一種可預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著科學(xué)技術(shù)的不斷更新和改進(jìn)，以及細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)等學(xué)科的不斷研宄，人們對科學(xué)的探索從宏觀世界延伸到微觀世界。隨著光學(xué)顯微鏡以及電子顯微鏡的問世，人們嘗試從細(xì)胞水平以及細(xì)胞分子水平來探索未知的世界。但是細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染成為一個不可避免的難題，隨著科研技術(shù)的不斷改進(jìn)，人們通過一系列的手段來降低細(xì)胞被污染的概率，即便這樣，細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染問題仍然未被有效解決，這就大大延長了實驗周期。尤其是在培養(yǎng)比較珍貴的細(xì)胞時，可能一次小小的失誤使得實驗時間的延遲以及大量實驗經(jīng)費的消耗。
[0003]細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中需要不斷更新培養(yǎng)液，使用傳統(tǒng)的培養(yǎng)皿對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的過程中，需將舊的培養(yǎng)液吸出，添加新的培養(yǎng)液，在操作的過程中，培養(yǎng)皿蓋與培養(yǎng)皿是分開的，很容易導(dǎo)致細(xì)菌的污染，且污染后的細(xì)胞與細(xì)菌是混在一起的，難以用簡單的方法除去細(xì)菌，針對比較珍貴的細(xì)胞，為減少污染帶來的實驗經(jīng)費的浪費，通常在細(xì)胞污染后在培養(yǎng)液中添加大量的抗體及其它試劑對其進(jìn)行補救，但效果不穩(wěn)定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004](一 )要解決的技術(shù)問題
[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)在細(xì)胞換液的過程中容易引起細(xì)胞的污染而導(dǎo)致實驗時間延長和實驗經(jīng)費的浪費的缺陷，本發(fā)明提供一種可預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿。
[0006]( 二 )技術(shù)方案
[0007]本發(fā)明所述的細(xì)胞培養(yǎng)皿，包括細(xì)胞承載皿、蓋于所述細(xì)胞承載皿上的防菌換液蓋和與所述防菌換液蓋密封連接的壓力組件。
[0008]本發(fā)明中，所述防菌換液蓋的上表面有換液凹槽，所述換液凹槽的底面為阻菌網(wǎng)。設(shè)置換液凹槽可直接通過液凹槽進(jìn)行更換培養(yǎng)液，不需直接打開培養(yǎng)皿蓋，這就減少了細(xì)胞被污染的機率。
[0009]本發(fā)明中，所述防菌換液蓋的上表面的換液凹槽優(yōu)選為向內(nèi)凹陷的小圓柱體，所述小圓柱體的底面為阻菌網(wǎng)，所述小圓柱體的高與所述細(xì)胞承載皿的高之比為3?5:6，所述小圓柱體的直徑與所述防菌換液蓋的直徑之比為1:2?4。
[0010]本發(fā)明中，所述阻菌網(wǎng)為孔徑大小為0.Ιμπι?Ιμπι的濾膜。絕大部分真菌的直徑大于2?30 μπι，本發(fā)明可以過濾掉絕大部分真菌，當(dāng)濾膜孔徑為0.22 μπι時，可以達(dá)到GMP或者藥典規(guī)定的除菌99.99%的要求，此時細(xì)菌也可去除，而且孔徑在0.22 μπι?I μπι之間時，隨孔徑的減小，阻菌的效果也越好。當(dāng)孔徑為0.1 μπι時，基本上所有的細(xì)菌，真菌都能阻隔，且有阻隔支原體(直徑0.ιμπι)的作用。雖然支原體直徑也為0.1 μ m，但是當(dāng)粒子的直徑小于0.5 μπι時，其慣性顯著減小，粒子震動會增加，所以雖然濾膜孔徑為0.1 μπι，也可有效阻隔直徑為0.1 ym的支原體。
[0011]本發(fā)明中，所述阻菌網(wǎng)的材料優(yōu)選為聚碳酸酯膜，聚碳酸酯為一種物理性能穩(wěn)定的膜，可經(jīng)受清洗劑、加熱和大劑量輻射消毒，且不發(fā)生變黃和物理性能下降。
[0012]本發(fā)明中，所述換液凹槽的上邊緣有向下凹陷的內(nèi)沿，用于支撐所述壓力組件，所述內(nèi)沿上設(shè)有4?8個向里凹陷的卡槽。所述內(nèi)沿和卡槽主要是用于支撐和密封所述壓力組件。
[0013]本發(fā)明中，所述壓力組件為活塞式壓力組件，包括活塞筒、位于所述活塞筒內(nèi)的活塞和所述活塞上的壓力桿。
[0014]本發(fā)明中，所述活塞筒底部設(shè)有向里突出的密封槽，所述密封槽的寬度與所述換液凹槽內(nèi)沿的寬度相同，所述密封槽內(nèi)設(shè)有密封組件，所述密封槽下部設(shè)置4?8個卡齒，所述卡齒恰好與所述卡槽相吻合?？ú叟c卡齒相吻合，二者對齊之后，通過轉(zhuǎn)動活塞筒，卡齒卡于所述內(nèi)沿上，給密封圈形成壓力，提供密封的培養(yǎng)環(huán)境，可預(yù)防細(xì)菌污染。
[0015]本發(fā)明中，所述卡齒優(yōu)選為楔形。選用楔形的卡齒，隨卡齒的旋轉(zhuǎn)，卡槽與卡齒之間的壓力越來越大，可增強壓力組件的密封性能。
[0016]本發(fā)明中，所述細(xì)胞承載皿為頂端開口的空心圓柱體，在所述空心圓柱體的側(cè)壁的上端有4?8個通氣柱，用于支撐位于所述細(xì)胞承載皿上方的防菌換液蓋。設(shè)置通氣柱既可對防菌換液蓋起到一定的支撐作用，還有利于細(xì)胞培養(yǎng)皿的通氣。
[0017]本發(fā)明中，所述細(xì)胞承載皿的側(cè)壁的厚度為底面厚度的3?6倍。當(dāng)壓力組件工作時，氣體流過側(cè)壁上緣與防菌換液蓋之間，由于側(cè)壁較厚，氣路較長，細(xì)菌進(jìn)入培養(yǎng)皿時經(jīng)過的路徑也較長，細(xì)菌不易進(jìn)入培養(yǎng)皿，且長的氣路不易形成湍流，也可以減少細(xì)菌進(jìn)入培養(yǎng)皿。
[0018]本發(fā)明中，所述通氣柱為直徑3?6mm，高I?3mm的圓柱體，所述圓柱體的頂部為圓滑的弧狀。將通氣柱的頂部設(shè)為圓滑的弧狀，可以防止其在轉(zhuǎn)動的過程中在所述防菌換液蓋劃出痕跡。
[0019]本發(fā)明的另一個目的是提供本發(fā)明所述的細(xì)胞培養(yǎng)皿在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用，所述應(yīng)用具體包括如下步驟:
[0020]I)在所述細(xì)胞承載皿中接種細(xì)胞并添加培養(yǎng)液，蓋上所述防菌換液蓋，在所述防菌換液蓋上連接壓力組件，將其置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
[0021]2)培養(yǎng)至需換液時，取出所述細(xì)胞培養(yǎng)皿，在無菌條件下，拉動所述壓力桿，將所述細(xì)胞承載皿中的培養(yǎng)液吸至換液凹槽，取下所述壓力組件，將所述換液凹槽中的培養(yǎng)液吸出。
[0022]3)在所述換液凹槽中添加新鮮培養(yǎng)液，將所述壓力組件與所述防菌換液蓋密封連接，推動所述壓力桿，將所述新鮮培養(yǎng)液壓入所述細(xì)胞承載皿，完成培養(yǎng)液的更換，將所述細(xì)胞培養(yǎng)皿再次置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
[0023]當(dāng)換液凹槽內(nèi)的培養(yǎng)液被污染時，可根據(jù)污染的情況，通過如下操作對細(xì)胞進(jìn)行清洗:
[0024]I)移去被污染的防菌換液蓋和壓力組件。
[0025]2)在所述細(xì)胞承載皿中添加無菌的清洗液，清洗細(xì)胞，清洗完畢后移出清洗液。
[0026]3)加入無菌的培養(yǎng)液，并更換型號相同的新的防菌換液蓋和壓力組件，再次放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
[0027](三)有益效果
[0028]I)本發(fā)明所述的細(xì)胞培養(yǎng)皿在防菌換液蓋上設(shè)有換液凹槽，且換液凹槽的開口處與壓力組件密封連接，這種結(jié)構(gòu)設(shè)置使得在細(xì)胞換液的過程中不需打開培養(yǎng)皿蓋，直接通過壓組件的抽吸即可實現(xiàn)，這就大大降低了細(xì)胞被污染的機率，縮短了實驗周期，提高了實驗效率。
[0029]2)由于換液凹槽底部設(shè)有阻菌網(wǎng)，可對微生物進(jìn)行有效地阻隔，因此即使換液凹槽內(nèi)的培養(yǎng)液被污染，一般情況下也不會引起細(xì)胞承載皿中細(xì)胞的污染，直接更換新的防菌換液蓋和細(xì)胞承載皿中的培養(yǎng)液即可消除污染，這種設(shè)置使得在培養(yǎng)珍貴的細(xì)胞時，即使防菌換液蓋內(nèi)的培養(yǎng)液出現(xiàn)污染也不需將細(xì)胞承載皿中的細(xì)胞直接丟棄，大大節(jié)約了實驗成本。
【附圖說明】
[0030]圖1為所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的正視圖
[0031]圖2為所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的俯視圖
[0032]圖3為所述防菌換液蓋上部結(jié)構(gòu)圖
[0033]圖4為壓力組件的正視圖
[0034]圖5為壓力組件的立體結(jié)構(gòu)圖