一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用
【專利說明】-種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng) 用。
[0002]
【背景技術(shù)】 產(chǎn)氣莢膜梭菌（c.perfringens)是臨床上氣性壞疽病原菌中最多見的一種梭菌，因能 分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)，造成 組織大面積壞死，加之本菌在體內(nèi)能形成莢膜，故名產(chǎn)氣夾膜梭菌。
[0003]肉毒桿菌是一種生長在缺氧環(huán)境下的細(xì)菌，在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極 強(qiáng)的生存能力，是毒性最強(qiáng)的毒素之一。肉毒桿菌是一種致命病菌，在繁殖過程中分泌毒 素，是毒性最強(qiáng)的蛋白質(zhì)之一。軍隊(duì)常常將這種毒素用于生化武器。人們食入和吸收這種 毒素后，神經(jīng)系統(tǒng)將遭到破壞，出現(xiàn)頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等癥狀。
[0004] 培養(yǎng)基（Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變 質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng) 基)，較長時(shí)間的貯存，必須放在:T6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，現(xiàn)在均改 制成粉末。
[0005] 培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng) 基及其應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對(duì)不 同的碳源、氮源、無機(jī)鹽類、維生素、生長促進(jìn)劑等諸類營養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選，對(duì)培養(yǎng)基 的pH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢(shì)、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較，研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0008] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為： 一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰肉培 養(yǎng)基、4.Og/L乳糖、15.Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸檬 酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0009]在以上方案的基礎(chǔ)上，所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20. 0g、 牛肉浸粉3. 0g、酵母浸粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉 〇? 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
[0010] 本發(fā)明還公開了所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，用于產(chǎn) 氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)。
[0011] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳 糖為可發(fā)酵糖類提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌。 稱取本品47. 0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝于500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養(yǎng)基（50°C)中，加入過濾除菌的0.5% D-環(huán)絲氨酸溶液20ml。 本發(fā)明的有益效果： 1、 培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用； 2、 菌生長迅速，變異率低； 3、 便于觀察，分析。
[0012]
【具體實(shí)施方式】 實(shí)施例1 : 一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰肉培 養(yǎng)基、4.Og/L乳糖、15.Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸檬 酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0013] 所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20. 0g、牛肉浸粉3. 0g、酵母浸 粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
[0014] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳 糖為可發(fā)酵糖類提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌。 稱取本品47. 0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝于500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養(yǎng)基（50°C)中，加入過濾除菌的0.5% D-環(huán)絲氨酸溶液20ml。 在 36 ± 1°C培養(yǎng) 20-24 /J^t_
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括 21g/L皰肉培養(yǎng)基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、I. 54g/L偏亞硫酸氫鈉 、I. 5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述 皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0 g、牛肉浸粉3. Og、酵母浸粉5. Og、可溶 性淀粉I. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
3. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特 征在于用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)。
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰肉培養(yǎng)基、4.0g/L乳糖、15.0g/L胰月示、7.55g/L大豆胨、1.54g/L偏亞硫酸氫鈉、1.5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7.5-7.7。所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、牛肉浸粉3.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；菌生長迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【IPC分類】C12R1-145, C12Q1-06
【公開號(hào)】CN104651458
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310599333
【發(fā)明人】劉漢斌
【申請(qǐng)人】劉漢斌
【公開日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2013年11月25日