一種桉葉烷型天然產(chǎn)物衍生物13?芐胺?土木香內(nèi)酯的制備方法及用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種桉葉烷型天然產(chǎn)物衍生物13?芐胺?土木香內(nèi)酯的制備方法及用途，13?芐胺?土木香內(nèi)酯應(yīng)用于制備抗細菌產(chǎn)品。本發(fā)明提供了桉葉烷型天然產(chǎn)物衍生物13?芐胺?土木香內(nèi)酯的新用途，拓寬了13?芐胺?土木香內(nèi)酯的應(yīng)用范圍，為13?芐胺?土木香內(nèi)酯的應(yīng)用提供更多的可能性。本發(fā)明提高了13?芐胺?土木香內(nèi)酯的合成收率。
【專利說明】
-種按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)目旨的制備方 法及用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種化合物的新用途及其制備方法，特別設(shè)及一種按葉燒型天然產(chǎn)物 衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的制備方法及用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋最早從±木香內(nèi)醋通過邁克爾加成得到，運種合成方法存在 收率較低的缺陷，文獻報道該化合物對埃及斑蚊的幼蟲和成蟲具有毒性（參見文獻： Chemistry&Biodiversity(2010) ,7(7) ,1681-1697)。但是，未見 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋具有 抗細菌活性的報道，也未見13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對農(nóng)作物具有促生長作用的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的新 用途，W拓寬13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的應(yīng)用范圍，為13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的應(yīng)用提供更多的 可能性。
[0004] 本發(fā)明還提供了一種按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的制備方法， 提高了 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的收率。
[0005] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
[0006] -種按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的用途，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋 應(yīng)用于制備植物生長促進劑。
[0007] 作為優(yōu)選，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋應(yīng)用于制備小麥幼苗或綠豆幼苗的生長促進劑。 [000引作為優(yōu)選，應(yīng)用于制備小麥幼苗或綠豆幼苗的生長促進劑時，13-節(jié)胺-±木香內(nèi) 醋的濃度控制在《30yg/mL。
[0009] 發(fā)明人意外發(fā)現(xiàn)13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對特定的農(nóng)作物幼苗具有生長促進作用，尤 其是在特定的濃度《30yg/mL下，為新型生長促進劑的開發(fā)提供了新的途徑。
[0010] -種植物生長促進劑，它由13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋為活性成分制備而成，該植物生 長促進劑含有30yg/mL的13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋。
[0011] -種按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的用途，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋 應(yīng)用于制備抗細菌產(chǎn)品。
[0012] 作為優(yōu)選，所述抗細菌產(chǎn)品為抗菌藥物、殺菌劑、殺菌洗手液、殺菌藥皂、殺菌洗涂 液中的一種。
[0013] 作為優(yōu)選，所述抗細菌產(chǎn)品的殺菌譜包括大腸埃希氏菌、蠟狀芽抱桿菌、金黃色葡 萄球菌、白菜軟腐病菌和枯草芽抱桿菌。
[0014] 現(xiàn)有技術(shù)報道了 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋具有殺蟲活性，本發(fā)明則提供了 13-節(jié)胺-± 木香內(nèi)醋的殺蟲活性之外的新用途，用13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋制備抗細菌產(chǎn)品，本發(fā)明發(fā)現(xiàn) 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋特別針對大腸埃希氏菌、蠟狀芽抱桿菌、金黃色葡萄球菌、白菜軟腐病 菌和枯草芽抱桿菌具有很好的抑菌作用，開發(fā)了其作為抗細菌產(chǎn)品的新用途，為抗細菌產(chǎn) 品的開發(fā)提供了新的途徑。
[0015] -種抗細菌產(chǎn)品，它由13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋為活性成分制成而成，該抗細菌產(chǎn)品 中13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的濃度> 25yg/mL。
[0016] 按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的制備方法，±木香內(nèi)醋純品溶于 甲醇中，在0°C下攬拌，緩慢滴加節(jié)胺，之后室溫攬拌4小時，將反應(yīng)液減壓濃縮除去甲醇，將 所得反應(yīng)物用乙酸乙醋溶解，并用飽和NH4C1水溶液洗涂，減壓濃縮除去乙酸乙醋得混合 物，將混合物拌W200-300目硅膠，經(jīng)硅膠色譜，洗脫液洗脫，得13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋純品。 采用本發(fā)明的制備方法，顯著提高了 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的收率。
[0017] 本發(fā)明的有益效果是：
[0018] 1、提供了按葉燒型天然產(chǎn)物衍生物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的新用途，拓寬了 13-節(jié) 胺-±木香內(nèi)醋的應(yīng)用范圍，為13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的應(yīng)用提供更多的可能性。
[0019] 2、提高了 13-節(jié)胺-上木香內(nèi)醋的合成收率。
【附圖說明】
[0020] 圖1是13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對幼苗幼根和幼芽的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n = 5)。
[0021] 圖2是13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對幼苗鮮重的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n = 5)。
【具體實施方式】
[0022] 下面通過具體實施例，并結(jié)合附圖，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的具體說明。
[0023] 本發(fā)明中，若非特指，所采用的原料和設(shè)備等均可從市場購得或是本領(lǐng)域常用的。 下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
[0024] 實施例：
[0025] 本發(fā)明實驗所用的13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋純品系從天然植物藏木香提取的±木香 內(nèi)醋（參見文獻：馬燕燕.藏木香和鐵穢的化學(xué)成分及生物活性研究.蘭州大學(xué)博±論文， 2013)合成得到，其合成過程如下：
[0026]
[0027] ±木香內(nèi)醋純品233mg溶于lOmL甲醇中，在0°C下攬拌，緩慢滴力日158mg節(jié)胺，之后 室溫攬拌4小時。將反應(yīng)液減壓濃縮除去甲醇，將所得反應(yīng)物用20mL乙酸乙醋溶解，并用飽 和NH4C1水溶液洗涂3次。減壓濃縮除去乙酸乙醋得混合物。將混合物拌W0.5g 200-300目 硅膠，經(jīng)硅膠(200-300目，lOg)色譜，W乙酸乙醋：乙醇（1:1體積比）為洗脫液梯度洗脫，得 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋純品（313mg)，高效液相色譜檢測純度為98.5%，收率為92.3%，明顯 高于文獻（化6111131:巧&8;[0(1;[￥6^;[17(2010),7(7),1681-1697)報道的56.7%。本發(fā)明^甲 醇作為反應(yīng)體系，用飽和NH4C1水溶液洗涂，大大提高了產(chǎn)品的純度和收率。
[002引產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)鑒定：白色粉末狀固體。質(zhì)譜EI-MS顯示分子離子峰[M+H]+m/z = 340， 結(jié)合1化醒R和DEPT,可確定該化合物的分子式為C22H29NO2,不飽和度為9</Η NMR譜7.29- 7.36(m，4H)、7.21-7.26(m，lH)、3.86(d，J=13.2，lH)和3.75(d，J=13.2，lH)顯示分子中含 有一個芐基(4個不飽和度）。1化NMR譜顯示有22個碳信號，除去一個芐基的7個碳信號，還有 15個碳信號:包括2個甲基、5個亞甲基、5個次甲基、3個季碳信號，δ177.9顯示分子中存在一 個醋幾基（1個不飽和度），δ150.9和128.5顯示分子中存在1對雙鍵(1個不飽和度）。綜上，分 子中還有3個不飽和度，說明該分子有3個環(huán)，結(jié)合1η醒R譜4.69-4.71 (m，1Η)、1.18(S，3Η) 和1.03(d，3H，J = 7.8)，說明該化合物為一個按燒型的倍半祗，進一步查閱文獻比較發(fā)現(xiàn)該 化合物的波譜數(shù)據(jù)與13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的波譜數(shù)據(jù)完全一致。至此，產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)得到確 定。
[0029] 產(chǎn)品的波譜數(shù)據(jù)如下：1η NMR(400MHz，CDCl3) :7.29-7.36(m，4H);7.21-7.26(m, lH)；5.04-5.06(m,lH)；4.69-4.71(m,lH)；3.86(d J=13.2,lH)；3.75(d J=13.2,1H)； 1.18(s，3H);1.03(d，3H，J = 7.8).Uc NMR(100MHz，CDCl3) :177.9(s);150.9(s);128.5(d); 128.3(d)；127.1(d)；115.2(d)；77.5(d)；54.1(t)；45.9(d)；45.8(t)；42.9(t)；42.8(t)； 38.4(d);37.7(d);33.0(q);32.9(s);28.7(t);23.0(t);16.9(q).EI-MS:[M+W+m/z = 340。
[0030] 化合物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的抗菌活性測定
[0031 ] 1 .供試細菌：大腸埃希氏菌化scherichia col i )、蠟狀芽抱桿菌（Baci 1 lus cereus)、金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus)、白菜軟腐病菌（Erwinia carotovora)、枯草芽抱桿菌（Bacillus subtili)。
[00創(chuàng) 2.試驗方法：用接種環(huán)輕輕劃取一環(huán)菌種菌落至50mL LB培養(yǎng)基（蛋白腺0.5g，氯 化鋼0.25g，牛肉膏0.15g，去離子水50mL，抑=7.0±0.1)中，于37 °C恒溫?fù)u床上220r/min培 養(yǎng)至 006日日=0.5,取10 化濃度分別為 125,62.5,31.3，15.5,7.8,3.9，1.9,0.9,0.5μg/mL13- 節(jié)胺-±木香內(nèi)醋DMSO樣品溶液，取OD6oo=0.5的菌懸液于10化，于80化營養(yǎng)肉湯混合震蕩 均勻后置于37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地，然后根據(jù)比濁法原理，用酶標(biāo)儀測定0D6QQ得最低抑菌濃 度(MIC)，每一個菌種每一濃度的樣品溶液平行做3次測試。氨節(jié)青霉素為陽性對照。
[0033] 3.試驗結(jié)果:化合物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對大腸埃希氏菌、蠟狀芽抱桿菌、金黃色 葡萄球菌、白菜軟腐病菌、枯草芽抱桿菌的最低抑菌濃度MIC測試結(jié)果見表1。陽性對照為氨 節(jié)青霉素。
[0034] 表1化合物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋的抗菌活性
[0035]
[0036] 表1表明，化合物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對大腸埃希氏菌化.Coli)、蠟狀芽抱桿菌 (B.Cereus)、金黃色葡萄球菌（S.Aureus)、白菜軟腐病菌化.Carotovora)、枯草芽抱桿菌 (B.Subtilis)有很強的抑制作用，其中對大腸埃希氏菌、白菜軟腐病菌和枯草芽抱桿菌的 抑制活性比陽性對照氨節(jié)青霉素的活性都要好。抗菌試驗表明，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋可W 用于制備抗菌藥物，或者制備抗菌劑，或者用于制備抗菌洗手液或抗菌藥皂或抗菌洗涂液。
[0037] 化合物13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對植物幼苗生長的影響試驗測定
[0038] 1.試驗方法：W單子葉植物小麥、雙子葉綠豆為測試物種對象，先對各種子進行W 下前處理：用70%乙醇浸泡2.5min，2.5%次氯酸鋼浸泡15min，蒸饋水沖洗干凈備用。先用 蒸饋水培養(yǎng)種子，使其萌發(fā)。然后在大小為15X20cm的發(fā)芽盒中加入5ml處理液，并鋪放好 兩層濾紙，將100粒已經(jīng)發(fā)芽的種子均勻擺放在濾紙上，再加入5mL處理液(對照組為去離子 水CK，有3個不同處理液），每個處理設(shè)置3個重復(fù)。間隔一天從發(fā)芽盒中隨機取5粒種子測其 幼根、幼芽長度及鮮重，總共測定6次。
[0039] 2.試驗結(jié)果：
[0040] 2.1 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對小麥和綠豆幼苗幼根和幼芽影響的試驗測試結(jié)果見 圖1。結(jié)果表明，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對作物幼根和幼芽的生長有低濃度促進、高濃度延緩 或抑制的生物效應(yīng)。處理液濃度為《30yg/mL時，均可促進幼根和幼芽的生長，促進作用顯 著。當(dāng)處理液濃度為>3(K)yg/mL時，顯著抑制小麥和綠豆幼苗幼根和幼芽的生長。
[0041] 2.2 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對小麥和綠豆幼苗鮮重影響的試驗測試結(jié)果見圖2。結(jié) 果表明，13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對小麥和綠豆的鮮重有低濃度促進、高濃度延緩或抑制的生 物效應(yīng)。當(dāng)處理液濃度為《30yg/mL時，顯著促進小麥和綠豆的生長，鮮重增加。
[0042] 13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋對幼苗生長的影響試驗表明，該化合物可W用于制備植物生 長促進劑。
[0043] -種植物生長促進劑，它由13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋為活性成分制備而成，該植物生 長促進劑含有30yg/mL的13-節(jié)胺-±木香內(nèi)醋。
[0044] W上所述的實施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的 限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
【主權(quán)項】
1. 一種桉葉烷型天然產(chǎn)物衍生物13-芐胺-土木香內(nèi)酯的制備方法，其特征在于:土木 香內(nèi)酯純品溶于甲醇中，在〇°C下攪拌，緩慢滴加芐胺，之后室溫攪拌4小時，將反應(yīng)液減壓 濃縮除去甲醇，將所得反應(yīng)物用乙酸乙酯溶解，并用飽和NH 4C1水溶液洗滌，減壓濃縮除去 乙酸乙酯得混合物，將混合物拌以200-300目硅膠，經(jīng)硅膠色譜，洗脫液洗脫，得13-芐胺-土 木香內(nèi)酯純品。2. -種桉葉烷型天然產(chǎn)物衍生物13-芐胺-土木香內(nèi)酯的用途，其特征在于：13-芐胺-土木香內(nèi)酯應(yīng)用于制備抗細菌廣品。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于:所述抗細菌產(chǎn)品為抗菌藥物、殺菌劑、殺菌 洗手液、殺菌藥皂、殺菌洗滌液中的一種。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于:所述抗細菌產(chǎn)品的殺菌譜包括大腸埃希氏 菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白菜軟腐病菌和枯草芽孢桿菌。
【文檔編號】A01P1/00GK106083785SQ201610429128
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2015年1月22日
【發(fā)明人】陳佳, 高坤, 袁春娟
【申請人】浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院