從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法，本發(fā)明采取較為簡單的酸處理作為藻細(xì)胞壁的破壁方法結(jié)合易溶于蝦青素的脂溶性溶劑二甲基亞砜，經(jīng)過對酸處理破壁方法的因素優(yōu)化得出，當(dāng)鹽酸濃度為4M、雨生紅球藻粉和鹽酸比（w/v）為1:40，80℃前處理5min時，再用二甲基亞砜作為萃取溶劑提取率達(dá)到最大為0.2%?0.5%。為了進(jìn)一步提高蝦青素提取率，采用兩種破壁方法—酸處理破壁法與超聲破壁法聯(lián)用的策略，達(dá)到較好效果，蝦青素提取率達(dá)到0.4%?0.7%。
【專利說明】
從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于微藻生物技術(shù)，涉及一種從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雨聲紅球藻(Haematococcus pluvialis)一種普遍存在的綠藻，屬于團(tuán)藻目，紅球藻科，是生產(chǎn)蝦青素的天然來源之一。蝦青素(Astaxanthin)作為類胡蘿卜素中的葉黃素類，在魚類的著色及人體抗氧化等方面具有極其重要的應(yīng)用。
[0003]雨生紅球藻在厚壁孢子時期能大量積累蝦青素，此時一般為收集雨生紅球藻的最佳時期。厚壁孢子時期細(xì)胞壁較厚，破壁效果對蝦青素的提取至關(guān)重要，而且還要綜合考慮方法的經(jīng)濟(jì)成本及工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)等實(shí)際因素。近年來，隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，微波輔助提取(MAE)(Hemwimon S，Pavasant P, Shotipruk A.Microwave-assisted extract1nof ant1xidative anthraquinones from roots of Morinda citrifolia[J].Separat1n and purificat1n technology, 2007 , 54(1): 44-50.)和超聲輔助提取(UAE)CRostagno M A, Palma M, Barroso C G.Ultrasound-assisted extract1n ofsoy isoflavones[J].Journal of Chromatography A, 2003, 1012(2): 119-128.)越來越多地被用來從植物和微生物中提取活性物質(zhì)。但應(yīng)用于工業(yè)化的過程中可能出現(xiàn)成本過尚，不易大規(guī)t旲生廣等特點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于探究雨生紅球藻中蝦青素的較優(yōu)提取方案。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，擬采用如下技術(shù)方案:
本發(fā)明一方面涉及一種從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法，所述的方法包括如下步驟:
(I)雨生紅球藻粉溶于HCl溶液中，70-90 0C水浴3-8min ；
(2 )酸處理后以5000-9000rpm離心3-7min，倒出上清液，沉淀采用去離子水洗滌1_3次后，用DMSO溶解底部沉淀得a;
(3)a在冰浴下超聲20-40min;
(4)超聲后40-50°C下水浴Ih后取樣。
[0005]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的HCl為3-5MHCl0
[0006]在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的鹽酸用量為雨生紅球藻粉重量的30-50倍。
[0007]在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的DMSO的用量為雨生紅球藻粉重量的30-50倍。
[0008]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的超聲總工作時間30min，工作Is，間歇Is，功率390W。
[0009]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，水浴后的樣品通過0.22μπι的有機(jī)濾膜過濾。
[0010]本發(fā)明采取較為簡單的酸處理作為藻細(xì)胞壁的破壁方法結(jié)合易溶于蝦青素的脂溶性溶劑二甲基亞砜，經(jīng)過對酸處理破壁方法的因素優(yōu)化得出，當(dāng)鹽酸濃度為4M、雨生紅球藻粉和鹽酸比(w/v)為1:40，80°C前處理5min時，再用二甲基亞砜作為萃取溶劑提取率達(dá)到最大為0.2%-0.5%。為了進(jìn)一步提尚4下青素提取率，米用兩種破壁方法一酸處理破壁法與超聲破壁法聯(lián)用的策略，達(dá)到較好效果，蝦青素提取率達(dá)到0.4%-0.7%。
【具體實(shí)施方式】
[0011 ]雨生紅球藻中蝦青素提取具體方法如下:
(1)分析天平稱取Ig雨生紅球藻粉溶于40mL4M HCl中，80°C水浴5min;
(2)酸處理后離心7000rpm5min，倒出上清液，去離子水洗滌兩次后用40mL DMSO溶解底部沉淀5min后取樣記為a ；
(3)冰浴下超聲30min，相關(guān)設(shè)置參數(shù)為總工作時間30min，工作ls，間歇ls，功率390W。超聲后取樣記為b;
(4)超聲后45°C下水浴Ih后取樣記為C。樣a、b、c分別通過0.22μπι的有機(jī)濾膜，液相色譜儀測定蝦青素含量。進(jìn)而計(jì)算蝦青素的提取率。
[0012]蝦青素提取率(％)=提取得到的蝦青素質(zhì)量/雨生紅球藻藻粉質(zhì)量X100%。
[0013]實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
實(shí)驗(yàn)采用先酸處理后超聲的方法處理藻細(xì)胞，最后再輔助水浴方法來提取蝦青素。三個階段分別取樣，酸處理階段結(jié)束后即a階段蝦青素提取率為0.2%-0.5%，超聲進(jìn)行完畢后SPb階段提取率為0.3%-0.6%，水浴Ih后即c階段提取率為0.4%-0.7%。
[0014]結(jié)果表明三種不同的處理方法都在原有的基礎(chǔ)上提高了蝦青素的收率，分析比較后得知，通過將不同的方法聯(lián)合，使得蝦青素的提取率大大提高，發(fā)揮了不同方法之間的協(xié)同作用。
[0015]以上所述實(shí)施例只是本發(fā)明的較佳實(shí)例，而沒有限制本發(fā)明的實(shí)施范圍。因此，凡是根據(jù)本
【發(fā)明內(nèi)容】
的實(shí)質(zhì)所作出的等效修改，都應(yīng)屬于在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法，所述的方法包括如下步驟: (1)雨生紅球藻粉溶于HCl溶液中，70-90°C水浴3-8min； (2)酸處理后以5000-9000rpm離心3-7min，倒出上清液，沉淀采用去離子水洗滌1-3次后，用DMSO溶解底部沉淀得a; (3 )a在冰浴下超聲20-40min ； (4)超聲后40-50 °C下水浴Ih后取樣。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的HCl為3-5MHCl。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的鹽酸用量為雨生紅球藻粉重量的30-50倍。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的DMSO的用量為雨生紅球藻粉重量的30-50倍。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的超聲總工作時間3O m i η，工作I s，間歇I s，功率39016.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，水浴后的樣品通過0.22μπι的有機(jī)濾膜過濾。
【文檔編號】C07C403/24GK105859601SQ201610303101
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年5月10日
【發(fā)明人】馮嵬, 朱明輝
【申請人】北京化工大學(xué)