6’-o-反式桂皮酰梓醇的正相加壓柱層析制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥新藥研究領(lǐng)域，具體而言涉及一種6' -0-反式桂皮酰梓醇的正相 加壓柱層析制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 6' -0-反式桂皮酰梓醇是傳統(tǒng)中藥胡黃連中的主要成分。6' -0-反式桂皮酰梓 醇具有抗菌、保肝、利膽、降血糖等多種功效。國外將6' -0-反式桂皮酰梓醇與其他物質(zhì) 的混合物應(yīng)用于臨床，國內(nèi)近年來開發(fā)了胡黃連環(huán)烯醚萜總苷（以6' -0-反式桂皮酰梓醇 和10-香甲酰梓醇為主要藥效成分)，相比較而言，單純的6' -0-反式桂皮酰梓醇應(yīng)用于臨 床藥效將更加明確，副作用更小，用藥安全性與有效性將更加有保障。經(jīng)檢索，國內(nèi)專利涉 及6'-0_反式桂皮酰梓醇制備的有：2007101643215 :使用常壓柱層析，工藝簡單，但影響效 率；2013106189968 :使用反相填料層析技術(shù)，效率高但成本昂貴，本發(fā)明所公開工藝采用 加壓正相色譜分離方法，相較于上述兩專利，具有一次處理樣品量大，填料便宜，效率高，使 用工藝設(shè)備先進(jìn)等優(yōu)點(diǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所用原料為6' -0-反式桂皮酰梓醇含量大于35%的中藥提取物(可以是專 利（專利號(hào)：201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備10-香莢酰梓 醇后所剩的提取物，也可以是其他含有6' -0-反式桂皮酰梓醇的植物提取物)，通過正相加 壓柱層析的方法使其純度>95%。
[0004] 取專利（專利號(hào)：201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備 10-香莢酰梓醇后所剩的提取物，經(jīng)檢測6'-0_反式桂皮酰梓醇的含量在40°/『50%之間(或 其他含有6' -O-反式桂皮酰梓醇量大于35%的植物提取物)，乙醇溶解加拌樣硅膠拌樣，裝 入樣品柱。
[0005] 取層析硅膠裝入層析柱，用流動(dòng)相沖洗層析柱3-5個(gè)柱床體積，將樣品柱與層析 柱串聯(lián)起來，用流動(dòng)相沖洗，流動(dòng)相為環(huán)己烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇一種或兩種溶劑 以一定比例混合使用。流速50~150ml/min。
[0006] 以雙波長紫外檢測器設(shè)置波長為265nm或235nm或282nm，進(jìn)行檢測，以檢測峰響 應(yīng)值為依據(jù)收集洗脫液，洗脫液干燥即得。 具體實(shí)施例
[0007] 以下具體實(shí)施例明顯可以得到純度>95%的6'-0_反式桂皮酰梓醇，但根據(jù)專業(yè)技 術(shù)知識(shí)可以對本發(fā)明所公開流動(dòng)相進(jìn)行微調(diào)以得到相同效果，凡不違背本發(fā)明精神的改動(dòng) 皆視為本
【發(fā)明內(nèi)容】
。
[0008] 實(shí)施例1 取專利(專利號(hào)：201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備10-香 莢酰梓醇后所剩的提取物25g，經(jīng)檢測6' -0-反式桂皮酰梓醇的含量為47%，用乙醇溶解后 加37. 5g拌樣硅膠拌樣，裝入樣品柱。
[0009] 取120g層析硅膠裝入層析柱，用流動(dòng)相(氯仿：甲醇=20:1)沖洗層析柱3-5個(gè)柱 床體積，將樣品柱與層析柱串聯(lián)起來，用流動(dòng)相沖洗，流速50ml/min，壓力為78psi。
[0010] 以雙波長紫外檢測器(設(shè)置其波長1為265nm，波長2為235nm)進(jìn)行檢測，以檢測 峰響應(yīng)值為依據(jù)收集洗脫液，回收溶劑，得6'-0_反式桂皮酰梓醇10.3 g，高效液相色譜法 檢測其純度為94. 6%。
[0011] 實(shí)施例2 取專利(專利號(hào)：201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備10-香 莢酰梓醇后所剩的提取物40g，經(jīng)檢測6 ' -0-反式桂皮酰梓醇的含量為36%，乙醇溶解加60g 拌樣硅膠拌樣，裝入樣品柱。
[0012] 取180g層析硅膠裝入層析柱，用流動(dòng)相(氯仿：乙醇=18:1)沖洗層析柱3-5個(gè)柱 床體積，將樣品柱與層析柱串聯(lián)起來，用流動(dòng)相沖洗，流速80ml/min，壓力為85psi。
[0013] 以雙波長紫外檢測器設(shè)置波長1為265nm，波長2為282nm，進(jìn)行檢測，以檢測峰響 應(yīng)值為依據(jù)收集洗脫液，回收溶劑，得6' -0-反式桂皮酰梓醇11. 0g，高效液相色譜法檢測 其純度為96. 0%。
[0014] 實(shí)施例3 取專利(專利號(hào)：201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備10-香 莢酰梓醇后所剩的提取物22g，經(jīng)檢測6' -0-反式桂皮酰梓醇的含量為42%，用乙醇溶解后 加34g拌樣硅膠拌樣，裝入樣品柱。
[0015] 取120g層析硅膠裝入層析柱，用流動(dòng)相乙酸乙酯沖洗層析柱3-5個(gè)柱床體積，將 樣品柱與層析柱串聯(lián)起來，用流動(dòng)相沖洗，流速120ml/min，壓力為90psi。
[0016] 以雙波長紫外檢測器(設(shè)置其波長1為235nm，波長2為282nm)進(jìn)行檢測，以檢測 峰響應(yīng)值為依據(jù)收集洗脫液，回收溶劑，得6'-0_反式桂皮酰梓醇8. 3g，高效液相色譜法檢 測其純度為95. 2%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 本發(fā)明公開一種正相加壓柱層析制備6' -O-反式桂皮酰梓醇的方法，其特征在于， 以6'-0-反式桂皮酰梓醇含量大于35%的提取物為原料，通過加壓正相柱層析，收取相應(yīng)洗 脫液，干燥即得。2. 如權(quán)利要求1所述一種正相加壓柱層析制備6' -0-反式桂皮酰梓醇的方法，其特 征在于，所用原料是6' -0-反式桂皮酰梓醇含量大于35%的提取物，可以是專利(專利號(hào)： 201110400683. 6)所介紹的"10-香莢酰梓醇制備的方法"制備10-香莢酰梓醇后所剩的提 取物，也可以是通過其他方式(例如：乙醇、甲醇回流提取，經(jīng)石油醚或乙酸乙酯萃?。┧?的提取物。3. 如權(quán)利要求1所述一種正相加壓柱層析制備6' -0-反式桂皮酰梓醇的方法，其特 征在于，原料用乙醇等易揮發(fā)溶劑溶解后，與適量拌樣硅膠均勻拌樣(原料：硅膠重量比為 1:5~2:1 )，拌樣硅膠為100~200目，烘干粉碎過60目篩。4. 如權(quán)利要求1所述一種正相加壓柱層析制備6'-0_反式桂皮酰梓醇的方法，其特征 在于，層析硅膠干法裝層析柱，用流動(dòng)相沖洗3~5個(gè)柱床體積。5. 將已拌樣硅膠干法裝于樣品柱中，將樣品柱與層析柱串聯(lián)，用流動(dòng)相沖洗，以雙波長 紫外檢測器檢測，以峰反應(yīng)信號(hào)判斷收取6' -0-反式桂皮酰梓醇洗脫液。6. 如權(quán)利要求1所述正相加壓柱層析制備6' -0-反式桂皮酰梓醇的方法，其特征在 于，層析硅膠采用200~400目，流動(dòng)相為：環(huán)己烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇一種或兩種溶 劑以一定比例混合使用，加壓栗系統(tǒng)為壓力80~200 Psi，流速50~130ml/min。
【專利摘要】本發(fā)明涉及中藥新藥研究領(lǐng)域，具體而言涉及一種6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加壓柱層析制備方法。所用原料為6’-O-反式桂皮酰梓醇含量大于35%的中藥提取物（可以是專利：201110400683.6所介紹的“10-香莢酰梓醇制備的方法”制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物，也可以是乙醇、甲醇回流提取，經(jīng)石油醚或乙酸乙酯萃取等方式獲得的含有6’-O-反式桂皮酰梓醇的植物提取物），通過正相加壓柱層析的方法使其純度>95%。本發(fā)明廢物利用，節(jié)能環(huán)保，填料便宜，成本低，一次處理樣品量大，效率高，生產(chǎn)周期短，溶劑回收快等特點(diǎn)，適合工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。
【IPC分類】C07H17/04, C07H1/06
【公開號(hào)】CN105017355
【申請?zhí)枴緾N201510427890
【發(fā)明人】張志東, 劉培冉, 楊濤, 賀靈劍, 劉文卉, 孫士青
【申請人】濟(jì)南同生生物醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2015年7月21日