一種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物。
【背景技術(shù)】
[0002]紫杉醇(paclitaxel)是從紅豆杉科紅豆杉屬(Taxus)植物的樹皮中提取得到的二萜類化合物。它是一種新型的微管穩(wěn)定劑，具有獨(dú)特抗癌活性，被美國國立癌癥研究所認(rèn)為是近15?20年來腫瘤化療的最重要的進(jìn)展。作為晚期卵巢癌的二線治療藥，至今已在40多個(gè)國家獲準(zhǔn)上市，并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃腸道癌及介入治療后的血管再狹窄等治療上顯示了令人鼓舞的療效。紫杉醇由于資源匱乏和水溶性低的問題而限制了它的臨床應(yīng)用。
[0003]多烯紫杉醇是在C4和C5位置上含有一個(gè)帶有氧四環(huán)的紫杉烷環(huán)結(jié)構(gòu)，并在C13位置上含有一個(gè)龐大的酯側(cè)鏈。在其體外活性結(jié)構(gòu)關(guān)系中顯示C13酯側(cè)鏈的特性和構(gòu)型對(duì)于多烯紫杉醇體外抗微管蛋白活性是置關(guān)重要的。相對(duì)于紫杉醇而言，多烯紫杉醇的水溶性顯著提升，用于細(xì)胞凋亡和癌癥治療的藥物活性高于紫杉醇，因此其制備方法受到了廣泛的關(guān)注。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)中，多烯紫杉醇的制備方法是利用其前體物質(zhì)10-去乙酰漿果赤霉素III進(jìn)行化學(xué)修飾實(shí)現(xiàn)的，該前體物質(zhì)目前仍主要通過紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)的方式獲得。然而一方面由于受代謝調(diào)控的限制，紅豆杉細(xì)胞分泌10-去乙酰漿果赤霉素III的傾向并不旺盛；另一方面受限于培養(yǎng)密度、細(xì)胞產(chǎn)量等因素，使得目標(biāo)產(chǎn)物的得率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供一種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，以解決現(xiàn)有技術(shù)中紅豆杉細(xì)胞對(duì)10-去乙酰漿果赤霉素III的分泌量較低的技術(shù)問題。
[0006]為實(shí)現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0007]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，包括以下重量份的成分:檸檬酸鈉8?10份，赤霉素4?6份，白蛋白2?3份，木犀草素1?2份，蠶蛹粉1?2份，酵母粉1?2份，陳皮1?2份，旋復(fù)花1?2份，川木通1?2份，香加皮1?2份，水50?60份。
[0008]作為優(yōu)選，還包括1?2重量份的大青葉。
[0009]作為優(yōu)選，還包括1?2重量份的鼠李糖。
[0010]作為優(yōu)選，還包括1?2重量份的甘露醇。
[0011]作為優(yōu)選，還包括1?2重量份的廣藿香。
[0012]作為優(yōu)選，所述誘導(dǎo)物由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉9份，赤霉素5份，白蛋白2.5份，木犀草素1.5份，蠶蛹粉1.5份，酵母粉1.5份，陳皮1.5份，旋復(fù)花1.5份，川木通1.5份，香加皮1.5份，水55份。
[0013]作為優(yōu)選，所述誘導(dǎo)物由以下重量份的成分組成:朽1檬酸鈉8.5份，赤霉素5.5份，白蛋白2.1份，木犀草素1.3份，蠶蛹粉1.7份，酵母粉1.6份，陳皮1.2份，旋復(fù)花1.1份，川木通1.4份，香加皮1.5份，大青葉1.4份，鼠李糖1.1份，甘露醇1.5份，廣藿香1.8份，水57份。
[0014]本發(fā)明通過在培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)子的方式干涉紅豆杉細(xì)胞自身代謝模式，從而定向誘導(dǎo)紅豆杉細(xì)胞分泌多烯紫杉醇半合成前體一一10-去乙酰漿果赤霉素III。本發(fā)明在用于細(xì)胞培養(yǎng)的慣常營養(yǎng)物基礎(chǔ)上優(yōu)選了多種微量元素并確定了最佳配比，在此基礎(chǔ)上添加了一定量的天然藥物成分旨在進(jìn)一步促進(jìn)該前體物質(zhì)的產(chǎn)率。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加本發(fā)明誘導(dǎo)物后，紅豆杉細(xì)胞對(duì)10-去乙酰漿果赤霉素III的分泌量顯著提升，同時(shí)能夠在一定程度增進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)密度。本發(fā)明技術(shù)思路清晰，技術(shù)方案合理，具有良好的規(guī)?；瘧?yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0015]以下將對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)描述。為了避免過多不必要的細(xì)節(jié)，在以下實(shí)施例中對(duì)屬于公知的結(jié)構(gòu)或功能將不進(jìn)行詳細(xì)描述。除有定義外，以下實(shí)施例中所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員普遍理解的相同含義。
[0016]實(shí)施例1
[0017]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉8份，赤霉素4份，白蛋白2份，木犀草素1份，蠶蛹粉1份，酵母粉1份，陳皮1份，旋復(fù)花1份，川木通1份，香加皮1份，水50份。
[0018]實(shí)施例2
[0019]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉10份，赤霉素6份，白蛋白3份，木犀草素2份，蠶蛹粉2份，酵母粉2份，陳皮2份，旋復(fù)花2份，川木通2份，香加皮2份，水60份。
[0020]實(shí)施例3
[0021]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉9份，赤霉素5份，白蛋白2.3份，木犀草素1.8份，蠶蛹粉1.5份，酵母粉1.6份，陳皮1.7份，旋復(fù)花1.8份，川木通1.2份，香加皮1.8份，水55份。
[0022]實(shí)施例4
[0023]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉
8.8份，赤霉素5.4份，白蛋白2.7份，木犀草素1.2份，蠶蛹粉1.2份，酵母粉1.2份，陳皮1.5份，旋復(fù)花1.6份，川木通1.4份，香加皮1.7份，大青葉1份，廣藿香1.1份，水52份。
[0024]實(shí)施例5
[0025]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉
9.4份，赤霉素4.2份，白蛋白2.1份，木犀草素1.3份，蠶蛹粉1.1份，酵母粉1份，陳皮2份，旋復(fù)花1.9份，川木通1.2份，香加皮1.9份，鼠李糖1.3份，甘露醇1.2份，廣藿香1.6份，水58份。
[0026]實(shí)施例6
[0027]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉
8.8份，赤霉素5.4份，白蛋白2.7份，木犀草素1.2份，蠶蛹粉1.2份，酵母粉1.2份，陳皮1.5份，旋復(fù)花1.6份，川木通1.4份，香加皮1.7份，大青葉1.5份，水55份。
[0028]實(shí)施例7
[0029]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉
9.2份，赤霉素5.7份，白蛋白2.4份，木犀草素1.5份，蠶蛹粉1.5份，酵母粉1.7份，陳皮1.7份，旋復(fù)花1.2份，川木通1.9份，香加皮2份，甘露醇1.8份，水59份。
[0030]實(shí)施例8
[0031]—種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉
8.5份，赤霉素5.5份，白蛋白2.1份，木犀草素1.3份，蠶蛹粉1.7份，酵母粉1.6份，陳皮
1.2份，旋復(fù)花1.1份，川木通1.4份，香加皮1.5份，大青葉1.4份，鼠李糖1.1份，甘露醇1.5份，廣藿香1.8份，水57份。
[0032]以上對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明。凡在本發(fā)明的申請(qǐng)范圍內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于包括以下重量份的成分:檸檬酸鈉8?10份，赤霉素4?6份，白蛋白2?3份，木犀草素1?2份，蠶蛹粉1?2份，酵母粉1?2份，陳皮1?2份，旋復(fù)花1?2份，川木通1?2份，香加皮1?2份，水50?60份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于還包括1?2重量份的大青葉。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于還包括1?2重量份的鼠李糖。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于還包括1?2重量份的甘露醇。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于還包括1?2重量份的廣藿香。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于所述誘導(dǎo)物由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉9份，赤霉素5份，白蛋白2.5份，木犀草素1.5份，蠶蛹粉1.5份，酵母粉1.5份，陳皮1.5份，旋復(fù)花1.5份，川木通1.5份，香加皮1.5份，水55份。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，其特征在于所述誘導(dǎo)物由以下重量份的成分組成:檸檬酸鈉8.5份，赤霉素5.5份，白蛋白2.1份，木犀草素1.3份，蠶蛹粉1.7份，酵母粉1.6份，陳皮1.2份，旋復(fù)花1.1份，川木通1.4份，香加皮1.5份，大青葉1.4份，鼠李糖1.1份，甘露醇1.5份，廣藿香1.8份，水57份。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種作用于紅豆杉細(xì)胞代謝調(diào)控的誘導(dǎo)物，該誘導(dǎo)物包括檸檬酸鈉、赤霉素、白蛋白、木犀草素、蠶蛹粉、酵母粉、陳皮、旋復(fù)花、川木通、香加皮等成分。本發(fā)明通過在培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)子的方式干涉紅豆杉細(xì)胞自身代謝模式，從而定向誘導(dǎo)紅豆杉細(xì)胞分泌多烯紫杉醇半合成前體——10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加本發(fā)明誘導(dǎo)物后，紅豆杉細(xì)胞對(duì)10-去乙酰漿果赤霉素Ⅲ的分泌量顯著提升，同時(shí)能夠在一定程度增進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)密度。本發(fā)明技術(shù)思路清晰，技術(shù)方案合理，具有良好的規(guī)?；瘧?yīng)用前景。
【IPC分類】C12P17/02, C12N5/04
【公開號(hào)】CN105400840
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510968250
【發(fā)明人】夏雪城, 馬丹
【申請(qǐng)人】天津市博愛生物藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年3月16日
【申請(qǐng)日】2015年12月18日