【
技術(shù)領(lǐng)域：
】本發(fā)明屬于黃藤果提取有效成份的
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種從黃藤果中提取血竭素的工藝。
背景技術(shù)：
：血竭素又稱龍血樹(shù)深紅素，是黃藤果中重要的活性成分之一。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，血竭素具有抗菌、抗病毒等活性。近年來(lái)，血竭素的潛在抗癌活性研究廣受關(guān)注。公開(kāi)的文獻(xiàn)從黃藤果中提取純化血竭素的報(bào)道極少，且得到的血竭素純度較低，達(dá)不到作為定性、定量的對(duì)照品要求。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供的一種從黃藤果中提取血竭素的工藝，以解決從黃藤果中提取純化血竭素純度較低，達(dá)不到作為定性、定量的對(duì)照品要求的問(wèn)題。為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)工藝：一種從黃藤果中提取血竭素的工藝，包括以下步驟：s1：將黃藤果進(jìn)行粉碎并過(guò)篩子，制得黃藤果粉末；s2：向步驟s1制得的黃藤果粉末中加入乙醇，在水浴條件下超聲波回流提取2-3次，每次超聲波的頻率為560-720w，溫度為42-50℃，時(shí)間為12-15min，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4-4.3，溫度控制為42-50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-6.2倍體積的50-55℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:3.8-5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-74％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4-4.3，溫度控制為42-50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液濃縮至每毫升中含血竭素7％-19％，采用大孔吸附樹(shù)脂分離提純制得血竭素的液體，條件為：解析劑為50％-70％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附樹(shù)脂體積的1.9-3.5倍，水洗區(qū)為去離子水，大孔吸附樹(shù)脂吸附再生溶劑為2.8％-4.9％的naoh溶液，吸附區(qū)流速8-10bv/h，解吸區(qū)流速16-20bv/h，水洗區(qū)流速22-26bv/h，再生區(qū)流速6-9bv/h，切換時(shí)間為700-750s，溫度為43-50℃，壓力為0.5-0.8mpa；s6：將步驟s5制得的血竭素液體進(jìn)行濃縮后結(jié)晶，所得晶體在溫度為40-44℃下真空干燥，制得血竭素。優(yōu)選地，步驟s1中所述篩子的目數(shù)為30-60。優(yōu)選地，步驟s2中所述黃藤果粉末與乙醇的重量比為1:6-8。優(yōu)選地，所述乙醇的體積分?jǐn)?shù)為68％-78％。優(yōu)選地，步驟s2中所述通過(guò)活性炭脫色除雜的時(shí)間為0.8-1.4h。優(yōu)選地，步驟s4中所述通過(guò)活性炭脫色除雜的時(shí)間為0.6-1.2h。優(yōu)選地，步驟s5中所述大孔吸附樹(shù)脂為ad-8型大孔吸附樹(shù)脂。優(yōu)選地，步驟s6中所述濃縮為真空減壓濃縮。優(yōu)選地，步驟s6中所述結(jié)晶是在溫度為4-8℃下進(jìn)行的。優(yōu)選地，步驟s6中所述晶體在溫度為40-42℃下真空干燥至含水率≤0.7％。本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明的方法制得的血竭素的提取得率在62.05以上和純度在98.34％以上，純度達(dá)到了作為定性、定量的對(duì)照品要求。【具體實(shí)施方式】為便于更好地理解本發(fā)明，通過(guò)以下實(shí)施例加以說(shuō)明，這些實(shí)施例屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。在實(shí)施例中，所述從黃藤果中提取血竭素的工藝，包括以下步驟：s1：將黃藤果進(jìn)行粉碎并過(guò)30-60目篩子，制得黃藤果粉末；s2：向步驟s1制得的黃藤果粉末中加入其重量6-8倍68％-78％的乙醇，在水浴條件下超聲波回流提取2-3次，每次超聲波的頻率為560-720w，溫度為42-50℃，時(shí)間為12-15min，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4-4.3，溫度控制為42-50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.8-1.4h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-6.2倍體積的50-55℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:3.8-5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-74％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4-4.3，溫度控制為42-50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.6-1.2h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液濃縮至每毫升中含血竭素7％-19％，采用ad-8型大孔吸附樹(shù)脂分離提純制得血竭素的液體，條件為：解析劑為50％-70％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附樹(shù)脂體積的1.9-3.5倍，水洗區(qū)為去離子水，大孔吸附樹(shù)脂吸附再生溶劑為2.8％-4.9％的naoh溶液，吸附區(qū)流速8-10bv/h，解吸區(qū)流速16-20bv/h，水洗區(qū)流速22-26bv/h，再生區(qū)流速6-9bv/h，切換時(shí)間為700-750s，溫度為43-50℃，壓力為0.5-0.8mpa；s6：將步驟s5制得的血竭素液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為4-8℃下結(jié)晶，所得晶體在溫度為40-42℃下真空干燥至含水率≤0.7％，制得血竭素。實(shí)施例1一種從黃藤果中提取血竭素的工藝，包括以下步驟：s1：將黃藤果進(jìn)行粉碎并過(guò)50目篩子，制得黃藤果粉末；s2：向步驟s1制得的黃藤果粉末中加入其重量7倍72％的乙醇，在水浴條件下超聲波回流提取2次，每次超聲波的頻率為620w，溫度為46℃，時(shí)間為14min，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.2，溫度控制為46℃，通過(guò)活性炭脫色除雜1.2h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.6倍體積的52℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:4.5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-74％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4.2，溫度控制為46℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.9h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液濃縮至每毫升中含血竭素12％，采用ad-8型大孔吸附樹(shù)脂分離提純制得血竭素的液體，條件為：解析劑為62％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附樹(shù)脂體積的2.6倍，水洗區(qū)為去離子水，大孔吸附樹(shù)脂吸附再生溶劑為4％的naoh溶液，吸附區(qū)流速9bv/h，解吸區(qū)流速18bv/h，水洗區(qū)流速24bv/h，再生區(qū)流速8bv/h，切換時(shí)間為730s，溫度為47℃，壓力為0.7mpa；s6：將步驟s5制得的血竭素液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為6℃下結(jié)晶，所得晶體在溫度為41℃下真空干燥至含水率為0.7％，制得血竭素。實(shí)施例2一種從黃藤果中提取血竭素的工藝，包括以下步驟：s1：將黃藤果進(jìn)行粉碎并過(guò)30目篩子，制得黃藤果粉末；s2：向步驟s1制得的黃藤果粉末中加入其重量6倍68％的乙醇，在水浴條件下超聲波回流提取2次，每次超聲波的頻率為560w，溫度為42℃，時(shí)間為15min，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4，溫度控制為42℃，通過(guò)活性炭脫色除雜1.4h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5倍體積的50℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:3.8(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4，溫度控制為43℃，通過(guò)活性炭脫色除雜1.2h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液濃縮至每毫升中含血竭素7％，采用ad-8型大孔吸附樹(shù)脂分離提純制得血竭素的液體，條件為：解析劑為50％-70％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附樹(shù)脂體積的2倍，水洗區(qū)為去離子水，大孔吸附樹(shù)脂吸附再生溶劑為2.8％的naoh溶液，吸附區(qū)流速8bv/h，解吸區(qū)流速16bv/h，水洗區(qū)流速22bv/h，再生區(qū)流速6bv/h，切換時(shí)間為700s，溫度為43℃，壓力為0.5mpa；s6：將步驟s5制得的血竭素液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為4℃下結(jié)晶，所得晶體在溫度為40℃下真空干燥至含水率為0.6％，制得血竭素。實(shí)施例3一種從黃藤果中提取血竭素的工藝，包括以下步驟：s1：將黃藤果進(jìn)行粉碎并過(guò)60目篩子，制得黃藤果粉末；s2：向步驟s1制得的黃藤果粉末中加入其重量8倍78％的乙醇，在水浴條件下超聲波回流提取3次，每次超聲波的頻率為720w，溫度為50℃，時(shí)間為12min，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.3，溫度控制為50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.8h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏6.2倍體積的55℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)74％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4.3，溫度控制為50℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.6h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液濃縮至每毫升中含血竭素19％，采用ad-8型大孔吸附樹(shù)脂分離提純制得血竭素的液體，條件為：解析劑為70％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附樹(shù)脂體積的3.5倍，水洗區(qū)為去離子水，大孔吸附樹(shù)脂吸附再生溶劑為-4.9％的naoh溶液，吸附區(qū)流速10bv/h，解吸區(qū)流速20bv/h，水洗區(qū)流速26bv/h，再生區(qū)流速9bv/h，切換時(shí)間為750s，溫度為50℃，壓力為0.8mpa；s6：將步驟s5制得的血竭素液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為8℃下結(jié)晶，所得晶體在溫度為42℃下真空干燥至含水率為0.5％，制得血竭素。對(duì)實(shí)施例1-3制得的血竭素的提取得率和純度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下表所示。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目提取得率(％)純度(％)實(shí)施例145.6898.35實(shí)施例240.9498.76實(shí)施例343.1198.91由以上表可知，本發(fā)明的方法制得的血竭素的提取得率在40.94以上和純度在98.35％以上，純度達(dá)到了作為定性、定量的對(duì)照品要求。以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明，對(duì)于所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書(shū)確定的專利保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12