本發(fā)明涉及特異性識別并結合至人含錨蛋白重復結構域的蛋白30a(ny-br-1)的免疫反應性分子，并且具體地涉及與其他的人含錨蛋白重復結構域的蛋白質沒有顯示出交叉反應性的免疫反應性分子。本發(fā)明還涉及此類免疫反應性分子在癌癥治療以及伴隨診斷方法中的用途，并且將在下文中參考這些應用進行描述。然而，應當理解，本發(fā)明不限于該具體使用領域。
背景技術：
：：1、整個說明書中對
背景技術：
：的任何討論決不應被視為承認此類技術是廣泛已知的或構成本領域公知常識的一部分。2、在癌癥療法的背景下，免疫療法通常旨在引發(fā)針對腫瘤細胞的免疫應答。免疫反應性分子，即特異性識別并結合腫瘤細胞抗原的靶序列或表位的分子，是啟動免疫應答所必需的，因此構成癌癥治療中免疫治療方法的不可或缺的工具。免疫反應性分子，如針對腫瘤特異性抗原(即“癌癥抗原”；下文也稱為“腫瘤相關抗原”或“癌癥相關抗原”)的單克隆抗體，已成為許多癌癥治療方案的一部分。例如，單克隆抗體曲妥珠單抗被批準用于治療乳腺癌和胃癌，因為它專門針對her2受體的表位。然而，除了針對癌癥抗原的“常規(guī)”抗體之外，幾種不同形式的免疫反應性分子已被基因工程化，這允許利用其靶標特異性來引發(fā)免疫應答。例如，嵌合抗原受體(car)分子構成了這種替代形式，因為它們是融合蛋白，該蛋白將抗體衍生的抗原識別結構域至少與t細胞激活結構域以及通常的跨膜結構域相結合。這允許離體生產源自患者但基因工程化的t細胞，其攜帶car，該car的抗原識別結構域位于細胞外空間，而t細胞激活結構域位于細胞內，該細胞再次充當患者特異性、腫瘤-特異性且基因工程化細胞抗癌劑。使用此類細胞抗癌藥物的細胞免疫療法通過將工程化t細胞回輸到患者體內，為癌癥患者(尤其是白血病患者)的治療提供了新的選擇。3、自20世紀90年代首次描述這種方法以來，特別是自2011年取得臨床成功以來，這種類型的免疫療法已經明顯優(yōu)于標準治療方法。全球范圍內已登記了超過600項評估car?t細胞的活躍i期和ii期臨床試驗。幾項已完成的研究報告稱，兒童和成人急性淋巴母細胞白血病(all)的平均響應比率為80％。其中大多數包括持久的完全緩解。然而，就實體瘤治療概念的應用而言，僅報道了少量的臨床結果，并且可用的臨床數據也相對較少。然而，在膠質母細胞瘤患者中已報道了初步成功。這種差異的主要原因可能是實體組織中腫瘤相關抗原的異質表達模式和/或健康組織上的最小靶抗原表達，導致腫瘤與健康組織之間的交叉反應性。如將理解的，car?t細胞與健康組織的交叉反應性可能在臨床環(huán)境中產生有害后果，因為car?t細胞不區(qū)分健康細胞和腫瘤細胞。因此，健康細胞——即使僅微弱表達腫瘤相關抗原——也將同樣成為目標。4、ny-br-1屬于癌癥睪丸抗原組，由于其天然限制的表達模式(即僅在睪丸中)，被認為特別適合作為ny-br-1特異性car?t細胞的靶標。然而，ny-br-1也被鑒定為與乳腺癌相關(theurillat等人，，ny-br-1protein?expression?in?breast?carcinoma:a?mammarygland?differentiation?antigen?as?target?for?cancer?immunotherapy“cancerimmunol?immunother?2007nov；56(11):1723-31)并鑒定為乳腺癌的基于抗體的療法的潛在靶標(seil等人“the?differentiation?antigen?ny-br-1?is?a?potential?target?forantibody-based?therapies?in?breast?cancer“int?j?cancer?2007jun?15；120(12):2635-42)。seil等人2007年還發(fā)表了許多抗ny-br-1抗體，其中表明“clone2”特別有前途。clone2是唯一市售的抗ny-br-1抗體，并且常規(guī)用于已發(fā)表的研發(fā)工作。例如，das等人2019中將clone2描述為用于蛋白質印跡分析中檢測ny-br-1的一抗(das等人“atransplantable?tumour?model?allowing?investigation?of?ny-br-1-specific?t?cellresponses?in?hla-drb1*0401?transgenic?mice”bmc?cancer?2019sep?13；19(1):914)。通過表位分析，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)由clone2抗體識別的特異性結合序列與ny-br1.1及其同工型2——兩個密切相關的蛋白質——的氨基酸序列幾乎相同(僅單個氨基酸不同)。數據庫和文獻研究揭示，ny-br1.1在健康腦組織中也有顯著表達。因此，使用源自clone2抗體的car構建體也存在在健康組織中識別ny-br1.1及其同工型2的巨大風險，因此通常使此類構建體無法用于治療乳腺癌患者。5、本領域需要改進的靶向ny-br-1的免疫反應性分子，例如用以增加癌癥、特別是睪丸癌和乳腺癌治療中的治療選擇。6、本發(fā)明的一個目的是克服或改善現(xiàn)有技術的至少一個缺點，或者提供一種有用的替代方案。具體地，本發(fā)明的一個目的是提供改進的靶向ny-br-1的免疫反應性分子。技術實現(xiàn)思路1、如上所述，本發(fā)明旨在提供免疫反應性分子，其對人含錨蛋白重復結構域的蛋白30a(ny-br-1；uniprotkbq?9bxx3)具有高度特異性，但重要的是，其與其他的人含錨蛋白重復結構域的蛋白質如人含錨蛋白重復結構域的蛋白30b(ny-br-1.1；uniprotkb?q9bxx2)或其同工型2(ny-br-1.1同工型2；uniprotkb?q9bxx2-2)沒有顯示出交叉反應性。2、本發(fā)明的免疫反應性分子特別適用于新的癌癥治療方案以及ny-br-1檢測方法，如在患者癌癥治療期間作為伴隨診斷(cdx)方法應用的ny-br-1檢測方法。3、廣義上，本公開涉及免疫反應性分子，其中所述免疫反應性分子特異性識別并結合至人含錨蛋白重復結構域的蛋白30a(ny-br-1；uniprotkb?q9bxx3；seq?id?no:30)，其特征在于該免疫反應性分子與人含錨蛋白重復結構域的蛋白30b(ny-br-1.1；uniprotkbq9bxx2；seq?id?no:31)或其同工型2(ny-br-1.1同工型2；uniprotkb?q9bxx2-2；seq?idno:32)沒有顯示出交叉反應性。優(yōu)選地，免疫反應性分子特異性識別并結合至包含抗原肽序列rgqvrklekmtkr(seq?id?no.1)的ny-br-1的表位。4、具體地，在第一方面，本發(fā)明涉及一種免疫反應性分子，其中所述免疫反應性分子特異性識別并結合至人含錨蛋白重復結構域的蛋白30a(ny-br-1；uniprotkb?q9bxx3)，其特征在于該免疫反應性分子特異性識別并結合至包含seq?id?no:1的抗原肽序列的ny-br-1的表位，并且其中所述免疫反應性分子具有包含seq?id?no:2至4的vl互補決定區(qū)(cdr)1至3和seq?id?no:5至7的vh?cdr?1至3的抗原結合區(qū)。5、在第二方面，本發(fā)明涉及第一方面的免疫反應性分子用于治療癌癥。6、因此，本發(fā)明的該第二方面還涵蓋治療癌癥的方法，其中該方法包括向有需要的受試者施用第一方面的免疫反應性分子和/或第一方面的免疫反應性分子在制造用于治療癌癥的藥物的用途。7、類似地，該第二方面還涵蓋第一方面的免疫反應性分子在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。8、通常，癌癥的特征在于癌癥相關抗原ny-br-1的表達，諸如但不限于睪丸癌或乳腺癌。9、在第三方面，本發(fā)明涉及第一方面的免疫反應性分子在檢測樣品中的ny-br-1的方法中的用途，其中任選地，該樣品是先前獲得的并且/或者衍生自癌癥患者，并且該方法是伴隨診斷(cdx)方法。10、優(yōu)選地，該方法選自：免疫組織化學染色法；膜介導的蛋白質印跡法；和基于流式細胞術的方法，并且/或者其中該樣品是組織樣品、原代細胞樣品或細胞系樣品。11、因此，在另一實施方案中，該第三方面也涵蓋檢測樣品中的ny-br-1的此類方法，其包括使用第一方面的免疫反應性分子。當前第1頁12當前第1頁12