一種從金針菇或金針菇菇根中提取純化金針菇多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種從金針茹或金針茹茹根中提取純化金針茹多糖的方法，屬于食品
技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 金針茹（Flammulinavelutiper)別名毛柄金錢茹、樹茹、冬茹、樸茹、構(gòu)菌等，是一 種藥食兩用的食用菌，不僅口感爽滑，味道鮮美，是人們餐桌上的一道常見佳肴，也因含有 多種生理活性成分，具有良好的保健作用而具有較高的藥用價(jià)值。
[0003] 金針茹主要的功能成分是金針茹多糖，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降低膽固醇、降血 壓、改善記憶功能、抗炎癥、抗病毒、抑菌W及抗氧化等多種功能活性。研究表明，金針茹多 糖對小鼠肉瘤S~180有明顯的抑制作用，顯著的免疫增強(qiáng)活性，并能顯著降低CC14所致 的小鼠血漿ALT(丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶）和AST(天口冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶）活性，明顯升高肝臟SOD的 活性，顯著降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量。
[0004]我國已實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)金針茹，2013年總產(chǎn)量為272. 9萬噸，金針茹作為初級農(nóng) 產(chǎn)品直接銷售，市場已出現(xiàn)明顯的飽和滯銷，茹農(nóng)增產(chǎn)不增收情況嚴(yán)重，迫切需要進(jìn)行金針 茹深加工與新產(chǎn)品開發(fā)，增加產(chǎn)品附加值，為金針茹鮮品銷售出路提供一個(gè)更廣闊市場。 陽〇化]目前金針茹多糖的提純多延襲經(jīng)典步驟，主要包括采用醇沉得到粗多糖，Sevage 試劑（正下醇氯甲燒=1 :4)沉淀蛋白，活性炭吸附去除色素，透析去除小分子物質(zhì)，再 次醇沉得到提取多糖等繁多步驟，且設(shè)及使用大量的有機(jī)溶劑和純化介質(zhì)，操作復(fù)雜，生產(chǎn) 成本高，不利于大量生產(chǎn)。
[0006] 中國專利文獻(xiàn)CN103788223A公開了 一種采用復(fù)合酶解-聯(lián)合超聲提取金針茹 多糖，中國專利文獻(xiàn)CN102702378A公開了一種采用超聲提取金針茹多糖，中國專利文獻(xiàn) CN104045731A公開了一種采用熱水加酶解提取金針茹多糖，后期提純多糖時(shí)均進(jìn)行了 Sevage法脫除蛋白、活性炭脫色素、透析等步驟，整個(gè)過程設(shè)及多種有機(jī)溶劑的使用和去 除，操作步驟繁瑣，效率低、耗時(shí)較長，且增加了生產(chǎn)成本，不利于金針茹多糖的工業(yè)化生 產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡便、綠色環(huán)保、處理過程耗時(shí)少的高效純化金 針茹多糖的方法，方便快捷進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0009] 一種從金針茹或金針茹茹根中提取純化金針茹多糖的方法，包括步驟如下：
[0010] 1)將金針茹或金針茹茹根進(jìn)行干燥處理，然后進(jìn)行粉碎，得金針茹粉；
[0011] 2)提取：金針茹粉用新煮沸并放涼的蒸饋水浸泡并置于-15°c~-20°c下冷凍 3~7小時(shí)，取出后置于微波爐中處理20~40分鐘，每隔4分鐘停止一次，4~8分鐘/次， 然后過濾，殘?jiān)儆眯轮蠓胁⒎艣龅恼麴佀?，重?fù)冷凍和微波處理過程2~5次，合并 濾液即為金針茹粗多糖提取液；
[0012] 3)金針茹粗多糖提取液離屯、得到的上清液進(jìn)行減壓濃縮，得到粗多糖濃縮液；
[0013] 4)所述粗多糖濃縮液W100~300血/min的流速過大孔樹脂，反復(fù)循環(huán)，直到洗脫 液在450nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用3~5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，W置換樹脂 柱中的多糖提取液，得到多糖洗脫液；
[0014] 5)將多糖洗脫液經(jīng)去雜、截留后，冷凍干燥至恒重后，得到粉末即為純化后金針茹 多糖。
[0015] 本發(fā)明優(yōu)選的，金針茹或金針茹茹根的干燥處理為溫壓差膨化干燥：將金針茹或 金針茹茹根平鋪后置于變溫壓差膨化罐中，將變溫壓差膨化罐內(nèi)溫度升至80-100°C，壓強(qiáng) 升至高于罐外大氣壓0. 1-0. 3MPa，在此溫度和壓強(qiáng)下保溫5-15min，然后將罐內(nèi)壓強(qiáng)瞬間 降至真空狀態(tài)，并在此真空狀態(tài)下降溫至60-80°C，保持所述真空狀態(tài)2-3小時(shí)，使所述金 針茹或金針茹茹根含水量< 10%，最后將罐內(nèi)溫度降至20-35°C，解除罐內(nèi)真空狀態(tài)，得到 干燥的金針茹或金針茹茹根。
[0016] 本發(fā)明優(yōu)選的，所述的過濾為采用板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，微波功率為400~620W。
[0017] 本發(fā)明優(yōu)選的，干燥后的金針茹或金針茹茹根與新煮沸并放涼的蒸饋水的體積比 為1:2~1:7,殘?jiān)c新煮沸并放涼的蒸饋水的體積比為1:1~1:4。
[0018] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟3)金針茹粗多糖提取液離屯、條件為：轉(zhuǎn)速4000rpm/min，離屯、 時(shí)間20~30min。
[0019]本發(fā)明優(yōu)選的，步驟如減壓濃縮溫度為70~80°C，減壓濃縮至原體積的20%~ 30%。
[0020] 本發(fā)明優(yōu)選的，所述的大孔樹脂為大孔樹脂D900、大孔樹脂LS-4抓、大孔樹脂 AB-8、大孔樹脂X-5非極性大孔吸附樹脂。
[0021] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟5)多糖洗脫液去雜為多糖洗脫液經(jīng)孔徑為50~200nm的陶 瓷膜除去顆粒狀雜質(zhì)。
[0022] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟5)中截留先經(jīng)截留分子量為100000的超濾有機(jī)膜截留，再經(jīng) 截留分子量為1000~10000的超濾有機(jī)膜截留，當(dāng)滲透側(cè)不再有透過液流出時(shí)，加50~ 20化純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液。
[0023] 本發(fā)明的提取方法結(jié)合大孔吸附樹脂純化金針茹多糖的制備方法，可簡便、快速、 有效去掉金針茹提取液中的蛋白、色素和脂質(zhì)等雜質(zhì)，用來純化的介質(zhì)可再生利用，具有制 備工藝簡單、操作時(shí)間短、處理量大等優(yōu)點(diǎn)，能有效降低企業(yè)生產(chǎn)成本，便于規(guī)?；a(chǎn)。純 度為 57. 2%~58. 3%。
[0024] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0025] 1、本發(fā)明的提取方法先將待提取物質(zhì)冷凍至-15°C到-20。然后進(jìn)行融化，細(xì)胞 中形成了冰晶及剩余液體中鹽濃度的增高可W使細(xì)胞破裂。微波加熱使細(xì)胞內(nèi)水分子吸收 微波能后溫度迅速上升并汽化，產(chǎn)生的壓力使細(xì)胞壁破碎，進(jìn)一步促進(jìn)了細(xì)胞壁的破碎效 果，細(xì)胞壁破裂，細(xì)胞內(nèi)部的有效成份從細(xì)胞中釋放出來，使金針茹多糖更易傾出，大大提 高了多糖的提取效率?？蓪?shí)現(xiàn)金針茹多糖大批量連續(xù)性提取，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
[00%] 2、本發(fā)明的提取方法結(jié)合可再生使用、處理量大的大孔吸附樹脂純化工藝，分離 介質(zhì)去除蛋白、色素和其它的小分子化合物，操作簡單，重復(fù)性好，產(chǎn)物純度高，且純化、 除雜效果更好，使多糖的利用率及純度均得到提高，提取純度從22.I%提高到57. 2%~ 60%。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合實(shí)施例對本方明做進(jìn)一步的說明，但不局限于此： 陽0測 實(shí)施例1
[0029] 一種從金針茹或金針茹茹根中提取純化金針茹多糖的方法，步驟如下：
[0030] 1)將金針茹或金針茹茹根進(jìn)行干燥處理，干燥處理具體步驟如下：將金針茹或金 針茹茹根平鋪后置于變溫壓差膨化罐中，將變溫壓差膨化罐內(nèi)溫度升至95°C，壓強(qiáng)升至高 于罐外大氣壓0.2MPa，在此溫度和壓強(qiáng)下保溫lOmin，然后將罐內(nèi)壓強(qiáng)瞬間降至真空狀態(tài)， 并在此真空狀態(tài)下降溫至75°C，保持所述真空狀態(tài)2小時(shí)，使所述金針茹或金針茹茹根含 水量< 10%，最后將罐內(nèi)溫度降至25°C，解除罐內(nèi)真空狀態(tài)，得到干燥的金針茹或金針茹 茹根，干燥后的金針茹或金針茹茹根然后進(jìn)行粉碎，過120目篩，得金針茹粉；
[0031] 2)提?。航疳樔惴塾?倍重量的新煮沸并放涼的蒸饋水浸泡并置于-15°c的冰箱 中冷凍7小時(shí)，取出后置于微波爐中處理30分鐘（每隔4分鐘停止一次，5分鐘/次）后， 采用板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，殘?jiān)儆?倍重量的新煮沸并放涼的蒸饋水浸泡，重復(fù)冷凍和 微波處理過程3次，微波功率為500W，合并濾液即為金針茹粗多糖提取液；
[0032] 3)W4000巧m/min的轉(zhuǎn)速離屯、處理金針茹粗多糖提取液25min，得到的上清液在 78°C下采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將上清液減壓濃縮至原體積的25%，得到粗多糖濃縮液；
[003引4)所述粗多糖濃縮液W250mL/min的流速過大孔樹脂，大孔樹脂為大孔樹脂D900,反復(fù)循環(huán)，直到洗脫液在450nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用5倍柱床體積的純水清 洗樹脂柱，W置換樹脂柱中的多糖提取液，得到多糖洗脫液；大孔吸附樹脂處理：取大孔吸 附用適量乙醇浸泡24hW上，去離子水洗至無醇味，2%~5%鹽酸浸泡3~化，水洗至中 性，2%~5%化OH浸泡3~5h，水洗至中性。
[0034] 處理樹脂進(jìn)行濕法裝柱（〇40mmX457mm)，樹脂自由沉降形成平整柱床層，去離子 水淋洗柱床3BV~4BV，待用。
[0035] 5)將多糖洗脫液經(jīng)經(jīng)孔徑為IOOnm的陶瓷膜除去顆粒狀雜質(zhì)去雜，然后進(jìn)行截 留，截留先經(jīng)截留分子量