3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物的制備方法，尤其涉及一種3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨 酰-異亮氨酸的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 上海來益生物藥物研究中心有限責(zé)任公司（以下簡稱來益生物藥物）從采集 自自然環(huán)境中的土壤樣品中進行微生物分離，得到了一種可產(chǎn)達(dá)托霉素的新型小鏈霉 菌（Streptomyces parvus),于2010年7月20日在中國微生物菌種保藏管理委員會普 通微生物中心正式保藏，保藏號為CGMCC No. 4027。當(dāng)時對該小鏈霉菌CGMCC No. 4027 的次級代謝產(chǎn)物研究僅限于達(dá)托霉素類化合物，來益生物藥物經(jīng)過深入研究，在其次 級代謝產(chǎn)物中分離出一種新的化合物3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨 酸（3-amin〇-2-hydroxy-4-pheny butanoyl-valyl-isoleucine)(中國專利申請?zhí)?201110076554. 6, 3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸及其制備方法和應(yīng)用），其 具有如下結(jié)構(gòu)：
[0003]
[0004] 經(jīng)研究該化合物能用于制備抑制革蘭氏陽性菌的藥物，尤其是抑制藤黃微球菌或 苦草芽孢桿菌的藥物。
[0005] 來益生物藥物經(jīng)過進一步廣泛而深入的研究發(fā)現(xiàn)，在小鏈霉素CGMCC No. 4027的 次級代謝產(chǎn)物中分離出的新化合物3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸具有抑制 氨肽酶的作用（中國專利申請?zhí)?01110076555. 0, 3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮 氨酸的應(yīng)用)，可用作氨肽酶抑制劑。含有有效量的該化合物的藥物制劑可用于治療腫瘤、 輔助治療腫瘤或增強免疫。
[0006] 但是，微生物發(fā)酵方法所獲得的化合物3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮 氨酸數(shù)量有限，難以滿足患者用藥的需求，因此，采用新的化學(xué)合成方法取代微生物發(fā)酵方 法是一種非常行之有效的新方法，能夠獲得更高的產(chǎn)量以滿足患者用藥的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供化合物3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的化 學(xué)合成方法，該化學(xué)合成方法能夠替代微生物發(fā)酵方法，所獲得的3-氨基-2-羥基-4-苯 基-纈氨酰-異亮氨酸收率高，純度高，并且可以工業(yè)化批量生產(chǎn)，能夠滿足患者的需求。
[0008] 本發(fā)明的第一個目的是提供3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的第 一種化學(xué)合成方法。
[0009] 本發(fā)明的另一個目的是提供3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的第 二種化學(xué)合成方法。
[0010] 本發(fā)明的3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的立體結(jié)構(gòu)式如化合物 7所示：
[0011]
[0012] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：
[0013] -種3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的合成方法，包括如下步驟， 采用化合物6經(jīng)氫化還原反應(yīng)制得所述3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸，即 化合物7,其化學(xué)反應(yīng)式為：
[0015] 其中R為Cbz-或者H-。
[0016] 較佳的，由所述化合物6制得所述化合物7的加氫催化劑為Pd/C，氫化試劑為H2。
[0017] 較佳的，由所述化合物6制得所述化合物7的溶劑為甲醇。
[0018] 進一步的，當(dāng)R為Cbz-時，所述3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸的 合成如合成路線1所示：
[0019]
[0020] 進一步的,上述合成路線1中的化合物6的制備：所述化合物6經(jīng)化合物4和化合 物5在第一溶劑中反應(yīng)制備而成：
[0022] 優(yōu)選的，所述第一反應(yīng)溶劑為THF。
[0023] 優(yōu)選的，所述化合物4和化合物5反應(yīng)時還加入HOBt(1-羥基苯并三唑）和EDC (1-(3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)，并將反應(yīng)液的pH值調(diào)至8-9。
[0024] 進一步的，上述的合成路線1中的化合物4的制備：所述化合物4經(jīng)化合物3在第 二溶劑中通入干燥的氯化氫反應(yīng)制備而成 ：
[0025]
[0026] 優(yōu)選的，所述第二反應(yīng)溶劑為二氯甲烷。
[0027] 進一步的，上述的合成路線1中的化合物3的制備：所述化合物3經(jīng)化合物1和化 合物2在第一溶劑中反應(yīng)制備而成 ：
[0028]
[0029] 優(yōu)選的，所述第一反應(yīng)溶劑為THF。
[0030] 優(yōu)選的，所述化合物1和化合物2反應(yīng)時還加入HOBt (1-羥基苯并三唑）和EDC (1-(3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)，并將反應(yīng)液的pH值調(diào)至8-9。
[0031] 進一步的，當(dāng)R為H-時，所述化合物6的制備：所述化合物6經(jīng)化合物5'在第三 溶劑中通入干燥的氯化氫反應(yīng)制備而成：
[0032]
[0033] 優(yōu)選的，所述第三反應(yīng)溶劑為乙酸乙酯。
[0034] 進一步的，所述化合物5'的制備：所述化合物5'經(jīng)化合物4和化合物2'在第二 溶劑中通入干燥的氯化氫反應(yīng)制備而成：
[0036] 優(yōu)選的，所述第二反應(yīng)溶劑為二氯甲烷。
[0037] 進一步的，所述化合物4的制備：所述化合物4經(jīng)化合物3在第二溶劑中通入干燥 的氯化氫反應(yīng)制備而成：
[0039] 優(yōu)選的，所述第二反應(yīng)溶劑為二氯甲烷。
[0040] 進一步的，所述化合物3的制備：所述化合物3經(jīng)化合物1和化合物2在第一溶劑 中反應(yīng)制備而成：
[0041]
[0042] 優(yōu)選的，所述第一反應(yīng)溶劑為THF。
[0043] 進一步的，所述化合物2'的制備：所述化合物2'經(jīng)化合物1'和BOC酸酐在第四 溶劑中反應(yīng)制備而成：
[0044]
[0045] 優(yōu)選的，所述第四反應(yīng)溶劑為水和四氫呋喃的混合溶劑。
[0046] 本發(fā)明的化學(xué)合成方法所制得的化合物7經(jīng)檢測與中國專利申請?zhí)?201110076554. 6和中國專利申請?zhí)?01110076555. 0中的微生物發(fā)酵方法所獲得的新化 合物為同一種化合物，都為3-氨基_2_羥基_4_苯基-纟顏氨醜-異殼氨酸，并且該3-氨 基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸能用于制備抑制革蘭氏陽性菌的藥物，尤其是抑 制藤黃微球菌或苦草芽孢桿菌的藥物；也具有抑制氨肽酶的作用，可用作氨肽酶抑制劑。含 有有效量的該化合物7的藥物制劑可用于治療腫瘤、輔助治療腫瘤或增強免疫。
[0047] 本發(fā)明可以經(jīng)過上述兩條化學(xué)合成路線制備最終化合物3-氨基-2-羥基-4-苯 基-纈氨酰-異亮氨酸，這兩種化學(xué)合成方法都能夠替代上述現(xiàn)有技術(shù)中的微生物發(fā)酵方 法，所獲得的3-氨基_2_羥基_4_苯基-纟顏氨醜-異殼氨酸收率1?，純度1?，并且可以工業(yè) 化批量生產(chǎn)，能夠滿足用藥需求。
【附圖說明】
[0048] 圖1為第一條合成路線中化合物3的ESI-MS質(zhì)譜圖。
[0049] 圖2為第一條合成路線中化合物4的ESI-MS質(zhì)譜圖。
[0050] 圖3為第一條合成路線中化合物6的ESI-MS質(zhì)譜圖。
[0051] 圖4為第一條合成路線中化合物7的ESI-MS質(zhì)譜圖。
[0052] 圖5為第一條合成路線中化合物7的核磁共振氫譜圖。
[0053] 圖6為第一條合成路線中化合物7的自動標(biāo)尺色譜圖。
[0054] 圖7為第二條合成路線中化合物2'的LC-MS譜圖。
[0055] 圖8為第二條合成路線中化合物7的LC-MS譜圖。
[0056] 圖9為第二條合成路線中化合物7的核磁共振氫譜圖。
【具體實施方式】
[0057] 以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明作進一步說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本 發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的保護范圍。
[0058] 實施例1
[0059] 化合物3-氨基-2-羥基-4-苯基-纈氨酰-異亮氨酸（即化合物7)的第一種合 成方法：
[0064] 3. 77g (0? 0173mol)化合物2于250ml茄形瓶中，加200ml THF溶解，冰水浴下加入 2. 34g(0. 0173mol)H0Bt (1-羥基苯并三唑)和 3. 64g(0. 019mol)EDC (1-(3-二甲基氨基丙 基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)，NMM (N-甲基瑪琳）調(diào)pH值至8-9,加入6.2g(0.0158mol) 化合物1，再次調(diào)pH值到8-9, r. t.攪拌反應(yīng)。4h點板已反應(yīng)完全。將反應(yīng)液傾入300ml 飽和 NaHCO3 中，EA250ml*3 萃取，合并 EA 相依次用飽和 NaHC03200ml*2, 5%KHS04200ml*3,飽 和NaC1200ml*l洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱（EA:PE=1:20-1:6)得淡黃色油狀物4. 4g。 ESI-MS: 443 [M + 23]+?；衔?的ESI-MS質(zhì)譜圖如圖1所示。
[0065] 2、化合物4的制備
[0067] 4. 4g化合物3于250ml三口瓶，100mlDCM溶解，冰水浴攪拌冷卻，通入干燥 的氯化氫氣體，Ih即反應(yīng)完全。將反應(yīng)液轉(zhuǎn)入250ml茄形瓶中旋干得白色固體2. 9g。 ESI-MS: 321 [M + 1]+?；衔?的ESI-MS質(zhì)譜圖如圖2所示。
[0068] 3、化合物6的制備
[0069]
[0070] 3. 29g(0.0 lmol)化合物 5 和 I. 49g(0.0 llmoDHOBt 于 250ml 茄形瓶中，加 150ml THF 溶解，加入 2.3g(0.012mol)EDC，NMM 調(diào) pH 值至 8-9,加入 3.57g(0.01mol)化合物 4,再次調(diào)pH值到8-9, r. t.攪拌反應(yīng)。4h點板已反應(yīng)完全。將反應(yīng)液傾入300ml飽和 NaHCO3 中，EA300ml*3 萃取，合并 EA 相依次用飽和 NaHC03200ml*2,