一種棉鈴蟲微孢子蟲株系及其在農(nóng)業(yè)害蟲防治中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及害蟲生物防治技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種棉鈴蟲微孢子蟲株系及其在農(nóng)業(yè) 害蟲防治中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 棉鈴蟲屬于鱗翅目夜蛾科，為雜食性害蟲。棉鈴蟲的幼蟲蛀食危害棉花、玉米、番 茄、辣椒等，是我國農(nóng)業(yè)上的主要害蟲，也是世界農(nóng)業(yè)上的主要害蟲。我國自從1990年來， 棉鈴蟲連年大爆發(fā)，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。后來，隨著轉(zhuǎn)Bt基因的抗蟲棉的大面積使用，棉 鈴蟲在棉田中的危害得到了有效的控制，但是，近年來有報(bào)道稱棉鈴蟲對轉(zhuǎn)基因的Bt蛋白 已經(jīng)產(chǎn)生了嚴(yán)重抗性，在南美洲的巴西，近年來棉鈴蟲又再次大爆發(fā)。
[0003]目前防治棉鈴蟲的方法主要是采用化學(xué)農(nóng)藥防治，盡管化學(xué)防治可以迅速的壓低 棉鈴蟲的蟲口密度，但是往往造成環(huán)境污染、殺傷大量有益動物，人畜中毒和害蟲產(chǎn)生抗藥 性等不良后果。生物農(nóng)藥防治棉鈴蟲不但可以有效控制棉鈴蟲的危害，而且不殺傷天敵、對 環(huán)境友好、對人畜安全，具有十分廣闊的應(yīng)用前景。因此，開發(fā)利用其他的有效生物防治資 源對棉鈴蟲進(jìn)行防治，有利于提高防治效果，減緩抗性發(fā)展，具有重要意義。
[0004] 微孢子蟲是昆蟲病原微生物，屬于專性細(xì)胞內(nèi)寄生的單細(xì)胞原生生物。它一旦侵 入寄主昆蟲體內(nèi)，便能夠通過食物，接觸等將病原體傳播給其他個(gè)體，而且可以通過卵傳染 給后代，從而引起昆蟲微孢子蟲病的發(fā)生和流行，是自然界制約昆蟲種群密度的重要因素 之一。
[0005] 雖然目前已經(jīng)有報(bào)道棉鈴蟲核型多角體病毒可以用于生物防治棉鈴蟲，但是微孢 子蟲對棉鈴蟲的防治具有多種優(yōu)勢。第一、棉鈴蟲核型多角體病毒對野外環(huán)境較為苛刻，對 紫外線敏感，而微孢子蟲較病毒更耐紫外線，可以滿足大田使用的要求。第二、棉鈴蟲核型 多角體病毒專一侵染棉鈴蟲殺蟲譜窄，而棉鈴蟲微孢子蟲可以侵染包括棉鈴蟲、小菜蛾、甜 菜夜蛾、菜青蟲、甘藍(lán)夜蛾、二化螟、稻縱卷葉螟等多種鱗翅目害蟲，其殺蟲譜廣。第三、棉鈴 蟲核型多角體病毒只能通過食入傳播侵染棉鈴蟲，而不能垂直傳播給下代的卵。棉鈴蟲微 孢子可以垂直傳播侵染下代的卵，造成下一代的幼蟲帶有微孢子蟲，并可以通過接觸傳播 侵染其他昆蟲，極大的控制整體的蟲群基數(shù)。
[0006] 因而，開發(fā)棉鈴蟲微孢子蟲用于農(nóng)業(yè)害蟲防治具有現(xiàn)實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種棉鈴蟲微孢子蟲株系，及其在防治包括棉鈴蟲、小菜 蛾、甜菜夜蛾、菜青蟲、甘藍(lán)夜蛾、二化螟、稻縱卷葉螟等多種鱗翅目害蟲中的應(yīng)用。
[0008] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案： 一種棉鈴蟲微孢子蟲株系，棉鈴蟲微孢子蟲FDK001株系，保藏于中國微生物菌種保藏 管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No. 11289。
[0009] 所述的棉鈴蟲微孢子蟲株系的制備方法，包括以下步驟： (1) 將棉鈴蟲微孢子蟲FDKOOl株系的孢子液噴灑在棉鈴蟲飼料上，喂食棉鈴蟲； (2) 棉鈴蟲食入帶有棉鈴蟲微孢子蟲FDK001株系的飼料后，被棉鈴蟲微孢子蟲感染而 死亡； (3) 取死亡的棉鈴蟲蟲體中的棉鈴蟲微孢子蟲FDK001株系的孢子，即為防治農(nóng)業(yè)害蟲 的活性成分。
[0010] 作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：步驟（1)中，所述孢子液與棉鈴蟲飼料的比例為50微 升孢子液噴灑于1立方厘米的飼料上。
[0011] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述的孢子液中孢子的濃度為IXlO4孢子/ml -IX 10s孢子/ml。
[0012] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述的棉鈴蟲的飼養(yǎng)條件為25-30Γ，相對濕度 60-70%，每日光照時(shí)間16小時(shí)。
[0013] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：步驟（3)中，具體可以通過如下方法獲取死亡蟲體 中所述的棉鈴蟲微孢子蟲FDK001株系微孢子：將步驟（2)中所述死亡的棉鈴蟲研磨、再 用120目的網(wǎng)篩過濾，將所有過濾得到的組織液用等體積的水稀釋后，進(jìn)行如下差速離心： 500-1000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘取上清，將上清液3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘取沉淀，即為 所述的FDK001棉鈴蟲微孢子蟲株系的孢子。
[0014] 所述的棉鈴蟲微孢子蟲株系在防治農(nóng)業(yè)害蟲中的應(yīng)用。
[0015] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述害蟲為鱗翅目害蟲，包括棉鈴蟲、小菜蛾、甜菜 夜蛾、菜青蟲、甘藍(lán)夜蛾、二化螟和稻縱卷葉螟。
[0016] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：包括含有所述棉鈴蟲微孢子蟲FDK001株系孢子成 分的農(nóng)業(yè)害蟲防治劑。
[0017] 作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述防治劑包括潤濕劑，為吐溫80,十二烷基苯磺 酸鈉、十二烷基硫酸鈉、烷基萘磺酸鈉、脂肪醇聚乙二醇醚硫酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚、壬 基酚聚氧乙烯醚、山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物；包括分散劑，為 ΝΝ0、木質(zhì)素磺酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈣、聚丙烯酸鈉、亞甲基雙萘磺酸鹽、烷基氨基?；撬猁}、亞 甲基雙萘磺酸鈉甲醛縮合物、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物、羧甲基纖維素、聚乙烯醇、聚 乙烯吡咯烷酮、三聚磷酸鈉、烷基萘磺酸鹽等中的一種或幾種混合物；包括防凍劑，為蔗糖、 乙二醇、丙二醇、甘油等中的一種或幾種的混合物；包括紫外防護(hù)劑，為苯丙氨酸、酪氨酸、 色氨酸、二苯甲酮、二甲氧基二苯甲酮、甲氧基肉桂酸辛酯、水楊酸辛酯等中的一種或幾種 的混合物。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供的棉鈴蟲微孢子蟲可以用于 防治棉鈴蟲、小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青蟲、甘藍(lán)夜蛾、二化螟、稻縱卷葉螟等多種鱗翅目農(nóng)業(yè) 害蟲。該產(chǎn)品屬于生物農(nóng)藥，對環(huán)境和人、畜、禽無毒害，對天敵安全，應(yīng)用前景廣闊。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 以下的實(shí)施例子便于更好的理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述的實(shí)施例子中 的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例子中所用的實(shí)驗(yàn)材料，如無特殊說 明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。以下實(shí)施例子中的定量實(shí)驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí) 驗(yàn)，結(jié)果取平均值。
[0020] 實(shí)施例1 棉鈴蟲微孢子蟲FDKOOl株系的獲得 將田間采集患病的棉鈴蟲(棉鈴蟲死蟲多為黑色死亡，不化水，蟲體軟，表皮容易破裂， 中腸腫脹變粗，脆弱易斷)，研磨、過濾、鏡檢，微孢子蟲在顯微鏡下為無色，折光性強(qiáng)，長卵 形，少數(shù)為腎形，大小約4. 5umX 2. 5um，用Giemsa染色，核被染色為淺紅色，細(xì)胞質(zhì)染色為 藍(lán)色。將各個(gè)野生棉鈴蟲微孢子蟲株系以一系列的濃度涂抹在棉鈴蟲飼料上，之后飼喂棉 鈴蟲，收獲死亡較早的蟲體(代表毒力強(qiáng)的毒株)，經(jīng)過研磨、過濾、離心等。得到純化的棉鈴 蟲微孢子蟲。連續(xù)篩選10代，得到棉鈴蟲微孢子蟲AeJioiAii/is) FDK001株系。
[0021] 在2015年10月19日將棉鈴蟲微孢子蟲（Afeseffi3 AdioFDK001株系保 藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址北京市朝陽區(qū)北辰 西路1號院3號)，保藏編號CGMCC No. 11289。棉鈴蟲微孢子蟲（Afeseffi3 FDK001 株系 CGMCC No. 11289 簡稱 FDK001 株系。
[0022] 實(shí)施例2 F