大規(guī)模培養(yǎng)綠色巴夫藻的大量元素營養(yǎng)鹽配方的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其是一種適用于大規(guī)模培養(yǎng)綠色巴夫藻的大量元素營養(yǎng)鹽配方。
【背景技術(shù)】
[0002]微藻作為可再生的生物質(zhì)能源也得到了越來越多的關(guān)注，規(guī)?；囵B(yǎng)微藻產(chǎn)業(yè)化也有相關(guān)的研究并取得一定進展，，但由于規(guī)模化培養(yǎng)微藻容易受到光照、培養(yǎng)條件等因素的影響，現(xiàn)有的微藻產(chǎn)業(yè)化模式仍存在效率低、成本高的不足。
[0003]綠色巴夫藻屬于金藻門、巴夫藻目，由于其無細胞壁、個體微小、繁殖快、營養(yǎng)豐富，適于幼體攝食和消化，并且具有合成高度不飽和脂肪酸的能力，最突出的是富含水產(chǎn)經(jīng)濟動物幼體生長和發(fā)育所必需的二十二碳六烯酸，在餌料強化方面起了直接或間接作用。因而它是一種優(yōu)質(zhì)的單胞藻餌料，廣泛應(yīng)用于蝦、蟹、貝類幼體及海水仔魚的人工育苗。
[0004]目前實驗室及生產(chǎn)上培養(yǎng)綠色巴夫藻多采用基礎(chǔ)的F/2培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，F(xiàn)/2培養(yǎng)基主要是由 NaN03、NaH2PO4.H20、Na2S13.9H20、Na2EDTA、FeCl3.6H20、CuSO4.5H20、ZnSO4.7H20、CoCl2.6H20、MnCl.4H20、Na2MoO4.2H20、維生素 B1、維生素 B12、生物素、自然海水組成。F/2培養(yǎng)基存在著易受污染、培養(yǎng)密度低等缺點，容易導(dǎo)致培養(yǎng)效率低下，所培養(yǎng)的細胞營養(yǎng)成分不穩(wěn)定，嚴重影響育苗進程和育苗質(zhì)量。
[0005]現(xiàn)有的技術(shù)未能解決綠色巴夫藻培養(yǎng)過程中的這一不足。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是針對目前綠色巴夫藻培養(yǎng)的現(xiàn)狀，提供一個適合綠色巴夫藻大規(guī)模培養(yǎng)的大量元素的營養(yǎng)鹽培養(yǎng)基礎(chǔ)及制備，本發(fā)明的培養(yǎng)基用于綠色巴夫藻的規(guī)?；囵B(yǎng)，可以促進綠色巴夫藻的生長、提高培養(yǎng)密度、提高培養(yǎng)效率，獲得的綠色巴夫藻細胞營養(yǎng)成分穩(wěn)定，還具有培育密度高、培育持續(xù)時間長、降低養(yǎng)殖成本低的特點。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:一種適用于大規(guī)模培養(yǎng)綠色巴夫藻的大量元素營養(yǎng)鹽配方，其中各組分及其含量以每m3海水中含有該組分g數(shù)計，如下=(NH2)2CO 25~35g/m3，NH4HCO3 55?65g/m3，Na2HPO4 8~12g /m3，F(xiàn)eCl3 2.2-2.8g /m3，EDTA_2Na 9.0-1Og/ m3。
[0008]優(yōu)選的配方組成可以是:該營養(yǎng)鹽配方以每m3海水中含有該組分g數(shù)計，如下:(NH2)2CO 30g/m3，NH4HCO3 60g/m3，Na2HPO4 1g /m3，F(xiàn)eCl3 2.5g /m3，EDTA_2Na 9.5g/ m3。
[0009]優(yōu)選的配方組成還可以是:該營養(yǎng)鹽配方以每m3海水中含有該組分g數(shù)計，如下:(NH2)2CO 32g/m3，NH4HCO3 58g/m3，Na2HPO4 8g /m3，F(xiàn)eCl3 2.8g /m3，EDTA_2Na 10g/m3。
[0010]優(yōu)選的配方組成還可以是:該營養(yǎng)鹽配方以每m3海水中含有該組分g數(shù)計，如下:(NH2)2CO 28g/m3，NH4HCO3 62g/m3,Na2HPO4 Ilg /m3，F(xiàn)eCl3 2.4g /m3，EDTA_2Na 9.6g/ m3。
[0011]本發(fā)明的營養(yǎng)鹽配方用于綠色巴夫藻的大規(guī)模培養(yǎng)方法包括如下步驟:
(O將用于大規(guī)模培養(yǎng)綠色巴夫藻的面積為200m2跑道式生物反應(yīng)器進行徹底的清理和消毒，而后將經(jīng)過砂濾、泡沫分離、精密過濾器和紫外線消毒的海水引入，海水水深25~30cm，再按照20ppm的劑量將強氯精加入海水中，進行消毒和曝氣一晝夜；
(2)海水經(jīng)步驟(I)處理后，按照30ppm的劑量加入硫代硫酸鈉；
(3)根據(jù)權(quán)利要求1所述配方，按海水水體體積，稱量以下各組分:(NH2)2OKNH4HCO3,Na2HPO4, FeCl3, EDTA_2Na，將各組分加入海水中，接入經(jīng)過檢測的合格的綠色巴夫藻藻種，接種量按體積比為藻種:海水=1:50~100，接種完畢，使用輪漿進行攪拌，輪漿由電動機驅(qū)動，同時通入CO2以調(diào)節(jié)pH值。
[0012]所述攪拌速度為:50~100rpm。
[0013]所述pH 值為 8-8.2。
[0014]所述組分的加入方式可以是:依次加入二分之一的(NH2)2OK二分之一的Na2HPO4、二分之一的EDTA_2Na、二分之一的NH4HC03、二分之一的FeCl3, 1min后，再加入二分之一的(NH2)2C0、二分之一的 Na2HPO4、二分之一的 NH4HC03、二分之一的 FeCl3、二分之一的EDTA-2Na。
[0015]所述組分加入海水后，將海水在頻率60~80Hz條件下進行超聲處理10~20min。
[0016]本發(fā)明具有如下有益效果:本發(fā)明可以促進綠色巴夫藻的生長、提高培養(yǎng)密度、提高培養(yǎng)效率，獲得的綠色巴夫藻細胞營養(yǎng)成分穩(wěn)定，還具有培育密度高、培育持續(xù)時間長、降低養(yǎng)殖成本低的特點，相對于現(xiàn)有技術(shù)，可以明顯提高綠色巴夫藻的細胞密度，明顯延長綠色巴夫藻的培養(yǎng)時間；在培養(yǎng)過程中，將營養(yǎng)鹽加入海水后再結(jié)合超聲波處理海水，利用超聲波的空化作用促進營養(yǎng)液的有效、快速、均勻溶解，且可控制海水中營養(yǎng)鹽成分微小顆粒的均勻分布，有利于微藻的吸收，促進其良好代謝，獲得良好的生長。
【具體實施方式】
[0017]下面通過實施例對本發(fā)明做進一步詳細說明，這些實施例僅用來說明本發(fā)明，并不限制本發(fā)明的范圍。
[0018]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加明確，下面對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細的描述。
[0019]實施例1采用以下步驟進行綠色巴夫藻的大規(guī)模培養(yǎng):
(1)將用于面積為200m2跑道式生物反應(yīng)器進行徹底的清理和消毒，而后將經(jīng)過砂濾、泡沫分離、精密過濾器和紫外線消毒的海水引入，海水水深25cm，再按照20ppm的劑量將強氯精加入海水中，進行消毒和曝氣一晝夜；
(2)海水經(jīng)步驟(I)處理后，按照30ppm的劑量加入硫代硫酸鈉；
(3)按以下配方，根據(jù)海水水體體積，稱量各組分，以每m3海水中含有該組分g數(shù)計:(NH2)2CO 30g/m3，NH4HCO3 60g/m3，Na2HPO4 1g /m3，F(xiàn)eCl3 2.5g /m3，EDTA_2Na 9.5g/
3
m ；
(4)將各組分加入海水中，開啟輪漿以轉(zhuǎn)速50r/min攪拌lOmin，再以頻率70Hz進行超聲處理15min，靜置5min后，接入經(jīng)過檢測的合格的綠色巴夫藻藻種，接種量按體積比為藻種:海水=1:50，接種完畢，使用輪漿進行攪拌，轉(zhuǎn)速50rpm，輪漿由電動機驅(qū)動，同時通入CO2以調(diào)節(jié)海水pH值8。
[0020]實施效果:本實驗方式所培養(yǎng)的綠色巴夫藻細胞密度高，達到了 6X 16個/ml，培養(yǎng)時間持續(xù)了 5天。