一種土壤磷素微生物活化劑及其應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及微生物制劑領域，具體設及一種用于活化±壤中憐素的微生物制劑。【背景技術】
[0002] 憐是植物生長所必需的重要營養(yǎng)素之一，如何能使±壤中的憐成為有效憐是當前 國內外非常關注的研究領域。憐元素參與植物生長繁殖的諸多過程。憐不僅是植物細胞原 生質的重要組成組分，而且還參與植物的光合作用，淀粉和糖的利用和能量的傳遞過程。憐 肥則可W提高植物幼苗期根系細胞生長速度，縮短植物的生長期。據研究，世界上絕大部分 農業(yè)±壤缺憐（總憐不缺，活性憐缺），從1950年開始，我國大部分地區(qū)開始向±壤中施入 化學憐肥，但憐肥利用率很低，憐肥的當季利用率一般只有10%~20%，我國農田中約2/3 嚴重缺憐，±壤中95%W上的憐為無效形式，植物很難直接吸收利用，為了獲取高產每一年 都向±壤重復施加大批量的可溶性憐肥，然而因為±壤的板結等原因，作物對施入的憐肥 當季節(jié)利用效率只有5%~10%，大部分與±壤中的Ca2+，化2+，化3+，A13+結合形成難溶性憐 酸鹽。自1950年W來，為了提高上壤憐素的利用率國內外學者做了大量研究，其中解憐菌 是一類具有將難溶性憐鹽轉化為可溶性憐鹽的微生物，國內外已有許多研究發(fā)現，解憐菌 不僅可W大幅度提高±壤中的憐利用效率，提高產量，從另一方面也能節(jié)約大量的憐礦資 源。
[0003] 目前，對于細菌解憐特性的生理學和遺傳學知識還了解得極少，尤其是在指示和 調節(jié)方面。對根際細菌性憐循環(huán)機制的了解還停留在早期的水平。但運方面的研究在農業(yè) 上的應用是巨大的，尤其是長期傳統憐肥的施用使得±壤中儲存的憐數量大增。而憐素在 ±壤中的過度積累不僅降低了憐肥的生產效益，而且引起環(huán)境問題，如水體富養(yǎng)化及養(yǎng)分 不平衡。
[0004] 20世紀80年代W后，國內許多單位相繼開發(fā)出了有多種芽抱桿菌組成的復合解 憐菌制劑，但由于解憐細菌的遺傳穩(wěn)定性差，運些菌劑在生產上使用的效果并不理想。因 此，尋求一種穩(wěn)定高效的解憐微生物制劑來開采利用±壤中儲存的憐素則是緩解憐肥需求 矛盾，減少憐對環(huán)境的污染的途徑之一。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的一個目的是針對現有技術不足提供一種制法簡單且高效的活化憐素的 微生物制劑。
[0006] 為實現上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：
[0007] 上述的一種±壤憐素微生物活化劑，是將一種具有解憐能力的菌株與菌株繁殖的 載體進行科學復配，經發(fā)酵制成的。
[0008] 上述該活化劑的活菌總數大于2X108CRJ/g。
[0009] 其中，上述的具有解憐能力的菌株是黑色真菌菌株毛霉，其保藏編號為CGMCC No.9637〇
[0010] 其中，上述菌株繁殖的載體包括但不限于麥教、豆巧、娃藻±、玉米粉、±壤、米慷、 活性炭、銀末的一種或幾種。
[0011] 其中，所述菌株繁殖的載體是將米慷、活性炭、銀末按一定的比例混合而成。
[0012] 可優(yōu)化為，所述繁殖載體是將米慷、活性炭、銀末按照質量比為2~3 : 1~2 : 1 混合而制成。
[0013] 更進一步優(yōu)化為，所述繁殖載體是將米慷、活性炭、銀末按照質量比為3 : 1 : 1 混合而制成。
[0014] 其中，制備上述憐素微生物活化劑時按解憐菌與菌株繁殖的載體質量比為 0. 26~1. 82 : 1進行配比混合發(fā)酵。
[0015] 其中，制備上述憐素微生物活化劑時優(yōu)化為，按解憐菌與菌株繁殖的載體質量比 為1.25 : 1進行配比混合。
[0016] 其中，所述解憐菌與菌株繁殖的載體混合后進行發(fā)酵時，發(fā)酵條件控制為：發(fā)酵溫 度28°C~32°C，發(fā)酵時間2~6天。
[0017] 可優(yōu)化為，所述發(fā)酵條件控制為：發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間4天。
[0018] 進一步地，本發(fā)明的另一目的是提供一種大量制備上述高效的活化憐素的微生 物制劑的方法。
[0019] 上述方法，包括如下步驟：
[0020] 1)將一種具有解憐能力的菌株與菌株繁殖的載體進行科學復配進行發(fā)酵，逐級擴 大培養(yǎng)，獲得長有大量菌體的餅±母劑；
[0021] 2)培制出來的母劑作為接種劑，接種大堆堆料，進一步擴大培制，將制得菌劑風干 或在40°CW下烘干。
[0022] 更近一步地，本發(fā)明的再一目的在于提供上述微生物制劑在提高±壤中憐素的利 用效率上的應用。
[0023] 其中，上述微生物制劑用作基肥、拌種或用做追肥施用于作物生長區(qū)域。
[0024] 其中，上述作物生長區(qū)域包括農田、林場或景觀苗圃。
[0025] 本發(fā)明的憐素微生物活化劑具有良好的解憐效果，可通過實施例中的解憐實驗可 知，該制劑優(yōu)先利用可溶性憐，當可溶性憐利用殆盡時，啟動解憐機制，將難溶性憐轉化為 可溶性憐，從而使溶液中可溶性憐的含量提高，可溶性憐含量的提高能促進植物對憐素的 吸收和利用，進而可促進作物的生長提高作物產量?？梢?，本發(fā)明提供的憐素微生物活化劑 對發(fā)展持續(xù)高效農業(yè)具有深遠意義。
[0026] 此外，利用該解憐微生物制劑來開采±壤中儲存的憐素是緩解憐肥需求矛盾，減 少憐對環(huán)境的污染的一個有效途徑。
【附圖說明】
[0027] 圖1為黑色真菌菌株毛霉顯微示意圖； 陽02引 圖2為憐的標準曲線圖；
[0029] 圖3A和圖3B為制得的解憐微生物菌劑外觀圖；圖3A為菌劑制備過程發(fā)酵情 況，圖3B為菌劑成品，從左到右為米慷、銀末、活性炭的質量比為3 : 1 : 1，1 : 2 : 1， 2 ： 2 ： 1 ;
[0030] 圖4為接菌量對有效憐增量的影響柱狀圖；
[0031] 圖5為發(fā)酵溫度對有效憐增量的影響柱狀圖； 陽0巧圖6為發(fā)酵時間對有效憐增量的影響柱狀圖；W及
[0033] 圖7為3種微生物制劑解解憐動態(tài)圖。
【具體實施方式】
[0034]W下實施例用于進一步說明本發(fā)明，但不應理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本 發(fā)明精神和實質的前提下，對本發(fā)明所作的修飾或者替換，均屬于本發(fā)明的范疇。
[0035] 實施例1憐素活化微生物制劑制備參數篩選
[0036] 1. 1試驗材料
[0037] 1. 1. 1試驗菌株和載體
[0038] 試驗菌株：具有解憐能力的黑色真菌菌株毛霉，上述黑色真菌菌株毛霉已于2014 年9月4號保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，保藏單位地址：北京市 朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，其分類命名毛霉（MucorSP.)，其保 藏編號為CGMCCNo. 9637,該菌株的顯微觀察如圖1所示； 陽039] 菌株載體：米慷、活性炭、銀末
[0040] 1. 1. 2主要試驗儀器
[0041] 恒溫培養(yǎng)箱，DHG-9053A干燥箱，QHZ-98A搖床，722型可見分光光度計，SW-CJ-IB 無菌操作臺，粉碎機，高壓蒸汽滅菌鍋，FA1104型電子天平
[0042] 1. 1. 3試驗試劑
[0043] 發(fā)酵培養(yǎng)液：葡萄糖10克，氯化鐘0. 3g，氯化鋼0. 3g，，硫酸錠0. 5g，屯水合硫酸 儘0. 3g，屯水合硫酸亞鐵0. 03g，憐礦粉5g，四水硫酸儘0. 03g，蒸饋水1000血，調節(jié)溶液抑 至中性，憐礦粉不能提前加入到溶液中，要單獨滅菌后混合。
[0044] 無機憐固體培養(yǎng)基：瓊脂18-20g加入到無機憐發(fā)酵培養(yǎng)液中。 W45] 鋼錬膽存溶液：準確量取153mL濃H2SO4,徐徐加入到裝有400mL蒸饋水的燒 杯中，自然冷卻至室溫。在300血水（約60°C)中溶解鋼酸錠[(NH4)sM0A4? &0,研磨 細]lOg，自然冷卻。將硫酸溶液徐徐加入到鋼酸錠溶液中，加入lOOmL的0. 5 %酒石酸錬鐘 怔SbOC4H4化?1/2&0]溶液，冷卻后，