一種膜敷料類產(chǎn)品在潮濕條件下的阻菌性檢測方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)療領域，特別是一種膜敷料類產(chǎn)品在潮濕條件下的阻菌性檢測方法。
【背景技術】
[0002]目前，醫(yī)院在胸外科、腦科、眼科、婦科、普外科、骨科及其他外科，以及眼部手術、整形手術、矯形手術及放射療法等各種類型手術及穿刺均少不了使用膜敷料類產(chǎn)品，然而對膜敷料類產(chǎn)品的阻菌性檢測卻沒有完整的檢測設備和檢測方法，現(xiàn)有檢測方法麻煩，費時費力，開放式、操作復雜、中間環(huán)節(jié)多容易污染、各種零件不容易配齊、不容易密封。因此，膜敷料類產(chǎn)品阻菌性檢測方法的改進和創(chuàng)新是目前亟需解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對上述情況，為解決現(xiàn)有技術之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種膜敷料類產(chǎn)品在潮濕條件下的阻菌性檢測方法，可有效解決現(xiàn)有技術檢測麻煩、費時費力、開放式、操作復雜、中間環(huán)節(jié)多容易污染、密封效果差的問題。
[0004]本發(fā)明解決的技術方案是，先配制好胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基、粘質沙雷菌的菌懸液，將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基涂在儲液瓶一側壁備用，然后將醫(yī)用膜敷料類產(chǎn)品、阻菌性檢測裝置、裝有培養(yǎng)基的瓶子、裝有菌懸液的瓶子一同放入萬級凈化局部百級的超凈工作臺上；在無菌操作條件下，將膜敷料固定在內(nèi)瓶的底部密封圈上，再經(jīng)卡環(huán)固定，蓋上蓋體，利用蠕動泵使菌懸液進入外瓶中，胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基進入內(nèi)瓶中，外瓶中的菌液高于內(nèi)瓶中的培養(yǎng)基4cm，用止液卡卡在進液管路，剪掉前端進料針，之后塞在排氣閥上，正立放置24h后，將裝置翻轉，拿掉出液管上的止液卡，內(nèi)瓶里的培養(yǎng)基流至儲液瓶里，蓋上瓶塞，將瓶子放入20°C?25°C下培養(yǎng)24h即可。
[0005]本發(fā)明方法經(jīng)反復試驗，準確率高，無誤差，遠高于現(xiàn)有檢測方法，本發(fā)明裝置一次性使用、密封性好、減少中間環(huán)節(jié)，大大提高了檢測結果的準確度，適用于實驗室、醫(yī)療用品制造商、醫(yī)院等的膜敷料產(chǎn)品阻菌性檢測，是膜敷料類產(chǎn)品阻菌性檢測裝置和方法上的創(chuàng)新。
【附圖說明】
[0006]圖1為本發(fā)明阻菌性檢測裝置的結構剖面主視圖。
[0007]圖2為本發(fā)明阻菌性檢測裝置的結構剖面?zhèn)纫晥D。
[0008]圖3為本發(fā)明阻菌性檢測裝置的止液卡結構主視圖。
【具體實施方式】
[0009]以下結合附圖和實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】作進一步詳細說明。
[0010]由圖1-3給出，本發(fā)明首先安裝膜敷料類產(chǎn)品潮濕條件下的阻菌性檢測裝置，在密封狀態(tài)下，按以下步驟進行:
1)將45-55mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)裝入帶硅膠塞的瓶子里，121°C滅菌15分鐘，備用；所述的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)是由重量百分比計的:胰蛋白胨1.5%(g/100ml)、大豆蛋白胨0.5% (g/100ml)、氯化鈉0.5% (g/100ml)和余量為蒸餾水制成，用質量濃度1%的氫氧化鈉溶液或氯化氫溶液調(diào)節(jié)pH為7.2 ± 0.2 ;
2)配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NutrientAgar Medium),用于藥品中細菌總數(shù)計數(shù),該培養(yǎng)基是由以下重量計的原料制成:蛋白胨10.(k、牛肉粉3.0g、氯化鈉5.0g和瓊脂15.0g，用質量濃度1%的氫氧化鈉溶液或氯化氫溶液調(diào)節(jié)PH值至7.3±0.1 ;然后，取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基3.3克，加熱攪拌溶解于10ml蒸餾水中，121°C滅菌15分鐘，均勻涂在儲液瓶3的一側內(nèi)壁上；
3)用20°C?25°C的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)粘質沙雷菌24h，獲得菌含量108-109cfu/mL的粘質沙雷菌的菌懸液，取250-270mL粘質沙雷菌的菌懸液裝入無菌帶膠塞的瓶子里；
4)將醫(yī)用膜敷料類產(chǎn)品、阻菌性檢測裝置、裝有培養(yǎng)基的瓶子、裝有菌懸液的瓶子一同放入萬級凈化局部百級的超凈工作臺上；所述的醫(yī)用膜敷料類產(chǎn)品為一次性使用薄膜手術巾或手術膜；
5)在超凈工作臺上，以無菌操作的方式將阻菌性檢測裝置拆開包裝，取出裝置中的內(nèi)瓶2，將裁剪好的醫(yī)用膜敷料類產(chǎn)品貼在內(nèi)瓶2底部的密封圈11上，用卡環(huán)12將其固定，保證膜被卡緊不漏液，將內(nèi)瓶2上連為一體的蓋體旋裝在外瓶I上，擰緊防止漏液，將一側內(nèi)壁涂有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的儲液瓶3旋裝在連接蓋8上，擰緊防止漏液，用止液卡將出液管5卡緊，構成密封系統(tǒng)；
6)在第一進液管7、第二進液管6上裝上蠕動泵，利用蠕動泵，在蠕動下，使胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基經(jīng)第二進液管6進入內(nèi)瓶中，然后用止液卡將內(nèi)瓶的進樣管卡緊，剪掉止液卡以上的管子，將余下管子的管口插進內(nèi)瓶第二排氣管1a的第二排氣閥1b上，再利用蠕動泵，在蠕動下，使粘質沙雷菌的菌懸液經(jīng)第一進液管7進入外瓶中，然后用止液卡將外瓶的進樣管卡緊，剪掉止液卡以上的管子，將余下管子的管口插進外瓶第一排氣管9a的第一排氣閥9b上，靜置24h ；
7)將內(nèi)瓶上的管子從內(nèi)瓶的第二排氣閥1b上拔下，將出液管5上的止液卡取下，再將整套阻菌性檢測裝置倒置，出液管5上裝上蠕動泵，使內(nèi)瓶中的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基在蠕動下，進入涂有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的儲液瓶3中，取下儲液瓶3，用無菌瓶塞塞好，平置，使儲液瓶內(nèi)的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分接觸，接觸后將儲液瓶直立，20?25°C下培養(yǎng)24h后觀察結果:a.液體培養(yǎng)基變渾濁，固體培養(yǎng)基上有紅色菌落，表明膜的阻菌性檢測不合格；b.液體培養(yǎng)基變渾濁，固體培養(yǎng)基上沒有紅色菌落，將渾濁的培養(yǎng)基轉接種至營養(yǎng)瓊脂平板，當有紅色典型性菌落，表明檢測結果不合格，當沒有紅色典型性菌落生長，表明檢測結果合格；c.液體培養(yǎng)基澄清透明，表明檢測結果合格。
[0011]所述的膜敷料類產(chǎn)品在潮濕條件下的阻菌性檢測裝置包括外瓶、內(nèi)瓶和儲液瓶，內(nèi)瓶2上口部設有連為一體的蓋體4，蓋體4上部有下端連通內(nèi)瓶2內(nèi)部的向上的垂直出液管5，出液管5上端的連接蓋8與儲液瓶3相連通，連接蓋8與儲液瓶3的瓶嘴密封旋裝在一起，連接蓋8上設有與出液管和儲液瓶相連通為一體的第三排氣管16a,外瓶I為向上開口結構，蓋體4密封裝在外瓶I上口部，蓋體4上分別有連通外瓶1、內(nèi)瓶2的第一進液管7、第二進液管6，外瓶I部位的蓋體上邊部裝有垂直向上的第一排氣管9a，內(nèi)瓶2部位的蓋體上裝有伸入內(nèi)瓶2的垂直向上的第二排氣管10a，內(nèi)瓶2為向下開口結構，下口與外瓶相連通，內(nèi)瓶下口外部周邊上經(jīng)密封圈11裝有卡環(huán)12，第一進液管7、第二進液管6上均連接有進料針13。
[0012]為了保證使用效果，所述的第一進液管7、第二進液管6、出液管5、第一排氣管9a和第二排氣管1a上均裝有止液卡15,止液卡15是由彈性對稱的第—^片15a、第二卡片15b構成的一體結構,第—^片15a、第二卡片15b相對側之間有卡槽15c。
[0013]所述的外瓶I底部有連為一體的小于外瓶半徑的底座18。
[0014]所述的連接蓋8經(jīng)內(nèi)螺紋與儲液瓶3的瓶嘴外螺紋旋裝在一起。
[0015]所述的儲液瓶3的瓶嘴上有相配應的瓶塞。
[0016]所述的外瓶I為向上開口的帶有外螺紋的圓形，蓋體4上有內(nèi)螺紋，蓋體經(jīng)內(nèi)螺紋和外瓶I的外螺紋旋裝在一起，所述的內(nèi)瓶2為高度、半徑均小于外瓶I的圓形。
[0017]所述的儲液瓶3為方形，一側內(nèi)壁上涂有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基層17。
[0018]所述的第一排氣管9a、第二排氣管10a、第三排氣管16a、進料針13上分別裝有第一排氣閥％、第二排氣閥10b、第三排氣閥16b、進料針排氣閥14，第一排氣閥％、第二排氣閥10b、第三排氣閥16b和進料針排氣閥14內(nèi)均裝有孔徑為0.45微米的過濾膜。
[0019]實施例1
1)將50mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)裝入帶硅膠塞的瓶子里，在121°C下，用壓力蒸汽滅菌器滅菌15分鐘，備用；所述的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)是由重量百分比計的:胰蛋白胨1.5% (g/100ml)、大豆蛋白胨0.5% (g/100ml)、氯化鈉0.5% (g/100ml)用蒸餾水配制而成，用質量濃度1%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH為7.2±0.2 ；
2)配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NutrientAgar Medium),用于藥品中細菌總數(shù)計數(shù),該培養(yǎng)基是由以下重量計的原料制成:蛋白胨10.(k、牛肉粉3.0g、氯化鈉5.0g和瓊脂15.0g，用質量濃度1%的氯化氫溶液調(diào)節(jié)PH值至7.3±0.1 ;稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基3.3克，加熱攪拌溶解于10ml蒸餾水中，在121°C下，用壓力蒸汽滅菌器滅菌15分鐘，均勻涂在儲液瓶3的一側內(nèi)壁上，備用；
3)用20°C?25°C的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)粘質沙雷菌ATCC8100 24h，獲得菌含量18-1O9Cfu/mL的粘質沙雷菌的菌懸液，取260mL粘質沙雷菌ATCC 8100的菌懸液裝入無菌帶膠塞的瓶子里；
4)將一次性使用薄膜手術巾、阻菌性檢測裝置、裝有培養(yǎng)基的瓶子、裝有菌懸液的瓶子一同放入萬級凈化局部百級的超凈工作臺上，備用；
5)在超凈工作臺上，以無菌操作的方式將阻菌性檢測裝置拆開包裝，取出裝置中的內(nèi)瓶2，將裁剪好的一次性使用薄膜手術巾貼在內(nèi)瓶2底部的密封圈11上，用卡環(huán)12將其固定，保證膜被卡緊不漏液，將內(nèi)瓶2上連為一體的蓋體旋裝在外瓶I上，擰緊防止漏液，將一側內(nèi)壁涂有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的儲液瓶3旋裝在連接蓋8上，擰緊防止漏液，用止液卡將出液管5卡緊；
6)在第一進液管7、第二進液管6上裝上蠕動泵，利用蠕動泵，在蠕動下，使胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基經(jīng)第二進液管6進入內(nèi)瓶中，然后用止液卡將內(nèi)瓶的進樣管卡緊，剪掉止液卡以上的管子，將余下管子的管口插進內(nèi)瓶第二排氣管1a的第二排氣閥1b上，再利用蠕動泵，在蠕動下，使粘質沙雷菌的菌懸液經(jīng)第一進液管7進入外瓶中，然后用止液卡將外瓶的進樣管卡緊，剪掉止液卡以上的管子，將余下管子的管口插進外瓶第一排氣管9a的第一排氣閥9b上,夕卜瓶菌懸液液面高于內(nèi)瓶胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基液面4cm,靜置24h ；
7)將內(nèi)瓶上的管子從內(nèi)瓶的第二排氣閥1b上拔下，將出液管5上的止液卡取下，再將整套阻菌性檢測裝置倒置，出液管5上裝上蠕動泵，使內(nèi)瓶中的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基在蠕動下，進入涂有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的儲液瓶3中，取下儲