一種制備苦豆子中苦參堿和槐定堿的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及苦豆子中的藥用活性成分的制備方法，具體涉及苦豆子中的藥用活性 成分苦參堿和槐定堿的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 苦豆子（L)，異名布亞（維名），為豆科槐屬植物苦豆子的 全草及種子，是我國(guó)西北地區(qū)常用中藥材。其藥用部位是根、莖、全草及種子，味苦性寒，具 有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕、止痛殺蟲等功效?？喽棺臃N子中生物堿含量較高，約8. 11% (質(zhì)量 分?jǐn)?shù)），主要有苦參堿、苦豆堿、槐果堿、槐定堿等。
[0003] 近年來國(guó)內(nèi)外研究表明總生物堿或其單體生物堿有多方面的生物活性，苦豆子生 物堿在抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗心率失常、免疫調(diào)節(jié)等方面具有重要的藥理活性。早在1930 年，來源于苦豆子中的苦參堿就被列入《美國(guó)藥典》。40年后，我國(guó)自主研制的治療腹瀉新 藥苦豆子生物堿制劑一 "苦豆子片"，被正式載入1977年版《中國(guó)藥典》，現(xiàn)改名為"克瀉靈 片"。此外，苦豆子中苦參素、槐定堿等在藥物領(lǐng)域也得到了有效開發(fā)利用，目前臨床應(yīng)用， 苦參堿治療婦科炎癥、苦參素注射液治療慢性乙型病毒性肝炎均取得很好的療效，我國(guó)有 乙肝患者和病毒攜帶者近一億人，治療乙肝的藥物需求量很大，市場(chǎng)前景極為廣闊?；倍▔A 和苦豆子總堿注射液用于治療腫瘤的研究也已開發(fā)成功。
[0004]目前，苦豆子生物堿提取主要采用酸水浸提，輔助超聲波或者微波等方法。根據(jù)各 單體生物堿的PH值不同或者極性的不同，多采用液液萃取方法對(duì)其進(jìn)行分離純化。上述方 法的萃取溶劑使用大量的毒性溶劑，生產(chǎn)成本高，操作步驟繁雜，且苦豆子單體生物堿的含 量較低。曾有文獻(xiàn)報(bào)道利用大孔吸附樹脂分離得到苦豆子總堿，再通過硅膠柱色譜進(jìn)行純 化，以結(jié)晶和重結(jié)晶的方法得到槐定堿和苦參堿。本發(fā)明對(duì)上述其工藝進(jìn)行優(yōu)化，僅用大孔 吸附樹脂對(duì)苦豆子總堿進(jìn)行分離得到槐定堿粗提物和苦參堿粗提取，通過一定的結(jié)晶與重 結(jié)晶的方法得到槐定堿精品和苦參堿精品。既簡(jiǎn)化了工藝流程，同時(shí)大量降低生產(chǎn)成本，提 高苦豆子生物堿的產(chǎn)量，因此更適合于工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明采用一種以大孔吸附樹脂分離純化苦參堿、槐定堿的制備方法，優(yōu)化以大 孔吸附樹脂分離純化苦參堿、槐定堿的工藝，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程，大大降低生產(chǎn)成本。提供一種 高效、安全、低成本、高純度適用于企業(yè)工業(yè)化生產(chǎn)的制備方法，改變現(xiàn)有生產(chǎn)工藝毒性大， 生產(chǎn)成本高，操作繁雜，含量低等不足。
[0006] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)： 一種采用大孔吸附樹脂分離純化苦豆子中苦參堿、槐定堿的制備方法，其特征在于：用 含有還原劑的酸性極性有機(jī)溶劑水溶液從苦豆子中提取苦豆子總堿液，堿化后，用大孔吸 附樹脂吸附至飽和，用水洗去未被樹脂吸附的殘留料液和水溶性雜質(zhì)，再用極性有機(jī)溶劑 水溶液進(jìn)行目標(biāo)產(chǎn)物的洗脫，濾液經(jīng)減壓回收溶劑，純化得到苦參堿粗提物、槐定堿粗提 物；苦參堿粗提物、槐定堿粗提物通過結(jié)晶和重結(jié)晶純化后得到苦參堿精品、槐定堿精品。
[0007] 提取苦豆子總堿液的制備方法是：以苦豆子為原料，將苦豆子粉碎，用10-15倍苦 豆子粉末干重（w/w)的50%-90%的酸性極性有機(jī)溶劑水溶液，極性有機(jī)溶劑水溶液中加入 過量還原劑，于50-90°C條件下提取1-3次，每次1-3個(gè)小時(shí)，合并三次濾液，然后減壓濃縮， 回收有機(jī)溶劑干燥，得到浸膏。
[0008] 所述大孔吸附樹脂分離純化的方法是：苦豆子浸膏為原料，加重量比1:2-4的 50%-80%的極性有機(jī)溶劑水溶液進(jìn)行溶解，加堿液調(diào)節(jié)PH=9-10,過濾，然后采用大孔吸附 樹脂富集吸附至飽和，先用不少于2倍量的水（v/v)洗去非生物堿的大極性雜質(zhì)，1-4倍樹 脂量的20%的極性有機(jī)溶劑水溶液以1-3倍樹脂量/小時(shí)的流速（v/v)洗去極性大的生物 堿雜質(zhì)。再用1-3倍樹脂量的30-40%的極性有機(jī)溶劑水溶液以1-3倍樹脂量/小時(shí)的流 速（v/v)洗脫目標(biāo)物質(zhì)，濾液在-0. 06~-0. 09MPa、50~65°C條件下，經(jīng)減壓回流，濃縮即 得槐定堿粗提物。再用1-5倍樹脂量的50%-70%的極性有機(jī)溶劑水溶液以1-3倍樹脂量/ 小時(shí)的流速（v/v)洗脫目標(biāo)物質(zhì)濾液在-0. 06~-0. 09MPa、50~65°C條件下，經(jīng)減壓回流， 濃縮即得苦參堿粗提物。
[0009] 槐定堿粗提物和苦參堿粗提物的純化工藝是：將槐定堿粗提物堿化PH11-13,用 有機(jī)溶劑萃取后蒸干得到槐定堿粗品，槐定堿粗品加石油醚進(jìn)行重結(jié)晶得槐定堿精品；苦 參堿粗提物加水?dāng)嚢韬?，靜置濾出除沉淀。減壓濃縮得苦參堿粗品。將苦參堿粗品堿化后 甲苯萃取，減壓回收的苦參堿粗品，加石油醚重結(jié)晶得到苦參堿精品。
[0010] 其中酸性極性有機(jī)溶劑中采用是強(qiáng)酸，可采用鹽酸、硫酸中的任意一種。
[0011] 所述的極性有機(jī)溶劑溶液中含有還原劑：所述的還原劑為硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、 抗壞血酸、亞硫酸氫鈉和焦亞硫酸鈉中的一種。
[0012] 大孔吸附樹脂可以是非極性吸附樹脂、中等極性大孔吸附樹脂、極性大孔吸附樹 脂中的一種?？刹捎肈3520、D4006、D4020、H103、X-5、HP10、HP20、XAD-7、SP850、SP825、 SP700、SP207、X-5AB-8、D-101中的一種。
[0013] 優(yōu)化工藝操作步驟為： (1) 粗提物準(zhǔn)備：以苦豆子為原料，將苦豆子粉碎，用10-15倍苦豆子粉末干重（w/w)的 PH=2-3的50%-90%乙醇水溶液，乙醇水溶液中加入過量還原劑，于50-90°C條件下提取1-3 次，每次1-3個(gè)小時(shí)，合并三次濾液，然后減壓濃縮，回收有機(jī)溶劑干燥，得到浸膏； (2) 苦豆子浸膏中，加重量比1:2-4的50%-80%的乙醇水溶液進(jìn)行溶解，加氨水調(diào)節(jié) PH=9-10,過濾，然后采用大孔吸附樹脂富集吸附至飽和，先用不少于2倍量的水（v/v)洗去 非生物堿的大極性雜質(zhì)，1-4倍樹脂量的20%的乙醇水溶液以1-3倍樹脂量/小時(shí)的流速 (v/v)洗去極性大的生物堿雜質(zhì)。再用1-3倍樹脂量的30-40%的乙醇水溶液以1-3倍樹脂 量/小時(shí)的流速（v/v)洗脫目標(biāo)物質(zhì)，濾液在-0. 06~-0. 09MPa、50~65°C條件下，經(jīng)減壓 回流，濃縮即得槐定堿提取物，再用3-5倍樹脂量的45%-70%的乙醇水溶液以1-3倍樹脂量 /小時(shí)的流速（v/v)洗脫目標(biāo)物質(zhì)，濾液在-0. 06~-0. 09MPa、50~65°C條件下，經(jīng)減壓回 流，濃縮即得苦參堿提取物； (3) 槐定堿精品的制備：將槐定堿提取物堿化pH= 11-13，苯類試劑萃取后蒸干得到 槐定堿粗品，槐定堿粗品加1 一 5倍量的石油醚進(jìn)行重結(jié)晶得槐定堿精品； 苦參堿精品的制備：苦參堿提取物加水?dāng)嚢韬?，靜置濾除沉淀，減壓濃縮得苦參堿粗 品，將苦參堿粗品堿化至pH= 9-11后甲苯萃取，萃取3 - 5次，減壓回收，加1-5倍量石油 醚重結(jié)晶得到苦參堿精品。
[0014] 其中酸性乙醇中采用是強(qiáng)酸，可采用鹽酸、硫酸中的任意一種。
[0015] 粗提物準(zhǔn)備過程中所需還原劑采用硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、抗壞血酸、亞硫酸氫鈉 和焦亞硫酸鈉中的一種 所有的堿化過程所用到的堿，可采用強(qiáng)堿和弱堿，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水。
[0016] 大孔吸附樹脂可以是非極性吸附樹脂、中等極性大孔吸附樹脂、極性大孔吸附樹 脂中的一種?？刹捎肈3520、D4006、D4020、H103、X-5、HP10、HP20、XAD-7、SP850、SP825、 SP700、SP207、X-5AB-8、D-101 中的任意一種。
[0017] 槐定堿精品的制備中苯類試劑可采用苯，甲苯。
[0018] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于： 1、 本發(fā)明采用酸性乙醇提取苦豆子生物堿，與單獨(dú)乙醇提取、單獨(dú)酸水提取、先乙醇提 取后酸化比較，增大了苦豆子總堿、槐定堿和苦參堿含量； 2、 本發(fā)明優(yōu)化了大孔吸附樹脂分離純化槐定堿、苦參堿的生產(chǎn)工藝。與現(xiàn)有技術(shù)相比， 本發(fā)明采用大孔吸附樹脂對(duì)苦豆子總堿