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一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液及使用方法

文檔序號:10715683閱讀:849來源:國知局
一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液及使用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液及使用方法。將巴氏芽孢桿菌(Bacilluspasteurii)接種于含多種營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中,在25~30℃下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值為6左右,培養(yǎng)12~24小時,培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光度計測量吸光度OD600,得到菌種生長曲線,觀察得到于18小時左右就進入穩(wěn)定期,相比于前人研究菌種生長速度明顯加快;本發(fā)明具有可以充分利用培養(yǎng)液中物質,工藝簡單,效率高,用時短,環(huán)境清潔,成本低廉,同時還提高了微生物誘導碳酸鈣的效率,可以縮短混凝土裂縫修補時間等優(yōu)點。
【專利說明】
一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液及使用方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)液的配制方法,特別是涉及一種促進微生物快速生長的培養(yǎng) 液的配制方法。
【背景技術】
[0002] 生物礦化作用是一種很普遍的自然現(xiàn)象,幾乎每一種生物都能合成礦物。其中近 三分之二是鈣礦,并且相當一部分具有膠結功能。它們通過其自身的生命活動,與周圍環(huán)境 介質之間不斷發(fā)生著酶化作用,逐漸形成碳酸鈣。利用微生物制備碳酸鈣具有環(huán)境清潔,綠 色環(huán)保,工藝簡單,成本低的優(yōu)點,該技術得到了廣泛的應用。同時巴氏芽孢桿菌是制備碳 酸鈣的常用菌,但由于其在一般培養(yǎng)條件下需要近48小時才能到達穩(wěn)定期,因此,用于裂縫 修補、混凝土膠結等實際工程中具有耗時較長,效率較低等缺點。
[0003] 巴氏芽孢桿菌的生長特征與培養(yǎng)液成分、培養(yǎng)溫度、PH值、氧氣供給等因素有關, 可以通過對這些條件進行控制,得到最適宜的培養(yǎng)條件,可以促進菌種快速生長,縮短培養(yǎng) 周期,從而提尚制備碳酸鈣的效率。

【發(fā)明內容】

[0004] 技術問題:本發(fā)明的目的是提供一種利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分來促進微生物快速 生長的培養(yǎng)液及使用方法。
[0005] 技術方案:本發(fā)明所采用的一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液中加入了酪蛋白 胨、豆粉蛋白胨和酵母浸膏三種營養(yǎng)物質,其中,酪蛋白胨、豆粉蛋白胨和酵母浸膏的含量 為g/L:酪蛋白胨為13-17g/L,豆粉蛋白胨為4-6g/L,酵母浸膏為5-6g/L,NaCl為4-6g/L,尿 素為18-22g/L,瓊脂為18-22g/L,余量為蒸餾水。
[0006] 酪蛋白胨、豆粉蛋白胨在早中期提供氮源、生長因子,酵母浸膏在中后期提供氮 源、生長因子,促進微生物快速生長,穩(wěn)定期減小一半。
[0007] 本發(fā)明的促進微生物快速生長的培養(yǎng)液的使用方法為:將巴氏芽孢桿菌Bacillus pasteurii接種于所述的培養(yǎng)液中,在25~30°C下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值為6 左右,培養(yǎng)12~24小時,培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光度計測量吸光度 〇D_,得到菌種生長曲線,觀察得到于18小時左右就進入穩(wěn)定期,相比于前人研究菌種生長 速度明顯加快。
[0008] 本發(fā)明將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種至培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中含有尿 素,以其為營養(yǎng)源,可以產(chǎn)生脲酶,不斷分解尿素,從而使溶液中的PH值適當?shù)纳?,更利?菌體的生長繁殖,同時培養(yǎng)液中含有酪蛋白胨和豆粉蛋白胨,兩者為菌種生長提供氮源和 碳源,同時兩者之間的相互影響可以共同促進菌種生長繁殖,而酵母浸膏在提供氮源和碳 源的基礎上還能提供無機鹽與NaCl相互配合進一步促進細菌生長。
[0009] 有益效果:與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明具有如下優(yōu)點:
[0010] 本發(fā)明可以充分利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質,相比于前人研究菌種生長速度明顯得 到加快,觀察到于18小時左右就進入了菌種生長的穩(wěn)定期,而且具有工藝簡單,效率高,用 時短,環(huán)境清潔,成本低廉,同時還提高了后續(xù)制備碳酸鈣的效率,可以縮短裂縫修補、混凝 土膠結的時間等優(yōu)點。同時在25~30°C下恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值為6左右為最優(yōu)培 養(yǎng)條件,培養(yǎng)12~24小時即可進行后續(xù)的試驗。
【附圖說明】
[0011 ] 圖1為室溫下菌種培養(yǎng)24小時內的生長0D6QQ曲線圖。
[0012]圖2為室溫下在只有酪蛋白胨作為營養(yǎng)源的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48小時的生長OD600曲線 圖。
[0013] 圖3為室溫下在只有豆粉蛋白胨作為營養(yǎng)源的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48小時的生長OD600曲 線圖。
[0014] 圖4為室溫下在只有NaCl提供無機鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48小時的生長OD600曲線圖。 [0015]圖5為室溫下在只有酵母浸膏提供無機鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48小時的生長0D 6QQ曲線 圖。
【具體實施方式】
[0016] 實施案例1
[0017] 一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液的配制方法,將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于含多種營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中,在25~30 |下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初 始PH值為6左右,培養(yǎng)12~24小時,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光度 計測量吸光度〇D_,得到菌種生長曲線,在本實施案例中,恒溫振蕩的溫度可選擇25、27或 30°C,控制初始PH值為5.5、6或6.5,培養(yǎng)時間可選擇12、15、17、20或24小時。此外,本實施例 可以只加酪蛋白胨不加豆粉蛋白胨作為主要營養(yǎng)物質;本實施例也可以只加豆粉蛋白胨不 加酪蛋白胨作為主要營養(yǎng)物質;本實施例還可以只加 NaCl提供無機鹽或者只加酵母浸膏提 供無機鹽。
[0018] 實施案例2
[0019]將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于含多種營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中(培養(yǎng) 基成分如表1所示),在25~30 °C下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值為6左右,培養(yǎng)12~ 24小時,得到渾濁的培養(yǎng)基,24小時后取出菌液在顯微鏡下觀察,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時 取出部分菌液,利用分光光度計測量吸光度〇D_,得到菌種生長曲線(圖1),觀察得到于18 小時左右就進入穩(wěn)定期。
[0020]表1培養(yǎng)基成分
[0021]
[0022] 實施案例3
[0023]將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于在案例1培養(yǎng)基的基礎上只加酪蛋 白胨不加豆粉蛋白胨作為主要營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中,在25~30°C下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并 控制初始PH值為6左右,培養(yǎng)48小時,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光 度計測量吸光度 0D6QQ,得到菌種生長曲線(圖2),觀察得到于40小時左右進入穩(wěn)定期。
[0024] 實施案例4
[0025]將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于在案例1培養(yǎng)基的基礎上只加豆粉 蛋白胨不加酪蛋白胨作為主要營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中,在25~30°C下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并 控制初始PH值為6左右,培養(yǎng)48小時,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光 度計測量吸光度 0D6QQ,得到菌種生長曲線(圖3),觀察得到于44小時左右進入穩(wěn)定期。
[0026] 實施案例5
[0027] 將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于在案例1培養(yǎng)基的基礎上只用NaCl 不加酵母浸膏提供無機鹽的培養(yǎng)基中,在25~30 |下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值為 6左右,培養(yǎng)30小時,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光度計測量吸光度 OD6Q0,得到菌種生長曲線(圖4),觀察得到于26小時左右進入穩(wěn)定期。
[0028] 實施案例6
[0029] 將巴氏芽孢桿菌(Bacillus pasteurii)接種于在案例1培養(yǎng)基的基礎上只用酵母 浸膏不加 NaCl提供無機鹽的培養(yǎng)基中,在25~30°C下進行恒溫振蕩培養(yǎng),并控制初始PH值 為6左右,培養(yǎng)30小時,在培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌液,利用分光光度計測量吸光 度OD600,得到菌種生長曲線(圖5),觀察得到于24小時左右進入穩(wěn)定期。
【主權項】
1. 一種促進微生物快速生長的培養(yǎng)液,其特征在于該培養(yǎng)液的組成為: 酪蛋白膝 13-17 g/L 豆粉蛋白腺 4-6 g/L 酵母浸膏 4-目g/L NaCI 日-6 g/L 尿素 18-22 g/L 瓊脂 化-22 g/L 余量為蒸饋水。2. -種如權利要求1所述的促進微生物快速生長的培養(yǎng)液的使用方法,其特征在于:將 己氏芽抱桿菌Bacillus pasteurii接種于所述的培養(yǎng)液中,在25~30°C下進行恒溫振蕩培 養(yǎng),并控制初始PH值為5.5-6.5之間,培養(yǎng)12~24小時,培養(yǎng)過程中每隔兩小時取出部分菌 液,利用分光光度計測量吸光度OD600 ,得到菌種生長曲線,觀察得到于18小時左右就進入穩(wěn) 定期,相比于其它菌種生長速度明顯加快。
【文檔編號】C12N1/20GK106085944SQ201610661889
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月12日 公開號201610661889.7, CN 106085944 A, CN 106085944A, CN 201610661889, CN-A-106085944, CN106085944 A, CN106085944A, CN201610661889, CN201610661889.7
【發(fā)明人】繆林昌, 孫瀟昊, 童天志
【申請人】東南大學
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