度通常為0.560重量%，優(yōu)選為550重量％，更優(yōu)選為5~20重量％。第1液或第2液的濃度過低，會出現(xiàn)固化反應(yīng)不充分等問題，過高則粘合劑液的粘度變高而難以處理。第1液和笫2液可以通過放射線滅菌容易地進行滅菌，優(yōu)選為照射10~50KGy的電子束、更優(yōu)選為照射2030KGy的電子束進行滅菌。這樣的滅菌處理，可以在對固化時間及其他的粘合劑性能無不良影響下進行條件的設(shè)定。在使用本發(fā)明的2液反應(yīng)型粘合劑時，第1液和第2液的混合及涂布可以通過各種方法進行。例如，可將笫1和第2粘合劑原液中的一方涂布于被粘接體表面，接著再涂布另一方進行混合。另外，將第1液和第2液在涂布裝置的混合室中混合后，既可以從噴嘴噴出進行噴涂，也可以從涂布裝置的孔口中流出進行涂布。根據(jù)不同情況，其除作為粘合劑利用之外，也可以作為由凝膠狀樹脂構(gòu)成的薄片等，以防止粘連等為目的而使用。此外，第1液和第—2液的混合比(體積比)通常設(shè)定為0.5~2.0,優(yōu)選為約1.0(即等量程度)。將第1液與第2液混合時，醛化a-葡聚糖的醛基與含氨基聚合物的氨基之間可形成席夫鍵，并以此為交聯(lián)點而形成具有網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)的水凝膠。其結(jié)果，在混合開始后2150秒，優(yōu)選為3100秒，更優(yōu)選為550秒內(nèi)產(chǎn)生固化。從混合開始至固化為止的優(yōu)選時間，隨用途不同而有所不同，為使其浸透至生物體組織內(nèi)、發(fā)揮高度粘接力，優(yōu)選為固化時間在10秒以上，特別優(yōu)選為15秒以上。通過這樣的固化反應(yīng)生成的含水凝膠狀固化粘合劑層或含水凝膠狀樹脂，只要經(jīng)過所設(shè)計的液化時間后，即，可通過自分解而變化為液體狀態(tài).即，即使不經(jīng)過生物體內(nèi)的酶分解等，只要處于含水狀態(tài)，就可以自然分解而變換為液體狀態(tài)(可流動的溶膠狀態(tài))。因而，在生物體內(nèi)，經(jīng)過某一規(guī)定時間后，可被迅速吸收或被排泄而消除。設(shè)計分解時間可在數(shù)小時4個月內(nèi)，通常為1日1個月的范圍，特別是2日2周范圍內(nèi)任意設(shè)定。與之相比，在生物體內(nèi)只通過酶分解被分解吸收的以往的生物體分解樹脂的場合，其分解期間極為不均，在經(jīng)過必要的粘接力保持時間后也不易被迅速分解。自分解的分解時間，可通過選擇或調(diào)整醛化a-葡聚糖和/或含氦基聚合物的分子量或其分布，使用/不使用或選擇多元羧酸，以及調(diào)整2液混合時的pH，來進行任意調(diào)整、設(shè)定。即，被分解吸收的時間可通過調(diào)整2液粘合劑的構(gòu)成來任意設(shè)計。自分解的機制雖尚不明了，但認(rèn)為是醛化a-葡聚糖的醛基在與氨基結(jié)合形成席夫堿時，與席夫堿相連的a-糖苷鍵易被分解的緣故。盡管此前就有利用席夫堿生成反應(yīng)的粘合劑，但未將其開發(fā)成為自分解性粘合劑，認(rèn)為其理由是作為含酪基聚合物和含氨基聚合物，要使用高分子量的物質(zhì)，尤其是作為含氨基聚合物，一定要使用分子量為數(shù)萬以上的物質(zhì)。由于含氨基聚合物不會分解，在使用分子量大的含氨基聚合物時，即使醛化a-葡聚糖分解，也不會產(chǎn)生固化物的崩解。而且，另一方面，即使是分子量較小的含氨基聚合物，如果醛化a-葡聚糖的分子量大時，l個月內(nèi)固化物也不會自行崩解。如上述專利文獻13的記述中所見，以往作為高分子量的含醛基聚合物使用的高分子量物質(zhì)，認(rèn)為是受粘合劑樹脂性能上的必要性的先入觀點所支配的。本發(fā)明的醫(yī)療用粘合劑及醫(yī)療用樹脂可優(yōu)選適用作生物體粘合劑、組織填充劑、止血劑、血管堵塞劑、動脈瘤封閉劑、防粘連材料以及藥物傳遞系統(tǒng)(DDS)用栽體.實施例1.高碘酸鈉對醛基引入量的控制將重均分子量為200000的右旋糖苷(和光純藥工業(yè)林式會社，批號EWN0778)5g溶于100ml蒸餾水，接著，添加各種不同量的高碘酸鈉(分子量213.89)，在40'C下邊攪拌5小時邊反應(yīng)。然后，將反應(yīng)后的溶液用蒸餾水透析24小時(使用分極分子量為14000的透析膜)后，冷凍干燥.由此得到醛化右旋糖苷。對所得各醛化右旋糖普，測定引入醛基的量。然后，求得高碘酸鈉相對于右旋糖苷的糖殘基量(摩爾)的添加量(摩爾)與醛基引入量(摩爾)之間的關(guān)系。結(jié)果如圖l所示。另外，醛基引入量的測定可通過氧化還原滴定法進行。具體地，將0.05mol/l的碘水溶液20ml、10mg/ml的醛化右旋糖苷水溶液10ml和lmol/l的氫氧化鈉水溶液20ml放入100ml錐形瓶中，在25'C下攪拌15分鐘。接著，添加6v/yO/。疏酸水溶液15ml，用O.lmol/1的硫代硫酸鈉水溶液滴定。以反應(yīng)系統(tǒng)為無色透明時作為終點，指示劑為淀粉水溶液。如圖1所示，醛基的引入量隨高碘酸鈉的添加量呈直線性增加.而且，當(dāng)高碘酸鈉的量相對于糖殘基量為0.051.0時，醛基量為0.1~2。因此可知，在添加與糖殘基等量的高碘酸鈉時，相對每個糖殘基平均可引入2個醛基，而進行高效的氧化反應(yīng)。2.固化時間的測定將重均分子量為40000的右旋糖苷(和光純藥工業(yè)林式會社，批號EWR5671)20g溶于100ml蒸餾水。接著，添加10g或5g高碘酸鈉，在50'C下邊攪拌3小時邊反應(yīng)。然后，將反應(yīng)后的溶液用蒸餾水透析24小時(使用分極分子量為14000的透析膜)后，冷凍干燥，得到醛化右旋糖普。進而，將各醛化右旋糖苷溶于蒸餾水，配成20重量％水溶液，以此作為2液反應(yīng)型粘合劑的第1液。其次，向25重量％的￡-聚賴氨酸水溶液(分子量4000，智索林式會社，批號2050506，游離胺)中加入乙酸lml和蒸餾水1.5ml，配制成20重量％中性聚賴氨酸水溶液.另外，將兩末端各具有l(wèi)個氨基的、重均分子量為3000的聚乙二醇胺(2官能PEG-NH2，游離胺)溶于蒸餾水，配制成30和50重量％水溶液(游離胺)。進而，將4分枝端具有氨基的、重均分子量為5000的聚乙二醇胺(4官能PEG-NH2，游離胺)溶于蒸餾水，配制成50重量％的水溶液。然后，將這些氨化合物水溶液，分別作為2液反應(yīng)型粘合劑的第2液。接著，將2液反應(yīng)型粘合劑的第1液0.5ml采集進入直徑16mm的玻璃試管中，放入直徑4mm、長10mm的磁力攪拌器，加熱至37。C，以100rpm速度攪拌。然后，用微量移液管添加預(yù)先加熱至37'C的第2液0.5ml，用秒表計測因粘合劑固化而使攪拌棒停止轉(zhuǎn)動的時間。高碘酸鈉向2液反應(yīng)型粘合劑的第l液中的添加量為10g時的結(jié)果示于表l，添加量為5g時的結(jié)果示于表2。表1和表2中，只與20重量％的中性聚賴氨酸水溶液組合的為實施例的粘合劑(分別為實施例1和實施例2)。當(dāng)?shù)?液為末端引入氨基的聚乙二醇溶液時，除凝膠狀粘接層的強度等不充分以外，經(jīng)過l日2個月也無法實現(xiàn)自分解性。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>如表1和表2所示，與氨化合物為2官能PEG-NH2的粘合劑相比，氨基數(shù)更多的4官能PEG-NH2的粘合劑，凝膠化時間短。進而，相對于每個殘基平均具有1個氨基的聚賴氨酸，凝膠化時間更短，而且，氨化合物濃度高的一方迅速固化。進一步地，高碘酸鈉添加量為10g的粘合劑比高碘酸鈉添加量為5g的粘合劑的凝膠化時間有縮短一半左右的傾向。由這些結(jié)果可知，通過改變?nèi)┗鶖?shù)目以及氨化合物的種類、濃度，可以控制固化時間。3.細(xì)胞毒性試驗將分子量為75000的右旋糖苷(和光純藥工業(yè)株式會社，批號EWK3037)20g與5g高碘酸鈉反應(yīng)，按照第2節(jié)的方法得到醛化右旋糖苷。之后，配制成20重量。/。水溶液，作為第l液，接著，向第2節(jié)使用的25重量％聚賴氨酸水溶液10ml中添加琥珀酸酐0.5ml和蒸餾水14.5ml，配制成10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液(參考例3)。另一方面，精密稱量30重量％甲醛水溶液約0.5g和25重量％戊二醛水溶液約0.5g，分別配制成25ml水溶液。使用所得的各水溶液，按下示方法進行細(xì)胞毒性試驗.細(xì)胞毒性試驗根據(jù)J.Biomed.Mater.Res.，29，829-835(1995)所述方法，使用小鼠成纖維細(xì)胞抹L929進行。具體地，首先將配制成10000細(xì)胞/ml的細(xì)胞混懸液以O(shè).lml/孔，種于96孔培養(yǎng)皿中，在37'C下培養(yǎng)3日。其次，將上述各種水溶液用培養(yǎng)基稀釋為各種濃度，每孔各添加O.lml，繼續(xù)培養(yǎng)2日。接著，每孔各添加稀釋至150jig/ml的中性紅培養(yǎng)基溶液0.1ml，在37t!下培養(yǎng)3小時。培養(yǎng)后，除去培養(yǎng)基，用1重量％戊二醛水溶液固定細(xì)胞，風(fēng)干。然后，每孔各添加舍1重量％乙酸的水/乙醇溶液(同體積混合物)O.lml，提取進入存活細(xì)胞的中性紅分子.進而，在541nm處測定吸光度，由該測定值求得NR50值.NR50值為使50。/o細(xì)胞死亡的必須溶緣濃度，該值越低說明毒性越強.表3總結(jié)了各種化合物的NR50值。表3_細(xì)胞毒性評價結(jié)果_試液成分NR50值(ng/ml)第1液醛化右旋糖苷6，019±91第2液聚賴氨酸>IO，OOO甲醛1.7±0.2_戊二醛_3.9±0.7如表所示，醛化右旋糖苷的NR50值為>6000ng/ml，該值與曱醛和戊二醛的值相比，分別為1/3500、1/1500以下，可見即使同樣是醛化合物，醛化右旋糖苷的毒性也非常輕微。另一方面，聚賴氨酸的毒性也極低，認(rèn)為粘合劑的各成分均是安全性極高的物質(zhì)，4.使用橡膠手套進行固化物的柔軟性評價將第2節(jié)所得20重量％醛化右旋糖苷水溶液(對20g右旋糖苷添加10g高碘酸鈉)和20重量％中性聚賴氨酸水溶液分別作為第1液和第2液，即，采用實施例1的2液粘合劑，然后，將這些粘合劑原液使用專用攪拌裝置涂布約0.5ml(0.25ml+0.25ml)于實驗用橡膠手套上，薄薄地拉伸。放置約l分鐘使之固化后，用氣泵向手套內(nèi)充入空氣，使固化物擴張，圖2顯示了擴張前(a)和擴張后(b)的粘合劑固化物的狀態(tài)。在圖中，被著色(藍(lán)色l號，和光純藥林式會社，批號KLN3789)的是粘合劑固化物凝膠。如圖所示，由于充入空氣、粘合劑固化物直徑擴張至約3倍時，未見皸裂或破壞.由該結(jié)果可知，本實施例(實施例1)的粘合劑即使在固化后也非常柔軟，此外，雖省略了照片和數(shù)據(jù)，但在右旋糖苷分子量為40000時，或向20g右旋糖苷中加入3g或5g高硤酸鈉等時，以;su吏用右旋糖苷時，可得到同樣柔軟和有韌性的凝膠狀樹脂層。5.使用兔皮膚進行粘接力的評價將第4節(jié)所得20重量％的醛化右旋糖苷水溶液作為第1液.而且，將第2節(jié)所得20重量％的中性聚賴氨酸水溶液、30重量％和50重量%的2官能PEG-NH2水溶液、以及50重量％的4官能PEG-NH2水溶液作為第2液.將第2液僅使用20重量％的中性聚賴氨酸水溶液的作為實施例(實施例l)的粘合劑。準(zhǔn)備好脫脂后的家兔背部皮膚(lx6cm)，在其表面依次涂布2液粘合劑的第1液和第2液各約lOpl(涂布面積lxlcm)。充分混合后，與同樣大小的家兔背部皮膚(未涂布粘合劑原液)粘貼，施加200g的負(fù)荷，放置5分鐘。然后，立即使用拉伸試驗機(AutographAGS-5KNG，島津制)，用10mm/分鐘的速度持續(xù)負(fù)載剪切力直至皮膚剝離為止，以剝離時的負(fù)荷荷重作為粘接強度。另外，為進行比較，對血纖蛋白膠("Bolheal",化學(xué)及血清療法研究所)也進行了同樣的試驗。結(jié)果如表4所示。[表41<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>如表4所見，使用中性聚賴氨酸水溶液或4官能PEG-N狂2水溶液作為粘合劑第2原液時，顯示了遠(yuǎn)高于以往的血纖蛋白膠的粘接強度.6.通過添加殼聚糖控制固化物的分解將第4節(jié)所得20重量％眵化右旋糖苷水溶液作為第1液，然后，通過將重均分子量為100000的殼聚糖(Yaegaki發(fā)酵技研株式會社，脫乙酰化度80%)溶于5%乙酸水溶液而配制的5重量％殼聚糖溶液與第4節(jié)所得20重量％中性聚賴氨酸水溶液以各種體積比混合，將這些混合液作為第2液。即，對于實施例l的粘合劑，將其笫2液中的一部分用殼聚糖水溶液替換。接著，向16mm玻璃試管內(nèi)放入粘合劑第1液和第2液的原液各lml，使其固化后，添加3ml磷酸緩沖溶液(PBS)，密封試管。然后，將試管放入37'C的干燥機中，經(jīng)時觀察粘合劑的分解狀況。圖3顯示了固化后5天中粘合劑的經(jīng)時狀態(tài)。圖3中試管下的標(biāo)記表示5重量%殼聚糖水溶液與20重量％中性聚賴氨酸水溶液的體積比。如圖3所示，在殼聚糖含量較少(體積比為0/10、1/9)的實施例中，粘合劑在5日內(nèi)完全分解。與之相比，若殼聚糖含量增多、則固化物的殘留量變多，體積比為5/5的粘合劑即使經(jīng)過3周也未觀察到分解。由此可知，通過改變氨化合物的種類、混合比，可以容易地控制粘合劑的分解速度或其在含水狀態(tài)下直至呈流動化為止的時間。此外，由以上結(jié)果可見，單獨使用分子量為10萬等的較低分子量的殼聚糖作為2液粘合劑的第2液時，全然未見本發(fā)明的自分解性。即，即使是含有氨基單元的直鏈狀聚合物，僅當(dāng)分子量在數(shù)萬以下，尤其是在2萬以下時，才可證實得到本發(fā)明的效果。7.粘合劑固化物在生物體內(nèi)分解速度的評價第1液使用第3節(jié)所用的分子量為75000的醛化右旋糖苷水溶液(20重量％)。而且，配制與第3節(jié)相同的10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。即，采用實施例l的粘合劑。為評價粘合劑固化物在生物體內(nèi)的分解速度，使用家兔(體重2.53.0kg，雌性)進行了以下實驗.由耳緣靜脈注射相當(dāng)于lkg體重0.6ml的戊巴比妥鈉后，通過向足部肌肉內(nèi)注射相當(dāng)于lkg體重O.lml的甲苯噻溱(商品名Selactar)進行麻醉處理。開腹后，將開有())10mm大小的孔的濾紙(No.2)貼附于肝臟表面，使用專用攪拌裝置將2液混合，涂布約lml。固化后縫合腹部，調(diào)查固化物的經(jīng)時分解狀況.圖4顯示了粘合劑固化物的分解狀況。確認(rèn)自埋入3日后開始慢慢發(fā)生分解，4周后有90%左右分解。而且，從組織反應(yīng)和組織切片圖來看，未見特別擔(dān)心的不良影響，這說明其安全性高。在進一步的分解實驗中，也未見兔出現(xiàn)食欲下降等，也未發(fā)現(xiàn)因埋入粘合劑而產(chǎn)生的不良影響。8.通過添加檸檬酸控制固化物的分解將第4節(jié)所得的20重量％醛化右旋糖苷水溶液作為第1液。而且，向第2節(jié)使用的25重量％堿性聚賴氨酸水溶液10ml中，以各種比例加入乙酸與檸檬酸至它們共為lg，再添加蒸餾水1.5ml，配制成20重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。即，將實施例1的2液粘合劑與參考例3(第3節(jié))的2液粘合劑以8/2、6/4、4/6以及2/8的各重量比混合形式，配制成為實施例的粘合劑。另外，以同樣方法配制僅使用乙酸(10/0)的粘合劑(與實施例l相同)和僅使用檸檬酸(0/10)的粘合劑(與參考例3相同)，進行比較。接著，按第6節(jié)所述方法評價粘合劑固化物的分解速度。其結(jié)果匯總于圖5。圖中的標(biāo)記表示乙酸和檸檬酸的重量比，最左為僅用乙酸調(diào)整pH的情況，最右邊為僅用檸檬酸調(diào)整pH的情況.調(diào)整聚賴氨酸水溶液pH所使用的酸僅為乙酸時，4日后完全分解，與之相比，隨著檸檬酸量的增加，固化物的分解延遲，在僅用檸檬酸調(diào)整pH值時，即使經(jīng)過2周仍保持著原來的形狀，其完全分解則需要2個月以上。由此顯示，通過改變pft調(diào)節(jié)劑的種類、數(shù)量，可以容易地控制粘合劑固化物的分解速度。9.聚賴氨酸的熱處理對高分子量化和固化物分解速度的影響將分子量為4000的s-聚-L-賴氨酸粉末(智索林式會社，批號20211023F)在180'C下進行真空干燥(熱處理).用凝膠電泳法評價經(jīng)熱處理的s-聚-L-賴氨酸的分子量.這里，使用15。/。SDS作為電泳用凝膠，使用流動緩沖溶液(NacalaiTesque公司，0.25mol/l-Tris，1.92mol/l-甘氨酸，10g/l-SDS)作為電泳液，使用日本EIDO林式會社的裝置在50mA電流下測定.標(biāo)記物使用肽分子量標(biāo)記物(第一化學(xué)藥品林式會社，Mw=2，51216，950;批號024RJZ)和蛋白梯(Invitrogen公司，Mw=6，000~181，800;批號1283301A)，染色液使用考馬斯亮藍(lán)(Invitrogen公司，R-250).其結(jié)果，得到圖6的照片狀的電泳圖形.確認(rèn)對于未處理體系(處理時間為O)，在2.56K之間顯現(xiàn)主成分，與智索林式會社的商品目錄中的分子量4000相一為是由于分子量為4000的成分彌散所致。通過熱處理雖然點消失，但分子量顯著增加，當(dāng)處理時間超過1.5小時，就會出現(xiàn)超出分子量標(biāo)記物的最大值182K的成分，進而隨著時間延長高分子量成分也增加。將所得熱處理聚賴氨酸粉末溶于蒸餾水，制成10重量％，令其含有4重量％的乙酸，配制成第2液。第1液使用笫3節(jié)所用的分子量為75000的醛化右旋糖普水溶液(20重量％)?；旌系?液和第2液，按第6節(jié)記栽的方法評價粘合劑固化物的分解速度。其結(jié)果如圖7所示。隨著處理時間(分子量)的延長分解時間也變長，處理時間為O時、2日內(nèi)分解，與之相比，處理時間為1.5小時則分解時間需2周，進而若處理時間為6小時，則分解時間需1個月以上。如第8節(jié)所述，由于固化物的分解時間可容易地通過選擇pH調(diào)節(jié)劑(乙酸或檸檬酸等)而延遲，因此一般認(rèn)為，在使用分子量低的、熱處理前的s-聚-L-賴氨酸時，可將分解時間由短期至長期自由調(diào)節(jié)，與此相比，當(dāng)使用經(jīng)長時間熱處理后的聚賴氨酸時，該調(diào)節(jié)則變得困難。但是，對于例如在180'C下的經(jīng)0.5小時左右或更少時間的熱處理，認(rèn)為是可用于調(diào)節(jié)分解時間的處理。與第6節(jié)中的分子量為10萬的殼聚糖的結(jié)果聯(lián)合考慮時，可以判定，含醛基聚合物的分子量為數(shù)萬以下，對充分發(fā)揮本發(fā)明的自分解性是必要的。10.電子束滅菌的應(yīng)用第1液使用笫3節(jié)所用的分子量為75000的醛化右旋糖苷水溶液(20重量％).另外，配制與笫3節(jié)相同的10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液，將各溶液用0.2jim孔徑的針筒式過濾器(Dismic25-AS020AS,Advantec制)過濾后，分別裝入5ml玻璃安瓿中，封管。將笫1液和第2液作為一體，25"時、在如表5左端所示條件下進行滅菌處理。經(jīng)滅菌處理后，按第2節(jié)所示方法調(diào)查其固化時間，研究滅菌處理的影響。其結(jié)果總結(jié)于表5。[表51放射線照射引起的固化時間的變化滅菌法固化時間/秒"差/秒未處理(未處置)13.04±0.200y射線(25kGy)13.65±0.060.62電子束(20kGy)10.66±0.26-2.38電子束(40kGy)8,25±0.07-4.79*)數(shù)據(jù)=平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)由表可見，通過Y射線照射在一定程度上延長了固化時間，而電子束照射則反而比未處置時的固化時間縮短。因此，認(rèn)為電子束照射法未引起各成分的分子量降低或改性，作為本粘合劑的滅菌方法的適用性高。11.由壓縮試驗評價粘合劑固化物的柔軟性第1液使用笫3節(jié)所用的分子量為75000的S化古凌糖苷水溶液(20重量％)。另外，配制與第3節(jié)相同^f10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。將它們用專用攪拌裝置混合，向細(xì)胞培養(yǎng)用24孔平皿(底面積2cm2)中流入2ml的量。25。C下2分鐘后，使用拉伸試驗機(島津制作所制ADS-5D)，將直徑6.6mm的半球以10mm/分鐘的速度壓在粘合劑固化物上，通過測定壓縮應(yīng)力，評價固化物的柔軟性.此外，作為比較對象，對血纖蛋白膠(Bolheal，化學(xué)及血清療法研究所)也進行了調(diào)查.應(yīng)力-壓縮應(yīng)力曲線結(jié)果如圖8所示.圖中給出了半球相對于固化物的壓陷量(mm)的該時刻的應(yīng)力值(mN).初期斜率基本無差別，從壓陷量為lmm附近開始，血纖蛋白膠的斜率變大，而本粘合劑的斜率為其一半左右。由此顯示，本粘合劑的固化物比血纖蛋白膠更柔軟。另外，雖省略了數(shù)據(jù)，但本發(fā)明的粘合劑，通過在20g右旋糖苷中分別添加高碘酸鈉3g和10g,可以使壓縮試驗中的壓縮應(yīng)力-應(yīng)力曲線發(fā)生變化。即，通過改變a-葡聚糖的醛化程度、改變?nèi)┗?氨基的摩爾比，使固化時的交聯(lián)密度自由變化，從而可以自由調(diào)節(jié)固化后的凝膠狀樹脂層的柔軟性。12.使用牛皮對粘接力的評價第1液使用第3節(jié)所用的分子量為75000的醛化右旋糖苷水溶液(20重量％)。另外，配制與第3節(jié)相同的10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。即，采用參考例3的2液粘合劑。為研究粘合劑的粘接強度，以牛皮作為被粘接體進行粘接試驗。將牛皮(TRUSCO公司的JT-5L，工作用皮革長袖手套)裁剪為lx5cm的長方形，以lxlcm的粘接面積將2片皮革進行粘接，在100g荷重下靜置5分鐘，使固化。所得粘接體用第11節(jié)使用的拉伸試驗機以10mm/分鐘的拉伸速度進行剪切，求得剝離時的粘接力(n=5)。此外，作為比較對象，對血纖蛋白膠(Bolheal，化學(xué)及血清療法研究所)也進行了調(diào)查。其結(jié)果，本粘合劑的粘接強度為2024±563gf/cm2，血纖蛋白膠的粘接強度為519±136gf/cm2。平均值顯示了本粘合劑相當(dāng)于血纖蛋白膠的近4倍的粘接強度，粘接強度在lkg/cii^以上的樣品盡管較多，但由于血纖蛋白膠的固化時間過短，難以制成粘接體，故血纖蛋白膠的粘接強度的不均衡性大，粘接強度低。此外，通過第2節(jié)的方法測得固化時間，本粘合劑為約10秒，而血纖蛋白膠為l秒以下。13，在消化器官外科領(lǐng)域的使用例(在肝臟中的止血效果)將第4節(jié)所得的20重量％醛化右旋糖苷水溶液作為第1液。另外，將第2節(jié)所得的20重量％中性聚賴氨酸水溶液和50重量％2官能PEG-NH2水溶液(游離胺)分別作為笫2液，以中性聚賴氨酸水溶液作為笫2液的，相當(dāng)于實施例1(第2節(jié))的粘合劑.將處死家兔的腹部從正中切開，露出肝臟，然后，用手術(shù)刀在肝臟切出長約2cm、深約5mm的傷口(切口)，使切開部位持續(xù)出血。接著，使用專用攪拌裝置，將粘合劑的第l和第2原液等容量混合，涂布于切開部位。結(jié)果確認(rèn)，第2液為中性聚賴氨酸水溶液的2液粘合劑(實施例1)在10秒以內(nèi)，第2液為2官能PEG-NH2水溶液的粘合劑在30秒以內(nèi)，發(fā)揮了確實的止血效果。圖9顯示了使用聚賴氨酸水溶液作為第2液時的止血前后的肝臟，可知發(fā)揮了止血效果。而且，粘合劑的膜將肝臟堅固地固定。由此可知，本實施例的粘合劑作為消化器官外科領(lǐng)域的止血劑，也發(fā)揮了優(yōu)良的效果。14.在心血管外科領(lǐng)域的使用例(防止粘連效果)第1液使用第3節(jié)使用的分子量為75000的醛化右旋糖苷水溶液(20重量％)。另外，配制與第3節(jié)相同的10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。即，配制與參考例3(第3節(jié))相同的2液粘合劑。其次，使分子量為7000的糊精(和光純藥工業(yè)林式會社，批號EWQ7180)20g與5g高碘酸鈉反應(yīng)，按第2節(jié)的方法得到醛化糊精。之后，配制20重量％水溶液，作為2液粘合劑的第1液。另外，通過向第2節(jié)所用的25重量％聚賴氨酸水溶液10ml中添加乙酸酑0.5ml和蒸餾水14.5ml，配制10重量％的中性聚賴氨酸水溶液，作為2液粘合劑的笫2液。這樣，得糊精型的實施例的2液粘合劑。為確認(rèn)在心血管外科領(lǐng)域的防止粘連效果，切開大鼠的心膜，在左心室表面用紗布摩擦100次，制成引起粘連的環(huán)境。向該處涂布由各種組成成分配制的粘合劑，縫合胸部，4周后，開胸，設(shè)定5個等級分?jǐn)?shù)(O，1，2，3，4共5個等級，數(shù)字越大表示粘連傾向越高)，判定粘連狀況(n=5),此外，使用臨床上作為防粘連劑用的血纖蛋白膠(Bolheal，化學(xué)及血清療法研究所)作為比較對象。按照未處置、血纖蛋白膠、參考例3(第3節(jié))的粘合劑、糊精型實施例的粘合劑的順序，其分?jǐn)?shù)分別為2.4±0.5、1.2±0.4、3.2±0.4、1.2±0.4，按照第6節(jié)所示方法，對參考例3(第3節(jié))的粘合劑以及糊精型實施例的粘合劑進行固化物分解速度的評價時，前者為約1個月、后者為2~3日。由此顯示，糊精型實施例的粘合劑的分解速度非?？?將之與上述結(jié)果合并考慮，可知凝膠的分解慢時(參考例3)比未處置時的粘連嚴(yán)重，分解快時(糊精型實施例)與血纖蛋白膠的粘連程度相同，通過使用分解快的粘合劑，可顯示出高效的防止心臟粘連效果。圖IO顯示了經(jīng)手術(shù)后4周的患部組織切片圖(馬森三色染色)。如圖中箭頭所示，確認(rèn)心臟表面殘留有固化物。手術(shù)時，通過用紗布摩擦心表面的心外膜，制成帶傷的引起粘連部位?？紤]到此時摩擦導(dǎo)致心外膜幾乎完全剝落，因此是涂布在露出的心肌組織上。包圍在粘合劑周圍的組織是之后生出的組織。粘合劑的涂布量雖然相同，但由于糊精型實施例粘合劑的分解迅速，與參考例3相比，其殘留的固化物的量非常少。因此認(rèn)為粘連也輕微。以上顯示，本實施例的粘合劑，可以容易地控制分解速度，因此作為心血管外科領(lǐng)域的防止粘連劑也是有效的。15.在心血管外科領(lǐng)域的使用例(止血效果)使用分子量為40000的右旋糖苷，配制第8節(jié)使用的20重量％醛化右旋糖苷水溶液，作為第1液。另外，配制第8節(jié)使用的20重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液(檸檬酸含量4%)。即，配制與參考例3(第3節(jié))相當(dāng)?shù)?液粘合劑。此外，除參考例3的粘合劑分解有些緩慢外，顯示了與各實施例的粘合劑相同的性質(zhì)和性能.為確認(rèn)在心血管外科領(lǐng)域的止血效果，進行了以下實驗.在乙瞇氣氛下放置30秒左右后，在氣管內(nèi)插管，用吸入異氟烷的方法實施麻醉，通過縫合大鼠的左心室自由壁止血，用19號針頭穿刺形成穿孔.暫緩縫合待確認(rèn)有脈動性出血后再次縫合、完全止血。除去周圍的血液，在心臟上覆蓋開有比19號針頭略大的孔的紙，使粘合劑和血液不會流到周圍.用胰島素注射用注射器在穿孔部位涂布0.4ml粘合劑.3分鐘后放置紗布，為使流出的血液可被紗布吸收，使縫合緩悛3分鐘(預(yù)先測定紗布的重量，以其前后重量差作為出血量).作為比較對象，也對未處理情況和血纖蛋白膠(Beriplast，化學(xué)及血清療法研究所)進行了實驗。此外，按未處置組、本粘合劑組、血纖蛋白膠組的順序，實驗中所用大鼠數(shù)量分別為6、5、5。按未處置、本粘合劑、血纖蛋白膠的順序，各出血量分別為1.1士0.5g、0.4土0.1g、0.9士0.5g，本粘合劑與血纖蛋白膠相比，其出血量顯著減少(p=0.02)。此外，對于出血情況，使用血纖蛋白膠時，血液突破了固化物而出血，除此以外，在固化物周圍與組織的間隙中也有出血，而本粘合劑僅出現(xiàn)后者且為少量，認(rèn)為這是出血量有差別的原因。以上顯示，本粘合劑作為心血管外科領(lǐng)域的止血劑也是有效的。16.在呼吸器官外科領(lǐng)域的使用例(對肺氣漏的堵塞)第1液使用第3節(jié)使用的分子量為75000的醛化右旋糖苷水溶液(20重量％)。然后，配制與第3節(jié)相同的10重量％中性聚賴氨酸水溶液，作為第2液。即，配制與參考例3(第3節(jié))相當(dāng)?shù)?液粘合劑。為確認(rèn)對肺氣漏的堵塞效果，使用比格狗進行了以下實驗。通過常規(guī)方法進行麻醉，經(jīng)氣管內(nèi)插管、開胸，在右肺以電動手術(shù)刀制成3x3cm面積的胸膜缺損部位。通過向患部噴射生理鹽水，提高人工呼吸機的壓力、確認(rèn)形成氣漏。然后，使用專用攪拌裝置在患部滴下約2ml的粘合劑并用手指敷涂(10秒)，2分鐘后向胸腔內(nèi)充滿生理鹽水，進行氣漏測試。作為比較對象，使用血纖蛋白膠(Bolheal,化學(xué)及血清療法研究所)，在患部滴下血纖蛋白原溶液并用手指敷涂，用噴射器在其上涂布(mb&spray法)。使用血纖蛋白膠時，根據(jù)文獻，在涂布5分鐘后進行氣漏測試。按本粘合劑、血纖蛋白膠(Bolheal)的順序，確認(rèn)出現(xiàn)氣漏的壓力分別為35.4±6.8、33.3±4.8cmH20，未見大的差異.但是，兩者的氣漏方式差別較大，使用血纖蛋白膠時，整個血纖蛋白塊從肺部剝離，缺損部暴露出來、開始漏氣(氣泡大)，而使用本粘合劑時，確認(rèn)缺損部本身保持完好，其周邊部位有針孔大小的洞，只有極小的氣泡。圖ll顯示了涂布本粘合劑前后的肺表面，可知通過涂布、缺損部位被粘合劑固化物所覆蓋.本粘合劑、血纖蛋白膠的術(shù)后使用情況均良好，比格狗未再次出現(xiàn)漏氣。該結(jié)果顯示，本粘合劑在呼吸器官外科領(lǐng)域作為堵塞肺氣漏目的而使用，也是很有效的。17.參考例l一末端氨基聚乙二醇將第4節(jié)所得的20重量％醛化右旋糖苷水溶液(分子量40000)作為第1液。另外，將第2節(jié)所得的兩末端各有1個氨基的重均分子量為3000的聚乙二醇胺(2官能PEG-NH2，游離胺)溶于蒸餾水，配制成50重量％的水溶液(游離胺)作為第2液。接著，按照第6節(jié)記載的方法，經(jīng)時觀察粘合劑固化物的分解情況。結(jié)果顯示，3小時內(nèi)完全液化。第2液成分的2官能PEG-NH2雖然分子量為3000，但因其僅在兩末端具有氨基，只在末端發(fā)生反應(yīng)，交聯(lián)密度極低，因而迅速分解。由本節(jié)結(jié)果和第2節(jié)的聚乙二醇胺的結(jié)果可證明，含氨基聚合物必須是由含氨基單元的鏈構(gòu)成的。18.參考例2—低聚殼聚糖(Chitosanoligosaccharide)將第4節(jié)所得的20重量％醛化右旋糖苷水溶液(分子量40000)作為笫1液.另外，將低分子量殼聚糖粉末("Y.H.低聚殼聚糖"，Yaegaki發(fā)酵技研林式會社，批號000522，乳酸鹽，26糖的混合物，平均分子量為700)溶于蒸餾水，配制50重量％水溶液作為第2液。接著，進行與參考例1同樣的反應(yīng)，經(jīng)過7小時也未固化。為此，向試管內(nèi)加入lml第1液，加入Y.H.低聚殼聚糖粉末100mg代替第2液，混合。30分鐘后，確認(rèn)固化。添加3ml的磷酸緩沖溶液(PBS)、封管后，經(jīng)時觀察粘合劑固化物的分解狀況。結(jié)果顯示，6小時內(nèi)完全液化.Y.H.低聚殼聚糖中，雖然相對于每個糖殘基具有l(wèi)個氨基，但因分子量過低，在使用其50重量％溶液時未形成凝膠，即使是使用粉末時也不能形成有效的凝膠網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)，因而迅速分解、液化，由低聚殼聚糖的結(jié)果可知，要達(dá)到約l日或更長的適當(dāng)?shù)淖员澜鈺r間，含醛基的單元的鏈狀聚合體的分子量必須在1000以上。而且，由低聚殼聚糖的結(jié)果可知，低分子量殼聚糖與低分子量聚賴氨酸等的作用相同。即，與第6節(jié)的添加殼聚糖的結(jié)果合并考慮，只有當(dāng)含醛基的單元的鏈狀聚合物的分子量為10002萬時，才能得到本發(fā)明的特有的效果。權(quán)利要求1.醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，是由重均分子量為1000～20萬的醛化α-葡聚糖水溶液構(gòu)成的第1液和由含氨基單元的鏈形成的含氨基聚合物水溶液構(gòu)成的第2液組成，上述含氨基聚合物的重均分子量為1000～2萬，上述第1液和第2液混合時，pH為5.0～8.0。2.權(quán)利要求1所述的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，上述笫1液和第2液的混合狀態(tài)下，醛基/氨基的摩爾比為0.2~2.0。3.權(quán)利要求1所述的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，上述的第2液中，可添加1~10重量％的乙酸、檸檬酸、琥珀酸、戊二酸、蘋果酸、富馬酸、馬來酸或其他一元或多元羧酸化合物、或與他們的至少一種對應(yīng)的酸酐化合物。4.權(quán)利要求1或2所述的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，上述醛化a-葡聚糖是將重均分子量為200010萬的右旋糖苷或糊精用高碘酸或高碘酸鹽氧化，相對每個葡糖酐單元引入0.1~1.0個醛基而得到的。5.權(quán)利要求l或2所述的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，對上述笫1液和笫2液照射10~50KGy的電子束進行滅菌。6.權(quán)利要求1或2所述的醫(yī)療用2液反應(yīng)型粘合劑，其特征在于，上述的含氨基聚合物是使用微生物或酶產(chǎn)生的s-聚-L-賴氨酸.7.自分解性醫(yī)療用樹脂，其特征在于，它是將由重均分子量為1000~20萬的醛化a-葡聚糖水溶液構(gòu)成的第1液和由含氨基單元的鏈形成的重均分子量為1000~2萬的含氨基聚合物水溶液構(gòu)成的第2液混合后所得的含水凝膠狀醫(yī)療用樹脂，醛基/氨基的反應(yīng)摩爾比為0.2-2.0，所述樹脂只要以含水狀態(tài)保存，在經(jīng)過可任意設(shè)定在1日1個月的凝膠狀態(tài)保持期間后，通過自分解變化為溶膠狀態(tài)。全文摘要本發(fā)明提供一種醫(yī)療用粘合劑及醫(yī)療用含水凝膠狀樹脂，其能充分滿足醫(yī)療用的粘合劑或樹脂所要求的一般性質(zhì)，且在經(jīng)過所設(shè)定的崩解時間后可迅速崩解，同時能夠比較自由地調(diào)整、控制該設(shè)定時間。將重均分子量為1000～20萬的醛化α-葡聚糖水溶液作為第1液，將由含氨基單元的鏈形成的含氨基聚合物水溶液作為第2液。上述含氨基聚合物的重均分子量為1000～2萬，上述第1液和第2液混合時的pH為5.0～8.0。文檔編號C09J105/00GK101111272SQ20068000363公開日2008年1月23日申請日期2006年1月31日優(yōu)先權(quán)日2005年1月31日發(fā)明者中島直喜,玄丞烋,近田英一申請人:Bmg株式會社